检索结果-南通市图书馆

作者：吴婧南京医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨亨廷顿蛋白(HAP1)基因对乳腺癌MCF-7细胞放射生物学特性的影响。方法:构建稳定表达HAP1基因的MCF-7/HAP1和空载体MCF-7/Pb的细胞株,经嘌呤霉素筛选及实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot实验鉴定,建立稳... 详细信息

目的:探讨亨廷顿蛋白(HAP1)基因对乳腺癌MCF-7细胞放射生物学特性的影响。方法:构建稳定表达HAP1基因的MCF-7/HAP1和空载体MCF-7/Pb的细胞株,经嘌呤霉素筛选及实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot实验鉴定,建立稳定表达HAP1基因的MCF-7/HAP1和空载体MCF-7/Pb的细胞株。应用平板克隆形成实验检测HAP1基因过表达对MCF-7细胞放射敏感性的影响,同时应用流式细胞术检测HAP1基因联合照射对细胞凋亡的影响。Western blot实验检测凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达情况。结果:成功建立MCF-7/Pb和MCF-7/HAP1稳定表达细胞株,平板克隆形成实验结果显示,转染HAP1基因并给予不同剂量照射后细胞集落形成能力明显下降,随着剂量的增加,下降更为明显;在同一照射剂量下,转染HAP1基因组细胞的集落形成能力最低。流式细胞实验结果显示单纯照射组或单独转染HAP1基因组都可以使细胞凋亡率增加,而HAP1基因联合照射组的作用更为明显,各组之间有显著性差异(P<0.05)。Western blot实验结果显示,单纯照射组、单独转染HAP1基因组及联合照射组较对照组细胞Bcl-2蛋白表达减少,同时Bax蛋白表达增多,且联合照射组细胞Bcl-2蛋白表达低于其它各组,Bax蛋白表达明显高于其它各组。结论:HAP1基因可能通过诱导乳腺癌MCF-7细胞发生凋亡,下调Bcl-2及上调Bax,增加人乳腺癌细胞的放射敏感性。目的:研究HAP1基因对人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响及作用机制。方法:取对数期生长期已构建好的MCF-7/HAP1和MCF-7/Pb稳转细胞株(5×106),接种于5周龄BALB/C雌性裸鼠左腹股沟部皮下,建立人乳腺癌裸鼠移植瘤模型,21d裸鼠皮下肿瘤长径到达0.6-0.9cm时,分为4组(n=6):MCF-7/Pb组,MCF-7/HAP1组,MCF-7/Pb+照射组,MCF-7/HAP1+照射组。照射组在第21天给予5 Gy X线照射一次后继续饲养3周左右。期间每隔4天用卡尺测量1次肿瘤的长径及短径,计算肿瘤体积。第6周时处死各组裸鼠并取出肿瘤统计瘤重。免疫组织化学方法分析Bcl-2和Bax表达,TUNEL实验分析细胞凋亡。结果:MCF-7/HAP1+照射组裸鼠肿瘤生长明显迟缓,平均体积小于其他3组(P均<0.01);MCF-7/HAP1+放射组平均瘤重明显小于其他3组(P均<0.01)。TUNEL凋亡实验结果显示:MCF-7/Pb组细胞平均凋亡率为8.90±1.37%,MCF-7/HAP1组为34.43±1.67%,MCF-7/Pb+照射组为55.03±0.49%,MCF-7/HAP1+照射组为81.73±1.87%。体内实验表明MCF-7/HAP1+照射组凋亡率明显高于其他3组(P<0.05)。通过免疫组织化学实验的染色评分结果显示:MCF-7/Pb组,MCF-7/HAP1组,MCF-7/Pb+照射组,MCF-7/HAP1+照射组中凋亡蛋白Bcl-2平均积分分别为13.33±1.89,7.67±1.25,8.67±0.47,4.67±1.89,凋亡蛋白Bax平均积分分别为1.67±0.47,4.00±1.63,7.00±1.41,14.67±1.89。通过本实验说明Bcl-2在MCF-7/HAP1+照射组中的水平明显低于其他3组(P<0.05),而Bax明显高于其他3组(P<0.05)。结论:HAP1基因可能通过调控肿瘤细胞的凋亡来增强人乳腺癌MCF-7细胞裸鼠移植瘤的放射敏感性。

关键词：乳腺癌亨廷顿蛋白1(HAP1)基因放射敏感性细胞凋亡乳腺癌放射敏感性 HAP1基因细胞凋亡体内

评估PD-1/PD-L1抑制剂治疗R/M HNSCC的有效性和安全性：网状meta分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

评估PD-1/PD-L1抑制剂治疗R/M HNSCC的有效性和安全性：网状meta...

