检索结果-南通市图书馆

作者：宋雪曲阜师范大学

学位级别：硕士

本翻译实践选择福格的《小习惯:小改变,大变革》(Tiny Habits:The Small Changes That Change Everything)作为翻译的源文本,主要探究交际翻译理论在呼唤类文本中的应用。该书为励志自助类书籍,书中对小习惯法进行了深入的解析,并通过... 详细信息

本翻译实践选择福格的《小习惯:小改变,大变革》(Tiny Habits:The Small Changes That Change Everything)作为翻译的源文本,主要探究交际翻译理论在呼唤类文本中的应用。该书为励志自助类书籍,书中对小习惯法进行了深入的解析,并通过许多成功的案例向人们展示小习惯的养成过程,鼓励人们通过做一些小事情达到自己的期望。该文本属于呼唤型文本,该文本类型的功能就是号召读者去行动、去思考、去感受,按照文本所希望的方式去做出反应,因此,译者选择了交际翻译来指导该类型文本的翻译实践,从词汇和句法两个层面分析该翻译实践,并试图以中国读者容易接受和理解的内容和语言方式来呈现源文本的确切语境意义。本翻译实践报告是译者在翻译完本书的简介和第一章的基础上撰写出来的。本报告由五章组成,第一章简要介绍了该翻译任务的背景。第二章是翻译任务描述,主要包括源文本的分析、翻译困难和对纽马克交际翻译的介绍。第三章是翻译过程描述,主要包括译前准备、翻译过程和质量保证。第四章是案例分析,以交际翻译为指导,从词汇和句法两个层面入手,呈现出译者在语义延伸、增译、词类转换、句子的分译与合译等方面实现交际翻译目的。第五章是对整篇翻译报告的总结。译者希望本翻译实践报告能对其它类似书籍的翻译提供一些参考。

关键词：行为设计呼唤型文本交际翻译

血流限制组合不同训练方案对中国跤男运动员无氧运动能力和下肢力量的影响

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血流限制组合不同训练方案对中国跤男运动员无氧运动能力和下肢力...

作者：谢鑫山东体育学院

学位级别：硕士

研究目的:观察血流限制低强度抗阻训练组合高强度抗阻训练对中国跤男运动员温盖特无氧试验(WAn T)表现、下肢爆发力、下肢最大力量、下肢肌肉耐力和下肢围度的影响效果。研究方法:选取36名中国跤男运动员随机分为3组,常规组(高强度抗阻... 详细信息

研究目的:观察血流限制低强度抗阻训练组合高强度抗阻训练对中国跤男运动员温盖特无氧试验(WAn T)表现、下肢爆发力、下肢最大力量、下肢肌肉耐力和下肢围度的影响效果。研究方法:选取36名中国跤男运动员随机分为3组,常规组(高强度抗阻训练组)、血流限制组(血流限制低强度抗阻训练组)、组合组(血流限制低强度抗阻训练组合高强度抗阻训练组),进行6周,每周3次的赛前半蹲起和弓步蹲训练。在干预训练前、第三周后和后期分别进行前测、中测和后测,测试内容为PP、PP/kg、AP、AP/kg、Min-P、PD(%)和立定跳远、30米冲刺跑、纵跳、深蹲1RM和深蹲60%1RM最大次数;实验前、后分别进行前测和后测,测试内容为臀围、左右大腿围和左右小腿围。通过重复测量双因素分析比较不同组别和组内指标的影响。研究结果:(1)无氧运动能力的变化上,6周训练后组合组PP值提高上非常显著优于常规组(P0.05);6周训练后血流限制组和组合组Min-P值均发生非常显著性提高(P0.05)。(2)下肢力量的变化上,6周训练后三组立定跳远、30米冲刺跑、深蹲1RM、深蹲60%1RM最大次数均出现显著性增长(P<0.05),组间比较发现立定跳中组合组和血流限制组效果均显著优于常规组(P<0.05);30米冲刺跑、深蹲1RM中组合组均优于常规组;6周训练后血流限制组和组合组纵跳高度均非常显著提升(P<0.01),组间比较发现组合组效果均显著优于常规组、血流限制组(P<0.05)。(3)下肢围度的变化上,6周干预后三组左大腿围、右大腿围均显著提高(P<0.05,P<0.01);血流限制组和组合组臀围均显著提高(P<0.05);血流限制组和组合组左、右小腿围均显著提高(P<0.05,P<0.01),组间比较发现组合组在左右小腿围增大效果上显著优于常规组和血流限制组(P<0.05)。研究结论:(1)6周干预训练,血流限制低强度抗阻训练组合高强度抗阻训练可以有效提高运动员的无氧运动能力,具体表现在峰值功率、相对峰值功率、无氧平均功率和最小功率;提高下肢力量,具体表现在立定跳远、30米冲刺跑、纵跳高度、深蹲1RM和深蹲60%1RM最大次数;增大下肢围度,具体表现在臀围、左右大腿围、左右小腿围。(2)6周的干预训练,血流限制低强度抗阻训练组合高强度抗阻训练在峰值功率、纵跳高度和左右小腿围的提高上显著优于高强度抗阻训练和血流限制低强度抗阻训练;在相对无氧平均功率、立定跳远、30米冲刺跑和深蹲1RM成绩提高上显著优于高强度抗阻训练。(3)血流限制低强度抗阻训练组合高强度抗阻训练比单纯血流限制低强度抗阻训练更助于训练效果的迁徙。

