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肉制品中马源性成分重组酶介导链置换等温扩增实时检测方法的建立及应用

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食品科学 2024年第3期45卷 203-210页

作者：范维孔维恒高晓月董雨馨李贺楠郭文萍中国肉类食品综合研究中心北京食品科学研究院北京100068 中国海关科学技术研究中心北京100000

目的:建立一种快速鉴定肉及肉制品中马源性成分的重组酶介导链置换等温扩增实时检测方法。方法:以马源性ATpase 6基因为靶基因设计多组特异性引物和Exo探针,通过引物筛选及反应参数优化,建立一种采用重组酶介导链置换等温扩增技术检测... 详细信息

目的:建立一种快速鉴定肉及肉制品中马源性成分的重组酶介导链置换等温扩增实时检测方法。方法:以马源性ATpase 6基因为靶基因设计多组特异性引物和Exo探针,通过引物筛选及反应参数优化,建立一种采用重组酶介导链置换等温扩增技术检测马源性成分的方法,并对该方法进行特异性、灵敏度和稳定性验证,同时通过对不同掺入比例混合样品、不同加工工艺模拟样品和市售样品进行检测,分析方法的检出限、适用性和准确性。结果:该方法反应迅速、特异性强、灵敏度高。可在39℃恒温条件下16min内完成反应;对23种非目标源性具有良好特异性;目标DNA的检测灵敏度可达到1.8copies/μL水平;对生肉的检出限为0.01%(质量分数,下同),对熟肉制品的检出限为0.1%;对90份市售样品进行检测,结果与标准方法一致。结论:建立的重组酶介导链置换等温扩增方法可用于肉及肉制品中马源性成分的掺假鉴别检测。

关键词：重组酶介导链置换等温扩增掺假鉴别马源性成分肉及肉制品

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食品蛋白增维结构精密构筑研究进展

中国食品学报 2024年第4期24卷 420-430页

作者：李煦源陈正行王涛江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心江苏无锡214122

增维结构为短程有序性单元结构在多维空间限域堆积,进而形成长程可控性高级结构,其特征为各单元结构定向排布且在尺度、维度上均具高度可编程性。鉴于动态化设计逻辑及标准化构筑机制,这种基于类似单元结构所形成的空间多样化高级组织架... 详细信息

增维结构为短程有序性单元结构在多维空间限域堆积,进而形成长程可控性高级结构,其特征为各单元结构定向排布且在尺度、维度上均具高度可编程性。鉴于动态化设计逻辑及标准化构筑机制,这种基于类似单元结构所形成的空间多样化高级组织架构,在功能食品的开发中具有重要应用。目前,增维结构的设计开发大多基于人工高分子或工程化蛋白,而在天然蛋白结构中鲜有报道,缺乏对蛋白折叠的过程控制是其首要原因。本文基于蛋白质共架技术,从介观重构、纳米雕刻及增维定制3个方面综述食品蛋白增维结构精密构筑研究进展。探讨构建食品蛋白高值化利用关键技术体系的思路和方法,以期为我国食品蛋白产业的发展提供理论和实践支持。

关键词：增维结构限域堆积蛋白改性精密构筑

蓝圆鲹分离蛋白酶解产物的制备及其抗大米淀粉老化特性

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水产学报 2024年第4期48卷 376-390页

作者：孙乐常孙小舒林端权陈玉磊翁凌缪松曹敏杰集美大学海洋食品与生物工程学院集美大学水产品深加工技术国家地方联合工程研究中心大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心爱尔兰农业部农业与食品发展局teagasc食品研究中心

为了进一步拓展海洋鱼类蛋白在食品中的应用，以蓝圆鲹分离蛋白为原料，利用酶解改性得到溶解性良好的蓝圆鲹分离蛋白酶解物(BPIH)，并研究其对大米淀粉(RS)短期老化的抑制作用。通过响应面法优化酶解改性工艺制备BPIH，并分别按RS的3%... 详细信息