作者：陈涵波南京医科大学

学位级别：硕士

目的:目前,许多研究积极探究了PD-1/PD-L1抑制剂联合治疗复发或转移性头颈部鳞状细胞癌的临床价值,但是各种联合治疗方式之间缺乏直接对比的研究证据,特别是与标准一线治疗相比。本研究旨在应用网状meta分析在R/M HNSCC中评估不同PD-1/P... 详细信息

目的:目前,许多研究积极探究了PD-1/PD-L1抑制剂联合治疗复发或转移性头颈部鳞状细胞癌的临床价值,但是各种联合治疗方式之间缺乏直接对比的研究证据,特别是与标准一线治疗相比。本研究旨在应用网状meta分析在R/M HNSCC中评估不同PD-1/PD-L1抑制剂治疗方案的有效性和安全性。材料和方法:在数据库中进行系统检索,筛选出截止至2020年3月符合纳入标准的II期或III期随机对照研究,并比较了7种不同的治疗方案。观察终点有ORR,还有生存相关指标OS和PFS,以及患者的SAE。结果:根据预设的纳入标准,一共有6项随机对照研究纳入分析,共包括患者2917名,涵盖了7种不同的治疗方案。在头对头meta分析中,直接比较的分析结果显示,与标准单药治疗相比,PD-1/PD-L1抑制剂单药治疗与较高的ORR有关（OR 0.70,95%Cl 0.45～1.09,P=0.111）,显著提高了OS（HR 0.81,95%Cl0.71～0.93,P=0.002）。EXTREME方案较PD-1/PD-L1抑制剂单药治疗显著改善了ORR（OR 2.68,95%Cl 1.86～3.87,P＜0.001）。随后进行了网状meta分析的混合比较,EXTREME方案较单药治疗方案提高了ORR,具有显著统计学意义（OR 0.38,95%Cr I 0.17～0.95）,并且在PFS改善方面是最佳治疗模式。但是排名概率图显示,EXTREME方案没有使患者在长期生存时间上获益。联合化疗可能是几种治疗方案里提高OS的最佳联合模式,其次为PD-1/PD-L1抑制剂单药方案,较其他标准治疗方案具有延长生存时间的趋势。值得注意的是,联合Acalabrutinib方案的SAE发生率可能最高。PD-L1≥1%（HR 0.672,95%CI0.512～0.882,P=0.004）对接受PD-1/PD-L1抑制剂治疗方案的生存获益有显著影响。结论:在R/M HNSCC中,EXTREME方案尽管在ORR和PFS方面有所改善,但在长期预后中较PD-1/PD-L1抑制剂单药或联合化疗稍显逊色。此外,PD-L1表达水平可能是治疗敏感性指标,帮助筛选可获益的患者群。

关键词：复发或转移性头颈部鳞状细胞癌靶向治疗 PD-1/PD-L1抑制剂

MiR-152通过DNMT1调节鼻咽癌的增殖、侵袭及迁移

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

MiR-152通过DNMT1调节鼻咽癌的增殖、侵袭及迁移

作者：卢志伟南京医科大学

学位级别：硕士

目的:已有研究表明,miR-152在胃癌、肠癌等多种肿瘤中呈现异常表达,起肿瘤抑制作用,但其在鼻咽癌(NPC)中表达状况及生物学作用机制目前尚不明确。本研究拟探讨miR-152对NPC细胞生物学行为的影响及作用机制。方法:MiR-152在鼻咽癌与正常... 详细信息

