检索结果-南通市图书馆

作者：刘云龙苏州大学

学位级别：硕士

现代学徒制下我国中职生学徒具有学生和员工双重身份,应该同时享受学生和企业员工的双重保护。但由于我国现代学徒制正处于试点阶段,学徒的身份界定不明、劳动基本权益保护缺乏、学徒人身权益保障不完善等原因致使学徒双重权益得不到保... 详细信息

现代学徒制下我国中职生学徒具有学生和员工双重身份,应该同时享受学生和企业员工的双重保护。但由于我国现代学徒制正处于试点阶段,学徒的身份界定不明、劳动基本权益保护缺乏、学徒人身权益保障不完善等原因致使学徒双重权益得不到保障。目前,学徒与企业究竟属于何种法律关系,在现行法律法规中没有规定,在教育规范文件中也没有明确。本文立足于中等职业学校,分析中等职业学校现代学徒制中职生学徒劳动权益保护存在问题及中职生学徒与企业之间的法律关系,借鉴西方发达国家现代学徒制学徒权益保护方法与措施,认为应该将学徒与企业的法律关系参照劳动法律关系,从而纳入劳动法律范围调整。并从完善相关法律法规参照劳动关系保护、规范学徒培训合同并实行行政备案、畅通权利救济通道、有效衔接职业培训与学历提升等方面提出了保护中职生学徒劳动权益的合理化建议。

关键词：中等职业学校现代学徒制劳动权益

非小细胞肺癌根治术后复发及进展影响因素的回顾性分析

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非小细胞肺癌根治术后复发及进展影响因素的回顾性分析

作者：陶洪安徽医科大学

学位级别：硕士

背景和目的近50年来大部分国家肺癌的发病率和死亡率均明显增高,其中男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位,女性发病率占第二位,死亡率占第二位。目前肺癌的治疗中仍以手术治疗为主,且手术治疗是非小细胞肺癌(non-small cell... 详细信息

背景和目的近50年来大部分国家肺癌的发病率和死亡率均明显增高,其中男性肺癌发病率和死亡率均占所有恶性肿瘤的第一位,女性发病率占第二位,死亡率占第二位。目前肺癌的治疗中仍以手术治疗为主,且手术治疗是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的根治性治疗手段,但绝大部分患者最终仍死于肺癌根治术后复发。本文将探讨NSCLC根治术后早期复发及进展的影响因素;已期待为非小细胞肺癌手术后复发的患者提供更加合理科学的综合治疗方案。从而做到早发现、早治疗,尽可能延长患者的生存期。方法本文回顾性分析120例NSCLC根治术后复发患者的临床资料(包括患者术前、手术及术后复发等临床情况),病例从2013年1月收集至2016年12月。根据患者的临床表现、相关实验室及影像学检查完成相关数据的分析对比,从中寻找到那些影响患者无复发时间间隔(recurrence-free interval,RFI)的因素。结果采用SPSS17.0软件进行数据统计分析120例NSCLC根治术后复发患者的临床资料,其中男性患者74人,女性患者46人。其中年龄最小患者31岁,年龄最大患者86岁,中位年龄为57岁。肿瘤TNM分期:I期患者35人(约占29.2%),Ⅱ期患者52人(约占43.3%),Ⅲ期患者33人(约占27.5%)。鳞状上皮细胞癌41例(约占34.1%),腺癌69例(约占57.5%),未分型10例(约占8.4%)。无症状体检发现患者47例,有症状患者73例(其中刺激性干咳38例,间断咯血19例,胸痛10例,其他6例)。术后治疗:治疗周期≤4周期94例(其中包括未接受治疗20例)治疗周期≥4周期26例。利用单因素(Mann-Whitnery U检验和Kruskal-Wallis H检验)对等级分类变量进行分析,分析结果显示:患者年龄、性别、TNM分期、首发症状为胸痛、血钠水平、术后一线化疗方案、术后化疗周期数是术后早期复发的影响因素。采用有序logistic回归进行多因素分析,分析结果提示年龄、TNM分期、首发症状为胸痛为术后早期复发的影响因素。结论NSCLC术后患者的RFI与年龄、性别、首发症状胸痛、TNM分期、血钠水平、治疗周期存在相关性。对于NSCLC术后患者建议行4周期以上的化学治疗,以延长患者的无复发时间间隔;其次对于就诊首发症状为胸痛,手术时患者年龄小于65岁且为女性,或术前实验室检查存在血钠异常的患者建议其加强随访,做到早发现、早治疗,以提高患者生存率。

