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TEAD1转录本的鉴定及其在鸡前脂肪细胞中的功能研究

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生物化学与生物物理进展 2024年第1期51卷 215-229页

作者：彭敏徐虎贾子秋杨清竹潘林王维禹孔令喆孙婴宁齐齐哈尔大学生命科学与农林学院生物技术系齐齐哈尔161006

目的 TEAD1转录因子1 (TEAD1)在前脂肪细胞中表达,但是功能还不清楚。本研究旨在探讨TEAD1的两个转录本对永生化鸡前脂肪细胞系(immortalized chicken preadipocyte 1,ICP1)细胞增殖、迁移、凋亡和分化的影响。方法克隆TEAD1基因的全... 详细信息

目的 TEAD1转录因子1 (TEAD1)在前脂肪细胞中表达,但是功能还不清楚。本研究旨在探讨TEAD1的两个转录本对永生化鸡前脂肪细胞系(immortalized chicken preadipocyte 1,ICP1)细胞增殖、迁移、凋亡和分化的影响。方法克隆TEAD1基因的全长序列,对获得的两个转录本进行生物信息学分析。利用间接免疫荧光分析TEAD1转录本的亚细胞定位。通过RT-qPCR、CCK-8和EdU等方法,检测过表达TEAD1转录本对ICP1细胞增殖的影响。利用划痕实验检测TEAD1转录本对ICP1细胞迁移的影响。利用细胞凋亡-Hoechst染色和RT-qPCR,分析过表达TEAD1转录本对ICP1细胞凋亡的影响。通过RT-qPCR检测TEAD1转录本在不同组织、不同细胞系和ICP1细胞分化过程中的表达。利用油红O染色、BODIPY染色、RT-qPCR、Western blot和双荧光素酶报告基因技术,分析过表达TEAD1转录本对ICP1细胞脂滴积累及成脂相关基因转录的影响。最后,测定过表达TEAD1转录本的ICP1细胞中甘油三酯(TG)含量。结果克隆TEAD1全长编码区,鉴定出两个TEAD1转录本。TEAD1-V1主要定位于细胞核,TEAD1-V2定位于细胞质与细胞核。过表达TEAD1-V1和TEAD1-V2均抑制ICP1细胞增殖。过表达TEAD1-V1促进ICP1细胞迁移,而过表达TEAD1-V2对ICP1细胞迁移没有影响。且过表达TEAD1-V1和TEAD1-V2均促进ICP1细胞凋亡。两个转录本在不同组织和细胞系中的表达模式相似,在前脂肪细胞分化过程中的表达先下降后上升。过表达TEAD1-V1能显著减少ICP1细胞中脂滴的积累(P0.05)。过表达TEAD1-V1能显著降低ICP1细胞中甘油三脂的含量(P0.05)。结论本研究首次克隆并鉴定了鸡TEAD1基因的两个转录本。过表达转录本TEAD1-V1和TEAD1-V2抑制鸡前脂肪细胞增殖并且促进鸡前脂肪细胞凋亡;TEAD1-V1抑制前脂肪细胞分化并促进前脂肪细胞迁移,而TEAD1-V2对前脂肪细胞分化和迁移没有影响。

关键词： TEAD转录因子1 鸡转录本 ICP1

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水力旋流器并联公共液斗对压降的影响研究

过程工程学报 2024年第6期24卷 705-715页

作者：刘秀林陈建义张宏斌高申煣中国石油大学(北京)机械与储运工程学院北京102249 齐齐哈尔大学机电工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

为降低并联水力旋流器组压降,设计了一种并联水力旋流器公共液斗。实验测量了常规并联旋流器组和带液斗的并联旋流器组的压降,并利用Fluent软件分析了并联分离器的流场。结果表明,带液斗的并联旋流器组的压降均低于常规组,平均减少了1.... 详细信息

为降低并联水力旋流器组压降,设计了一种并联水力旋流器公共液斗。实验测量了常规并联旋流器组和带液斗的并联旋流器组的压降,并利用Fluent软件分析了并联分离器的流场。结果表明,带液斗的并联旋流器组的压降均低于常规组,平均减少了1.9%,当入口流速增大至5.0 m/s后,压降减小幅度最大达3.36%。带液斗的并联旋流器组的分离效率均高于常规组,平均增加了0.94个百分点,当入口流速增大至5.0 m/s后,分离效率增加幅度最大达1.34个百分点。与常规并联相比,带液斗的并联旋流器组内空气柱消失,导致湍动能耗散减小且切向速度变化更为平缓。液斗内并行涡流会受到其他旋涡约束,旋涡系中心比单个旋涡中心摆动幅度要小,稳定性更强。公共液斗能够有效降低并联旋流器分离压降,本工作可为并联水力旋流器的设计和应用提供指导。