目的:已有研究表明,miR-152在胃癌、肠癌等多种肿瘤中呈现异常表达,起肿瘤抑制作用,但其在鼻咽癌(NPC)中表达状况及生物学作用机制目前尚不明确。本研究拟探讨miR-152对NPC细胞生物学行为的影响及作用机制。方法:MiR-152在鼻咽癌与正常组织中的表达,获取自Gene Expression Omnibus(GEO GSE36682)。采用实时定量PCR(聚合酶链反应)分析鼻咽癌细胞株中miR-152的表达情况。通过细胞侵袭,伤口愈合和细胞存活实验来检测miR-152对NPC细胞的侵袭和增殖的影响。流式细胞术检测细胞凋亡,Western实验检测相关靶基因的表达。焦磷酸测序用以检测鼻咽癌细胞的甲基化水平。结果:与正常组织相比,miR-152的表达在鼻咽癌组织和细胞系中呈现下调,提示miR-152在鼻咽癌中可能起抑制肿瘤作用。上调miR-152的表达,鼻咽癌细胞的侵袭和迁移能力明显受到抑制,但增殖能力没有明显变化。荧光素酶实验结果表明DNMT1(DNA methyctransferace1 DNA甲基化转移酶1)在鼻咽癌中是miR-152的直接靶标。挽救实验显示,下调DNMT1表达逆转了抑制miR-152对鼻咽癌细胞的影响。此外,由于DNMT1表达下调抑制了miR-152的甲基化水平,同时使miR-152的表达增加从而抑制鼻咽癌的侵袭及迁移。结论:miR-152在鼻咽癌中表达下调,促进侵袭转移进程。其分子机制是miR-152通过结合并下调靶基因DNMT1,而DNMT1下调又反向调节miR-152的甲基化水平从而形成“miR-152/DNMT1正反馈环路”。

关键词： miR-152 DNMT1 鼻咽癌甲基化

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

调强放疗背景下转移性鼻咽癌的生存分析

调强放疗背景下转移性鼻咽癌的生存分析

作者：彭凡禹南京医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨调强放疗时代,转移性鼻咽癌的临床特征、治疗模式、生存情况及预后影响因素。方法:2006-2015年在南京医科大学附属肿瘤医院确诊远处转移的鼻咽癌患者共349例,其中236例符合入组标准。所有患者均接受原发灶根治性调强放疗;针对... 详细信息

目的:探讨调强放疗时代,转移性鼻咽癌的临床特征、治疗模式、生存情况及预后影响因素。方法:2006-2015年在南京医科大学附属肿瘤医院确诊远处转移的鼻咽癌患者共349例,其中236例符合入组标准。所有患者均接受原发灶根治性调强放疗;针对远处转移的治疗,90例接受了单纯全身化疗,146例接受了转移灶局部治疗±化疗。Kaplan-Meier法计算生存率,Log-rank法、Cox风险比模型分别进行单、多因素分析预后因素。结果:全组中位随访时间22个月,1、2、3年总转移后生存率分别为79.9%、48.4%、36.5%。无病间期、转移灶个数以及化疗周期数是影响鼻咽癌转移后生存的独立预后因素。初治转移性鼻咽癌患者的生存明显优于治疗后转移者,尤其是原发灶放疗开始后6个月内发生的转移预后最差。寡转移的发生率占59.7%,预后明显优于多发转移患者,部分寡转移患者能够通过转移灶局部治疗联合化疗获得长期生存甚至达到临床治愈。结论:初治转移性鼻咽癌经原发根治性灶调强放疗联合化疗获得长期生存;治疗后转移的鼻咽癌患者能从转移灶局部治疗联合化疗中生存获益。目前缺乏转移性鼻咽癌分层治疗和寡转移的诊断标准,如何选择合理的综合治疗方案有待前瞻性的随机对照研究。

关键词：鼻咽肿瘤调强放疗远处转移预后

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

奈达铂对鼻咽癌放射增敏作用

奈达铂对鼻咽癌放射增敏作用

作者：王德军南京医科大学

学位级别：硕士

目的：观察奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响，初步探讨其作用机制。方法：通过CCK-8法检测奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞存活率影响。克隆形成实验计算各处理组的细胞存活分数，多靶单击模型拟合细胞存活曲线并求出放射敏感性参数... 详细信息