关键词：肺肿瘤手术治疗复发

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建筑业违法分包情形下受伤工人权利救济研究

建筑业违法分包情形下受伤工人权利救济研究

作者：刘士博苏州大学

学位级别：硕士

众所周知,建筑业是一个事故频发的领域。我国建筑业在实践操作过程中存在诸多不规范之处,违法分包、层层分包大量存在。虽然我国建筑法和安全生产法等法律规范明令禁止违法分包行为,但是工程的总承包方和其他分包方为了压缩成本、追逐利... 详细信息

众所周知,建筑业是一个事故频发的领域。我国建筑业在实践操作过程中存在诸多不规范之处,违法分包、层层分包大量存在。虽然我国建筑法和安全生产法等法律规范明令禁止违法分包行为,但是工程的总承包方和其他分包方为了压缩成本、追逐利益,依然想尽办法把承包的工程进行再分包,而且很多时候把工程分包给了没有施工资质的单位和个人,从而导致往往是没有施工资质的个人带领十几个或者几十个工人在一线施工。由于被分包的一方不具备相应的资质,在施工过程中不能给工人足够的劳动保护,使得建筑领域职业灾害频发。在职业灾害发生后,由于施工的工人大都是农民工,法律意识和维权意识比较差,加之我国相关的法律规定繁多且各种规定又不统一,导致受伤的工人在救济自己权利的时候遇到了很多现实障碍。因此,本文分析了大量的司法案例,从中总结了受伤工人在寻求救济的过程中主要面对的困境,并追溯其中的原因,从而为解决这一实践中频发的问题提供相应的意见和建议。

关键词：违法分包劳动关系工伤人身损害

缔约阶段劳动者告知义务研究 ——以“隐孕入职”为视角

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缔约阶段劳动者告知义务研究 ——以“...

作者：周欣怡苏州大学

学位级别：硕士

我国《劳动合同法》第八条明确规定,在劳动合同缔结过程中,劳动者与用人单位应当互相负有告知义务。将劳动缔约阶段纳入法律调整的范围之内,体现我国劳动立法的进步。但对告知义务具体为何,法律并未给予明确的规定,使得在激烈的劳动力... 详细信息

我国《劳动合同法》第八条明确规定,在劳动合同缔结过程中,劳动者与用人单位应当互相负有告知义务。将劳动缔约阶段纳入法律调整的范围之内,体现我国劳动立法的进步。但对告知义务具体为何,法律并未给予明确的规定,使得在激烈的劳动力市场竞争中,引发了大量“求职欺诈”的劳动纠纷。尤其是对隐瞒“生育”等信息能否判定为“欺诈”行为,在实务界出现同案不同判,判决理由差异化、裁判论证粗糙的现象。学界对第八条的讨论也尚存诸多争议,法律的粗线条化难以应对不断出现的新型劳动关系,无法有效平衡劳资双方的权益。本文对缔约阶段劳动者承担告知义务的必要性,以及告知义务的法律性质进行探讨,运用民事欺诈理论厘清劳动者告知义务内容,认为劳动者履行告知义务不应仅为被动告知,也应承担部分主动义务,而用人单位提问的合法性也是界定劳动者告知内容的重要因素;劳动合同无效条款联系着违反告知义务的责任承担,但基于劳动者承担告知义务的法律性质,其还应当承担缔约过失责任。

关键词：缔约阶段告知义务隐孕入职欺诈

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乳腺癌术后复发时间与临床因素的相关性分析

乳腺癌术后复发时间与临床因素的相关性分析

作者：何咏竞安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:乳腺癌目前已逐渐成为较为常见的恶性肿瘤之一,女性占这一疾病的发病人群中的绝大一部分,该病的发病率在所有女性恶性肿瘤中已升至第一位,在女性全部恶性肿瘤中,其死亡率比例高达15.0%,随着治疗方式的不断更新,当下该疾病的的治疗... 详细信息

