检索结果-南通市图书馆

作者：刘如意武汉理工大学

学位级别：硕士

随着中国特色社会主义法治体系不断健全,法治中国建设迈出坚实步伐。但同时,建设社会主义法治国家是一项长远复杂的系统工程,需要一代又一代人的接力奋斗。在这个过程中,全体公民的法治素养,是构成法治国家最重要的根基。作为新时代实... 详细信息

随着中国特色社会主义法治体系不断健全,法治中国建设迈出坚实步伐。但同时,建设社会主义法治国家是一项长远复杂的系统工程,需要一代又一代人的接力奋斗。在这个过程中,全体公民的法治素养,是构成法治国家最重要的根基。作为新时代实现全面依法治国的主力军,青年大学生的法治素养极大影响了法治建设的未来图景。对新时代大学生的法治素养进行系统深入的研究,对当前和今后全面依法治国和推动高校法治教育改革具有深远影响。本文主要从以下四个方面对新时代大学生法治素养培育进行了分析和探讨。第一部分是绪论。主要分析了新时代大学生法治素养培育的研究背景和意义,并对国内外相关问题的研究成果进行分析归纳,总结其中存在的不足。紧接着阐述了本文主要运用的研究方法和创新之处。第二部分是关于新时代大学生法治素养培育的相关理论分析,主要包括大学生法治素养相关概念的界定和本研究的理论基础。通过对相关概念的界定,剖析了新时代大学生法治素养的具体内涵。随之从马克思主义法治思想、中国传统法治思想以及知情意行协同理论三个角度阐明了本研究的理论基础,明确了新时代培育大学生法治素养的重要意义。第三部分在实证研究的基础上分析了新时代大学生法治素养培育的现状和成因。通过问卷调查和访谈,了解到在法治化进程全面推进的情况下,新时代大学生群体已经具备一定基础的法治知识,法治意识、法治情感不断增强,法治能力不断提高。但同时,仍然存在着一些问题亟待解决,主要包括:新时代大学生的法治认知水平仍需提高;法治素养培育力量较为薄弱;法治课堂教学的吸引力不足;法治素养培育的效果尚不理想等。最后,针对这些问题,从大学生自身、法治素养培育方式、法治素养培育合力以及法治素养培育内容方面找出原因。第四部分是新时代大学生法治素养培育的路径选择。针对发现的问题和成因,提出要通过更新法治教育理念,明确法治素养培育方向;优化法治教育内容,适应法治素养培育需要;完善法治教育途径,提高法治素养培育成效;打造法治育人环境,营造良好法治氛围这四个方面来完善新时代大学生法治素养培育,提升新时代大学生的法治素养水平。

关键词：新时代大学生法治素养培育

BDNF-PTD融合蛋白逆转大脑缺血导致神经死亡的药效学和机制研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

BDNF-PTD融合蛋白逆转大脑缺血导致神经死亡的药效学和机制研究

作者：左夏林南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景血脑屏障主要由血管内皮细胞和脑组织的星状胶质细胞的足突构成,具有内皮细胞之间紧密连接并且缺乏内吞囊的特点,可限制血液和脑组织之间物质的自由交换,因此大多数药物很难通过血脑屏障进入大脑发挥治疗疾病作用。脑源性神经... 详细信息