目的：观察奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞放射敏感性的影响，初步探讨其作用机制。方法：通过CCK-8法检测奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞存活率影响。克隆形成实验计算各处理组的细胞存活分数，多靶单击模型拟合细胞存活曲线并求出放射敏感性参数及放射增敏比。流式细胞仪检测奈达铂用药前后的细胞周期分布及凋亡率变化。Western-blot检测p-AKT和bcl-2蛋白表达。结果：奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞生长有抑制作用，具有时间及浓度依赖性(p＜0.05)，并选取浓度为0.25mg/L和0.5mg/L的奈达铂作为试验用。在奈达铂为O.25mg/L时，SERD和SERD分别为1.16和1.32;0.5mg/L时，SERD和SERD分别达到1.23和1.82。以0、0.25、0.5mg/L奈达铂作用CNE-2细胞24h，它们的G2/M期比例分别为(3.66±0.38)%、(13.84±0.45)%和(42.09±0.79)%，凋亡率分别为(4.28±1.20)%、(6.6±1.15)%和(9.2±0.65)%，组间差异均有统计学意义(p＜0.05)。Western-blot结果显示：药物组、单纯照射组及联合照射组较对照组p-AKT、bcl-2蛋白表达减少，且联合照射组p-AKT、bcl-2蛋白表达低于其它各组。结论：奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞具有放射增敏作用，其机制可能与改变细胞周期分布及增加凋亡等有关。

关键词：奈达铂鼻咽癌放射增敏体外

GINS2基因对人鼻咽癌细胞生物学行为的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

GINS2基因对人鼻咽癌细胞生物学行为的影响

作者：钱露茜南京医科大学

学位级别：硕士

目的:探讨GINS2（GINS complex subunit 2,GINS复合物亚基2）基因对人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞生物学行为的影响。方法:将靶向GINS2基因的shRNA慢病毒载体感染人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞,利用荧光显微镜观察各组细胞的感染效率。采用实时... 详细信息

目的:探讨GINS2（GINS complex subunit 2,GINS复合物亚基2）基因对人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞生物学行为的影响。方法:将靶向GINS2基因的shRNA慢病毒载体感染人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞,利用荧光显微镜观察各组细胞的感染效率。采用实时荧光定量PCR检测慢病毒感染前后GINS2 mRNA表达水平的改变;采用Western Blot检测GINS2蛋白表达水平的改变;运用Celigo细胞成像分析细胞的生长能力;运用噻唑盐（MTT）法分析细胞的增殖能力;运用平板克隆形成实验分析细胞的体外成瘤能力;运用流式细胞术分析细胞的凋亡率。结果:GINS2-shRNA慢病毒载体成功感染人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞,每株细胞分为shCtrl组和shGINS2组。实时荧光定量PCR结果显示,shGINS2组细胞中GINS2 mRNA水平较shCtrl组明显降低;Western Blot结果显示,shGINS2组细胞中GINS2的蛋白表达水平较shCtrl组明显降低。体外功能实验结果如下:Celigo细胞计数结果显示,与shCtrl组相比,shGINS2组细胞的生长受抑制;MTT结果显示,与shCtrl组相比,shGINS2组细胞的增殖受抑制;平板克隆形成实验结果显示,与shCtrl组相比,shGINS2组细胞克隆形成数减少,提示shGINS2组细胞的体外成瘤能力减弱;流式细胞术结果显示,shGINS2组细胞的凋亡率较shCtrl组显著增高。结论:体外实验表明,下调人鼻咽癌5-8F和CNE-2Z细胞GINS2的水平,可抑制鼻咽癌细胞的生长增殖,诱导细胞的凋亡;提示GINS2在鼻咽癌的发生发展中可能起促进作用。

关键词：鼻咽癌 GINS2基因生长增殖凋亡

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

A公司肿瘤标志物检测业务成本管理研究

A公司肿瘤标志物检测业务成本管理研究

作者：吴一凡南京林业大学

学位级别：硕士

我国近五年出台肿瘤标志物检测行业利好政策、推行分级诊疗,大大促进了肿瘤标志物检测行业的发展。2018年后行业发展尤其迅速,肿瘤标志物检测业务相关公司的数量、规模、投资迅速增长。随着行业的发展,企业间竞争逐渐加剧,如何在保障业... 详细信息

