牙龈卟啉单胞菌侵入口腔上皮细胞后基因表达变化的初步研究

作     者：成伟 王洁 孔令雪 齐霞 吴亚菲 赵蕾 CHENG Wei,WANG Jie,KONG Ling-xue,QI Xia,WU Ya-fei,ZHAO Lei(State Key Laboratory of Oral Diseases,Sichuan University,Chengdu 610041,China)

作者机构：四川大学口腔疾病研究国家重点实验室四川成都610041 四川大学华西口腔医院牙周科四川成都610041 

出 版 物：《牙体牙髓牙周病学杂志》 (Chinese Journal of Conservative Dentistry)

年 卷 期：2012年第22卷第11期

页      面：641-645页

学科分类：1003[医学-口腔医学] 100301[医学-口腔基础医学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30801295) 教育部博士点专项科研基金青年新教师基金(200806101107) 

主　　题：牙龈卟啉单胞菌 口腔上皮细胞 侵入 差异显示PCR 

摘      要：目的:采用差异显示反转录PCR技术,比较牙龈卟啉单胞菌侵入口腔上皮细胞后基因表达的变化,初步筛选与细菌侵入宿主细胞相关的毒力致病基因。方法:提取纯培养状态和侵入KB细胞后的牙龈卟啉单胞菌ATCC 33277细菌总RNA;反转录PCR技术显示cDNA表达条带;筛选并回收差异表达条带,二次扩增cDNA,经测序和BLAST同源性比对,初步分析细菌侵入KB细胞后表达差异基因的功能。结果:共筛选获得3条牙龈卟啉单胞菌侵入KB细胞后表达存在差异的基因HX 01、HX 02、HX 03;BLAST同源性比对结果显示,HX 01与牙龈卟啉单胞菌ABC转运蛋白编码基因PG 0683具有96%的同源性;HX 02与牙龈卟啉单胞菌PepO编码基因PG 0159具有97%的同源性;HX 03未找到类似同源性基因序列。结论:牙龈卟啉单胞菌在侵入KB细胞后发生了细菌毒力基因的表达变化,跨膜蛋白ABC转座子和PepO可能参与细菌侵入宿主细胞的致病过程。