关键词：血流限制中国式摔跤无氧运动能力下肢力量抗阻训练

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鹿茸干细胞分泌蛋白促进大鼠软骨缺损修复

鹿茸干细胞分泌蛋白促进大鼠软骨缺损修复

作者：周珏中国农业科学院

学位级别：硕士

关节软骨的自我修复能力弱,软骨缺损的临床治疗效果仍不尽人意。同时,鹿茸软骨是一种独特的再生软骨,具有自我修复能力,修复速度极快。这种快速自我修复的过程与鹿茸干细胞的旁分泌因子密切相关。这个发现为临床上开发用于软骨缺损的无... 详细信息

关节软骨的自我修复能力弱,软骨缺损的临床治疗效果仍不尽人意。同时,鹿茸软骨是一种独特的再生软骨,具有自我修复能力,修复速度极快。这种快速自我修复的过程与鹿茸干细胞的旁分泌因子密切相关。这个发现为临床上开发用于软骨缺损的无细胞疗法提供了潜力。利用手术的方法构建大鼠关节软骨缺损模型,以水凝胶为生物载体,分别承载鹿茸干细胞条件培养液(ASC-CM)和鹿茸干细胞外泌体(ASC-Exos)植入大鼠软骨缺损处,利用组织学方法评估软骨损伤修复水平;通过CCK-8法、Edu法和划痕法研究了ASC-CM和ASC-Exos对软骨细胞和大鼠骨髓间质干细胞(BMSCs)增殖、迁移能力的影响,用q PCR和western blot研究了ASC-CM和ASC-Exos对软骨细胞表型的维持作用。用流式细胞术和q PCR法研究ASC--CM对软骨细胞凋亡的影响。最后,通过DIA法确定了CM和Exos中含有的蛋白质成分,以预测可能的机制。ASC-CM显著促进软骨组织损伤修复。在体内实验中,实验组(ASC-CM)软骨修复水平高于阳性对照(h ADSC-CM)和阴性对照(DMEM)组。体外实验表明,ASC-CM明显增强软骨细胞和BMSCs的增殖和迁移。ASC-CM上调了软骨细胞中Aggrecan、COLII、Sox9和NAMPT m RNA的表达水平,下调了BAX的m RNA表达水平;上调了软骨细胞中Aggrecan、COLII、Sox9的蛋白水平。流式细胞仪结果显示,ASC-CM处理后,细胞凋亡率明显下降。对ASC-CM蛋白的成分分析显示,活性成分可能有S100A4、S100B、PLS3、Filamin A、TGF-β1、TGF-β2、PDGF和IGF-1。ASC-CM可能是S100A4等细胞骨架蛋白与多种生长因子(TGF-β1、TGF-β2、PDGF和IGF-1)的协同作用促进软骨生成。ASC-Exos明显促进软骨组织损伤修复。实验组(ASC-Exos)的软骨修复水平高于阳性对照(h ADSC-Exos)和阴性对照(DMEM)组。体外实验显示,ASC-Exos明显增强了软骨细胞和BMSCs的增殖和迁移能力。ASC-Exos上调了软骨细胞中Aggrecan、COLII和Sox9 m RNA的表达水平。对ASC-Exos蛋白成分的分析,发现了一些活性成分,如Serotransferrin、S100A4。ASC-Exos对软骨损伤修复有明显的作用,这种作用可能是通过促进软骨细胞和BMSCs的增殖和迁移,维持软骨细胞的表型而实现的。这可能是由于Serotransferrin、S100A4的作用。这为临床上开发用于软骨缺损的无细胞疗法提供了新的思路。