我国近五年出台肿瘤标志物检测行业利好政策、推行分级诊疗,大大促进了肿瘤标志物检测行业的发展。2018年后行业发展尤其迅速,肿瘤标志物检测业务相关公司的数量、规模、投资迅速增长。随着行业的发展,企业间竞争逐渐加剧,如何在保障业务质量的前提下做好成本管理,成为影响企业竞争力的关键因素。在努力提升自身核心竞争力的同时,优化自身成本管理的问题是肿瘤标志物检测公司长足发展与生存的关键。本文以A公司肿瘤标志物检测业务为研究对象,通过运用价值链理论、作业成本法、PDCA全流程管理理论相关研究成果,在价值链理论指导下对公司业务进行价值链基本活动与辅助活动拆解分析、在PDCA全流程管理理论指导下对各个价值链环节成本管理中存在的问题及原因进行分析,使用作业成本法分类核算成本,并根据问题成因提出解决方案。首先,文章介绍了公司发展现状与基本情况,并将肿瘤标志物检测业务依照价值链理论进行拆解分析,接下来对A公司肿瘤标志物检测各价值链环节成本管理现状进行阐述,主要是存货及样本管理、客户开发、上机检验、生信分析、售后医学支持五大业务基本活动和原料采购、技术研发成本、业务人力资源、仪器设施成本四大业务辅助活动价值链环节的成本管理现状。其次,文章以PDCA全流程管理理论系统地对A公司肿瘤标志物检测业务成本管理中存在的问题进行分析,并挖掘问题产生的原因。文章将A公司肿瘤标志物检测业务划分为P预算、D执行、C检查、A改进四个流程,并根据流程中所表现出的问题:P预算阶段——成本预算不准确、成本投入方向决策失误;D执行阶段——上机检验和生信分析环节成本浪费、部门间成本管理缺少协同;C检查阶段——成本核算分析中纠偏措施效果不佳、核算方式不能满足公司成本管理需求;A改进阶段——成本管理问题长期得不到解决、成本管理优化方向不统一等,分析问题产生的深层原因:成本预算计量不准确、成本预算审核跟踪机制不健全;公司成本管理意识淡薄、缺乏全员全过程成本管理;缺乏成本核算所需的系统化数据录入、成本核算粗糙;缺少持续改进制度、成本管理缺少中心理念。最后,文章以优化肿瘤标志物检测业务PDCA流程,提高价值链总体价值为目标,提出:从公司预算阶段开始制定成本预算规范;建立业务审核制度;建立PDCA全流程管理体系;提高全员成本管理意识;推进信息化进程;加强成本管理优化的沟通和交流机制;推广使用作业成本法核算;细化科研成本核算;健全成本管理约束和激励制度;建立持续改进成本管理PDCA循环,从而为A公司肿瘤标志物检测业务提供更为科学、精准的管理对策。

关键词：成本管理成本控制价值链 PDCA全流程管理作业成本法

XRCC1 Arg399Gln基因多态性与中国人群消化系统肿瘤易感性的Meta分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

XRCC1 Arg399Gln基因多态性与中国人群消化系统肿瘤易感性的Meta...

作者：陈小军南京医科大学

学位级别：硕士

目的:系统评价X 线修复交叉互补基因 l(X-ray repair cross complementing group 1,XRCC1)Arg399Gln基因多态性与中国人群消化系统肿瘤的关系,为消化系统肿瘤的防治提供临床依据。方法:在PubMed、Medline、Web of Science、Embase、中... 详细信息

