hTERT siRNA对HepG2细胞hTERT表达及端粒酶活性的影响

作     者：何淑霞 刘东红 

作者机构：漯河市中医院检验科漯河市462003 漯河市中心医院检验科漯河市462003 

出 版 物：《医药论坛杂志》 (Journal of Medical Forum)

年 卷 期：2008年第29卷第19期

页      面：36-38页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

主　　题：RNA干扰 HepG2细胞系 小干扰RNA 人端粒酶逆转录酶 端粒酶 

摘      要：目的研究siRNA技术对肝癌HepG2细胞系hTERT mRNA表达及端粒酶的抑制作用,探讨siRNA抑制肿瘤细胞的作用及机理。方法体外转录合成hTERT siRNA并转染入HepG2细胞株中,应用RT-PCR观察HepG2细胞中hTERT mRNA表达改变,Western blot检测hTERT蛋白的表达,应用末端重复片断扩增-酶联免疫吸附(TRAP-ELISA)方法测定转染24h、48h后细胞端粒酶活性。结果hTERT siRNA转染后,对HepG2细胞hTERT mRNA和蛋白表达明显抑制。转染后24h端粒酶活性转染组均数为(0.167±0.019),与未转染组均数(0.823±0.027)、空质粒阴性对照组均数(0.826±0.031)比较,差异有统计学意义(P0.05);48h端粒酶活性转染组均数为(0.153±0.017),与未转染组均数(0.816±0.022)、空质粒阴性对照组均数(0.809±0.028)比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论靶向hTERT的siRNA,能有效抑制肝癌细胞系HepG2 hTERT-mRNA和蛋白表达及端粒酶活性。