目的:乳腺癌目前已逐渐成为较为常见的恶性肿瘤之一,女性占这一疾病的发病人群中的绝大一部分,该病的发病率在所有女性恶性肿瘤中已升至第一位,在女性全部恶性肿瘤中,其死亡率比例高达15.0%,随着治疗方式的不断更新,当下该疾病的的治疗疗效已经得到了很大的改善,死亡率有所下降,然而约三分之一的患者仍会出现复发转移,一旦发生转移,治疗上将更为艰难,本研究的目的就是对乳腺癌的术后复发相关危险因素进行分析,病对疾病的复发时间集中点以及复发的规律进行探讨,判断使乳腺癌术后复发几率提高的相关危险因素,从而为对乳腺癌患者制定个体化的随访原则和治疗策略提供依据,对于有复发高危因素患者进行提前干预,尽量推迟其复发的时间,以使患者生存率提升,并达到改善其生存质量的目的。方法:收集1992.1-2017.1经本院乳腺外科行乳腺癌根治术并确诊为原发性乳腺癌患者,选取手术日期,年龄大小,肿瘤直径,淋巴结阳性个数,雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)状态,Ki-67表达情况,月经情况,术前中性粒细胞/淋巴细胞数目比值(neutrophil-tolymphocyte ratio,NLR)、血小板/淋巴细胞数目比值(platelet to lymphocyte ratio,PLR)等数据完整的患者共170例,并以这些病例为研究对象,对于统计整理得到的入组患者的相关数据,利用Kaplan-Meier的检验方式,分析所有可能与复发时间相关的因素,并进一步分析与之相关的危险因素。结果:统计入组患者的一般情况,其中ER、PR双阳性79人,接受内分泌治疗的患者46人;所有病例均为女性,年龄区间为18-73岁,年龄的中位数为47.0岁,年龄的平均值为47.9岁,其中所有患者的复发时间进行分析发现,复发时间的中位数为28.0月,而复发时间的平均值是33.8月。通过单因素分析发现,内分泌治疗,ER、PR状态、Ki-67表达以及淋巴结转移个数均与复发时间有关(P<0.05),而使用Pearson方法分析提示,年龄,NLR、PLR与复发时间有关(P<0.0,5),最后,利用Cox多因素分析的方法,结果提示患者术后的内分泌治疗情况、淋巴结阳性的粒数、Ki-67的表达均是可影响复发的时间,且为独立的预后因素(P<0.05)。结论:通过本次研究,发现许多因素都可能会影响到乳腺癌手术之后的复发几率,对于那些有复发危险因素的患者,我们应提前采取各种必要的干预措施,注意增强术后的监测,应该对乳腺癌患者制定个体化的随访原则和治疗策略,对于术后的后续治疗应积极贯彻完成,只有这样才有可能降低乳腺癌术后复发的机率,从而延缓复发时间,并由此使整体患者的生存率得到提高。

关键词：乳腺癌复发时间影响因素内分泌治疗淋巴结转移

PKM2对肝癌细胞增殖和凋亡的调节作用及其机制研究

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PKM2对肝癌细胞增殖和凋亡的调节作用及其机制研究

作者：李玉环安徽医科大学

学位级别：硕士

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球消化系统高发的恶性肿瘤之一,由于该病早期缺乏特异性临床表现,大部分患者发现时已处于该病的中晚期阶段,由于该病中晚期暂时缺乏确实有效的治疗手段,因此目前肝癌死亡率高居恶性肿瘤第... 详细信息

肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是全球消化系统高发的恶性肿瘤之一,由于该病早期缺乏特异性临床表现,大部分患者发现时已处于该病的中晚期阶段,由于该病中晚期暂时缺乏确实有效的治疗手段,因此目前肝癌死亡率高居恶性肿瘤第三位。据统计,仅在中国每年就有超过23万人死于肝细胞肝癌,肝癌给患者本人带来了极大的身体和精神压力,也为其家庭带来了毁灭性的打击,该病已成为影响人类健康最重要的疾病之一。尽管在过去的几十年间,外科手术技术得以发展、新型化疗药物如雨后春笋般不断涌现,放射疗法水平也取得了极大的提高,少部分患者的寿命得以延长,但对于绝大多数患者而言疗效并不理想。因此,深入挖掘肝癌发生的分子机制,研发肝癌治疗新药物,新方法,提出确实有效的治疗方案,提高患者生活质量,延长患者生存期,成为人类刻不容缓的课题之一。早在1920年,德国生化学家Warburg就出了肿瘤细胞相对于正常细胞,一大重要特征就是葡萄糖代谢方式的改变,即著名的Warburg效应。正常哺乳动物细胞在氧气充足的情况下,主要通过线粒体有氧呼吸分解葡萄糖释放能量,而肿瘤细胞即使在氧气充足的环境下也主要利用糖酵解方式分解葡萄糖产生乳酸释放能量来维持细胞能量需求。糖酵解共有三种关键酶,分别是己糖激酶、6-磷酸果糖激酶-1以及丙酮酸激酶。丙酮酸激酶是糖酵解最后一步关键酶,催化磷酸烯醇式丙酮酸生成丙酮酸释放能量,近年来,越来越多的研究发现丙酮酸激酶在肿瘤中发挥了重要的作用,因而受到广泛学者的关注。大量的研究表明哺乳动物体内共有四种丙酮酸激酶同工酶,分别表达于不同的组织,其中M2型丙酮酸激酶(Pyruvate kinase M2,PKM2)主要表达于代谢旺盛的胚胎组织以及肿瘤组织中,与肿瘤的发生发展有着密不可分的联系,但其在肝癌中的具体作用以及潜在机制并不清楚。因此,明确PKM2在肝癌中的作用对肝癌治疗有着重要的意义。内质网是真核细胞内主要的细胞器之一,是蛋白质翻译和钙离子储存的场所。当细胞内缺氧或者钙离子平衡失调,内质网上未折叠的蛋白或错误折叠的蛋白增多超出内质网的处理能力时,会导致内质网的结构和功能失调诱发内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress,ERS)。由于实体肿瘤常态缺氧,因此内质网应激在实体肿瘤中普遍存在。哺乳动物细胞内存在三种ERS感受器,即IRE1α、ATF6、PERK。一般情况下,这些感受分子与内质网的伴侣分子GRP78(glucose regulated protein78)结合处于无活性状态[18]。内质网应激时,IRE1α、ATF6、PERK、GRP78表达增多。大量的研究发现,ERS对细胞存活以及凋亡有重要影响。然而PKM2对肝癌发生及进展的影响是否有ERS的参与目前还不清楚。本课题以人肝癌细胞株SMMC-7721为研究对象,探讨PKM2在肝癌细胞中对ERS的调控作用从而初步完善有关于肝癌发生发展的机制研究。本课题主要研究内容如下:1.检测PKM2在人肝癌组织及细胞株中的表达收集人肝癌组织和癌旁肝组织(距肝癌组织≥5mm)标本,采用免疫组织化学染色以及Western Blot法测人肝癌组织中PKM2的表达变化。结果证实,PKM2在人肝癌组织中表达较癌旁肝组织升高,且差异具有统计学意义。Western Blot检测人正常肝细胞株L02及肝癌细胞株HepG2,BEL-7402和SMMC-7721中PKM2的蛋白质表达量。结果发现,PKM2蛋白在三种人肝癌细胞株中质表达均较正常组升高,差异具有统计学意义。***2表达下调后对肝癌细胞增殖和凋亡的影响为了探索PKM2对肝癌细胞增殖和凋亡的影响,本课题使用si-RNA沉默PKM2后采用Western Blot法、细胞克隆形成实验法以及流式细胞术检测了细胞增殖及凋亡情况。结果表明,与对照组相比,PKM2表达下调组肝癌细胞的增殖明显受抑制,肝癌细胞凋亡增加,较少的细胞停滞在G1期,差异具有统计学意义。***2表达上调后对肝癌细胞增殖和凋亡的影响为了进一步探索PKM2表达上调对肝癌细胞增殖以及凋亡的影响,本实验应用GV230-PKM2过表达PKM2后采用Western Blot法、细胞克隆形成法以及流式细胞术检测了细胞增殖及凋亡情况。结果表明,与对照组相比,PKM2表达上调明显促进了肝癌细胞的增殖,抑制肝癌细胞的凋亡,更多的细胞停滞在G1期,差异具有统计学意义。***2表达下调后对肝癌细胞内质网应激的影响为了探索PKM2是否影响肝癌细胞内质网应激,本课题在si-PKM2沉默PKM2后采用Western Blot法、qRT-PCR法检测了细胞内质网应激相关分子的表达。结果表明,与对照组相比,PKM2表达下调后内质网应激相关分子GRP78、ATF6、CHOP表达升

关键词： PKM2 肝癌内质网应激

紫杉醇用于非小细胞肺癌患者的药代动力学研究

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紫杉醇用于非小细胞肺癌患者的药代动力学研究

作者：刘加涛安徽医科大学

学位级别：硕士

背景与目的非小细胞肺癌是肺癌最常见的类型，占肺癌的80%以上，且2/3发现时已失去手术机会，主要依靠化学治疗。但以紫杉醇为代表第三代化疗药物联合顺铂治疗非小细胞肺癌的总有效率维持在25%～54%之间，患者的5年生存率仅5%左右。如... 详细信息

