检索结果-南通市图书馆

作者：黄琬重庆医科大学

学位级别：硕士

背景:本研究旨在了解重庆市西部某医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)分离株的分子特征与多粘菌素B(PMB)体外联合的作用效果。方法:从重庆医科大学附属永川医院分离出127株非重复的CRKP菌株... 详细信息

背景:本研究旨在了解重庆市西部某医院耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)分离株的分子特征与多粘菌素B(PMB)体外联合的作用效果。方法:从重庆医科大学附属永川医院分离出127株非重复的CRKP菌株,采用VITEK-2 compact系统进行鉴定,并采用微量肉汤稀释法测定其最低抑菌浓度。采用肠杆菌目基因间重复共有聚合酶链反应和多位点序列分型分析分离菌株的同源性。使用聚合酶链式反应评估遗传信息,包括耐药和毒力基因。通过全基因组测序检测了CRKP携带基因bla 的基因组特征。通过棋盘滴定试验检测联合用药效果。结果:ST11是同源性比较的优势序列类型。儿童对头孢他啶-阿维菌素的耐药率显著高于成人,耐药基因bla 的检出率也明显高于成人(p<0.0001)。mrk D(97.6%)、uge(96.9%)、kpn(96.9%)、fim-H(84.3%)等毒力基因检出率高。Inc F(57.5%)是检测到的主要复制子质粒,测序结果显示CRKP063基因组含有两个质粒。携带介导碳青霉烯类耐药的bla 的质粒为359,625bp的Inc FII质粒,含有毒力因子、质粒复制蛋白(rep B)、稳定蛋白(par A)以及介导质粒接合转移的IV型分泌系统(T4SS)蛋白。多粘菌素B-替加环素组合与多粘菌素B-亚胺培南组合协同作用比例分别为9.0%与7.3%,无拮抗作用。结论:1、由于儿童携带金属酶的比例较高,所以对CAZ-AVI的耐药率高于成人;2、携带质粒为接合质粒,主要复制子类型为Inc F;3、多粘菌素与替加环素的联合可能更为有效。本研究有助于了解本院CRKP的流行情况及儿童与成人的显著性差异,为临床经验性使用抗生素提供新的思路。

关键词：分子流行病学全基因组测序多粘菌素B 耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌抗生素敏感性

IMP-4碳青霉烯酶质粒在肠杆菌目细菌中传播机制以及药物联合策略研究

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IMP-4碳青霉烯酶质粒在肠杆菌目细菌中传播机制以及药物联合策略...

作者：杨程茹佳木斯大学

学位级别：硕士

目的了解携带bla肠杆菌目细菌的耐药性、分子特征及毒力因子,探索不同抗生素对治疗携带bla肠杆菌的最佳方案,以及质粒在肠杆菌中水平转移的机制,旨在能够为质粒介导的耐药传播发展新一代预防措施提供思路,在碳青霉烯耐药菌的治疗选择方... 详细信息