关键词：水力旋流器并联公共液斗压降空气柱自稳定性

大白菜BrCYP83B1基因的克隆及表达分析

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生物技术通报 2024年第6期40卷 152-160页

作者：王玉书赵琳琳赵爽胡琦白慧霞王欢曹业萍范震宇齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江省抗性基因工程与寒地生物多样性保护重点实验室齐齐哈尔161006 齐齐哈尔大学化学与化学工程学院齐齐哈尔161006

【目的】细胞色素P450家族是十字花科植物硫苷合成重要的酶系,其中CYP83亚家族主要参与核心结构的合成,旨在探究大白菜(Brassica rapa ***)CYP83B1基因的功能。【方法】利用RT-PCR技术克隆BrCYP83B1基因,通过生物信息学软件分析其编码... 详细信息

【目的】细胞色素P450家族是十字花科植物硫苷合成重要的酶系,其中CYP83亚家族主要参与核心结构的合成,旨在探究大白菜(Brassica rapa ***)CYP83B1基因的功能。【方法】利用RT-PCR技术克隆BrCYP83B1基因,通过生物信息学软件分析其编码蛋白理化性质、同源性及启动子顺式作用元件,利用RT-qPCR技术分析BrCYP83B1的表达模式,并构建其植物超表达载体。【结果】BrCYP83B1 cDNA序列全长为1500 bp,编码499个氨基酸,编码蛋白属于细胞色素P450超家族,主要定位于细胞质,二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲构成,与甘蓝型油菜、青花菜的CYP83B1蛋白具有较高的同源性。启动子分析表明,该基因启动子区域包含水杨酸、脱落酸及茉莉酸甲酯等激素响应的顺式作用元件,说明BrCYP83B1基因表达可能受激素调控。RT-qPCR分析结果表明,BrCYP83B1基因在大白菜的根、茎、叶、花和果中均有表达,且以叶中的表达量最高;茉莉酸甲酯够显著促进该基因的表达,而水杨酸处理对其表达具有一定的抑制作用,脱落酸处理下基因先上调后又下调。【结论】BrCYP83B1可能参与大白菜对激素的响应调控。

关键词：大白菜 BrCYP83B1 基因克隆植物激素表达分析超表达载体

微小染色体维持蛋白2基因诱导性敲除宫颈癌HeLa细胞系的建立及对DNA复制的影响

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实用医学杂志 2024年第2期40卷 133-139页

作者：李萍汤拓郑皑雪张鲁平王涛洪鲜邓志会齐齐哈尔医学院医药科学研究院黑龙江齐齐哈尔161006

目的利用诱导性CRISPR/Cas9技术建立微小染色体维持蛋白2(MCM2)基因敲除的宫颈癌HeLa细胞系,并探究MCM2对DNA复制及复制压力的影响。方法使用诱导性CRISPR/Cas9系统TLCV2,构建MCM2敲除HeLa细胞系;并分为对照组(Control)、敲除1组(KO1)... 详细信息

目的利用诱导性CRISPR/Cas9技术建立微小染色体维持蛋白2(MCM2)基因敲除的宫颈癌HeLa细胞系,并探究MCM2对DNA复制及复制压力的影响。方法使用诱导性CRISPR/Cas9系统TLCV2,构建MCM2敲除HeLa细胞系;并分为对照组(Control)、敲除1组(KO1)和敲除2组(KO2)。通过Western blot、EdU掺入实验、实时定量PCR、免疫荧光、CCK-8等实验,分析MCM2敲除对DNA复制和羟基脲诱导复制压力的影响。结果经过诱导后CRISPR/Cas9系统有效地敲除MCM2基因,并影响MCM2-7复合物的稳定。与对照细胞相比,MCM2敲除细胞DNA复制能力显著下降,同时Cyclin A1、Cyclin E1和CDK4的mRNA表达水平降低。在DNA复制压力下,MCM2敲除降低了细胞的存活能力、DNA损伤修复能力,并增加基因组的不稳定性。结论MCM2基因敲除降低正常条件下HeLa细胞的DNA复制能力,并降低复制压力后细胞的存活能力。本研究成功地构建了诱导性MCM2基因敲除HeLa细胞系,为进一步研究MCM2基因在宫颈癌中的作用及其生物学功能奠定了基础。

