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Establishment and Utilization of a Tetracycline-controlled Inducible RNA Interfering System to Repress Gene Expression in Chronic Myelogenous Leukemia Cells

引用

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2005年第12期37卷 851-856页

作者： Fan YANG Yun ZHANG Ying-Li CAO Shu-Hui WANG Li LIU Department of Microbiology and Etiology,Institute of Basic Medical .sic Medical Sciences. Chinese Academy q/’Medical Sciences and Peking Union Medical College.Beijing 100005.China departmentofmicrobiologyandetiology InstituteofBasicMedicalSciencesChineseAcademyofMedicalSciencesandPekin

RNA interference (RNAi),a posttranscriptional gene silencing process mediated by small double-stranded RNA specifically complementary to the targeted transcript,has been used extensively in the developmentof novel therapeutic approaches against various human diseases including chronic myelogenous leukemia (CML).*** report the successful construction of a tetracycline-controlled siRNA in CML cell line K562.A K562cell line stably expressing the reverse tetracycline-controlled transactivator (rtTA) was constructed.A tetracy-cline responsive element(TRE) was integrated into the RNA polymerase Ⅲ promoter region of pBS/U6 thatwas used to drive specific siRNA to target the novel cytokine receptor-like factor 3 (CRLF3) gene,The resultsshow that rtTA was able to recognize the TRE to prevent siRNA-mediated exogenous and endogenous CRLF3gene ***,CRLF3-siRNA mediated gene repression could be induced in a dose-dependentmanner in the presence of ***,the inducible siRNAi system in K562 cells might be useful for thestudy of RNAi-mediated therapeutic approaches against CML.

关键词： inducible siRNA tetracycline reverse tetracycline-controlled transactivator U6 promoter CRLF3

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