目的了解携带bla肠杆菌目细菌的耐药性、分子特征及毒力因子,探索不同抗生素对治疗携带bla肠杆菌的最佳方案,以及质粒在肠杆菌中水平转移的机制,旨在能够为质粒介导的耐药传播发展新一代预防措施提供思路,在碳青霉烯耐药菌的治疗选择方面提供实验室依据。方法收集两所三级甲等教学医院分离的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)共259株,其中筛选出4株IMP-4碳青霉烯酶阳性菌株。1、用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)检测相关耐药基因:β-内酰胺类基因、Amp C酶编码基因、质粒介导的喹诺酮耐药基因、多粘菌素耐药基因。2、肉汤稀释法检测最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。3、棋盘滴定法和时间杀伤试验来探究不同抗生素治疗携带bla基因的CRE的最优组合。4、采用生物膜形成试验和血清杀伤试验来检测携带bla毒力强弱。5、采用接合试验、自然传代法及SDS-高温交替法来验证质粒的转移及稳定性。6、利用全基因组测序技术检测耐药基因、毒力基因、耐药质粒的详细信息、多位点序列分型(MLST)及IV型分泌系统(Type IV secretion system,T4SS)的组成。7、利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,RT-q PCR)检测接合基因tra D的表达量。结果1、检出bla(3株)以及bla(1株)碳青霉烯类耐药基因,还检出mcr-9、bla、bla、bla、acc(6’)-lb和bla耐药基因,未检出bla、bla 、bla、bla及bla耐药基因。2、所有分离株均对美罗培南(MEM)、多粘菌素(PB)、亚胺培南(IMP)、头孢他啶-阿维巴坦(CAZ-AVI)耐药,对替加环素(TIG)、阿米卡星(AK)、左氧氟沙星(LEV)耐药率均为25%(1/4)。3、MEM+LEV联合对CRECL42的FICI值为0.25,表现为协同作用;MEM+AK、AK+LEV和PB+IMP联合对CRECL60的FICI值均为0.5,表现为协同作用。时间杀伤实验中任何组合对CRECL42未见协同作用;TIG(0.5MIC和1MIC)+MEM/IMP(1MIC)和TIG(2MIC)+IMP(0.5MIC和1MIC)组合对CRECL60表现为协同作用;TIG(0.5MIC和1MIC)+IMP(0.5MIC和1MIC)组合对CRKP294表现出协同作用;TIG(0.5MIC、1MIC和2MIC)+MEM/IMP(0.5MIC)组合对CRECL352表现出拮抗作用。1MIC IMP在4-12h对所有菌株均表现为强于所有组合的杀菌及抑菌能力,TIG+1MIC IMP在24h对CRECL60(携带bla)表现为强于其他组合的协同作用。4、1株CRKP为强生物膜形成,3株CRECL为弱生物膜形成。1株CRKP对于血清杀伤表现为抵抗现象,2株CRECL表现为对血清杀伤中介,1株CRECL对血清杀伤极度敏感。5、4株携带IMP金属酶的菌株中仅CRECL42菌株接合成功,质粒稳定性检测中Inc P质粒最稳定,传代50次,质粒未丢失,其次是Inc C和Inc HI2,最不稳定的是Inc U,接合子的质粒比原始菌的质粒更稳定。6、全基因组测序显示3株CRECL的MLST分型分别为ST520、ST528、ST25,1株CRKP为ST37;4株CRE的质粒类型分别为Inc C、Inc HI2、Inc U、Inc P;不同菌株携带bla的质粒同时携带多个不同耐药基因和毒力因子;bla和bla均在1类整合子上,bla的周围环境为acc(6’)-lb-qac G2-ltr A-bla -intl1和acc(6’)-lb-qac G2-bla-intl1,bla的周围环境为IS6100-sul1-qac E-ltr A-bla -intl1-drf A19;3株菌检出“F”型T4SS,组成蛋白包括tra C、tra D、tra I、tra G、tra A等,1株菌检出“P”型T4SS,组成蛋白包括trb G、trb B、trb H、trb F等。7、接合子J42的接合基因tra D的相对表达量为CRECL42的1.08倍,而CRECL60和CRKP294的接合基因tra D相对表达量为CRECL42的0.31倍。结论1、当IMP的体外MIC≤4μg/m L时,棋盘滴定法和时间杀伤试验的体外抗菌活性表明对携带bla单独使用IMP在8-12h抑菌活性最好,对携带bla联合使用TIG+1MIC IMP在24h杀菌效果最好,建议临床针对携带bla且IMP的最低抑菌浓度≤4μg/m L的肠杆菌临床治疗

关键词： IMP-4 质粒转移 T4SS 全基因组测序耐药性

临兴地区太原组煤系致密砂岩硅质胶结物形成机制

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临兴地区太原组煤系致密砂岩硅质胶结物形成机制

作者：杨甜甜中国矿业大学

学位级别：硕士

根据中国、美国、加拿大、澳大利亚、印度等全球多个地区天然气技术可采储量估算表明,2013年全世界天然气剩余技术可采储量720万亿方,其中致密砂岩气可采储量约为54万亿方。在过去的数十年中,美国天然气的探明储量不断增加,其主要原因... 详细信息

根据中国、美国、加拿大、澳大利亚、印度等全球多个地区天然气技术可采储量估算表明,2013年全世界天然气剩余技术可采储量720万亿方,其中致密砂岩气可采储量约为54万亿方。在过去的数十年中,美国天然气的探明储量不断增加,其主要原因归功于以致密砂岩气为主的非常规天然气。就中国而言,致密砂岩气主要分布在鄂尔多斯盆地上古生界石炭-二叠系,优质储层成因机制研究一直是致密砂岩气储层研究领域的热点问题,鄂尔多斯盆地上古生界临兴地区太原组致密砂岩储层具有良好的勘探前景,而致密砂岩储层中硅质胶结物发育不仅影响深部储层物性,反映成岩事件影响,还记录了埋藏过程中重大地质变动的信息,对于深化成藏认识具有重要作用。本文以鄂尔多斯盆地上古生界临兴地区太原组致密砂岩储层为研究对象,综合运用岩心观察、薄片鉴定、扫描电镜、包裹体测温等测试技术方法,结合构造演化史、埋藏演化史等分析,对硅质胶结物期次及特征,物质来源、物质传输、沉淀过程及其成因等进行了系统研究,探讨了硅质胶结物的形成机制,取得了以下成果认识:鄂尔多斯盆地东部上古生界砂岩储层岩石类型主要为岩屑砂岩,次为岩屑石英砂岩、岩屑长石砂岩和石英砂岩,碎屑颗粒多以石英和岩屑为主,由此也可看出硅质胶结物的含量高是因为碎屑颗粒中石英占比较大。临兴地区成岩作用类型多样,对储层物性影响明显,压实作用使孔隙减少,但胶结作用是使储层趋于致密化的主要原因,而其中硅质胶结作用是储层致密化的关键。硅质胶结物是鄂尔多斯盆地临兴地区太原组中广泛发育的自生矿物之一,主要类型有石英加大边、自生石英充填孔隙和微晶石英三种。在临兴地区中常见石英加大边,呈单个颗粒悬浮和胶结其他颗粒形式赋存;自生石英多数为自形-半自形,占据长石溶蚀孔和颗粒之间,晚于石英加大边形成。临兴地区太原组砂岩储层发育两期硅质胶结物。第一期硅质胶结物产状为石英加大边,由早期石英压溶作用和长石溶蚀形成;第二期硅质胶结物产状为石英加大边、石英微晶和孔隙充填型自生石英,盐水包裹体均一温度在100～130℃;少量盐水包裹体的均一温度高于160℃。砂岩储层在整个埋藏演化过程中,往往经历复杂的成岩演化过程,硅质胶结物在砂岩储层中呈现多产状、多期次胶结。硅质胶结物发育受烃类充注、热液流体充注及岩石自身组构影响。临兴地区第一期硅质胶结物来源于压溶和长石溶解,第二硅质胶结物主要来源于长石溶解和黏土矿物转化,发育“长石溶解和黏土矿物转化主供源,多内源-单外源,多期次胶结”硅质成因模式,大量硅质胶结物沉淀前烃类充注对储层有保护作用。