研究背景血脑屏障主要由血管内皮细胞和脑组织的星状胶质细胞的足突构成,具有内皮细胞之间紧密连接并且缺乏内吞囊的特点,可限制血液和脑组织之间物质的自由交换,因此大多数药物很难通过血脑屏障进入大脑发挥治疗疾病作用。脑源性神经营养因子(Brain-derived neurotrophic factor, BDNF)为生物体内天然的蛋白分子,在神经系统的生长发育中,对神经元的生存,分化起重要作用;具有增强学习记忆等功能,但同样难以通过血脑屏障进入中枢神经系统治疗神经退行性疾病。目前临床上缺少一种有效的,非侵入性的方法使得BDNF通过血脑屏障而发挥生物学效应,因而限制了BDNF在临床上的应用。所以,以何种给药系统使BDNF进入大脑是发挥BDNF临床治疗作用应用的关键。目前在实验室阶段研究的脑靶向给药系统主要包括：①脑血管内灌注或脑内直接注射给药。②病毒载体介导基因后的脑内直接注射给药。③脂质体包裹药物后系统途径给药。④脑靶向单克隆抗体偶联药物后系统途径给药。但这些方法有很多的不足：①脑血管内灌注或脑内注射给药有极大的不顺应性,且给药后,药物分布在很小的脑部位。②病毒基因介导给药虽然是很好的入脑载体,但并不适合临床上的急性缺血的脑损伤的治疗,因为脑损伤后在很短的时间内给药才能对神经元细胞有保护和修复作用。而且病毒载体对人的免疫系统,及细胞染色体组有副作用。③用脂质体包裹药物能增加药物的脂溶性,但脑对脂质体的摄入是绝对的和非特异性的,增加了药物因全身分布而带来的副作用和成本。④单克隆抗体偶联药物进行静脉给药能够使得BDNF通过血脑屏障到达大脑而发挥生物学效应,但这种方法得到的药物,制备过程繁琐,成本高;脑靶向用单克隆抗体需先进行人源化改造。如何寻找种有效的,非侵入性的给药系统方法,使得BDNF进入大脑发挥生物学效应?来源于人免疫缺陷病毒的TAT蛋白能够跨膜导入细胞内部的发现,给我们解决这个问题提供了很好的思路。蛋白转导域(PTD)是指那些小于20个氨基酸、带正电荷,可以穿过大多数细胞膜的穿膜肽的一个富含碱性氨基酸区域,带正电荷的多肽片段与蛋白转导功能相关联。可以将大分子运输入几乎所有的哺乳动物细胞内,无需特殊的环境。其对给合物的大小没有严格的限制,已经在肿瘤,免疫治疗等临床前研究中取得了很大的进展。本实验室前期通过基因工程方法制备了一种能通过血脑屏障的脑源性神经营养因子-PTD融合蛋白(BDNF-PTD),实验证明其能通过血脑屏障。在此基础上,本文研究了BDNF-PTD在动物脑缺血模型中保护神经元功能的药效学及其作用机制。目的研究本实验中心制备的BDNF-PTD在动物脑缺血模型中保护神经元功能的初步药效学功能;通过神经功能缺陷评分对非给药组和给药组进行神经功能缺陷评价;研究本实验中心制备的BDNF-PTD在动物脑缺血模型中保护神经元功能的作用机制。方法一、建立SD大鼠脑局部缺血模型大鼠用10%水合氯醛(3ml／100g)腹腔注射麻醉,仰卧固定在手术台上,在颈部正中切开,剪开前筋膜,钝性分离胸锁乳突肌和胸骨舌骨肌之间的间隙,暴露左侧颈总动脉(CCA)和迷走神经,并分离。往远心段找出颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA),干净分离ECA、ICA。结扎ECA近分叉端和在距分叉处10mm结扎CCA,并在CCA近分叉处套线待用,用动脉夹夹住ICA。在距分叉处5mm的CCA上用眼科剪45°剪一小斜口,插入栓线,通过分叉处进入ICA,提起在CCA近分叉处准备好的线,打好结但不能太紧,栓线能通过为合适,松开ICA处的动脉夹,继续使栓线顺ICA入颅方向推进,直到推进至分叉处17mm为止。将线栓和CCA固定,剪掉多余的栓线,缝合筋膜和皮肤。根据Bederson评分法进行神经功能缺陷程度的评分。其原则如下：0分：无神经功能缺损症状,行为正常;1分：前肢屈曲;2分：中度神经功能缺损,抵抗对侧推力下降伴前肢屈曲,无转圈行为;3分：重度神经功能缺损,抵抗对侧推力下降伴前肢屈曲,有转圈行为。1、2、3级为模型成功的标准。二、脑源性神经营养因子融合蛋白(BDNF-PTD)对大鼠局灶性脑缺血治疗作用的初步药效学研究通过线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞(MACO)模型。永久性栓塞1个小时后腹腔给每只动物模型注射50ug (50ug/ml)的BDNF-PTD,24小时后断头取脑,大脑切片TTC染色,比较栓塞1小时后给药模型组与未给药模型组的脑梗死面积,观察BDNF-PTD保护大脑缺血神经元死亡的情况。三、脑源性神经营养因子融

关键词：脑源性神经营养因子融合蛋白(BDNF-PTD) 大脑中动脉栓塞模型神经保护机制

α-硫辛酸治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的药效学及机制的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

α-硫辛酸治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的药效学及机制的研究

作者：邓后亮南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景脑中风是导致全球人类死亡的主要疾病,是第三大致死病因仅次于心脏病和癌症。同时,50%-70%存活者具有严重的后遗症,包括瘫痪,失语等。其中缺血性脑中风是脑中风的主要类型,发病率约占脑卒中的80%,具有发病率高、致残率高、复... 详细信息