关键词：鹿茸干细胞条件培养液外泌体软骨再生软骨缺损

新三板私募股权融资中对赌协议的应用研究 ——以新疆火炬为例

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新三板私募股权融资中对赌协议的应用研究 ...

作者：苏雅婷上海师范大学

学位级别：硕士

外源融资是公司发展壮大的一个重要环节,常见的融资方式包括债务融资和股权融资等。我国的民营企业的融资受到自身现金流不稳定,内控不合规等现实状况限制,很难从银行类金融机构获得债务融资,中国资本市场又对上市公开融资有着严格的准... 详细信息

外源融资是公司发展壮大的一个重要环节,常见的融资方式包括债务融资和股权融资等。我国的民营企业的融资受到自身现金流不稳定,内控不合规等现实状况限制,很难从银行类金融机构获得债务融资,中国资本市场又对上市公开融资有着严格的准入门槛。新三板挂牌制度为中小民营企业融资提供了新的途径,新三板又叫“全国中小企业转让系统”,在新三板挂牌的公司不能公开募集资金,但是可以通过定向增发进行私募股权融资。新三板挂牌逐渐成为众多企业融资的选择,但新三板挂牌企业的信息披露、市场监管等都与主板存在差距,导致私募股权融资中存在的信息不对称风险等更加显著。投资方为了控制投资的风险,保障自身的利益,对赌协议开始被频繁运用在民营企业的私募股权融资的过程中。对赌协议本质是私募股权融资中的风险控制手段,投融资双方就企业的发展达成某项约定,在企业的发展过程中根据企业的经营状况不断调整投资金额接近企业的真实市场价值。对赌协议应该是投融方双方协议商定的平等条款,但是在融资过程中,投资方因为握有资金,拥有更多的话语权主导条款的设计。为了防范投资风险和追求投资利益,融资方往往会设置严格的退出方式以及不切实际的业绩承诺。中国资本市场上运用对赌协议失败的案例比比皆是,譬如俏江南,永乐电器等大型民营企业,实施对赌协议后,企业一路衰败,甚至丧失控制权。对赌的频繁失败究其根本和民营企业的投资心理脱不开关系,为了获得高额融资,签署无法完成的业绩承诺,选择不符合企业真实情况的发展战略。但是也有少数对赌成功的案例,借助私募股权融资促进企业发展。本案例以新疆火炬和九鼎投资的对赌协议为线,首先分析国内新三板企业运用对赌协议的现状,探讨签订对赌协议对新三板企业的影响。再结合案例中对赌双方的基本情况以及对赌协议的签订背景、条款设计,以及对赌履约情况,分析新疆火炬对赌协议设计的合理性。从对赌协议的实施路径、风险控制分析新疆火炬应用对赌的全过程。探讨新疆火炬如何成功完成对赌,在实践对赌条款过程中改善治理。本文结合私募股权融资相关知识,分析了新疆火炬对赌成功的全过程,希望在新三板企业对赌失败热潮的环境背景下,结合新疆火炬对赌案例提供一些对赌成功的借鉴意义以及应用对赌的一些启示。

关键词：私募股权融资对赌协议新三板

绿色并购对企业会计信息质量的影响研究 ——基于市场化进程的调节效应

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绿色并购对企业会计信息质量的影响研究 ...