关键词：硅质胶结物成岩期次形成机制硅质来源太原组临兴地区

西安市小学生习武动机与武术参与关系研究 ————自我效能感的中介效应

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西安市小学生习武动机与武术参与关系研究 ...

作者：万成广西安体育学院

学位级别：硕士

研究目的:本研究主要探究西安市小学生习武动机、自我效能感与武术参与的内部关系,运用理论与实证研究方法进行分析。主要有以下三个目的:(1)参照体育锻炼行为机制以及前人研究,构建西安市小学生习武动机、自我效能感与武术参与之间的... 详细信息

研究目的:本研究主要探究西安市小学生习武动机、自我效能感与武术参与的内部关系,运用理论与实证研究方法进行分析。主要有以下三个目的:(1)参照体育锻炼行为机制以及前人研究,构建西安市小学生习武动机、自我效能感与武术参与之间的理论模型;(2)通过实证研究对构建的理论模型进行验证;(3)根据研究结果得出结论并提出合理的建议。研究方法:(1)文献资料法;(2)问卷调查法:根据研究的需要,针对西安市城区内有武术参与的小学生发放调查问卷,调查问卷主要包括学生的个人基本信息(性别、年龄、就读学校、练习年限)、习武动机量表、自我效能感量表、武术参与问卷四个部分组成,调查对象主要是西安市内参与学校开设的将武术作为正式课程、武术操、社团课、校武术队等武术参与形式的小学生。(3)数理统计法:本研究在实证分析中,首先使用Excel将收集回来的问卷进行初步检查以及题项顺序与逻辑关系之间的调整,并生成后续研究中所需要用到的相关指标;随后利用Stata17.0对调研数据进行统计处理,其中包括对数据的筛选、清理,数据库的合并等。通过回归分析实证统计分析方法对理论假设路径进行回归分析,构建习武动机、自我效能感和武术参与的回归模型,再使用自举检验方法(Bootstrap法)对自我效能感在习武动机与武术参与之间是否存在中介效应进行验证。研究结果:(1)在本次调查的结果中,根据习武动机的得分情况来看,在西安市小学深参与武术学习或锻炼的过程中,是由鉴别调节作为主导因素进行;西安市小学生的自我效能感从整体来看处于中上水平(3.375±0.833),较为适合学生参与到武术学习或锻炼中来;参与本次调查的西安市小学生的武术参与强度的均值得分为2.675±0.753分,介于小强度与中等强度之间;平均参与时长的均值得分则是3.652±0.775分,时间跨度为20-60分钟;每周参与武术学习或锻炼的次数则达到了10.393±4.559次/周;(2)西安市小学生的内部动机、鉴别调节、外部调节以及缺乏动机在性别上均存在差异但未达到显著水平,但在习武动机这一指标上男生会显著地低于女生(p<0.05);随着来练习时间的延长,鉴别调节则会受到显著性地提高,参与强度与参与时长也会得到显著提升;在课后会进行“自我总结”的学生,其内在动机、鉴别调节、自我效能感显著高于没有进行“自我总结”的学生,并且在参与过程中,表现出更高的参与强度;有参赛经历的学生,内在动机、自我效能也表现出了明显高于无参赛经历学生的水平,同时,他们在参与武术学习或锻炼的过程中,会投入更多的时间和精力;最后,本研究中高、低年级在各方面不存在显著性差异;(3)根据对各变量的回归分析以及中介效应检验的结果,个体的习武动机、自我效能感均会对个体在武术参与过程中均会产生显著性的影响作用。基于该结果,再将自我效能感代入模型之间进行中介效应的检验,检验结果发现自我效能感在习武动机对武术参与的影响作用中起到显著中介效应。研究结论:(1)西安市小学生习武动机、自我效能感、武术参与的基本情况良好;(2)“参赛经历”与“自我总结”有助于学生投入武术参与;(3)自我效能感在习武动机对武术参与的影响作用中起到显著中介效应。

关键词：运动情境动机自我效能感武术参与中介效应

美国薄荷精油对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌抗菌活性及抗菌机制的研究

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美国薄荷精油对耐碳青霉烯鲍曼不动杆菌抗菌活性及抗菌机制的研究

作者：鄂心蕊佳木斯大学

学位级别：硕士

目的:研究美国薄荷精油对碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）的抗菌作用及其可能的作用机制,为暴发流行的CRAB提供可靠的治疗依据。方法:1.收集临床分离CRAB菌株通过VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪及配套鉴定卡和药敏卡进行CRAB菌... 详细信息