关键词：微小染色体维持蛋白2 基因敲除宫颈癌 HeLa细胞 DNA复制

“摩登上海”、沦陷区文学与新文艺改编——以新发现的《鲁男子：恋》连环画为中心

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细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3对鸡前脂肪细胞分化的抑制作用

现代中文学刊 2024年第2期 74-81页

作者：许海洋复旦大学中文系齐齐哈尔大学文学与历史文化学院

1941年12月，太平洋战争爆发后，日军进占租界。尽管彼时日伪政府严控上海文化艺术事业，然而在消费文化浪潮下，报刊出版业以及文化艺术公司对商业利益的追逐和市民大众对娱乐趣味的需求，共同造就了1940年代“摩登上海”之文学艺术改... 详细信息

1941年12月，太平洋战争爆发后，日军进占租界。尽管彼时日伪政府严控上海文化艺术事业，然而在消费文化浪潮下，报刊出版业以及文化艺术公司对商业利益的追逐和市民大众对娱乐趣味的需求，共同造就了1940年代“摩登上海”之文学艺术改编热潮。本文以新发现1942—1943年连载于上海日报副刊的曹涵美绘曾朴原著《鲁男子：恋》连环画为依托，通过探讨曹绘《鲁男子：恋》连载之始末，分析其作风格特点，并结合1940年代上海报刊中《鲁男子：恋》被改编为舞台剧及电影相关材料，探究《鲁男子：恋》视觉化改编，以期丰富和深化对1940年代上海沦陷区新文学艺术改编的研究。

关键词：《鲁男子:恋》曾朴曹涵美连环画消费文化沦陷区文学

来源：评论

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云南农业大学学报（自然科学版） 2024年第2期39卷 36-42页

作者：张新金钊贾子秋张珂潘林孙婴宁齐齐哈尔大学生命科学与农林学院生物技术系黑龙江齐齐哈尔161003 沈阳大学生命科学与工程学院辽宁沈阳110041

【目的】解析细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(cyclin-dependent kinase inhibitor 3,CDKN3)在鸡前脂肪细胞分化中的作用,为阐明脂肪沉积的分子机制奠定理论基础。【方法】构建荧光表达载体pECFPCDKN3,转染至鸡永生化前脂肪细胞系(immo... 详细信息

【目的】解析细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(cyclin-dependent kinase inhibitor 3,CDKN3)在鸡前脂肪细胞分化中的作用,为阐明脂肪沉积的分子机制奠定理论基础。【方法】构建荧光表达载体pECFPCDKN3,转染至鸡永生化前脂肪细胞系(immortalized chicken preadipocyte cell line,ICP1),观察CDKN3蛋白的亚细胞定位;采用油酸钠诱导ICP1分化,qRT-PCR检测分化过程中CDKN3 mRNA表达水平;将pCMVHA-CDKN3和pCMV-HA分别转染到ICP1中,转染24 h后进行诱导分化,通过油红O染色检测脂肪细胞分化情况,并利用qRT-PCR检测过表达CDKN3后脂肪分化相关基因的mRNA表达水平。【结果】转染了pECFP-CDKN3的细胞主要在细胞核中呈青色荧光信号,提示鸡CDKN3定位于细胞核;在诱导ICP1成脂分化的过程中,CDKN3 mRNA表达量逐渐升高;油红O染色结果显示:过表达CDKN3细胞内脂滴聚集减少,且脂肪分化相关基因C/EBPα、PPARγ、FABP4和FAS的表达水平均呈下降趋势,其中FAS显著下降(P<0.05),PPARγ极显著下降(P<0.01)。【结论】CDKN3是核蛋白,可抑制鸡前脂肪细胞分化。

关键词：细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子3(CDKN3) 鸡前脂肪细胞脂肪分化亚细胞定位

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纬度梯度下不同群系羊草种群数量特征

生态学杂志 2024年第2期43卷 455-460页

作者：刘国兵焦德志李梓雯周婵李程程齐齐哈尔大学生命科学与农林学院黑龙江齐齐哈尔161006 国家林业和草原局产业发展规划院北京100000 辽宁大学生命科学院沈阳110036