作者：姚书淇上海师范大学

学位级别：硕士

随着“双碳”目标的提出,我国积极参与到全球节能环保行动中,通过技术创新、能源改革、建设碳市场等途径推动工业企业进行绿色并购、形成绿色发展方式和推进产业结构绿色转型。近年来绿色并购交易数量大幅上升,说明随着绿色发展理念的深... 详细信息

随着“双碳”目标的提出,我国积极参与到全球节能环保行动中,通过技术创新、能源改革、建设碳市场等途径推动工业企业进行绿色并购、形成绿色发展方式和推进产业结构绿色转型。近年来绿色并购交易数量大幅上升,说明随着绿色发展理念的深化,越来越多企业选择通过绿色并购来提高企业竞争力、获得利益相关者的支持,但企业信息披露的内容存在规范性不足和缺乏可比性问题,偏离外部使用者的需要。那么,面对“十四五”国民经济绿色发展大格局和以双碳目标为首的经济结构变革,主并企业的绿色并购行为作为一种触发式的前因,会对会计信息质量产生何种影响?企业所处地区市场化进程是否会在其中起到调节作用?不同污染程度和产权性质企业的绿色并购行为差异如何?基于此背景,本文探究了在市场化进程的调节作用下,企业绿色并购与会计信息质量之间的影响关系。为解决这些问题,文章在梳理总结国内外现有研究成果的基础上,以2010-2020年中国上市工业企业的并购事件为研究对象,运用倾向得分匹配法探究企业绿色并购对会计信息质量的影响,并考虑地区市场化进程在其中的调节作用;接着通过灰色关联分析确立的关联度大小进行污染程度分级,考虑不同污染程度和产权性质企业在绿色并购中的行为差异;在进一步研究中考虑企业内部高管环保意识和内部控制质量因素对绿色并购影响企业会计信息质量的调节作用。研究结果显示:第一,企业进行绿色并购后,可操纵性应计盈余管理程度显著增加,会计信息质量显著降低,说明企业绿色并购行为更主要基于寻租观,并不是着眼于绿色发展的长远战略以实现企业长期利益最大化,而是管理层为谋求自己的私利、获取套利收益而进行的策略性绿色并购,因此为躲避外界关注会选择低调行事,通过对会计信息进行干预、有目的的盈余管理等行为来减少会计信息的透明度,减轻社会公众的关注,下调企业会计信息质量;第二,主并企业所处地区市场化进程能够调节企业绿色并购对会计信息质量的负面影响,更多地将绿色并购作为积极履行社会责任,实现环保与经济协同发展的工具;第三,在此基础上,运用灰色关联分析法将主并企业划分为重污染非重污染企业,探究不同污染程度、产权性质的主并企业在绿色并购过程中的行为差异。重污染企业市场化进程能显著降低绿色并购对会计信息质量的负面影响;非国有企业较少受到政府的管制和干预,更易实施策略性绿色并购,减少由于逐利动机引发的会计信息质量降低。第四,主并企业的高管环保意识与内部控制质量会抑制绿色并购对会计信息质量的负面影响。研究结论对政府制定与实施绿色并购、引导产业结构绿色转型升级具有参考价值。

关键词：绿色并购会计信息质量市场化进程主并企业行为差异内部控制质量

上市公司高派现股利政策动因与效应研究——以吉比特公司为例

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上市公司高派现股利政策动因与效应研究——以吉比特公司为例

作者：陶宸上海师范大学

学位级别：硕士

股利政策既是上市公司的一项重要财务决策,也是公司财务管理的主要组成部分。随着我国资本市场的不断发展,企业和公众都愈发重视股利政策的制定与实施。近几年,在证监会多项分红政策的推动下,我国上市公司现金分红水平不断上升,“高派... 详细信息

股利政策既是上市公司的一项重要财务决策,也是公司财务管理的主要组成部分。随着我国资本市场的不断发展,企业和公众都愈发重视股利政策的制定与实施。近几年,在证监会多项分红政策的推动下,我国上市公司现金分红水平不断上升,“高派现”现象屡见不鲜。现金股利政策一方面向市场释放了公司经营的积极信号,直接的回馈了股东利益;另一方面,也可能存在为终极股东输送利益、为重要股东减持保驾护航的可能。但其所产生的效应不仅仅作用于广大股东的利益,更关乎到公司的生产经营、资本结构和未来发展等方方面面。因此,众多国内外学者将上市公司股利政策的选择与制定作为重点研究内容。本文选取了互联网行业连续多年现金分红的吉比特公司,以相关理论和股利政策研究成果为依托,从财务状况和公司治理等方面挖掘吉比特公司选择高派现政策的动因,构建财务弹性指标体系分析高派现的财务效应,从外部关注度、企业价值、市场反应和代理问题四个角度判断高派现的非财务效应,通过因子分析法构建综合效应评价体系分析高派现的综合效应。研究发现,高派现政策的实施以良好的财务状况为经济基础,股权结构对高派现政策的选择具有导向性,公司外部环境也会引导高派现的实施。高派现不会对财务状况良好的企业产生强烈的财务效应,但可以显著帮助企业提升外部关注度,激发正向的市场反应。综合来看,高派现政策对经营状况良好的公司产生正向的综合效应。因此,本文建议公司要根据自身现状制定合适的股利政策,注重股利政策的稳定性;同时要优化股权结构,鼓励通过高派现实现合理利益,但也要防范大股东侵占中小股东利益。