目的:研究美国薄荷精油对碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）的抗菌作用及其可能的作用机制,为暴发流行的CRAB提供可靠的治疗依据。方法:1.收集临床分离CRAB菌株通过VITEK-2 Compact全自动微生物分析仪及配套鉴定卡和药敏卡进行CRAB菌株初筛,根据2020年CLSI标准判断折点,挑选出对碳青霉烯类抗菌药物（亚胺培南、美罗培南、厄他培南）中任一种药物耐药的菌株,并纸片法复核,作为实验菌株,用自动生物质谱检测系统对试验菌株进行质谱分析。2.通过K-B法测定精油对CRAB的敏感性、微量肉汤稀释法测定美国薄荷精油的MIC值以及MBC值。3.棋盘滴定实验确定美国薄荷与多粘菌素B联用对CRAB的协同效果,联合所用的精油浓度为精油MIC值的1/8-2倍。4.时间生长曲线监测美国薄荷在24小时内不同时间点对CRAB的杀菌效果。5.通过结晶紫染色法生物膜抑制实验测定MIC值的1/16-2倍浓度下精油对CRAB生物膜的抑制作用。6.生物发光法测定精油作用后细胞内ATP含量的变化。7.流式细胞仪测定精油作用后细菌PH值以及膜电位的变化。8.扫描电镜下观察精油作用后细胞形态的变化。结果:1.菌株的分布:48株鲍曼不动杆菌标本类别:痰液38株（79.1%）,分泌物1株（2.1%）,血液1株（2.1%）,胆汁1株（2.1%）,其他标本7株（14.6%）。（图1.）主要来自重症监护病房28株（58%）,神经外科8株（17%）,呼吸与危重病房9株（19%）,整形烧伤美容2株（4%）急诊内科1株（2%）。2.美国薄荷精油的主要成分:麝香草酚,Y-松油烯,邻-聚伞花素,1-辛烯-3-醇,2-甲氧基-5-甲基-异丙苯,芳樟醇,4-蒈烯,3-崖柏烯,月桂烯。其中麝香草酚的含量可以达69.75%。3.质谱检测系统鉴定结果分析:48株试验菌株经质谱分析后均进一步确定为鲍曼不动杆菌。4.48株CRAB均对美国薄荷精油敏感,并且含有5%DMSO的纸片无抑菌作用,因此使用DMSO作为助溶剂溶解精油对本实验无影响。5.测得48株CRAB精油最低抑菌MIC为0.625μl/ml,对照组含有2.5%DMSO对细菌生长无抑制作用。MBC范围为0.625μl/ml～1.25μl/ml。6.精油对CRAB生长动力学的影响:0-2h内各浓度处理的CRAB均未生长,从2h开始,0,1/4MIC,1/8MIC,1/16MIC浓度下的CRAB逐渐生长,4h开始1/2MIC浓度下的CRAB生长缓慢,MIC,2MIC下CRAB完全被抑制。7.细胞内ATP浓度结果分析:经美国薄荷MIC处理后的CRAB内ATP含量比未经处理的CRAB内ATP含量降低,2MIC处理后CRAB与阴性对照组相比ATP含量进一步降低。***值结果分析:未处理的CRAB细胞的p H平均值为6.27±0.12,美国薄荷MIC处理组细胞的p H值从6.27±0.12降至4.33±0.31,加入2MIC美国薄荷后,与阴性对照组相比,p H值由6.27±0.12进一步降至3.23±0.21。9.膜电位变化分析:经美国薄荷处理的细胞显示细胞膜超极化,荧光强度（负值）明显降低。10.美国薄荷对CRAB生物膜形成的影响:在1/4MIC,1/8MIC,1/16MIC美国薄荷作用下,轻度抑制CRAB生物膜形成,1/2MIC,MIC作用下生物膜形成能力降低幅度变大,2MIC作用下生物膜形成能力最低。11.美国薄荷对CRAB细胞形态的影响:FESEM分析表明,未经美国薄荷处理的CRAB呈球杆状,表面光滑。经美国薄荷MIC和2MIC处理后,CRAB表面出现塌陷损伤。12.联合抗菌实验结果分析:协同作用23株（48%）,相加作用13株（27%）,无关作用12株（25%）,拮抗作用0株（0%）。结论:1.美国薄荷精油对CRAB具有良好的抑菌活性并且与多粘菌素B联合使用后,对大多数CRAB有协同抗菌作用,并且大大降低了多粘菌素B的使用剂量,为开发新的用药措施提供了有效依据。2.美国薄荷精油可破坏CRAB细胞膜的完整性,导致CRAB细胞内ATP浓度降低,PH降低以及膜电位降低。3.美国薄荷精油对CRAB生物膜的形成具有抑制作用,并且随着其浓度增加抗生物膜活性越强。4.展望:美国薄荷含有太多不同类型的化合物成分,由于实验条件及时间有限,未能对各种成分进行详细的研究。在日后将深入研究是其主要的成分发挥的作用,还是某些成分协同发挥抗菌活性,为开发传统天然产物对抗耐药细菌提供更具体的数据。

