牛坏死杆菌43K OMP单克隆抗体的制备及鉴定

作     者：贺显晶 张思瑶 蒋剑成 王丽娜 肖佳薇 汪锋锋 孙东波 郭东华 HE Xian-jing;ZHANG Si-yao;JIANG Jian-cheng;WANG Li-na;XIAO Jia-wei;WANG Feng-feng;SUN Dong-bo;GUO Dong-hua

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2021年第34卷第1期

页      面：89-92页

学科分类：090603[农学-临床兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31572534) 国家重点研发计划(2017YFD0502200) 黑龙江八一农垦大学校内培育课题(XA2016-03) 

主　　题：坏死杆菌 牛 43K OMP 单克隆抗体 

摘      要：目的制备牛坏死杆菌43K OMP单克隆抗体,并鉴定其生物学特性。方法经IPTG诱导表达重组43K OMP,纯化后免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌抗43K OMP特异性抗体的杂交瘤细胞,制备腹水,对抗43K OMP单克隆抗体进行效价、亚类、免疫原性及特异性鉴定。结果获得3株稳定表达抗43K OMP单克隆抗体的杂交瘤细胞株,取其中效价最高的1株命名为O43,其重链为IgG1,轻链为κ链,上清和腹水效价分别为1∶25 600和1∶105;该单克隆抗体可与重组43K OMP发生特异性反应,且与转染后瞬时表达43K OMP的BHK-21细胞特异性结合,发生荧光反应。结论成功表达并纯化了43K OMP,制备了牛坏死杆菌43K OMP单克隆抗体,为研究坏死杆菌的感染机制及发病机理奠定了基础。