关键词：现金股利高派现动因高派现效应互联网公司吉比特

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状态焦虑对工作记忆的影响机制及干预研究

状态焦虑对工作记忆的影响机制及干预研究

作者：孙小越天津中医药大学

学位级别：硕士

焦虑是一种日常生活中常见的情绪状态,是人们在面对具有潜在威胁性、挑战性的事件时产生的消极情绪,这种情绪会损害记忆、推理、决策等认知过程。工作记忆是人类高级认知心理活动的基础。它能够在短时间内维持和控制来自环境中的信息,... 详细信息

焦虑是一种日常生活中常见的情绪状态,是人们在面对具有潜在威胁性、挑战性的事件时产生的消极情绪,这种情绪会损害记忆、推理、决策等认知过程。工作记忆是人类高级认知心理活动的基础。它能够在短时间内维持和控制来自环境中的信息,以保证人们各种认知活动顺利完成。有研究者认为,焦虑干扰工作记忆过程,从而对人们的其他认知过程产生消极影响。为探究焦虑与认知过程的关系,研究者将焦虑与工作记忆的关系作为研究的重点。以往研究侧重于特质焦虑对工作记忆的影响,然而,健康个体的认知过程也会受到焦虑的干扰,探究健康个体状态焦虑下工作记忆的特点有助于提升个体焦虑情绪下的认知活动表现,促进个体身心健康发展。因此,本研究通过实验法,采用恐惧创伤电影范式和经典的n-back范式,探讨状态焦虑对工作记忆的作用机制,在此基础上提出能够有效改善状态焦虑个体工作记忆表现的干预方案。研究共分为两个研究:研究一探讨在不同认知负荷条件下,状态焦虑对工作记忆的作用机制,包括两个实验。实验1采用2(状态焦虑:是vs.否)×3(认知负荷:低vs.中vs.高)的两因素混合设计,考察状态焦虑对言语工作记忆和空间工作记忆的影响。结果发现,在空间工作记忆任务上,状态焦虑组的反应时显著高于非状态焦虑组;在言语工作记忆任务上,状态焦虑组与非状态焦虑组任务在反应时上不存在显著性差异。实验2采用2(状态焦虑:是vs.否)×3(认知负荷:低vs.中vs.高)×2(材料类型:负性图片vs.中性图片)的三因素混合设计,探讨状态焦虑对负性材料的工作记忆影响机制。结果发现,在状态焦虑条件下,被试在中、高认知负荷条件下的负性图片任务反应时显著低于中性图片任务;在低认知负荷条件下,负性图片和中性图片任务的反应时不存在显著差异。在非状态焦虑条件下,所有认知负荷水平下对负性图片任务的反应时显著高于中性图片。研究一发现,状态焦虑损害工作记忆表现,并且状态焦虑个体对负性图片存在注意偏向。研究二在研究一的基础上,进一步探讨提升状态焦虑个体工作记忆表现的干预方案,因此实验3以价值观自我肯定为干预方式,采用2(自我肯定:是vs.否)×2(材料类型:负性图片vs.中性图片)的两因素混合设计,考察自我肯定对状态焦虑个体工作记忆任务的影响。结果发现,自我肯定组在工作记忆任务上的反应时显著低于非自我肯定组,正确率显著高于非自我肯定组。在自我肯定条件下,负性图片和中性图片在反应时上不存在显著性差异;在非自我肯定条件下,负性图片任务反应时显著低于中性图片任务。通过对实验结果的分析,我们得出以下结论:(1)状态焦虑选择性损害个体空间工作记忆表现,对言语工作记忆的表现影响较小。(2)在中、高认知负荷任务,状态焦虑个体对负性信息产生注意偏向,负性信息的工作记忆表现显著好于中性信息。(3)自我肯定干预可以提高状态焦虑个体的工作记忆表现,抑制其对负性信息的注意偏向。

关键词：状态焦虑工作记忆自我肯定认知负荷

基于战略视角家族企业代际传承并购绩效研究——以福耀玻璃并购福建三锋为例

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基于战略视角家族企业代际传承并购绩效研究——以福耀玻璃并购福...

