纳豆糖蛋白的分离纯化、结构表征及其免疫活性研究(英文)

作     者：沈柱英 黄占旺 肖建辉 曹靖文 SHEN Zhuying;HUANG Zhanwang;XIAO Jianhui;CAO Jingwen

作者机构：江西农业大学食品科学与工程学院江西省天然产物与功能食品重点实验室江西南昌330045 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2015年第36卷第13期

页      面：215-222页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金地区科学基金项目(31160337) 

主　　题：纳豆 糖蛋白复合物 结构分析 免疫活性 

摘      要：为更充分了解纳豆中的成分对脾细胞增殖能力的影响,本实验通过DEAE-52纤维素离子交换柱层析以及Sephadex G-100凝胶柱层析,从纳豆糖蛋白粗提物中获得两种较纯的纳豆糖蛋白：NPPC-1-b和NPPC-2-a。由高效凝胶渗透色谱得到它们的分子质量分别为26.93、357.60 k D。对这两种糖蛋白进行进一步的红外光谱扫描、紫外光谱扫描、单糖组成分析以及氨基酸组成分析显示,NPPC-1-b中含有的是O-糖肽键,而NPPC-2-a中存在的是N-糖肽键。NPPC-1-b主要由甘露糖、鼠李糖、阿拉伯糖组成,且其含量比例分别为67.45%、25.67%和2.44%。NPPC-2-a主要由葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、木糖以及半乳糖组成,其含量比例分别为36.64%、21.71%、10.35%、9.00%和5.17%。氨基酸自动分析结果显示,两种糖蛋白兼含有人体所需的17种氨基酸。NPPC-1-b主要由谷氨酸、脯氨酸、赖氨酸和精氨酸组成,其含量分别为0.971%、0.791%、0.708%和0.603%;NPPC-2-a主要由谷氨酸、脯氨酸以及天冬氨酸组成,其含量分别为0.903%、0.689%和0.504%。此外,体外免疫活性探讨发现,100~200μg/m L的NPPC-1-b以及12.5~200μg/m L的NPPC-2-a可显著增强脾细胞增殖能力（P〈0.05）,其中以100μg/m L的NPPC-2-a作用效果最佳。在细胞因子表达方面,NPPC-1-b和NPPC-2-a可显著促进细胞因子白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）以及干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）的表达,其中50μg/m L的NPPC-2-a分泌IL-2最多,200μg/m L的NPPC-2-a表达IFN-γ的量最高。以上研究结果表明NPPC-1-b和NPPC-2-a具有一定的免疫调节作用。