研究背景脑中风是导致全球人类死亡的主要疾病,是第三大致死病因仅次于心脏病和癌症。同时,50%-70%存活者具有严重的后遗症,包括瘫痪,失语等。其中缺血性脑中风是脑中风的主要类型,发病率约占脑卒中的80%,具有发病率高、致残率高、复发率高、死亡率高等特点,给家庭和社会带来沉重的负担。临床上尽快恢复脑损伤后的血液供应,挽救濒临死亡的脑细胞是减轻脑缺血后脑损伤的关键。目前,在急性脑缺血早期静脉注射重组组织型纤溶酶原激活剂(tPA)是唯一被美国食品药品监督管理局(FDA)批准的溶栓治疗手段。但是由于其存在很窄的治疗窗以及血液再灌注诱导的二次损伤,临床证明只有少部分患者从中获益。因此,研究药物保护血液再灌注诱导的二次损伤是近年来研究的热点。脑缺血再灌注损伤会激活一系列错综复杂的生理病理反应：氧化应激,钙超载,兴奋性氨基酸,炎症,细胞凋亡等,最终导致细胞死亡。其中氧化应激和细胞凋亡在脑缺血再灌注损伤中扮演及其重要的角色。在动物实验中,已知多种药物可作用于该复杂的病理过程,对脑缺血再灌注具有一定的保护作用。①抗氧化剂：这类药物可清除由再灌注诱导的过量的自由基,改善氧化应激,证实对脑缺血再灌注有保护作用,如依达拉奉目前广泛应用于治疗急性缺血性脑卒中。②抗生素：研究人员发现四环素类药物通过减弱细胞免疫性以及阻断细胞凋亡级联反应保护脑卒中。③生长因子：生长因子通过抗凋亡和抗炎作用减轻脑卒中后的损伤,而且可促进神经和血管再生,如脑源性神经营养因子(BDNF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)等。④钙离子通道抑制剂：通过提高Na+-K+-ATP酶的活性,维持细胞膜的正常功能,保证脑内离子稳定,防止缺血再灌注后脑细胞内Ca2+超载造成的损坏,从而发挥保护作用。实验研究证明尼莫地平对急性脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。⑤抗炎症药物：炎症是脑缺血再灌注损伤中主要的病理特征,抗炎药物通过抑制中性粒细胞浸润和降低黏附分子的表达而抑制炎症过程,保护脑组织。实验研究证明高剂量抗炎药物布洛芬可以干扰白细胞和内皮细胞之间相互作用,通过抑制内皮细胞黏附分子的表达产生抗脑损伤作用。⑥中药：中药对缺血性脑卒中的显著临床疗效使其成为神经保护药物的重要研究对象,越来越多的证据表明中药对脑缺血具有保护作用。川芎嗪、灯盏花注射液、银杏叶制剂、丹参注射液、红景天等药物从不同途径、不同环节对缺血性脑卒中病人起到一定的脑保护作用。 α-硫辛酸(LA)是一种存在于线粒体的酶,属于硫醇类化合物,具有很强的抗氧化性。LA既水溶性也脂溶性,很容易分布到机体内各个组织中,被称为“万能抗氧化剂”,是人类不可或缺的抗氧化剂。在体内LA转化为二氢硫辛酸(DHLA),两者都具有很强的抗氧化性。LA具有多种生物活性：清除自由基,再生其他抗氧化剂,抗炎,抗凋亡,螯合金属离子等。LA现在临床主要应用于糖尿病周围神经病变,但是国内外学者发现LA对多种疾病具有潜在的治疗价值,如糖尿病肾病,阿尔茨海默病,帕金森综合症,缺血再灌注,衰老以及重金属中毒等。实验证明LA对多种组织缺血再灌注具有保护作用,包括心脏、周围神经、睾丸、视网膜以及大脑等。过去有关研究表明LA治疗心肌组织缺血再灌注损伤是通过激活PI3K/Akt和ERK1/2信号通路,这两个信号通路对于促进细胞增殖、分化以及凋亡起着关键性作用。但是,据我们所知很少研究涉及LA对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及其作用机制。所以本文研究了LA在大鼠脑缺血再灌注模型中保护大脑功能的药效学及其作用机制。目的本实验采用改良线栓法制备大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,研究LA对大鼠脑缺血再灌注的药效作用,同时对其作用机理进行初步探讨。方法 1.建立SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型大鼠术前禁食12小时但不禁水。用10%水合氯醛(3.5ml/kg)腹腔注射麻醉,用75%乙醇消毒大鼠颈部皮肤,在颈部正中切开皮肤,剪开前筋膜,钝性分离胸锁乳突肌和胸骨舌骨肌之间的间隙,分离左侧颈总动脉(CCA)和迷走神经。往远心端找出并分离颈外动脉(ECA)和颈内动脉(ICA)。临时结扎CCA,动脉夹夹闭左侧ICA,结扎并切断左侧ECA,下拉近心端,与左侧ICA呈直线。然后在ECA近分叉处用眼科剪45。剪一小斜口由此插入制备好的线栓,松开动脉夹,缓慢向ICA插入线栓,直到推进至分叉处18-20mm遇阻力即止。松开CCA,缝合皮肤。阻断血流90分钟后,拔出线栓实现再灌注。整个手术期间用台灯保证大鼠体温为37℃。再灌注24小时之后,采用Longa评分法对大鼠神经功能进行评分：0分：正常;1分：脑缺血对侧前肢不能完全伸展;2分：实验动物向缺血对侧转圈;3分：实验动物爬行时向缺血对侧倾倒;4分：实验动物不能自发行走,意识丧失。 ***对大鼠脑缺血再灌注治疗作用的初步药效学研究大鼠随机分为假手术组(