作者：王雨佳上海师范大学

学位级别：硕士

我国家族企业受到中国特有的家族文化背景的深远影响,我国民营企业在代际传承的浪潮中进行抉择也成了民营家族企业创始人需要考虑的问题。本文选择福耀玻璃作为研究对象,基于2018年年中福耀玻璃并购接班人曹晖创办的福建三锋集团的事件... 详细信息

我国家族企业受到中国特有的家族文化背景的深远影响,我国民营企业在代际传承的浪潮中进行抉择也成了民营家族企业创始人需要考虑的问题。本文选择福耀玻璃作为研究对象,基于2018年年中福耀玻璃并购接班人曹晖创办的福建三锋集团的事件进行案例研究,在文献综述的基础上,从总体和具体路径分析家族企业战略并购对于企业绩效影响的机理,探究家族企业代际传承的过程中进行代际间并购的动因,运用事件研究法分析福耀玻璃战略并购福建三锋的市场绩效,通过平衡计分卡对于战略并购绩效的财务和非财务绩效进行分析,随后建立综合评价模型对于并购绩效的结果进行综合评价。研究表明福耀玻璃的战略并购行为在一定程度上实现了战略目标,同时战略并购绩效结果评价较好。结合福耀玻璃在代际传承阶段进行战略并购的行为和并购绩效结果得出以下结论:家族企业进行战略调整能够促进战略并购的效率,推动家族企业顺利渡过代际传承阶段,同时家族企业在战略并购之后要加强对于企业内部的发展,谨慎选择投资项目,发挥并购之后企业的管理协同效应,提高应对风险的能力。因此,从代际传承视角研究家族企业进行战略并购的动因分析,过程梳理和整体战略并购绩效评价,能够指导我国民营制造业家族企业进行有效的代际传承,达到家族企业“基业长青”的追求,具有一定的理论和现实意义。

关键词：家族企业代际传承战略并购并购绩效

细叶百合和新铁炮百合原生质体分离培养及瞬时转化体系的建立

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细叶百合和新铁炮百合原生质体分离培养及瞬时转化体系的建立

作者：何珊珊沈阳农业大学

学位级别：硕士

百合是世界范围内重要的观赏和食用植物,然而其原生质体分离培养研究仍处于起步阶段,高效的百合原生质体再生系统尚未建立。本研究以细叶百合和新铁炮百合为材料,通过酶解法建立了百合原生质体高效分离培养体系,并使用PEG-Ca介导法实现... 详细信息

