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Construction and identification of recombinant lentiviral vector containing HIV-1 Tat gene and its expression in 293T cells

引用

The Journal of Biomedical Research 2010年第1期24卷 58-63页

作者： Bingbing Wei Ninghan Feng Feng Zhou Chun Lu Jiantang Su Lixin Hua department of Urology the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University Nanjing 210029 China department of microbtology and immunology Nanjing Medical University Nanjing 210029 China

Objective： To construct a lentiviral vector expressing HIV-1 Tat and identify its expression in 293T cells. Methods： The gene fragment of HIV-1 Tatlol was subcloned to lentiviral transfer vector pHAGE-CMV-MCS- IZsGreen, which was named pHAGE-Tat. Then the constructed pHAGE-Tat was used to co-transfect the packing 293T cells, together with the packaging plasmids pMD2.G and psPAX2. The packaged viral particles designated LV-Tat were used to infect the 293T cells and the viral titer was calculated. The expression of HIV-1 Tat in 293T cells was confirmed using RT-PCR and western blot. Results： The recombinant lentiviral vector was successfully constructed and could express HIV-1 Tat in 293T cells. The virus titer was 5.73×10^6 ifu/ml. Conclusion： The successfully constructed recombinant lentiviral vector makes a strong foundation for further exploring the possible role of HIV-1 Tat in the development of prostate cancer.

关键词： prostate cancer HIV-1 Tat

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