淡豆豉炮制过程中产纤溶酶微生物的筛选和鉴定

作     者：翁美芝 邓雄伟 王立元 苏明声 周丽 谢小梅 WENG Mei-zhi;DENG Xiong-wei;WANG Li-yuan;SU Ming-sheng;ZHOU Li;XIE Xiao-mei

作者机构：江西中医药大学江西南昌330004 江西中医药大学附属南昌市洪都中医院江西南昌330006 

出 版 物：《中草药》 (Chinese Traditional and Herbal Drugs)

年 卷 期：2020年第51卷第24期

页      面：6221-6228页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 1002[医学-临床医学] 0703[理学-化学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81660664) 国家自然科学基金项目(82060709) 国家自然科学基金项目(82060699) 江西省科技厅科学基金项目(20192ACBL21032) 江西省科技厅科学基金项目(20192BAB205098) 江西省科技厅科学基金项目(20171BAB215061) 江西省卫生计生委中医药科研项目(2017Z016) 国家留学基金项目(201908360259) 江西中医药大学项目(2018jzyb-7) 

主　　题：淡豆豉 纤溶酶 优势微生物 系统发育树 菌种鉴定 酪蛋白平板法 纤维蛋白平板法 枯草芽孢杆菌 嗜麦芽窄食单胞菌 微球菌 

摘      要：目的筛选和鉴定淡豆豉炮制过程中产纤溶酶的优势菌株。方法按《中国药典》2020年版制备淡豆豉;采用酪蛋白平板法和纤维蛋白平板法分别对淡豆豉炮制不同时间点样本中产纤溶酶的微生物进行初筛和复筛;将产纤溶酶微生物分别接种在特定的液体培养基中培养,获得纯种发酵液,用纤维蛋白平板法测定发酵液的纤溶酶活力;应用16S rDNA和18S rDNA通用引物分别对产纤溶酶细菌和真菌进行PCR扩增、对扩增产物进行测序,测序结果通过NCBI同源性比对、MEGA4.1软件构建系统发育树进行分子生物学鉴定。结果筛选获得3种产纤溶酶细菌,分别为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis、嗜麦芽窄食单胞菌Stenotrophomonas maltophilia、微球菌Micrococcus。纤维蛋白平板法测定纯种发酵液纤溶酶活力的结果显示,嗜麦芽窄食单胞菌所产纤溶酶活力最高,达527.49 IU/mL。结论淡豆豉炮制过程中存在高产纤溶酶的优势菌株,淡豆豉的溶栓作用值得进一步研究。为揭示淡豆豉炮制中纤溶酶形成机制奠定基础。