百合是世界范围内重要的观赏和食用植物,然而其原生质体分离培养研究仍处于起步阶段,高效的百合原生质体再生系统尚未建立。本研究以细叶百合和新铁炮百合为材料,通过酶解法建立了百合原生质体高效分离培养体系,并使用PEG-Ca介导法实现了百合原生质体的瞬时转化,研究结果如下:1.建立了细叶百合和新铁炮百合原生质体分离体系。以叶片为材料分离的原生质体均达到10数量级,活力均达70%左右,以胚性愈伤组织为材料分离的原生质体大小均一,产量活力均达到10数量级、60%左右。细叶百合和新铁炮百合叶片原生质体的最佳分离液分别为:CPW+2.0%纤维素酶RS+0.50%离析酶R-10+0.10%果胶酶Y-23+12g·L甘露醇和CPW和1.0%纤维素酶RS+0.50%离析酶R-10+0.10%果胶酶Y-23+14g·L甘露醇,分离条件为25℃黑暗条件下低速振荡酶解6 h。细叶百合和新铁炮百合胚性愈伤组织原生质体的最佳分离液分别为:CPW+2.0%纤维素酶RS+0.6%果胶酶Y-23和CPW+14 g·L甘露醇和CPW+2.0%纤维素酶RS+0.6%果胶酶Y-23和CPW+12 g·L甘露醇,分离条件分别为25℃黑暗条件下低速振荡酶解4 h和6 h。2.构建叶片来源的原生质体形成细胞团、胚性愈伤组织来源的原生质体获得愈伤组织的体系。细叶百合和新铁炮百合原生质体纯化后转接于含1/8 NHNO的MS培养基中,固-液结合法培养能够启动其细胞分裂。叶片来源和胚性愈伤组织来源的原生质体最佳培养密度均为2×10个·m L,葡萄糖浓度分别为60 g·L和90 g·L。叶片原生质体培养3 d出现第一次分裂,10 d出现第二次分裂,28 d后可获得细胞团,之后细胞分裂停止并解体。胚性愈伤组织原生质体培养4 d出现第一次分裂,12 d出现第二次分裂,30 d后可获得细胞团,70 d后新铁炮胚性愈伤组织来源的原生质体最终形成具有旺盛分裂能力的愈伤组织。胚性愈伤组织更有利于原生质体分裂再生,是良好的再生材料。3.建立了细叶百合和新铁炮原生质体瞬时转化体系。叶片原生质体转化的最佳密度为1×10个·m L,加入10μg植物表达载体p RI-101-ON-GFP,再加入110μL PEG-Ca溶液含有400 g·LPEG4000,0.1 mol·LCa Cl,0.6 mol·L甘露醇,三种液体混合后,转化培养24 h,细叶百合和新铁炮百合的转化效率分别为34%和36%;愈伤组织原生质体转化的最佳培养密度调整为0.5×10个·m L,加入10μg表达载体中,再加入110μL PEG-Ca溶液含有400 g·LPEG4000,0.1 mol·LCa Cl,0.4 mol·L甘露醇,三种液体混合后,转化培养36 h后,细叶百合和新铁炮百合的转化效率分别为12%、13%。4.新铁炮百合较细叶百合的胚性愈伤组织原生质体具有更好的再生能力。叶片和胚性愈伤组织均为分离原生质体的优良材料。叶片原生质体是研究瞬时转化和基因功能的良好受体,而愈伤组织原生质体在细胞工程育种方面更具优势。

关键词：细叶百合新铁炮百合原生质体分离培养瞬时转化

基于线粒体能量代谢探讨补阳还五汤及拆方治疗缺血性中风的机制

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基于线粒体能量代谢探讨补阳还五汤及拆方治疗缺血性中风的机制

作者：杨璐平北京中医药大学

学位级别：硕士

研究背景缺血性中风(ischemicstroke,IS)是常见的脑血管类疾病,以神志不清、口舌歪斜、半身不遂、舌强语蹇或不语等为主要临床特征,作为现代社会严重威胁人类健康的三大疾病之一。目前,IS的治疗方法多通过静脉注射阿替普酶等溶栓药物来... 详细信息