背景与目的非小细胞肺癌是肺癌最常见的类型，占肺癌的80%以上，且2/3发现时已失去手术机会，主要依靠化学治疗。但以紫杉醇为代表第三代化疗药物联合顺铂治疗非小细胞肺癌的总有效率维持在25%～54%之间，患者的5年生存率仅5%左右。如何提高非小细胞肺癌的化疗的效果，减轻化疗毒副反应，一直是人们关注的焦点。近年来，随着肿瘤发病率的不断增高，如何更好地利用好现有抗肿瘤药物，在保证疗效的同时将毒性反应降到最低成为人们研究的热点。国外对紫杉醇药代动力学的研究为安全、合理、有效地利用该制剂提供了理论依据。但药物在体内的代谢过程会因种族差异、药物相互作用及不同病种而有所不同。因此，对紫杉醇在国人中的药代动力学和药效动力学进行进一步研究，具有十分重要的意义。本课题欲通过紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌，探讨疾病控制组与疾病进展组药物代谢动力学参数的差异，以及毒性反应与药代动力学参数之间的相关性，目的在于：（1）通过对紫杉醇药物代谢动力学研究的，探讨紫杉醇在晚期非小细胞肺癌患者体内的药物动力学特征;（2）初步探讨治疗效果、毒性反应与药代动力学参数之间的相关性，最终筛选出与治疗效果和毒性反应具有相关性的药代动力学参数，为临床个体化治疗提供理论依据。方法本实验选用10例晚期非小细胞肺癌患者进行紫杉醇的临床药代动力学和药效学研究，其中男7例，女3例，年龄46～70岁，ECOG评分均小于等于1分。其中腺癌4例，鳞癌6例，ⅢB4例，IV6例。紫杉醇135mg·m-2—175mg·m-2，第1天，恒速输注3h。顺铂按20mg/日，连续输注5日方式给药。分别紫杉醇输注开始时，输注0.5h，1.5h，3h，3.5h，4h，5h，7h，11h及15h，采血2ml于肝素管内，并记录治疗效果和毒性反应。按RECIST实体瘤疗效评定标准分为疾病控制组(CR+PR+NC)和疾病进展组(PD)。采用HPLC法测定给药后不同时间点的血药浓度，测得的血药浓度—时间数据用DASver3.0药代动力学分析软件进行数据处理，主要药物动力学参数包括：峰浓度(Cmax)，血药浓度—时间曲线下面积(AUC)，清除率(CL)，表观分布容积(Vd)，分布相半衰期(tl/2a)，消除相半衰期(t1/2β)等。采用SPSS19.0的独立样本t-检验方法判定治疗效果、中性粒细胞减少症（WBC＜4×109.L-1）及肝功能损害与剂量、Cmax、AUC和阈浓度（C＞0.1μmol.L-1或0.05μmol.L-1）维持时间等参数的关系，取p=0.05作为检验水准。结果 1.紫杉醇药物代谢动力学对10例患者进行药物代谢动力学分析，患者均采用紫杉醇135mg·m-2—175mg·m-2恒速3h静脉滴注方式给药。紫杉醇血药浓度均在滴注开始后迅速上升，输注结束即刻血药浓度达到最大值(Cmax)。使用DASver3.0药代动力学软件处理血药浓度数据，紫杉醇在体内的处置过程符合二室模型。患者药动学参数个体差异较大，主要药代动力学参数：t1/2α0.75±0.32h，t1/2β10.03±11.65h，Cmax3.76±1.09mg/L，AUC9.47±2.76mg/L/h，Vd91.19±33.72L，CL27.05±6.60L/h。 2.疾病控制组与疾病进展组药物动力学参数的比较对10例患者进行临床药动学—药效学研究，其中CR0例，PR4例，NC4例，PD2例，疾病控制率为80%。疾病控制组与疾病进展组各时间点的紫杉醇血浆浓度相近，差异均无统计学意义(p＞0.05)。两组间药代动力学参数比较，疾病控制组的AUC、 t(>0.1)、t(>0.05)、Vd及CL均高于疾病进展组，差异无统计学意义(p＞0.05);疾病控制组的tl/2a、t1/2β、Cmax均低于疾病进展组，差异无统计学意义(p＞0.05);疾病控制组的给药剂量（Dose）高于疾病进展组，差异有统计学意义(p=0.02)。 3.血液学毒性与药物动力学参数之间的相关性进入试验的10名患者用药白细胞均有不同程度下降，但只有2名发生白细胞减少症，采用SPSS19.0对患者的白细胞下降百分比与药代动力学参数之间的相关性进行独立样本t检验，结果显示白细胞减少组Dose、AUC、Cmax、t(>0.1)和t(>0.05)等均高于无白细胞减少组，但无统计学意义（P>0.05）。白细胞减少组tl/2a低于无白细胞减少组，差异有统计学意义(P=0.034)。 4.肝毒性与药物动力学参数之间的相关性有5名患者用药后发生肝功能损害，主要表现为谷丙转氨酶（ALT）和总胆红素（TBIL）升高。采用SPSS19.0的独立样本t检验，判断肝功能损害程度与药代动力学参数之间的关系，结果表明，肝功能损害组t1/2β、AUC高于无肝功能损害组，但不具有统计学意义（P>