大尺度地理空间和局域尺度微生境植物种群数量特征的比较研究,对解释多变环境植物的趋异适应具有重要意义。在我国北方的天然草原,采用单位面积和大样本取样法,比较纬度梯度下不同群系羊草种群数量特征,进一步分析种群数量特征与纬度的... 详细信息

大尺度地理空间和局域尺度微生境植物种群数量特征的比较研究,对解释多变环境植物的趋异适应具有重要意义。在我国北方的天然草原,采用单位面积和大样本取样法,比较纬度梯度下不同群系羊草种群数量特征,进一步分析种群数量特征与纬度的关系。结果表明:纬度梯度上,草甸群系和草甸草原群系羊草的种群密度、种群生物量和种群高度分别为709~1536和661~1109株·m^(-2),366.92~726.40和330.59~410.72 g·m^(-2),56.28~73.49和43.27~68.87 cm,总体上草甸群系均高于草甸草原群系(P系羊草种群数量特征均表现出增加的趋势,种群数量特征与纬度间均较好地符合y=ax的指数函数关系,R^(2)在0.7806~0.9373,拟合方程均达到显著水平。因此,无论在大尺度地理空间,还是局域尺度微生境间羊草种群均表现出明显的适应性调节,局域尺度的不同群系间羊草种群数量特征差异稳定,大尺度的纬度间羊草种群数量特征又表现出一致的规律性。

关键词：羊草种群群系趋异适应

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NX制图模块在机件表达方法视图中的应用

智能制造 2024年第4期 77-82页

作者：矫健齐齐哈尔工程学院机电工程系黑龙江齐齐哈尔161005

NX制图模块将三维实体转化为二维平面图,大大提高二维制图效率,但并非所有图样都能利用相应命令直接完成,需要以国家标准为准则,综合利用多种命令来完成。本文详细介绍了NX2212软件如何创建符合国标的机件表达方法中视图(基本视图、向... 详细信息

NX制图模块将三维实体转化为二维平面图,大大提高二维制图效率,但并非所有图样都能利用相应命令直接完成,需要以国家标准为准则,综合利用多种命令来完成。本文详细介绍了NX2212软件如何创建符合国标的机件表达方法中视图(基本视图、向视图、局部视图和斜视图)的操作方法,为工程技术人员提供制图方法参考。

关键词：基本视图向视图局部视图斜视图 NX2212

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面向机器学习型区域滑坡易发性评价的训练样本采样方法

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地理学报 2024年第7期79卷 1718-1736页

作者：洪浩源王德生朱阿兴南京信息工程大学地理科学学院南京210044 郑州师范学院地理与旅游学院郑州450044 南京师范大学地理科学学院南京210023 威斯康星大学麦迪逊分校地理系美国麦迪逊53706

训练样本在基于机器学习的区域滑坡易发性评价中具有重要作用,训练样本通常是由滑坡(正样本)和非滑坡(负样本)组成,由采样方法采集得到。然而,现有正样本采样方法均没有度量所采集正样本的可信度,使得所采集训练样本可靠性得不到保证,... 详细信息

训练样本在基于机器学习的区域滑坡易发性评价中具有重要作用,训练样本通常是由滑坡(正样本)和非滑坡(负样本)组成,由采样方法采集得到。然而,现有正样本采样方法均没有度量所采集正样本的可信度,使得所采集训练样本可靠性得不到保证,制约了机器学习的区域滑坡易发性评价效果。针对这一问题,本文提出滑坡正样本原型采样方法(PBS),该方法利用某点与滑坡正样本原型的地理环境相似度和不相似度分别度量正样本与负样本的可信度,基于互斥法设置可信度阈值采集训练样本。以甘肃省油房沟流域为研究区,将PBS与已有代表性采样方法分别对油房沟流域构建基于逻辑回归、支持向量机和随机森林的滑坡易发性推测模型,对比有可信度和无可信度样本下的滑坡易发性评价效果。结果发现,正样本和负样本可信度与滑坡易发性评价效果分别呈现“波动上升”与“正相关”的特点,PBS方法在基于3种机器学习模型的滑坡易发性评价的验证精度(Accuracy)和接收者操作特征曲线下面积(AUC)值比已有代表性采样方法分别至少提高了14.7%和14%,且标准差均较小,表明本文所提出方法是有效的。

关键词：区域滑坡易发性评价训练样本采样机器学习模型可信度度量