丝裂原活化蛋白激酶8基因在3T3-L1细胞诱导分化中表达水平的变化及肿瘤坏死因子-α对其调节的作用
Expression of Mitogen-Activated Protein Kinase 8 Gene during 3T3-L1 Preadipocytes Differentiation and Regu-lative Role of Tumor Necrosis Factor-Alpha作者机构:南京医科大学儿科医学研究所 淮阴市第一人民医院江苏淮阴223300 常熟市第二人民医院江苏常熟215500
出 版 物:《实用儿科临床杂志》 (Journal of Applied Clinical Pediatrics)
年 卷 期:2006年第21卷第7期
页 面:391-394页
学科分类:1002[医学-临床医学] 100202[医学-儿科学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金项目资助(39870362) 江苏省自然科学基金项目资助(BK99136) 江苏省教委自然科学基金项目资助(98KJB320002) 淮安市科技项目资助(HSA04027)
主 题:丝裂原活化蛋白激酶8基因 3T3-L1脂肪细胞 脂肪细胞分化 肿瘤坏死因子-α
摘 要:目的 观察丝裂原活化蛋白激酶8(MAPK8)基因在3T3-L1脂肪前体细胞诱导分化过程中表达水平的变化,探讨TNF-α1对成熟脂肪细胞中MAPK8基因表达水平的调节作用,分析MAPK8基因与脂肪细胞分化、脂质形成及肥胖问的关系。方法体外培养3T3-L1脂肪前体细胞,在诱导其分化成熟的基础上,采用RT-PCR技术检测诱导分化不同时段(0~10d)脂肪细胞中MAPK8基因的表达水平;应用重组TNF-α(0.1,1.0,10.0μg/L)干预分化成熟的脂肪细胞,采用RT-PCR技术检测1NF-α干预后不同时间(0.5,2,6,12,24h)脂肪细胞中MAPK8基因的表达水平。结果 1.3T3-L1前体脂肪细胞中,MAPK8基因表达水平较高。应用地塞米松(DEX)、1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(MIX)、胰岛素后脂肪细胞逐渐分化成熟,MAPK8基因mRNA表达水平逐渐减低。MAPK8基因表达水平除在诱导分化前至d4、d2~5、d6~10时段内无显著性差异外(P均〉0.05),余各时段问表达水平均有显著差异(P均〈0.01);2.不同浓度重组TNF-α干预成熟脂肪细胞,均能显著上调MAPK8基因的表达,并呈现随TNF-α浓度增加、刺激时间延长,表达调控作用逐渐增强的总体趋势。TNF-α浓度为0.1μg/l,时,MAPK8基因的表达水平于干预12h时间点开始出现明显上调;浓度增加至1.0μg/L,时,MAPK8基因表达水平开始显著上调的时间点提前至干预2h时,但24h时间点的表达水平未见继续上调;TNF-α浓度为10.0μg/L时,除2h时间点MAPK8基因表达开始显著上调外,12~24h时段的表达也呈上调趋势。结论 ***8基因在3T3-L1细胞分化过程中表达逐渐下调,其机制可能有利于脂肪细胞的分化成熟和脂质积聚,与肥胖发生有关;***-α能够上调成熟脂肪细胞中MAPK8基因的表达,其效应总体趋势上呈现剂量及时间反应性特征。