关键词：紫杉醇非小细胞肺癌药代动力学药效动力学

HKDC1对肝癌细胞生物学行为的影响及其机制的研究

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HKDC1对肝癌细胞生物学行为的影响及其机制的研究

作者：张黎安徽医科大学

学位级别：硕士

研究背景肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率分别位居世界第六和第三,肝细胞癌(HCC)是肝癌中最常见的类型,占所有肝癌病例的75%～85%。多数肝癌患者肿瘤发现时已处于较晚期,肝癌复发率高,且总体预后较差,这些更增加了... 详细信息

研究背景肝癌是临床上最常见的恶性肿瘤之一,其发病率及死亡率分别位居世界第六和第三,肝细胞癌(HCC)是肝癌中最常见的类型,占所有肝癌病例的75%～85%。多数肝癌患者肿瘤发现时已处于较晚期,肝癌复发率高,且总体预后较差,这些更增加了肝癌的治疗难度。目前,系统性化疗是肝癌患者的重要治疗手段,但近年来肝癌细胞对化疗产生耐药抵抗,因此探索肝癌发生分子机制,寻找肝癌治疗新靶点,增加肝癌细胞对抗癌药物的敏感性,对肝癌患者的治疗及生存有着极其重要的临床意义。细胞内外各种因素如缺氧、营养缺乏、氧化应激、Ca浓度改变等刺激,可使未折叠或错误折叠蛋白质在内质网中累积,这进一步加剧内质网的功能障碍,导致内质网应激(ERS)的激活。大量研究发现,持续活化的ERS可促进肿瘤生长转移、诱导肿瘤耐药反应及抑制抗肿瘤免疫。细胞为了减少错误折叠的蛋白质带来的损害、缓解应激状态,启动未折叠蛋白反应(UPR)。UPR的三条通路由3种跨膜传感器激活,包括活化转录因子-6(ATF6)、肌醇必需酶1α(IRE1α)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK),UPR通过减少蛋白质翻译和增加蛋白折叠酶和分子伴侣的表达来缓解内质网应激。转录激活因子4(ATF4)是一种应激诱导的转录因子,是参与UPR的PERK途径的重要组成部分,ATF4及其靶基因与肿瘤血管生成和转移有关,是治疗癌症的潜在靶点。己糖激酶结构域成分1(HKDC1)是最近发现的第五种己糖激酶,在细胞葡萄糖代谢中起着至关重要的作用,现已有研究发现HKDC1可能在乳腺癌、肺癌、结直肠癌、肝癌及淋巴瘤中发挥致癌作用,但目前HKDC1在肝癌中的研究机制甚少。本篇研究旨在探究HKDC1在肝癌中的表达与肿瘤进展及临床预后的关系,进一步阐明其对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响,以及增强肝癌细胞对药物敏感性的作用,并探讨其可能的分子机制。目的(1)探究HKDC1在肝癌中的表达情况及其表达与肝癌进展及不良预后的关系。(2)阐明HKDC1对肝癌细胞侵袭、迁移、增殖以及药物敏感性的影响。(3)进一步探讨HKDC1发挥促癌作用可能的分子机制。方法(1)将肝细胞癌患者的石蜡包埋、福尔马林固定的癌及癌旁组织样本制备成组织芯片,用免疫组织化学法进行染色分析,检测HKDC1在癌组织和癌旁组织中的表达情况。同时,用Western blot法检测来自不同HCC患者的3对新鲜癌旁组织及肝癌组织的HKDC1蛋白表达情况。(2)使用Kaplan-Meier生存函数和TCGA肝癌基因组图谱中配对的肝癌/癌旁组织数据集,描述并分析HKDC1过表达与肝细胞癌患者病理分级、临床分期及总生存期的关系。(3)Western blot法检测正常肝细胞系LO2和五种肝癌细胞系Huh7、LM3、Hep G2、Hep3B及PLC/PRF/5中HKDC1的表达情况,后续实验选用HKDC1表达相对最高的Hep G2和HKDC1表达相对最低的Huh7细胞进行,并在Hep G2细胞中采用瞬时转染技术转染小发夹RNA敲除HKDC1,构建HKDC1低表达肝癌细胞模型;用相同方法使HKDC1在Huh7细胞中过表达,构建HKDC1高表达肝癌细胞模型。通过克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞凋亡术等对细胞增殖、迁移、侵袭及药敏性进行检测。(4)在Hep G2、Huh7细胞系中采用瞬时转染技术敲除ATF4,Western blot法检测ATF4敲低后HKDC1蛋白表达变化。同时,用CCK-8法、克隆形成实验、划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测肝癌细胞ATF4敲低后增殖、迁移能力及凋亡的变化。结果(1)免疫组化结果显示HKDC1在肝癌组织中高表达,但在癌旁组织中明显低表达,HKDC1在肝癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织。同样,Western blot结果显示,与相对应的癌旁组织相比,肝癌组织标本中HKDC1明显过表达。进一步的生存分析提示HKDC1高表达的肝癌患者总生存期较短。(2)TCGA肝癌基因组图谱中配对的肝癌/癌旁组织数据集分析表明,HKDC1在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织,且与患者的病理分级及临床分期呈正相关。基于TCGA数据的Kaplan-Meier生存分析也显示HKDC1高表达的肝癌患者总生存时间较短。(3)克隆形成实验结果表明,Huh7细胞内的HKDC1过表达促进了细胞的增殖,Hep G2细胞中的HKDC1沉默则会导致细胞增殖受到抑制。Transwell侵袭实验与划痕实验表明,Huh7细胞中的HKDC1过表达增强了细胞的迁移及侵袭能力;而降低Hep G2细胞中的HKDC1表达可显著抑制细胞迁移及侵袭。另外,流式细胞凋亡实验结果也显示,敲低HKDC1能降低Hep G2细胞对索拉菲尼的凋亡抵抗,HKDC1过表达能降低Huh7细胞对索拉菲尼的药物敏感性