关键词：耐碳青霉烯美国薄荷抗菌活性鲍曼不动杆菌耐药性

Sohlh2通过TGM2调控的自噬通路促进肝细胞癌的发展

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Sohlh2通过TGM2调控的自噬通路促进肝细胞癌的发展

作者：刘旭玥山东大学

学位级别：硕士

研究背景:肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)是一种常见的消化系统恶性肿瘤,占原发性肝癌的80%～90%。在我国,原发性肝癌是患病率第五位、致死率第二位的肿瘤,严重威胁着人们的生命健康。因为肝癌确诊时大多为中晚期,预后极差。近... 详细信息

研究背景:肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)是一种常见的消化系统恶性肿瘤,占原发性肝癌的80%～90%。在我国,原发性肝癌是患病率第五位、致死率第二位的肿瘤,严重威胁着人们的生命健康。因为肝癌确诊时大多为中晚期,预后极差。近十年来,肝脏切除和移植手术是肝细胞癌的主要治疗手段,免疫疗法也开始进入肝细胞癌的临床实验和治疗,但晚期肝癌的5年生存率仍然低于10%。因此,阐明肝细胞癌的发展机制,可以为肝细胞癌的临床治疗提供新的有效靶点和理论基础。Sohlh2(Spermatogenesis and oogenesis basic helix-loop-helix transcription factor 2)是碱性螺旋—环—螺旋(bhlh)转录因子家族的重要成员之一,其能与靶基因启动子区域的保守E-box序列结合,调节靶基因表达,参与细胞凋亡、分化、增殖等多种生物学行为的调控。课题组前期实验结果已证实,Sohlh2基因敲入小鼠可发生自发性脂肪肝和肝纤维化;在注射肝癌诱导剂DEN后急性肝损伤更严重。生物信息学分析和预实验结果显示,肝癌细胞中Sohlh2的表达明显上调。上述结果提示Sohlh2可能在肝癌发生发展中发挥重要作用。自噬(Autophagy)是一种涉及细胞质大分子、聚集的蛋白质、受损的细胞器或病原体降解的细胞途径。自噬在包括肝癌在内的多种肿瘤的发生和发展中发挥着重要作用。当自噬被激活后,Beclin1催化自噬膜的发生,随后自噬膜上LC3b-I催化生成LC3b-II,LC3b-Ⅱ可以与p62结合,进入自噬溶酶体阶段完成自噬,促进肿瘤细胞的新陈代谢、抗应激能力、侵袭、耐药性和干性,进而促进肿瘤的发展。TGM2(Transglutaminasetype2)在多种炎症、纤维化增生和肿瘤组织中表达上调。TGM2可以通过UBA结构域与p62相互作用,进而促进自噬。预实验结果显示,Sohlh2可以上调肝癌细胞中TGM2表达,并促进自噬。因此我们推测,Sohlh2可能通过调控TGM2的表达,促进自噬,进而调控肝细胞癌的进展。研究方法:1.分析Sohlh2在患者肝癌组织中的表达情况利用TCGA数据库进行生物信息学分析,探讨Sohlh2在肝癌和癌旁组织中的表达差异,及Sohlh2表达与肝癌预后的相关性。将肝癌临床组织芯片进行免疫组化染色,分析癌旁和癌组织间Sohlh2表达的差异。2.研究Sohlh2对肝癌细胞增殖、EMT、迁移和侵袭的影响体外培养人源的肝癌细胞系HepG2、Huh7和snu387,采用慢病毒转染的方法,构建Sohlh2过表达和敲减的稳转细胞株。通过CCK-8增殖实验、克隆形成实验和Transwell迁移和侵袭实验,检测Sohlh2对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。通过q-PCR和Western-blot,检测 Sohlh2 对肝癌细胞 EMT 标记物 E-cadherin、ZO-1、N-cadherin、Vimentin表达的影响。3.研究Sohlh2对肝癌细胞自噬的影响利用EBSS诱导肝癌细胞自噬,通过q-PCR、Western-blot和免疫荧光染色,研究Sohlh2对自噬标记物p62、Beclin1、LC3b表达的影响。通过透射电镜实验、LC3荧光双标慢病毒系统,检测Sohlh2对肝癌细胞自噬的影响。肝癌细胞加入自噬抑制剂3-MA处理,通过CCK-8增殖实验和Transwell迁移和侵袭实验,检测自噬是否介导Sohlh2对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。4.在体实验研究Sohlh2对肝癌细胞裸鼠皮下成瘤和肿瘤转移的影响将10只雄性裸鼠随机分为两组,每只分别皮下注射3 × 106个对照或Sohlh2过表达的HepG2细胞。从注射第4天起,每隔2天测量皮下瘤体的体积大小,绘制生长曲线。注射4周后,取裸鼠皮下肿瘤,通过q-PCR、Western-blot和免疫组化染色,研究Sohlh2对皮下肿瘤中肝癌细胞自噬和增殖的影响。将10只雄性裸鼠随机分为两组,分别尾静脉注射5×105个对照或Sohlh2过表达的HepG2肝癌细胞。通过肝脏和肺脏肿瘤转移灶统计和HE染色,检测Sohlh2对肿瘤转移的影响。5.研究Sohlh2是否通过调控TGM2的表达促进自噬利用Sohlh2稳转肝癌细胞和裸鼠皮下肿瘤,通过q-PCR、Western-blot、免疫组化和免疫荧光染色,检测Sohlh2对TGM2表达的影响。通过ChIP和双荧光素酶报告基因实验,研究Sohlh2是否直接调控TGM2的表达。在Sohlh2过表达肝癌细胞中,瞬转TGM2 RNAi,通过q-PCR、Western-blot、LC3荧光双标慢病毒系统、CCK-8增殖实验和Transwell迁移和侵袭实验研究TGM2是否介导Sohlh2对肝癌细胞自噬及增殖、迁移