为了进一步拓展海洋鱼类蛋白在食品中的应用，以蓝圆鲹分离蛋白为原料，利用酶解改性得到溶解性良好的蓝圆鲹分离蛋白酶解物(BPIH)，并研究其对大米淀粉(RS)短期老化的抑制作用。通过响应面法优化酶解改性工艺制备BPIH，并分别按RS的3%、6%、9%(质量百分比)进行添加。通过测定RS的凝沉性、动态黏弹性、热学特性以及微观结构分析评价BPIH的抗淀粉老化活性。结果显示，响应面法确定的最佳条件：酶底比5 000∶1 (U/g)、酶解时间3 h、料液比1.00∶3.81、酶解温度46.36℃、酶解pH 6.30，氮溶指数(NSI)实际值为85.41%±0.82%，与预测值86.37%接近。该酶解条件下BPIH水解度达到21.62%。BPIH中小于1 000 u的肽占79.94%，主要为小分子低聚寡肽。加入BPIH可以减弱RS的凝沉现象，降低RS在4℃保存过程中的储能模量(G')，显著降低老化后RS的峰值温度(Tp)和焓值(ΔHr)；加入BPIH的大米淀粉，老化后微观结构有较大孔洞，提升了淀粉糊化后保留内部水分的能力。研究表明，BPIH能够抑制RS在4℃保存期间凝胶网络和微晶结构的形成，同时可能限制了淀粉分子间的聚集，抑制或延缓RS的短期老化。本研究为蓝圆鲹分离蛋白酶解物在食品蛋白配料中的应用提供理论参考。

关键词：蓝圆鲹分离蛋白酶解淀粉短期老化

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细胞培养肉高效合成的生物学基础与技术挑战

中国食品学报 2024年第5期24卷 103-125页

作者：关欣周景文王守伟李春保陈坚江南大学未来食品科学中心江苏无锡214122 中国肉类食品综合研究中心北京100068 南京农业大学食品科技学院南京210095

随着社会发展水平的不断提升,全球肉制品消耗量快速增长。细胞培养肉是农业食品科技的一场革命,随着国际上细胞培养肉工程化技术的迅速发展,国内在这方面的差距逐步显现。本文综述细胞培养肉高效合成的生物学基础,包括动物细胞功能维持... 详细信息

随着社会发展水平的不断提升,全球肉制品消耗量快速增长。细胞培养肉是农业食品科技的一场革命,随着国际上细胞培养肉工程化技术的迅速发展,国内在这方面的差距逐步显现。本文综述细胞培养肉高效合成的生物学基础,包括动物细胞功能维持与发育过程机制,关键生长因子解析与生物合成,细胞大规模低成本培养关键技术以及细胞培养肉食用品质提升的生物学过程,讨论细胞培养肉工业化制造面临的技术挑战,并对细胞培养肉技术的未来重点攻关方向进行展望,为实现细胞培养肉的可持续生物制造提供理论和实践依据。

关键词：细胞培养肉食品合成生物学工程化低成本大规模

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绿豆蛋白α-淀粉酶抑制肽的制备与鉴定

食品科学 2024年第1期45卷 58-64页

作者：李永富王雅茹黄金荣史锋江南大学食品学院粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心食品科学与技术国家重点实验室江苏无锡214122 江苏省生物活性制品加工工程技术研究中心江苏无锡214122

采用胃-胰蛋白酶水解绿豆蛋白及其分级蛋白,以水解物α-淀粉酶活性抑制率为主要指标,结合水解度、氨基酸组成及分子质量分析其抑制效果差异及原因。结果表明,绿豆蛋白肽对α-淀粉酶活性抑制率最高,为16.51%;与绿豆分级蛋白相比,绿豆蛋... 详细信息

采用胃-胰蛋白酶水解绿豆蛋白及其分级蛋白,以水解物α-淀粉酶活性抑制率为主要指标,结合水解度、氨基酸组成及分子质量分析其抑制效果差异及原因。结果表明,绿豆蛋白肽对α-淀粉酶活性抑制率最高,为16.51%;与绿豆分级蛋白相比,绿豆蛋白的疏水氨基酸含量和水解度最高,分别为32.68%和6.28%,水解物的肽分子质量最小,均小于20kDa,因此选用绿豆蛋白制备α-淀粉酶抑制肽。然后分离鉴定绿豆蛋白肽,新发现了17条有潜在α-淀粉酶抑制效果的肽。本研究表明绿豆蛋白较其分级蛋白具有更强的α-淀粉酶抑制效果,能够用于降血糖的功能性食品或药物中。

