GST pull-down技术验证CIPK7蛋白激酶与CBL1蛋白的相互作用

作     者：黄聪琳 丁硕 姜华 安黎哲 HUANG Cong-lin;DING Shuo;JIANG Hua;AN Li-zhe

作者机构：甘肃省中医院兰州730050 甘肃省中医药研究院兰州730050 兰州大学生命科学学院兰州730000 

出 版 物：《兰州大学学报（自然科学版）》 (Journal of Lanzhou University(Natural Sciences))

年 卷 期：2013年第49卷第6期

页      面：828-832页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基　　金：国家科技重大专项资金项目(2009ZX08009-029B) 甘肃省科技支撑计划项目(2009GS03292) 

主　　题：CBL1蛋白 GST pull-down CIPK7蛋白 蛋白质相互作用 

摘      要：采用DNA重组技术,构建pGEX-4T-3-CIPK7和pET28-CBL1蛋白表达载体,转化大肠杆菌并诱导表达目的蛋白,利用亲和层析纯化法纯化GST标签、His标签融合蛋白,通过GST pull-down试验验证CIPK7与CBL1之间的相互作用.成功构建了CBL1和CIPK7的重组质粒,经诱导表达及纯化获得了可溶性GSTCIPK7和CBL1-His融合蛋白,GST pull-down试验证实了CBL1能够与CIPK7结合.CIPK7蛋白与CBL1蛋白之间存在直接的相互作用,为进一步研究蛋白激酶CIPK7的功能奠定了基础.