关键词：肝细胞癌自噬 Sohlh2 TGM2

基于文本挖掘技术的第十四届全运会网络舆情研究 ————以新浪微博平台为例

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基于文本挖掘技术的第十四届全运会网络舆情研究 ...

作者：张义祥西安体育学院

学位级别：硕士

据第50次《中国互联网发展状况统计报告》显示,我国互联网用户数量达10.51亿,可见,网络已成为国民生活中不可或缺的一部分。新浪微博作为中国最大的社交媒体平台,不仅承担着中国网民娱乐的需求,呈现来自各界民众的声音,同时蕴含着大量... 详细信息

据第50次《中国互联网发展状况统计报告》显示,我国互联网用户数量达10.51亿,可见,网络已成为国民生活中不可或缺的一部分。新浪微博作为中国最大的社交媒体平台,不仅承担着中国网民娱乐的需求,呈现来自各界民众的声音,同时蕴含着大量具有舆论导向作用的主流媒体用户的声音。他们覆盖各个领域,实时产生着数以万计的用户评论数据,这些评论数据都较为真实地反映着社情民意,以及民众对一些热点事件的态度及情绪。对于体育赛事而言,其网络舆情对于赛事的举办、比赛的发展也具有重要作用。如若网络舆情能够朝着正向发展,不涉及舆情危机,那么政府或者赛事的举办方可利用舆论引起网民关注,推广体育比赛、传播体育精神等。但另一方面,体育赛场“暴力事件”、“暴力冲突”时有发生;运动员比赛发挥失常、结果不尽人意、裁判判罚不公等情况都会引起网民的不满和负面情绪,产生舆情危机。因此,如何从海量的文本数据中把握体育赛事网络舆情的走向,了解民众的发展意见,避免舆论导向走偏,充分发挥政府对热点事件的洞察力以及领导能力,是我们所需要研宄与讨论的。2021年第十四届全运会作为我国的大型体育赛事,是全民围观的公共话题,极易形成网络舆情。本研究区别于以往的研究视角,从文本挖掘出发,采用词频分析、LDA主题模型、文本情感分析等方法,借助网络舆情生命周期理论,网络爬虫、TF-IDF算法、中文分词算法等技术,利用来自新浪微博的评论文本作为数据源,对“第十四届全运会”的网络舆情进行分析,总结出十四运网络舆情的传播演化特征,对所产生的负面舆论事件进行跟踪分析,进一步提出相应的应对策略,以期为未来体育赛事网络舆情的应对提供参考价值。依据研究结果,本文得出如下结论:首先,第十四届全运会网络舆情文本语言呈现娱乐化和情感化的表达方式;网络舆情信息在汇聚的过程中表现出明显的群族意识;无论是在舆情发展的哪一个阶段,为运动员或运动队加油和鼓励一直是网民们所讨论的话题,同时明星运动员的一举一动也是网民们关注的主要对象,此外,在不同的阶段所衍生的话题也不相同;微博的评论文本都是以积极情绪占为主导,其网络舆情主要集中在正式比赛期间,赛前和赛后虽然话题有一定的热度,但网民们的参与量小,话题讨论的热度尚不高。其次,对第十四届全运会所产生的网络舆情进行跟踪分析发现:意见领袖对网络舆情的发展起正向引导作用;明星运动员的报道为推广体育赛事、传播体育精神提供契机;官方话语权在舆论传播中具有明显优势。造成负面网络舆情的原因主要集中在以下几个方面,突发公共事件处理不当引起网民不满;外界因素导致运动员意外损伤激发了网民们的负面情绪。体育“饭圈”乱象引发热议,网民们在发表言论时使用了较多负面词汇,为十四运网络舆情朝着负面发展提供了契机;运动员或涉事品牌失败的危机公关会导致负面网络舆情的产生。最后,针对负面舆情,可提出如下应对策略,以期为未来体育赛事网络舆情的应对提供参考价值。第一,官方媒体应把握时机对负面网络舆情进行正向引导,第二,官方与网民意见形成良性沟通,促进网民形成理性思考。第三,运动员或品牌方进行有效的危机公关。第四,官方部门建立舆情监测机制。第五,完善相关法律法规加大监控力度,构建良好的网络舆情环境。

关键词：第十四届全运会网络舆情文本挖掘机器学习 LDA主题模型

市级体育运动学校竞技体育后备人才社会流动路径及影响因素的混合研究

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市级体育运动学校竞技体育后备人才社会流动路径及影响因素的混合...