研究背景缺血性中风(ischemicstroke,IS)是常见的脑血管类疾病,以神志不清、口舌歪斜、半身不遂、舌强语蹇或不语等为主要临床特征,作为现代社会严重威胁人类健康的三大疾病之一。目前,IS的治疗方法多通过静脉注射阿替普酶等溶栓药物来消除闭塞和恢复血流,但是受到治疗窗口期狭窄的限制,还存在潜在的神经毒性、溶栓灌注率差等并发症,因此不足5%的IS患者能受益于溶栓治疗。此外,血管内取栓可以作为静脉溶栓的补充。尽管利用药物和机械溶栓的治疗能帮助一些患者从IS中恢复,但治疗手段受到多种条件限制,疗效也不确定。因此,从中医药的角度深入研究IS的潜在机制,开发潜在的神经保护靶点,进一步改善脑功能预后有重要的价值。中医药治疗IS具有悠久的历史、丰富的经验和独特的优势。在临床以中医药理论为指导,实施辨证论治,能够显著提高IS患者的生活质量。气虚血瘀证是IS常见证候之一,故具有补气活血通络之效的经典复方补阳还五汤可有效改善脑血流状态治疗气虚血瘀证缺血性中风。然而,气虚血瘀导致IS的内在病理机制尚不明确,补阳还五汤通过作用于何种环节或靶点改善脑血流状态仍缺乏深入认识。现代中医理论认为线粒体作为“动力工厂”在某种意义上反应了中医“气”的作用,许多研究显示气虚血瘀证与线粒体能量代谢异常密切相关,而中风的相关研究中有关气虚血瘀证与线粒体能量代谢影响脑血流的研究甚少。因此,本研究以气虚血瘀证脑缺血大鼠模型为研究对象,以补气活血的代表性方剂补阳还五汤为干预手段,从脑线粒体能量代谢影响脑血流状态的角度对气虚血瘀的病理实质进行深入诠释,以期揭示补阳还五汤治疗IS的分子机制,同时为中医“气血”与线粒体的关系提供进一步的实验佐证。研究方法实验一气虚血瘀证缺血性中风大鼠模型的构建及补阳还五汤的治疗作用:动物随机分为3组(每组6只):①正常组:不进行任何处理;②模型组:14d连续多因素复合模拟制备气虚血瘀证模型,第14 d进行气虚证、血瘀证评分,符合证候标准的大鼠,在第15 d采用线栓法制备大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,手术后再进行气虚证、血瘀证及神经功能评分,综合评分达到要求即完成气虚血瘀证缺血性中风大鼠模型的构建。③补阳还五汤组:在第15 d MCAO手术后当天灌胃补阳还五汤,给药剂量为13.1 g/kg。正常组和模型组分别灌胃等量的蒸馏水,各组均每日灌胃1次,连续灌胃7 d。连续灌胃结束后次日(即造模开始的第22 d)检测各组大鼠气虚证、血瘀证及神经功能评分、旷场实验、舌象图像R、G、B值及脑梗死体积。实验二补阳还五汤及拆方对气虚血瘀证缺血性中风大鼠脑血流及相关因素的影响:动物随机分为6组(每组12只):①正常组;②模型组;③补阳还五汤组;④补气组;⑤活血组;⑥丁苯酞组。后4组大鼠在构建气虚血瘀证基础上,在第15 d MCAO手术后当天灌胃药物,补阳还五汤组、补气组及活血组给药剂量分别为13.1、10.8、2.2g/kg,丁苯酞组给药剂量为0.84g/kg,正常组和模型组分别灌胃等量的蒸馏水,各组均每日灌胃1次,连续灌胃7 d。在线栓阻塞前后和取材前,应用激光散斑血流成像系统检测大鼠缺血侧脑血流量(rCBF)。第22d取血和脑,应用全自动生化分析仪观察大鼠血脂水平,应用ELISA法检测大鼠凝血及脑微血管相关因子情况,应用免疫荧光技术观察大鼠CD34+脑微血管密度。实验三补阳还五汤及拆方对气虚血瘀证缺血性中风大鼠脑线粒体能量代谢的影响:动物分组及灌胃处理同实验二。第22 d取脑,应用荧光素酶法检测大鼠缺血侧脑ATP水平,应用JC-1法检测大鼠缺血侧脑线粒体膜电位水平,应用生化法检测缺血侧脑线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅴ活性,应用Western-blot技术观察大鼠缺血侧脑线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅴ的亚单位蛋白水平和AMPK、p-AMPK蛋白水平。研究结果实验一气虚血瘀证缺血性中风大鼠模型的构建及补阳还五汤的治疗作用:1.气虚证、血瘀证评分:模型组大鼠气虚证和血瘀证评分均升高,补阳还五汤治疗后可有效降低气虚证和血瘀证评分。2.神经功能评分:模型组大鼠神经功能评分升高,补阳还五汤组大鼠神经功能评分降低。3.旷场实验:模型组大鼠旷场实验平均速度和总路程下降,而进入中央格次数增加,补阳还五汤治疗后大鼠运动总路程与平均运动速度提高,进入中央格的次数则减少。4.舌面图像RGB值:正常组大鼠舌质归属于“淡红舌”,模型组大鼠舌质归属于“紫舌”,补阳还五汤组大鼠舌质归属于“暗红舌”。5.脑梗死体积:模型组大鼠脑梗死体积百分比升高,补阳还五汤治疗后脑梗死体积百分比降低。实验二补阳还五汤及拆方对气虚血瘀证缺血性中风大鼠脑血流及相关因素的影响1.大脑皮质rCBF:正常组大鼠缺血侧大脑皮质rCBF丰富,血流速度稳定;与正常组相比,模型组大鼠rCBF降低;治疗后,治疗组大鼠rCBF均增加;与补阳还五汤组比较,丁苯酞组大鼠

关键词：补阳还五汤及拆方气虚血瘀证缺血性中风脑血流线粒体能量代谢