关键词：绿豆蛋白水解 α-淀粉酶抑制肽分离与鉴定

鸽脂肪前体细胞的分离培养及成脂诱导分化研究

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畜牧兽医学报 2024年

作者：梁小娟李雨爽付周唐铎李莹莹王守伟中国肉类食品综合研究中心北京食品科学研究院

旨在建立鸽脂肪前体细胞的体外分离、培养、鉴定和成脂诱导分化的方法。本研究采集3只健康的1日龄银王鸽皮下脂肪组织，利用I型胶原酶进行消化以分离脂肪前体细胞，在脂肪前体细胞常规分离法基础上进行分离方法改良，对获得的脂肪前体... 详细信息

旨在建立鸽脂肪前体细胞的体外分离、培养、鉴定和成脂诱导分化的方法。本研究采集3只健康的1日龄银王鸽皮下脂肪组织，利用I型胶原酶进行消化以分离脂肪前体细胞，在脂肪前体细胞常规分离法基础上进行分离方法改良，对获得的脂肪前体细胞进行原代和传代培养，并观察细胞形态，通过免疫荧光鉴定特异性标记DLK1，确认脂肪前体细胞。通过在培养基中添加胰岛素和油酸钠进行成脂诱导分化，使用BODIPY493/503染色观察细胞中的脂滴分布情况，通过甘油三酯测定试剂盒检测细胞中甘油三酯的含量，采用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测脂肪前体细胞成脂分化过程中分化相关基因的表达。研究结果表明，鸽脂肪前体细胞呈梭形，改良分离法比常规分离法能够获得更多的脂肪前体细胞；与37 ℃相比，在41 ℃培养温度下，获得的脂肪前体细胞数目显著增加（P研究改良了脂肪前体细胞常规分离法，成功分离获得鸽脂肪前体细胞，且筛选出最适培养温度。获得的鸽脂肪前体细胞经胰岛素和油酸钠诱导后能高效地分化为成熟的脂肪细胞。本研究为鸽脂肪代谢分子调控机制的研究提供了良好的细胞模型，同时也为鸽生物培育肉的制备提供种子细胞和技术指导。

关键词：鸽脂肪前体细胞成脂分化成熟脂肪细胞细胞培育肉

北京黑猪脂肪前体细胞的分离培养及成脂诱导分化研究

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畜牧兽医学报 2024年第7期 2877-2889页

作者：梁小娟李雨爽李莹莹王守伟中国肉类食品综合研究中心北京食品科学研究院

旨在建立北京黑猪脂肪前体细胞的分离培养及成脂诱导分化培养体系，为研究猪脂肪沉积的分子机制提供试验材料，为生物培育肉的制备提供技术指导。本研究采集1头7日龄健康的北京黑猪公猪的颈部皮下脂肪组织，使用机械法联合I型胶原酶消... 详细信息

旨在建立北京黑猪脂肪前体细胞的分离培养及成脂诱导分化培养体系，为研究猪脂肪沉积的分子机制提供试验材料，为生物培育肉的制备提供技术指导。本研究采集1头7日龄健康的北京黑猪公猪的颈部皮下脂肪组织，使用机械法联合I型胶原酶消化法分离脂肪前体细胞。对获得的脂肪前体细胞进行形态观察、生长曲线绘制、免疫荧光鉴定、成脂诱导分化、油红O染色、BODIPY染色、甘油三酯含量测定及使用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测成脂分化相关基因的表达。结果表明，分离的北京黑猪脂肪前体细胞贴壁后呈长梭形，细胞生长曲线呈S型。免疫荧光结果表明，PREF1表达为阳性，表明分离的细胞的确为脂肪前体细胞。在相同的诱导试剂组合条件下，使用10%FBS比2%FBS成脂诱导分化效果更好。在相同血清浓度的情况下，鸡尾酒法与油酸钠、罗格列酮共同联用的细胞分化效果较好。分化8 d的细胞中出现大量的脂滴，脂滴经油红O染色呈红色，经BODIPY染色呈绿色。且分化8 d的细胞中甘油三酯的含量显著升高(P研究成功建立了北京黑猪脂肪前体细胞的分离与培养体系，并筛选出适合二维和三维培养的成脂诱导分化方法，为进一步研究猪脂肪沉积的分子机制和改善肉品质奠定基础，也为细胞培育肉的制备提供技术指导。