关键词： α-硫辛酸脑缺血再灌注氧化应激脑源性神经营养因子 PI3K/AKT ERK1/2

BDNF-TAT融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及体外活性测定

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

BDNF-TAT融合蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及体外活性测定

作者：罗道飞南方医科大学

学位级别：硕士

神经退行性疾病,如老年性痴呆（Alzheimer’s disease AD）、帕金森氏症（Parkinson’s disease PD）、萎缩性侧索硬化（Amyotrophic lateral sclerosis, ALS）、和亨廷顿氏病（Huntington’s disease HD）等,临床表现为肢体运动和学习... 详细信息

神经退行性疾病,如老年性痴呆（Alzheimer’s disease AD）、帕金森氏症（Parkinson’s disease PD）、萎缩性侧索硬化（Amyotrophic lateral sclerosis, ALS）、和亨廷顿氏病（Huntington’s disease HD）等,临床表现为肢体运动和学习记忆等功能障碍,主要原因是神经元功能的缺失或死亡。目前没有理想的治疗手段,在我国AD和PD这两种疾病已经累及大约1000万人给个人家庭和社会带来沉重负担。研究表明,神经营养因子家族成员（neurotrophic factors, NTFs）等,显示了很好的中枢神经系统神经退行性疾病的治疗前景。脑源性神经营养因子（BDNF）是神经营养因子家族成员包括之一,与其特异性受体酪氨酸激酶家族成员trkB结合,激活下游的信号传导途径,而发挥神经营养生物活性。然而,血脑屏障（BBB）阻碍了大分子药物从血液中进入大脑发挥生理作用,人大脑血脑屏障（BBB）由血管内皮细胞紧密连接组成,BBB腔内面为血液,腔外面多为外膜细胞,星行细胞及少量的神经元。天然BDNF不能透过BBB进入大脑发挥神经营养活性。蛋白质转导结构域（protein transduction domain, PTD）,如来源于人类Ⅰ型免疫缺陷病毒的转录激活蛋白（Trans-activator transcription, TAT）的PTD,是一类富含正电荷能够将与其物理或化学连接的化合物、蛋白质、或核酸类分子,带过细胞膜进入细胞浆,胞核内,甚至BBB,发挥各自的生物学功能的结构域。PTD/TAT介导的蛋白质可穿过由脑血管内皮细胞组成的BBB,使所携带蛋白进入大脑发挥生理作用,而使一些在正常情况下是不能通过BBB的蛋白进入脑组织。本实验中心前期通过基因工程的方法成功制备了编码成熟BDNF-TAT融合蛋白的基因,目的在于在世界上首先制备一种能通过BBB进入中枢神经系统,治疗神经退行性疾病的基因重组神经营养因子药物制剂。基于前期研究,本文采用重组质粒PET-30（a）-BDNF-TAT转化至大肠杆菌BL21（DE3）plysS中优化表达,经阳离子交换树脂优化纯化及精氨酸倍比稀释法复性BDNF-TAT融合蛋白,尾静脉给药KM种小鼠后研究其脑靶向性及其在脑组织中的分布,体外培养SD大鼠新生一周鼠背根神经节神经元检测BDNF-TAT融合蛋白的生物学活性,为进一步研究可透过血脑屏障药物BDNF-TAT融合蛋白治疗神经退行性疾病提供物质基础。目的 1.研究重组质粒PET-30（a）-BDNF-TAT转化至大肠杆菌BL21（DE3）plysS后BDNF-TAT融合蛋白的表达,并优化BDNF-TAT融合蛋白在大肠杆菌中表达及纯化的条件;2.小鼠经尾静脉血管给予复性后BDNF-TAT融合蛋白,探讨其在小鼠脑组织中的脑靶向性及在小鼠脑组织中的分布;3.体外培养新生大鼠背根神经节神经元细胞,进一步研究复性后BDNF-TAT融合蛋白体外促进神经元存活生长的活性。方法 1.根据前期课题组经基因工程办法制备的重组质粒PET-30（a）-BDNF-TAT及,本文将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21（DE3）plysS,37℃, 1.0mM IPTG诱导4h后低温离心（4℃,5000 rpm）收集菌体,超声裂解,高速离心后收集各步骤样品,通过15%SDS-PAGE和Western Blot分析确定融合蛋白BDNF-TAT在大肠杆菌中的表达形式;分别选取25℃、30℃、33℃、37℃、40℃为不同的诱导温度,对诱导温度进行优化;分别选取0.1mM、0.5mM、1.0mM、1.5mM为IPTG诱导浓度,对IPTG诱导浓度经行优化;选取1、2、4、6、8为诱导时间,对诱导时间经行优化;收集各条件下大肠杆菌并经行15%SDS-PAGE和（?）WesternBlot分析确定BDNF-TAT融合蛋白在大肠杆菌中的最佳表达条件。 2.重组质粒转化至大肠杆菌后,经25℃,0.5mM IPTG诱导4h后离心收集湿菌体,PBS重悬洗涤后用60%强度超声破碎仪裂解大肠杆菌,4℃、12000rpm低温高速高速离心去上清,沉淀用2M尿素和0.4%DOC洗涤并重复洗涤一次,低温高速离心去上清,包涵体沉淀用8M尿素4℃搅拌溶解14h,溶解后蛋白通过中高压层析系统泵入SP--Sepharose阳离子交换柱,选取pH7.0 NaCl浓度分别为0.1M和0.5M的洗脱液经行梯度洗脱优化不同离子强度对目的蛋白的洗脱能力;选取pH8.5,NaCl浓度为0.5M的洗脱液洗脱目的蛋白,对挂柱的目的蛋白经行分离纯化。洗脱后目的蛋白用0.4M精氨酸倍比稀释法除去目的蛋白中的尿素,同时复性融合

