腺病毒介导反义血管紧张素Ⅱ1型受体cDNA对人肺动脉平滑肌细胞生物学行为的影响
Effects of adenoviral vector containing human angiotensin Ⅱ type 1 receptor antisense cDNA on biological action of human pulmonary artery smooth muscle cells作者机构：郧阳医学院附属太和医院呼吸内科湖北十堰442000 郧阳医学院解剖学教研室
出 版 物：《中华结核和呼吸杂志》 (Chinese Journal of Tuberculosis and Respiratory Diseases)
年 卷 期：2005年第28卷第4期
页 面：263-267页
核心收录：
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金：湖北省科技攻关计划基金资助项目(2004AA304B09) 湖北省教育厅资助项目(2001A39009)
主 题：血管紧张素Ⅱ1型受体 细胞生物学行为 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR) 介导反义 血管紧张素Ⅱ(AngⅡ) PASMC 肺动脉平滑肌细胞 DMEM 流式细胞仪检测 AT1R cDNA转染 β半乳糖苷酶 增殖指数 蛋白表达水平 AngⅡ介导 腺病毒介导
摘 要：目的探讨腺病毒介导的反义血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1R)cDNA转染对培养的人肺动脉平滑肌细胞(PASMC)迁移、增殖和凋亡的影响。方法构建重组反义人AT1R腺病毒(AdCMVahAT1)和表达β半乳糖苷酶的对照腺病毒载体AdCMVLacZ,将培养的PASMC分为DMEM组、AdCMVLacZ组和AdCMVahAT1组,分别给予不同的干预因素干预PASMC,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和免疫组化及彩色图像分析法检测AT1R的表达情况,并用改良的迁移小室进行细胞迁移实验。又将培养的PASMC分为DMEM组,AngⅡ组,AdCMVLacZ+AngⅡ组和AdCMVahAT1+AngⅡ组,用流式细胞仪检测各组PASMC的增殖指数和凋亡率,绘制DNA合成直方图。结果转染AdCMVahAT1后48h的PASMC,AT1RmRNA明显低于对照组[AT1R/βactin吸光度(A)比值:AdCMVahAT1组为0.48,DMEM组为0.97,AdCMVLacZ组为0.96];AdCMVahAT1组AT1R蛋白表达水平(A值为176.39±21.63)显著低于DMEM组(A值为310.21±29.82)和AdCMVLacZ组(A值为306.45±30.09),差异均有统计学意义(P均0.01),转染AdCMVahAT1后24h的PASMC迁移距离为(40.93±9.69)μm,显著短于DMEM组的(78.23±11.79)μm和AdCMVLacZ组的(77.80±10.66)μm,差异均有统计学意义(P均0.01)。给予AngⅡ刺激48h,AngⅡ组PASMC的增殖指数(59.69±3.46)
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