作者：曲雪婷西安体育学院

学位级别：硕士

竞技体育后备人才是我国体育事业发展的重要基础,竞技体育的激烈竞争,很多后备人才被淘汰,这些被优化掉的后备人才流动成为问题,就业困难、出路狭窄使人们对进入体校望而却步,进而导致体育后备人才生源引进不足。市级体育运动学校又作... 详细信息

竞技体育后备人才是我国体育事业发展的重要基础,竞技体育的激烈竞争,很多后备人才被淘汰,这些被优化掉的后备人才流动成为问题,就业困难、出路狭窄使人们对进入体校望而却步,进而导致体育后备人才生源引进不足。市级体育运动学校又作为后备人才非常重要的储备基地,在三基训练网络具有承上启下的作用。因此,市级体育运动学校的竞技体育后备人才社会流动及影响因素值得被探究。体育领域内的社会流动研究,多数聚焦于对优秀运动员的社会流动上,如职业运动员的流动研究、退役运动员安置与社会去向研究等,而后备人才这一相对普通的群体的社会流动研究较少。因此,构建一套较为科学、全面地竞技体育后备人才社会流动理论模型,明确竞技体育后备人才在社会流动分层中所处的地位情形,对完善竞技体育后备人才社会流动理论具有重要的理论意义。同时,分析后备人才社会流动现状及影响因素,让青少年运动员了解自身所在地位,了解其自身需求,从而帮助他们在结束后备人才培养阶段前能够合理选择适合其自身发展的社会出路,实现积极的自我改变,具有丰富的现实意义。本研究通过定性分析与定量分析相结合的方法探究竞技体育后备人才社会流动影响因素。首先,通过个案访谈法对20名曾经在市级体校就读过的人员进行调查,运用扎根理论对访谈样本进行编码,构建出竞技体育后备人才社会流动影响因素理论模型。又通过问卷调查法对全国314名曾经在体校就读过的后备人才进行调查,以个人因素、家庭因素、学习因素、训练因素、人际关系因素、政策因素六大因素作为测量指标,运用回归模型分析竞技体育后备人才社会流动影响因素的显著性,并加以解析。最后,从国家的角度,从学校角度,从运动员家庭和运动员自身的角度,提出了增强市级体校竞技体育后备人才向上流动的科学措施,促进国家体育事业的发展目标的实现。依据数据分析,本文得出以下结论:第一,市级体育运动学习竞技体育后备人才社会流动影响因素理论模型的核心范畴为“社会流动影响因素”;第二,竞技体育后备人才社会流动路径有三条,分别是:向上流动、水平流动、向下流动。在选择工作的后备人才中,多数人群向下流动,社会地位不乐观,体育事业发展需要多方促进,增加体育后备人才向上流动路径,使其多于向下流动。第三,后备人才社会流动存在个体与家庭差异,个体差异中“运动等级”“项目喜爱程度”“发展规划”差异显著,家庭中“家庭经济”“家庭支持”差异显著。第四,市级体育运动学校体育后备人才社会流动主要影响因素是运动等级、运动天赋。体校在培养后备人才使其成为职业运动员已经较为系统,后备人才能否实现向上流动取决于运动天赋、运动等级;无法走职业道路的学生需要在体育行业中向上流动,依靠运动等级优势进入大学。从国家层面、学校层面、家庭层面、运动员自身四个角度提出以下建议:政府继续推进体教融合,树立科学的发展观;改变班级授课教学形式,学校应加强对文化教育的重视;塑造良好的家庭文化氛围,促进家庭教育发展;强化后备人才的思想教育,使后备人才明确个人职业发展方向。

关键词：市级体校竞技体育后备人才社会流动混合研究

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技术现象学视域下的医院环境设计研究

技术现象学视域下的医院环境设计研究

作者：刘靖宇安徽医科大学

学位级别：硕士

随着21世纪社会进步与医学的发展,传统的生物医学模式转变为"生物-心理-社会"的医学模式,人们对医疗环境以及医疗过程的体验要求日益增长,医院环境建设成为重点。良好的环境能使人产生积极心理,消除消极情绪,营造良好的医院环境会加速... 详细信息

随着21世纪社会进步与医学的发展,传统的生物医学模式转变为"生物-心理-社会"的医学模式,人们对医疗环境以及医疗过程的体验要求日益增长,医院环境建设成为重点。良好的环境能使人产生积极心理,消除消极情绪,营造良好的医院环境会加速患者的治疗与康复,促进医疗工作者提高工作效率,产生积极向上的工作情绪,从而使医患双方达到良性循环,充分发挥医院治病救人的功能作用。优化改善医院环境是医院以人为本服务的具体表现,是提高医疗水平的关键。现阶段医院室内外环境仍倾向于满足治疗功能,缺乏人文社会以及情感方面的考量,迫切需要通过哲学思想来指导,优化就医环境,使其符合新时期大众的医疗需求。本文以对技术现象学"还原"方法以及后现象学中的"具身关系"在医院环境设计中的应用为研究重点,通过对几所医院进行资料采集以及对医患人员进行医院环境满意度问卷调查,研究医院环境设计与医患人员的关系,探索医院环境、人与社会之间的关系及其影响,建设高品质高效率的医疗环境。首先在理论研究的部分,对医院环境设计的研究背景、理论意义及应用价值进行了论述,并通过对国内外学者关于医院环境设计的设计理念和功能方法的相关文献进行综述,提出了研究方法、技术路线以及创新点;其次在实践探索部分,通过问卷调查、实地访谈和案例分析来获取医患人员的需求以及情感意愿,并总结出不同类型的医院环境设计满足不同医患人员的设计要点和人文关怀价值取向。在以上研究的基础上,以问题为导向确立不同类型患者的康复需求以及情感需求,对医院室内外环境的设计理念、功能审美以及社会因素所出现的问题提出设计策略,期望优化改善医院环境。