关键词：脑源性神经营养因子融合蛋白表达纯化活性

琥珀酰明胶注射液减轻cRGD-siRNA所致小鼠肾毒性的实验研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

琥珀酰明胶注射液减轻cRGD-siRNA所致小鼠肾毒性的实验研究

作者：廖文婕南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景siRNA通过抑制靶mRNA转录而引起特异性基因沉默,它已经成为治疗基因过表达引起的疾病的新型治疗策略。但是,siRNA在临床应用前还遇到了很多障碍,包括靶向性差、细胞摄取率低等,通过将siRNA整合到各种靶向性配体中可解决以上问... 详细信息

研究背景siRNA通过抑制靶mRNA转录而引起特异性基因沉默,它已经成为治疗基因过表达引起的疾病的新型治疗策略。但是,siRNA在临床应用前还遇到了很多障碍,包括靶向性差、细胞摄取率低等,通过将siRNA整合到各种靶向性配体中可解决以上问题。整合素是细胞粘附分子的一种,是连接细胞核与外环境的跨膜受体。其中,整合素α v β 3受体在肿瘤血管中有很高表达,但是在正常内皮细胞中几乎不表达。环状的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(cRGD)是一种整合素配体,可被α vβ 3受体特异性识别。我们利用这一特点,以cRGD为载体,合成介导siRNA聚集在肿瘤的新型肿瘤靶向药物。然而,我们发现cRGD-siRNA分子系统给药会引发肾毒性,必须找到可以有效防治cRGD-siRNA肾毒性的药物。琥珀酰明胶注射液,即佳乐施,是低血容量时的胶体血浆代用品,研究表明,佳乐施可以将RAFT-RGD的重吸收降低50%以上。本实验将佳乐施和cRGD-siRNA经过尾静脉混合注射到小鼠体内,进行血液分析、病理切片、TUNEL分析等试验,验证佳乐施对cRGD-siRNA分子导致的肾毒性的减轻作用,为今后cRGD-siRNA的临床治疗扫除障碍、提供支持。方法***-siRNA分子的制备和鉴定将环状cRGD肽通过巯基与siRNA分子正义链的5'端共轭连接,得到cRGD-siRNA分子,用HPLC和质谱测定得到的cRGD-siRNA分子的纯度和结构。2.实验动物分组和血清生化指标测定将成年雄性昆明小鼠随机分成以下三组,每组6只:1)cRGD-siRNA组:尾静脉注射cRGD-siRNA(5 nmol);2)cRGD-siRNA和佳乐施混合注射组:尾静脉注射cRGD-siRNA(5 nmol)和佳乐施(4 mg)混合液;3)对照组:尾静脉注射生理盐水(100 μl)。每隔48h给药一次,共5次,最后一次给药两天后,取血分离血清,测定每组血清肌酐和尿素氮的含量。3.组织学观察和TUNEL染色处死小鼠,取出肾脏,进行常规HE染色并观察。切片脱蜡后用蛋白酶k溶液孵育,然后用含有FITC-12-dUTP标记混合物的TdT孵育缓冲液孵育,在DAPI中染色,荧光显微镜下观察并计算TUNEL凋亡指数。结果***-siRNA分子的制备和鉴定本课题成功制备了如下siRNA序列:sense strand:5'-(mG)(mA)(mG)AACCUCACAUGGU(mA)(mC)(mA)dTdT-3';antisense strand:5'-(mU)(mG)(mU)ACCAUGUGAGGUU(mC)(mU)(mC)dTdT-3'。HPLC 测定cRGD-siRNA分子的纯度可达81%,质谱测定其分子质量与理论分子质量一致。2.血清生化指标测定cRGD-siRNA组血清尿素氮和肌酐含量比对照组明显升高,而佳乐施共同给药组血清尿素氮和肌酐明显比cRGD-siRNA组低(P<0.05)。3.组织学观察和TUNEL染色HE染色结果显示cRGD-siRNA组大量肾小管上皮细胞水肿、坏死,红细胞渗出,部分肾小球萎缩,而佳乐施混合注射组肾损伤明显减轻。TUNEL结果表明,佳乐施混合注射组凋亡细胞较少,cRGD-siRNA组凋亡细胞明显增多,两组的细胞凋亡指数有显著差异(P<0.05)。结论成功合成了 cRGD-siRNA分子并证实了佳乐施可明显减轻cRGD-siRNA导致的肾损伤,提示佳乐施在cRGD-siRNA临床应用过程中可能存在潜在的利用价值,具有较好的临床研究前景。