目的:系统评价X 线修复交叉互补基因 l(X-ray repair cross complementing group 1,XRCC1)Arg399Gln基因多态性与中国人群消化系统肿瘤的关系,为消化系统肿瘤的防治提供临床依据。方法:在PubMed、Medline、Web of Science、Embase、中国知网、维普、中国生物医学文献及万方数据库上检索有关XRCC1 Arg399Gln基因多态性与中国人群消化系统肿瘤关系的文献。采用Revman 5.2和Stata 12.0软件进行Meta分析,计算合并比值比(odds ratio,OR)及其95%可信区间(95%confidence interval,95%CI),并进行敏感性分析和发表偏倚的估计。结果:通过纳入和排除标准搜索相关数据库,一共纳入56篇文献关于XRCC1 Arg399Gln基因多态性与中国人群消化系统肿瘤关系的研究。纳入的56篇研究中,14篇为食管癌,12篇为胃癌,13篇为结直肠癌,13篇为肝细胞癌,4篇为胰腺癌。56个研究均为病例对照研究,共包含14137例患者和19858例对照者。Meta分析结果显示,XRCC1Arg399Gln基因多态性和中国人群肝细胞癌呈现了显著的相关性[(Gln vs Arg:OR = 1.33,95%CI:1.16-1.54,P<0.001),(Gln/Glnvs Arg/Arg:OR = 1.47,95%CI:1.24-1.74,P<0.001),(Arg/Gln vs Arg/Arg:OR = 1.48,95%CI:1.19-1.84,P<0.001),(Gln/GlnvsArg/Arg+Arg/Gln:OR= 1.26,95%CI:1.08-1.48,P = 0.003),(Arg/Gln+Gln/Glnvs Arg/Arg:OR = 1.49,95%CI:1.21-1.83,P<0.001)],而未发现XRCClArg399Gln基因多态性与食管癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌有关联。结论:XRCC1 Arg399Gln基因多态性可能增加中国人群罹患肝细胞癌的风险。XRCC1 Arg399Gln基因多态性与中国人群食管癌、胃癌、结直肠癌、胰腺癌易感性无明显关联。

关键词： XRCC1 基因多态性消化系统肿瘤 Meta分析

锌指蛋白488在鼻咽癌中的表达及功能机制的研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

锌指蛋白488在鼻咽癌中的表达及功能机制的研究

作者：宗丹南京医科大学

学位级别：硕士

第一部分 ZNF488对鼻咽癌细胞株HONE1生物学行为的影响目的：探讨ZNF488基因对鼻咽癌细胞HONE1生物学行为的影响。方法：构建携带空载体、人ZNF488基因的逆转录病毒质粒pMSCV和pMSCV-ZNF488,以磷酸钙法转染293FT细胞并收集病毒液,感染... 详细信息