关键词：医院环境环境设计人性化现象学

黄芪多糖联合紫杉醇对胃癌BGC823细胞增殖和自噬的影响及相关机制研究

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黄芪多糖联合紫杉醇对胃癌BGC823细胞增殖和自噬的影响及相关机制...

作者：郝艳娇河北北方学院

学位级别：硕士

胃癌(gastric cancer,GC)占全球癌症的6%,目前正威胁着全世界人民的健康。紫杉醇(paclitaxel,PTX)作为众所周知的一线化疗抗癌药物,但长期应用有一定的耐药性和毒副作用。因此,寻找疗效确切,减少肿瘤耐药性及药物毒副作用的辅助化疗药... 详细信息

胃癌(gastric cancer,GC)占全球癌症的6%,目前正威胁着全世界人民的健康。紫杉醇(paclitaxel,PTX)作为众所周知的一线化疗抗癌药物,但长期应用有一定的耐药性和毒副作用。因此,寻找疗效确切,减少肿瘤耐药性及药物毒副作用的辅助化疗药物是十分必要的。黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)具有抗凋亡、抗炎、抗肿瘤等多种功效,并且能够显著提高化疗药物作用及减少毒性。然而,APS能否增强PTX的抗胃癌作用及其分子机制尚未阐明。本文选用胃癌BGC823细胞株作为研究目标,探讨APS与PTX联合用药对BGC823细胞活性、迁移、侵袭和凋亡水平的影响及与细胞自噬之间的关系,并对APS联合PTX发挥协同效应的机制进行了初步研究。首先采用MTT法检测不同浓度的APS、PTX及联合用药对BGC823细胞生存能力的影响,分析药物对细胞活力的抑制效应;利用Compu Syn软件进行联合指数(CI)值的分析,根据抑制率计算CI值,再根据CI值研究两药之间的相互关系并寻求最佳联合用药浓度;采用划痕和Transwell细胞实验,分别检测APS、PTX及联合用药后对细胞迁移及侵袭能力的影响;Hoechst染色法观察APS、PTX及联合用药对细胞凋亡水平的变化;通过扫描电子显微镜(SEM)观察各组细胞的形态变化;应用免疫荧光法检测LC3蛋白的相对表达情况;通过蛋白印迹法(Western blot)检测细胞内有关自噬和凋亡蛋白的表达情况。结果显示,APS、PTX均使细胞增殖受到抑制,随着剂量增加,细胞抑制率也升高,APS与PTX联合用药作用后的抑制效果较单独用药效果更显著(P<0.05)。Compu Syn软件分析显示APS和PTX存在协同抑制作用,根据CI值将实验分成对照组(药物浓度为0),APS组(10 mg·m L),PTX组(10μg·m L)和联合组(APS 10 mg·m L+PTX 10μg·m L)。划痕结果显示,APS、PTX及联合用药使细胞划痕间隙的愈合速度减慢,细胞的迁移受到明显抑制(P<0.05,P<0.01)。Transwell实验分析显示,实验组中细胞数量显著降低,表明APS、PTX及联合组均可抑制细胞的侵袭,且联合组效果更为显著(P<0.01)。Hoechst染色结果显示,APS、PTX和联合组作用于胃癌BGC823细胞后,核浓度明显增加,亮蓝色荧光信号逐渐增强,表明细胞发生了凋亡,且联合组凋亡效果更为显著(P<0.05,P<0.01)。扫描电镜下对照组细胞表面微绒毛丰富,细胞形态完整,各药物组细胞表面形态和结构均受到破坏,联合组细胞形态改变更为明显。应用激光共聚焦显微镜发现,各药物组LC3荧光强度较对照组明显增强,联合组中的荧光强度更为显著(P<0.01)。Western blot实验发现经药物处理后,与对照组相比,促进凋亡的标志蛋白Bax的表达量增加,而抗凋亡的标志蛋白Bcl-2的水平降低,同时与自噬有关的蛋白Becline-1含量上调,p62的水平降低,LC3Ⅱ与LC3Ⅰ比例增加,且联合组各蛋白表达水平变化更为显著(P<0.05,P<0.01)。综上所述,APS、PTX及联合用药可有效降低胃癌细胞活力、迁移和侵袭力,促进细胞凋亡,并诱导细胞发生自噬。APS联合PTX能发挥协同作用的潜在机制,可能是通过减弱Bcl-2和p62蛋白的表达以及上调Bax、Becline-1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的蛋白表达水平。

关键词：黄芪多糖紫杉醇胃癌联合用药凋亡自噬