关键词：琥珀酰明胶注射液佳乐施 cRGD-siRNA 肾毒性

前荷叶碱单体的分离鉴定及其对人脐静脉内皮细胞功能的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

前荷叶碱单体的分离鉴定及其对人脐静脉内皮细胞功能的影响

作者：肖华第一军医大学

学位级别：硕士

血管内皮细胞位于血流与平滑肌细胞之间,其损伤和/或功能改变在多种心血管疾病的发病过程中起重要作用,尤其是动脉粥样硬化发病的始动环节。内皮功能障碍主要表现为—氧化氮(NO)等内皮依赖性舒张因子(EDRF)分泌减少或生物利用度降低,而... 详细信息

血管内皮细胞位于血流与平滑肌细胞之间,其损伤和/或功能改变在多种心血管疾病的发病过程中起重要作用,尤其是动脉粥样硬化发病的始动环节。内皮功能障碍主要表现为—氧化氮(NO)等内皮依赖性舒张因子(EDRF)分泌减少或生物利用度降低,而内皮素(ET)等内皮依赖性收缩因子(EDCF)分泌增多。目前认为血管内皮细胞的凋亡在内皮功能障碍中起重要的作用。引起血管内皮细胞凋亡的诱因有很多,其中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导内皮细胞分泌NO失衡导致细胞凋亡越来越受到人们的关注。故对NO水平进行调控可望成为治疗AugⅡ引起的内皮细胞凋亡异常相关心血管疾病的有效策略。目前已发现血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素受体拮抗剂均可提高内皮细胞分泌NO水平。我国传统中药有作用温和、副作用少的优势,发现一种有自主知识产权、能保护内皮细胞功能,且能进一步改善甚至逆转心血管疾病发病进程的药物具有深远意义。莲子心为睡莲科植物睡莲成熟种子中的干燥幼叶及胚根,是祖国医学中重要药物之一,具有清心安神、去热,交通心肾、涩精止血之功效。自从日本人富田真雄等从莲叶中分离出荷叶碱(Nuciferine)、莲碱(Roemerine)、O-去甲荷叶碱(O-Nornuciferine)3个单体成分以来,迄今为止,从植物莲中分离出的生物碱类化合物已有20多个,且均为异喹啉类生物碱。前荷叶碱(Pronuciferine)是从莲子心中提取的原阿朴啡生物碱,到目前为止,除了有学者曾报道从莲子心中提取得到了前荷叶碱外,国内外对其的生物学功能尚无研究。而从莲子心中提取出来的莲心碱和甲基莲心碱可阻滞钙离子通道、清除氧

关键词：前荷叶碱超临界CO2萃取术人脐静脉内皮细胞(HUVECs) 血管紧张素Ⅱ (AngⅡ) 一氧化氮(NO) 凋亡

微文化背景下大学生文化认同感培育研究 ——以微电影为例

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

微文化背景下大学生文化认同感培育研究 ...

作者：秦慕星武汉理工大学

学位级别：硕士

在社会转型背景下，复杂的文化格局使我国大学生文化认同感正遭遇着前所未有的冲击。面对这一现实，高校思想政治教育工作者应积极了解大学生当前的思想动态，准确找到思想政治教育的切入点，才能切实有效地推进大学生文化认同感培育研... 详细信息

在社会转型背景下，复杂的文化格局使我国大学生文化认同感正遭遇着前所未有的冲击。面对这一现实，高校思想政治教育工作者应积极了解大学生当前的思想动态，准确找到思想政治教育的切入点，才能切实有效地推进大学生文化认同感培育研究。微文化通过微电影、微博、微信等微媒介实现共享与交流，其信息发布便捷，渠道多样化、信息原创性，呈现碎片化、信息交互性强，网络社会化等特点，使微媒介迅速成为最受欢迎的社会交互模式。因此，在微文化背景下,利用微电影培育大学生文化认同感，已成为时代诉求。微电影作为新兴的传播媒介，对高校学生的生活方式与思想观念有着深刻的影响。然而，目前高校思想政治教育还未广泛利用微电影这一媒介资源，国内学界中以微电影创新思想政治教育理念，培育大学生文化认同感的研究还很少，并且大多都缺乏针对性与系统性。本文旨在探讨微文化背景下大学生文化认同感的培育问题。本研究以微电影为例，选取2006年以后入学的大学生为研究对象，运用文献研究法、调查分析法、案例分析法等研究方法，对大学生文化认同现状、微电影对大学生影响的基本现状进行了调查与分析，为高校运用微电影开展思想政治教育，培育大学生文化认同感提供了切实可行的对策。基于上述分析，笔者认为影响大学生文化认同感的因素有大学生自身因素、家庭传统文化教育因素、高校传统文化教育因素以及社会大环境因素。本研究目的在于运用与新媒体环境相适应的有效手段培育大学生文化认同感，完善高校思想政治教育体系。因此，可以从以下三个方面寻求对策：其一，提高新时代大学生素养;其二，创新微时代背景下高校思想政治教育工作理念;其三，完善微电影监督机制，营造和谐的微文化氛围。