第一部分 ZNF488对鼻咽癌细胞株HONE1生物学行为的影响目的：探讨ZNF488基因对鼻咽癌细胞HONE1生物学行为的影响。方法：构建携带空载体、人ZNF488基因的逆转录病毒质粒pMSCV和pMSCV-ZNF488,以磷酸钙法转染293FT细胞并收集病毒液,感染鼻咽癌细胞株HONEl,经嘌呤霉素筛选及Western-blotting鉴定,建立稳定表达ZNF488的HONEl-pMSCV-ZNF488和空载体HONE1-pMSCV的细胞株。应用噻唑盐(MTT)法、平板克隆形成实验检测ZNF488过表达对HONE1细胞生长增殖的影响,同时应用流式细胞术检测ZNF488对细胞周期增殖指数的影响。划痕实验及Transwell体外侵袭实验观察ZNF488对HONE1迁移侵袭能力的影响。Western-blotting检测上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白及抑癌基因PTEN的表达情况。结果：成功建立HONE1-pMSCV 和 HONEl-pMSCV-ZNF488稳定表达细胞株,MTT法及平板克隆形成实验结果显示,与空载体组HONE1-pMSCV细胞相比,HONE1-pMSCV-ZNF488细胞增殖及克隆形成能力均增强。流式细胞术显示过表达ZNF488细胞S期百分比较空载体组高,增殖指数增加。划痕实验、Transwell体外侵袭实验示ZNF488能够显著增加细胞的迁移、侵袭能力。Western-blotting检测发现上皮标志E-Cadhesion、a-Catenin表达降低,间质性标志Fibronectin、Vimentin表达升高,同时抑癌因子PTEN表达下降。结论：过表达ZNF488可通过诱导鼻咽癌细胞HONE1发生上皮间质转变及下调抑癌基因PTEN,促进细胞的增殖及迁移侵袭能力。第二部分ZNF488在鼻咽癌中的表达、功能及分子机制的研究目的：1、检测ZNF488在鼻咽癌中的表达,并明确其与预后的关系。2、探索ZNF488对鼻咽癌细胞株功能的影响,并进行分子机制的研究。方法：实时荧光定量PCR检测ZNF488在鼻咽癌组织、正常鼻咽组织、鼻咽癌细胞、正常鼻咽上皮细胞及永生化细胞中表达情况。免疫组织化学检测ZNF488在鼻咽癌组织中的表达情况。构建ZNF488过表达细胞株后,划痕试验及Transwell试验检测ZNF488对迁移和侵袭功能的影响。同时利用小分子RNA (SiRNA)技术基因敲除内源性ZNF488,进一步对功能进行验证。Western blotting在蛋白水平上检测上皮标志物及间质标志物,免疫荧光进一步验证上皮及间质标志物伴随ZNF488过表达之后的变化。平板克隆形成实验、软琼脂平板克隆形成实验及裸鼠体内成瘤实验在体外及体内水平检测ZNF488对成瘤能力的影响。基因芯片对比两对细胞株基因表达差异,并进行聚类分析。荧光素报告基因检测核转录因子TCF/LEF的转录活性。Western blotting检测通路蛋白的表达情况。统计方法如下：Student's T检验,X2检验,Kaplan-Meier生存分析,log-rank检验,并应用回归风险模型进行多因素分析。结果：ZNF488在鼻咽癌组织中表达水平高于正常鼻咽上皮组织,在鼻咽癌细胞株中普遍呈高表达,且在鼻咽癌细胞株5-8F和S18两株具有高转移特性的细胞株中明显呈高表达。免疫组织化学结果显示,ZNF488高表达区域主要位于癌巢前缘。生存分析研究表明,高表达ZNF488的患者,其总生存、无进展生存、无远处转移生存及无局部区域复发生存均明显低于低表达ZNF488的患者。功能实验表明,过表达ZNF488后,鼻咽癌细胞的迁移及侵袭能力均增加,而基因敲除ZNF488后,高转移细胞株的迁移及侵袭能力均减弱。过表达ZNF488后,鼻咽癌细胞的体内体外成瘤能力均增加。机制研究表明,ZNF488上调了β-Catenin、 p-GSK3β、Smad4、Snail和Slug表达,通过激活VVNT/β-Catenin及TGF-β/Smad4通路,两者共同作用下激活核转移因子TCF/LEF,从而诱导鼻咽癌细胞发生上皮间质转变。结论：ZNF488在鼻咽癌的发生发展中作为癌基因,通过激活WNT/β-Cate min及TGF-β/Smad4通路,激活核转移因子TCF/LEF,而诱导鼻咽癌细胞发生上皮间质转变,从而参与鼻咽癌的侵袭与转移过程。

关键词：鼻咽癌锌指蛋白488 上皮—间质转化侵袭转移分子机制 ZNF488 鼻咽癌侵袭与转移 EMT WNT通路 TGF-β通路

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Ⅱ期鼻咽癌的长期疗效分析及治疗模式探讨

Ⅱ期鼻咽癌的长期疗效分析及治疗模式探讨

作者：张煜婕南京医科大学

学位级别：硕士

目的:评估调强放疗背景下II期鼻咽癌的长期生存与失败模式,并探讨影响II期鼻咽癌预后的因素。方法:本研究纳入了2006至2015年期间南京医科大学附属肿瘤医院初治的190例II期鼻咽癌患者。T1N1、T2N0和T2N1各临床亚组的病例数分别为84例、1... 详细信息