关键词： HKDC1 肝细胞癌 ATF4 内质网应激药物敏感性

环氧合酶-2选择性抑制剂NS-398对人肝癌BEL-7402和HepG2细胞凋亡及凋亡抑制蛋白表达的影响

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环氧合酶-2选择性抑制剂NS-398对人肝癌BEL-7402和HepG2细胞凋亡...

作者：付卫争安徽医科大学

学位级别：硕士

背景原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病率为30.3/10万,占所有癌症的5%。近二十年来,我国HCC死亡率增加了41.7%,约占全世界HCC死亡人数的45%。外科手术是目前最有效的治疗方法,但是超过80%的肝... 详细信息

背景原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是我国常见的恶性肿瘤之一,其发病率为30.3/10万,占所有癌症的5%。近二十年来,我国HCC死亡率增加了41.7%,约占全世界HCC死亡人数的45%。外科手术是目前最有效的治疗方法,但是超过80%的肝癌病例被确诊时已经是晚期,失去了手术机会,而即使对于那些手术患者,其两年内的复发率也高达50%。全身性化疗是治疗肝癌尤其是无手术指征的晚期肝癌的重要方法,但对肝癌的疗效尚令人失望。凋亡抵抗是HCC的特征之一,在HCC的发生发展中占有重要地位。凋亡抵抗也是肝癌治疗失败的重要原因。最近的研究发现环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)有明显的抑制凋亡作用,COX-2在肝癌等多种肿瘤中存在着高表达,其在肝细胞癌发生过程中起重要作用,COX-2抑制凋亡的作用被认为在HCC化疗抵抗中发挥着重要作用。COX-2选择性抑制剂可抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡,但其诱导细胞凋亡的详细机制尚不十分清楚。目的探讨环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂NS-398对人肝癌BEL-7402、HepG2细胞凋亡及凋亡抑制蛋白survivin、XIAP和c-IAP1表达的影响。方法采用MTT法测定COX-2选择性抑制剂NS-398对BEL-7402、HepG2细胞的增殖抑制情况;原位细胞凋亡检测法(Terminal deoxynucleotidy transferase-mediated dUTP nick-end labeling, TUNEL)观察细胞凋亡形态学变化;流式细胞仪(Flow Cytomtry, FCM)检测凋亡率;免疫细胞化学技术检测COX-2,survivin,XIAP和c-IAP1蛋白的表达情况并分析COX-2与survivin,XIAP,c-IAP1表达的相关性。