关键词：微文化微电影大学生文化认同

农村小学教师主观幸福感研究 ——以湖北黄冈地区为例

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

农村小学教师主观幸福感研究 ——以湖...

作者：黄婷武汉理工大学

学位级别：硕士

幸福是人的毕生所求,追求幸福是推进社会前进的动力。当前,在我国全面建成小康社会和深入推行素质教育的背景下,教师幸福日益引起了人们的注意,引起了研究者的关注。从教师职业的特殊性来看,其主观幸福感将直接影响到教师队伍的稳定性... 详细信息

幸福是人的毕生所求,追求幸福是推进社会前进的动力。当前,在我国全面建成小康社会和深入推行素质教育的背景下,教师幸福日益引起了人们的注意,引起了研究者的关注。从教师职业的特殊性来看,其主观幸福感将直接影响到教师队伍的稳定性以及教育事业的发展,甚至社会的和谐与进步。提升教师的主观幸福感,实现教师自我价值,是当前发展我国教育事业的迫切需求。为了深入了解当前教师职业幸福的状态,挖掘其幸福与不幸福的原因,从而为教师主观幸福之路的探寻提供现实依据,本研究以黄冈地区和武汉地区的八所农村小学教师为研究对象,通过问卷调查和个案访谈研究他们的主观幸福感状况,了解其主观幸福感的总体状况和影响因素。本研究采用SPSS对收回的数据进行分析统计,得出最后结论。研究结果表明：第一、从调查的总体情况来看,农村小学教师主观幸福感水平较低。第二、农村教师队伍、生源不稳定,教师资源流失严重,学生多为留守儿童,增加了教师教学压力。第三、农村教师幸福感水平低下的主要原因为收入低,缺乏社会支持。第四、提升教师幸福的途径主要表现为教师自我素质的提升、更多的社会支持与制度的完善、落实。笔者认为,提升教师的主观幸福感,不仅要以一定的外在条件为前提和基础,更要依赖教师自身的条件和努力。最后,论文就如何提升教师的主观幸福感做出了对策研究,重点从政策实施、社会支持、学校管理、个人修养四个维度提出了建议。

关键词：农村小学教师主观幸福感

肿瘤靶向的biRGD-siVEGFR2在小鼠体内的组织分布、生物利用度及急性毒性研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤靶向的biRGD-siVEGFR2在小鼠体内的组织分布、生物利用度及急...

作者：黎国仙南方医科大学

学位级别：硕士

研究背景整合素受体αvβ3在肿瘤新生血管及部分肿瘤细胞中高表达。课题组前期利用RGD环肽可与整合素αvβ3受体特异性结合特点,以小分子化合物将两个RGD环肽与siRNA分子通过共价偶联得到biRGD-siRNA分子,用于肿瘤靶向治疗。biRGD-siRN... 详细信息