目的:评估调强放疗背景下II期鼻咽癌的长期生存与失败模式,并探讨影响II期鼻咽癌预后的因素。方法:本研究纳入了2006至2015年期间南京医科大学附属肿瘤医院初治的190例II期鼻咽癌患者。T1N1、T2N0和T2N1各临床亚组的病例数分别为84例、18例和88例。所有患者均接受了根治性调强放疗并具有完整的临床资料。总生存期（overall survival,OS）、无局部复发生存期（local relapse-free survival,LRFS）、无区域复发生存期（regional relapse-free survival,RRFS）和无远处转移生存期（distant metastasis-free survival,DMFS）的生存曲线由Kaplan–Meier法获得,采用log-rank检验和COX比例风险回归模型进行单因素及多因素分析。P＜0.05被认为有统计学差异。结果:全组5年随访率为94.2%,中位随访时间为90个月（13-159个月）。II期鼻咽癌的5年OS、LRFS、RRFS和DMFS分别为92.0%、94.0%、96.2%和91.5%。在T1N1、T2N0和T2N1三个临床亚组间,5年OS、LRFS、RRFS和DMFS的差异无统计学意义（OS:92.9%vs 100%vs 89.7%,p=0.332;LRFS:97.5%vs 88.9%vs 91.7%,p=0.168;RRFS:95.1%vs 100%vs 96.6%,p=0.629;DMFS:92.9%vs 100%vs 88.4%,p=0.247）。此外,与单纯放疗相比,化疗的加入并未显著提高II期鼻咽癌患者的5年OS、LRFS、RRFS和DMFS（OS:92.5%vs 89.1%,p=0.535;LRFS:94.9%vs 88.7%,p=0.219;RRFS:96.8%vs 92.3%,p=0.272;DMFS:91.9%vs 89.0%,p=0.643）。多因素分析结果显示淋巴结最大直径（HR=3.312,95%CI 1.178-9.307,P=0.023）与II期鼻咽癌的OS有关,并且年龄（HR=5.431,95%CI 1.158-25.482,P=0.032）、NLR（HR=6.686,95%CI 1.733-25.790,P=0.006）被认为是II期鼻咽癌LRFS的独立预后因素。结论:在调强放疗背景下,II期鼻咽癌可获得较好的生存结局,而远处转移为II期鼻咽癌患者最主要的治疗失败模式。化疗的加入未能为II期鼻咽癌患者带来生存获益。此外,淋巴结最大直径是II期鼻咽癌OS的独立预后因素,而年龄、NLR则为II期鼻咽癌LRFS的独立预后因素。目的:诱导化疗在II期鼻咽癌中的应用价值目前仍存在争议。我们进行了这项meta分析来评估诱导化疗联合放疗对比单纯放疗治疗II期鼻咽癌的疗效。方法:我们通过Embase、Pubmed、Cochrane Library、万方、维普和CBM六个数据库对已发表的文献进行了全面检索,文献检索截止2020年2月。纳入文献均探讨了II期鼻咽癌患者接受诱导化疗联合放疗与接受单纯放疗的预后差异。结局指标包括总生存率（overall survival,OS）、无局部区域复发生存率（locoregional relapse-free survival,LRRFS）、无远处转移生存率（distant metastasis-free survival,DMFS）和无进展生存率（progression-free survival,PFS）以及治疗相关急性毒性反应。若研究间不存在异质性则采用固定效应模型,若存在则采用随机效应模型。敏感性分析和亚组分析用来辨别异质性的来源。发表偏倚则通过Begger检验来确定。当P＜0.05时认为差异具有统计学意义。结果:7项研究共有628例II期鼻咽癌患者被纳入本项meta分析。汇总结果显示与单纯放疗比较,诱导化疗联合放疗不能改善II期鼻咽癌患者的OS（HR=0.75,95%CI 0.52-1.07,P=0.11）、LRRFS（HR=0.91,95%CI 0.59-1.40,P=0.67）、DMFS（HR=1.32,95%CI,0.46-3.80,P=0.61）和PFS（HR=0.75,95%CI0.50-1.12,P=0.16）,却显著增加了3-4级白细胞减少症（OR=8.79,95%CI2.26-34.20,P=0.002）和3-4级中性粒细胞减少症（OR=7.86,95%CI 2.42-25.49,P=0.0006）的发生。亚组分析结果表明,与单纯常规放疗相比,诱导化疗联合常规放疗均无法改善II期鼻咽癌患者的OS（HR=0.66,95%CI 0.44-1.00,P=0.05）、LRRFS（HR=

关键词： Ⅱ期鼻咽癌调强放疗疗效预后诱导化疗放疗 meta