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Construction of the Antisense Eukaryotic Vector for Proliferating Cell Nuclear Antigen Gene and Its Expression in Bladder Cancer EJ Cell Line

引用

Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2002年第4期22卷 327-330页

作者：童强松曾甫清齐义鹏朱朝晖鲁功成 DepartmentofUrology virologyinstitute

To explore a novel strategy for antisense gene therapy of cancer,the coding sequence of hum an proliferating cell nuclear antigen(PCNA) c DNA was reversely inserted into the eukaryotic vector p L XSN by molecular cloning techniques and transferred into bladder cancer EJcells with li- posome. The PCNA expression in transferred cells was dynamically detected by immunofluo- rescence and RT- PCR techniques. Changes of proliferation activities of cancer cells were assayed by MTT colorim etric and cloning formation m *** the experiment,the antisense eukaryotic vector was successfully constructed and nam ed as p L *** transfection with it for1- 7 days,PCNA protein and m RNA levels in cancer cells were blocked by16 .74 % - 84 .2 1% (P< 0 .0 5 ) and2 3.2 7% - 86 .15 % (P<0 .0 5 ) *** proliferation activities of transferred cells were inhibited by 2 7.91% - 6 2 .0 7% (P<0 .0 1) ,with cloning formation abilities being de- creased by 5 0 .81% (P<0 .0 1) . Itwas concluded that the in vitro proliferation activities of cancer cells could be effectively inhibited by blocking PCNA expression with antisense technique,which could serve as an ideal strategy for gene therapy of bladder cancer.

关键词： proliferating cell nuclear antigen antisense RNA m olecular cloning gene expression

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