研究背景整合素受体αvβ3在肿瘤新生血管及部分肿瘤细胞中高表达。课题组前期利用RGD环肽可与整合素αvβ3受体特异性结合特点,以小分子化合物将两个RGD环肽与siRNA分子通过共价偶联得到biRGD-siRNA分子,用于肿瘤靶向治疗。biRGD-siRNA可通过RNA干扰原理靶向沉默目的基因的表达,在基因水平治疗疾病。前期结果提示biRGD-siRNA分子可增强细胞摄取、促进内体释放并靶向体内肿瘤组织新生血管、沉默目的基因表达,表现出一定的抑制肿瘤生长的药效。但是否具有成药性,还需要进一步的研究,如在体内使用的药代动力学及安全性需要详细的评价。但国内外对siRNA药物的药代动力学研究较少,尚没有成熟方法对biRGD-siRNA分子进行体内定量研究,更没有对肿瘤部位的biRGD-siRNA分子进行定量研究。目的建立准确可靠的biRGD-siVEGFR2分子体内定量方法,探讨分子在体内的组织分布、生物利用度同时研究其体内应用的急性毒性。方法1.建立可测定biRGD-siRNA分子在脏器及血清中浓度的定量方法。2.测定siVEGFR2、cRGD-siVEGFR2 及 biRGD-siVEGFR2 浓度,比较三者在体内的血清稳定性并考察剂量对biRGD-siVEGFR2血清稳定性影响。3.考察biRGD-siVEGFR2在小鼠体内的组织分布及生物利用度。4.建立肿瘤模型及肿瘤组织中biRGD-siVEGFR2定量方法,研究biRGD-siVEGFR2在肿瘤模型鼠中的组织分布及生物利用度。5.小鼠尾静脉注射50 nmol biRGD-siVEGFR2,研究其急性毒性。结果1.成功建立茎环实时PCR方法用于biRGD-siVEGFR2体内定量研究,标准曲线线性关系好,R2均达到0.99以上,最低检测限达到检测要求。2.与 siVEGFR2、cRGD-siVEGFR2 相比,biRGD-siVEGFR2 显著增加了 siRNA的t1/2、Cmax和AUC并降低CL。3.随剂量增加,biRGD-siVEGFR2显著增加其t1/2、Cmax和AUC。***-siVEGFR2仅在小鼠肾脏中被检测到,其t1/2为69分钟、Cmax为64605 ng/g、AUC0-t为1581966 ng/g*min。5.通过比较正常小鼠与肿瘤模型鼠组织分布,biRGD-siVEGFR2靶向于肿瘤组织。与肾脏相比,肿瘤部位t1/2增加1.5倍、Cmax增加3.26倍、AUC增加5.6倍、CL降低4.9倍。6.急性毒性实验中,与对照组相比,给药组小鼠体重变化、脏器系数、生化血液学指标、血液学指标均无统计学差异。病理切片结果显示与对照组相比,给药组的心、肝、脾、肺、子宫、睾丸均未见异常。给药组3例肾脏组织出现肾小管上皮细胞肿胀变性。结论本研究成功建立稳定可靠的茎环实时PCR方法对biRGD-siVEGFR2定量,结果提示biRGD-siVEGFR2可增强体内siRNA化合物在血清稳定性且与剂量成正比。biRGD-siVEGFR2可特异性靶向肿瘤部位且在肿瘤部位生物利用度最高。高剂量下biRGD-siVEGFR2安全低毒。

关键词： biRGD-siRNA 组织分布急性毒性茎环实时PCR 生物利用度

关怀理论视域下大学生责任意识培育现状与对策研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

关怀理论视域下大学生责任意识培育现状与对策研究

作者：蔡欢武汉理工大学

学位级别：硕士

大学生是21世纪社会主义现代化事业的建设者与接班人,是祖国的未来、民族的希望,其责任意识状况直接影响到社会的发展与进步。当前,我国大学生责任意识现状总体向善,但部分大学生仍然在对自我、他人、社会、自然的责任意识方面存在不足... 详细信息

大学生是21世纪社会主义现代化事业的建设者与接班人,是祖国的未来、民族的希望,其责任意识状况直接影响到社会的发展与进步。当前,我国大学生责任意识现状总体向善,但部分大学生仍然在对自我、他人、社会、自然的责任意识方面存在不足,这些问题的产生离不开大学生自身、家庭、学校以及社会的错误认知和负面行为的影响。这表明,本应落到实处的责任意识教育还不够完善,亟待一种新的方法来提高责任意识教育的实效性。产生于20世纪70年代的关怀理论源自于女性独特的道德判断,通过对其内容进行梳理,可以发现关怀理论以人与外界之间的密切关系为逻辑基础,围绕情感、情境、实践、回应等一系列内容展开。正是因为关怀理论重视人的本质是关系性的存在这一客观事实,所以十分强调营造人与外界之间关怀型关系的重要性与必要性,倡导人们应将可自发形成的自然关怀推及到全社会,形成涵盖全人类与整个自然界的伦理关怀,使得人与自身及外界之间形成充满关心与爱的良性互动关系。在这种关怀型关系之中,责任意识将极易自发产生。同时,通过进一步对比可知,关怀理论与责任意识无论是在逻辑起点、发展走向还是最终目的上,都有着惊人的相似。此外,在挖掘关怀理论的理论内涵时也不难发现,关怀理论中蕴含着的不少内涵可以为责任意识教育提供方法论指导。实际上,当人人都学会关怀之时,那么责任意识问题便迎刃而解。实践中,当代中国大学生责任意识虽然主流向上,但也存在一些问题。部分大学生在对自己、他人、社会、自然的责任意识方面有所缺陷,究其原因,都离不开对“关系”的认识不够深入。针对这一问题,关怀理论可以提供一定的指导。家庭、学校、社会都应建立起内部的关怀关系,通过关怀教育促使人们学会关怀,以关怀情境熏陶人,激励人们自觉承担起自己的责任,自然而然地形成对自己、他人、社会、自然的责任意识。总之,以关怀理论指导责任意识教育,能够有效地提高大学生责任意识水平,促进高校思想政治教育的可持续发展,推动社会主义和谐社会的构建。

关键词：关怀理论责任责任意识培育大学生