关键词：北京黑猪脂肪前体细胞成脂诱导分化成熟脂肪细胞三维培养细胞培育肉

枯草芽孢杆菌发酵对豆类中酚类物质及抗氧化活性的影响

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中国食品学报 2024年第1期24卷 291-300页

作者：唐双庆鲁慧琪李秀丽邱怡君王敏徐媛王红波江汉大学生命科学学院食品营养与安全研究中心武汉430056 湖北省豆类(蔬菜)植物工程技术研究中心武汉430056

多酚是豆类的主要活性成分,对该类食品的抗氧化功能具有重要影响。本研究利用枯草芽孢杆菌ATCC 6051发酵8种豆类,分析发酵对豆类食品中酚类物质含量和抗氧化活性的影响。发酵红豆、菜豆、蚕豆、绿豆、大豆、扁豆和豌豆的总酚含量分别增... 详细信息

多酚是豆类的主要活性成分,对该类食品的抗氧化功能具有重要影响。本研究利用枯草芽孢杆菌ATCC 6051发酵8种豆类,分析发酵对豆类食品中酚类物质含量和抗氧化活性的影响。发酵红豆、菜豆、蚕豆、绿豆、大豆、扁豆和豌豆的总酚含量分别增加了24.19%,57.89%,123.78%,172.90%,225.32%,300.00%,343.17%。对发酵前、后8种豆类中19种酚类化合物含量的比较发现,发酵影响儿茶素、表儿茶素、水杨酸和芥子酸的含量。发酵绿豆、大豆、豌豆和扁豆提取物的DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除活性以及铁离子还原能力均提高。总酚含量与DPPH自由基清除活性、ABTS+自由基清除活性以及铁离子还原能力均极显著相关(P研究表明,绿豆、大豆、豌豆和扁豆是利用枯草芽孢杆菌发酵制备富含酚类和高抗氧化活性产品的理想食品原料,适用于发酵豆类功能食品的开发。

关键词：枯草芽孢杆菌豆类酚类物质抗氧化活性

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牛乳β-乳球蛋白变异体检测方法研究进展

中国食品学报 2024年第3期24卷 446-457页

作者：王亚玲贾舸赵军英乔为仓张明辉陈历俊北京三元食品股份有限公司、国家母婴乳品健康工程技术研究中心、北京市乳品工程技术研究中心、母婴研究技术创新中心北京100163

β-乳球蛋白(β-LG)是牛乳中重要的天然活性营养物质,也是牛乳中主要的过敏原之一。β-乳球蛋白约为乳清蛋白总量的50%,是牛乳中主要的乳清蛋白,具有较强的热敏感性和致敏性,在优质乳品工业中起关键作用。其不仅作为牛奶热处理强度的评... 详细信息

β-乳球蛋白(β-LG)是牛乳中重要的天然活性营养物质,也是牛乳中主要的过敏原之一。β-乳球蛋白约为乳清蛋白总量的50%,是牛乳中主要的乳清蛋白,具有较强的热敏感性和致敏性,在优质乳品工业中起关键作用。其不仅作为牛奶热处理强度的评估指标,还作为食品中牛乳过敏原的标志蛋白,有效识别和检测牛乳β-乳球蛋白非常重要。已报道的牛乳β-乳球蛋白有13种变异体,其中A和B是牛乳β-LG的常见变异体,且含量最高。根据不同的检测原理,文章简述近年来牛乳β-乳球蛋白变异体的三大类检测方法,总结电泳法、色谱法和免疫法的原理、优缺点及部分应用实例,重点介绍液相色谱法和毛细管电泳法两种定量方法,并展望牛乳β-乳球蛋白未来的发展方向。

关键词： β-乳球蛋白变异体色谱法免疫法电泳法