结果NS-398可以显著抑制BEL-7402和HepG2细胞的增殖,并随着剂量的增加和时间的延长,该抑制作用增强(P<0.01);TUNEL染色可见典型的凋亡形态学特征,包括染色质凝集、边集化,呈新月形聚集于核膜下;流式细胞仪检测显示在G0/Gl期前出现一个代表凋亡细胞的亚G1峰,即凋亡峰,用药组凋亡率明显高于对照组,NS-398浓度为0、25、50、100和200μmol/L时,BEL-7402凋亡率分别为(1.41±0.23)%、(6.69±0.57)%、(10.96±1.35)%、(22.83±1.84)%和(32.25±2.41)%;HepG2凋亡率分别为(3.3±0.6)%、(5.7±1.8)%、(14.2±1.3)%、(40.1±2.3)%和(64.9±5.8)%(P<0.01)。免疫细胞化学分析显示,与对照组相比,NS-398作用后可使COX-2、survivin、XIAP和c-IAP1蛋白的表达明显下调(P<0.01)。相关性分析显示在肝癌细胞中COX-2与survivin,XIAP,c-IAP1的表达呈显著正相关(P<0.01)。结论NS-398对人肝癌细胞株BEL-7402、HepG2有抑制增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与通过下调survivin,XIAP和c-IAP1的表达有关。

关键词： NS-398 环氧合酶-2 细胞凋亡凋亡抑制蛋白原发性肝癌

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共享经济视阈下隐蔽雇佣关系问题研究

共享经济视阈下隐蔽雇佣关系问题研究

作者：吴长峰苏州大学

学位级别：硕士

隐蔽雇佣关系①是一种旨在隐藏或扭曲雇佣关系的行为,其手段包括以另一种法律外壳加以掩盖,或赋予其另一种使工人获得更少保护的工作形式。本文的研究对象主要是互联网共享经济背景下,在平台经济中活跃的受隐蔽雇佣关系剥削的劳动群体,... 详细信息

隐蔽雇佣关系①是一种旨在隐藏或扭曲雇佣关系的行为,其手段包括以另一种法律外壳加以掩盖,或赋予其另一种使工人获得更少保护的工作形式。本文的研究对象主要是互联网共享经济背景下,在平台经济中活跃的受隐蔽雇佣关系剥削的劳动群体,他们大多从事的是服务行业,并且与平台企业存在或多或少的管理与被管理的关系,工作地点、工作时间相对自由,工作时间、地点与时长具有潜在不可预期性,他们接受平台企业的任务,同时也向其支付一定的管理费用,与传统雇佣关系有着明显的差别,弹性化、灵活化特征更加明显,一些互联网企业有意识地利用劳务派遣或者民事合同关系掩盖真实雇佣关系。且由于当前劳动关系认定标准的僵化,实务中对于此类案件出现了很多分歧。本文首先在第一部分提出问题,即针对不同的隐蔽雇佣类型适合采用怎样的规制路径。第二部分将着重对隐蔽雇佣关系进行类型化分析。为规制隐蔽雇佣,第三部分将视线转到国外,总结和分析了两种主要的规制方式:建立多元素的雇佣关系认定标准和设立中间主体。第四部分,笔者认为对以民事法律关系掩盖雇佣关系这一类型,应当在确立“事实第一原则”的基础上引入多元素认定标准,以实现对隐蔽雇佣的筛选。对以非标准雇佣关系隐蔽标准雇佣关系这一类型,鉴于劳务派遣是最被普遍利用的方式,应当在《劳动合同法》和《劳务派遣暂行规定》对劳务派遣的规制基础上释放劳动力市场活力,明确劳务派遣各方责任,并且要强调劳务派遣的“同工同酬”以消除歧视,减少劳务派遣的滥用。

关键词：共享经济事实第一原则多元素认定标准隐蔽雇佣关系法律规制