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基于QbD理念的煅自然铜炮制工艺优化及其XRD指纹图谱分析

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：陈欣苟海英何天行邹佳良杨玥曾德雯陈林陈鸿平陈士林胡媛刘友平成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室

目的：基于质量源于设计（QbD）理念，优化煅自然铜炮制工艺，并建立煅自然铜X-射线衍射（XRD）指纹图谱。方法：以煅自然铜的安全性、有效性及质量可控性为质量概况（QTPP），以颜色、硬度、金属光泽、物相组成、重金属及有害元素含量... 详细信息

目的：基于质量源于设计（QbD）理念，优化煅自然铜炮制工艺，并建立煅自然铜X-射线衍射（XRD）指纹图谱。方法：以煅自然铜的安全性、有效性及质量可控性为质量概况（QTPP），以颜色、硬度、金属光泽、物相组成、重金属及有害元素含量为关键质量属性（CQAs），确定煅制温度、煅制时间、铺置厚度、粒径大小为关键工艺参数（CPPs）。采用差示热分析法、XRD及电感耦合等离子体质谱法，分析煅制温度与煅自然铜CQAs间的关联性。再基于客观赋权法（CRITIC）-熵权法，通过正交试验优选出煅自然铜最佳炮制工艺。采用粉末XRD对按最佳工艺炮制的煅自然铜样品进行物相分析，通过几何拓扑图形叠加，建立煅自然铜的平均数图谱和中位数图谱，并进行相似度评价与聚类分析。结果：单因素实验表明，温度升高的过程自然铜物相从FeS2转变成Fe7S8，颜色从暗黄色逐渐加深、重金属及有害元素含量降低。优化后的煅自然铜炮制工艺为煅制温度750 ℃、煅制时间2.5 h、铺置厚度3 cm、粒径大小0.8～1.2 cm，醋淬1次（自然铜-醋10:3）。自然铜煅制后内部结构呈蜂窝状，有利于有效成分的溶出。建立了以10个共有峰为特征指纹信息的13批煅自然铜的XRD指纹图谱；所分析样品XRD指纹图谱的相对峰强的相似度均>0.960 0，且能有效区分生品及不合格品。结论：温度为影响煅自然铜质量的主要因素，炮制后自然铜有效成分溶出增加，重金属及有害物质含量降低，体现炮制增效减毒的功能，优选出的炮制工艺稳定、可行。建立的煅自然铜XRD指纹图谱可作为煅自然铜质量控制标准之一。

关键词：质量源于设计自然铜炮制工艺差示热分析法 X-射线衍射法电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS) 指纹图谱

基于广泛靶向代谢组学分析仿野生附石和附木栽培金钗石斛的次生代谢产物差异

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：史一凡周昌庆王娇娇陈林陈鸿平王福胡媛刘友平成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室

目的：探析仿野生附石和附木栽培金钗石斛次生代谢产物积累差异，从而阐明石斛“唯生石上者胜”的科学内涵，为金钗石斛的栽培和品质评价提供方向。方法：采用超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱法（UPLC-QTRAP-MS/MS）广泛靶向... 详细信息

目的：探析仿野生附石和附木栽培金钗石斛次生代谢产物积累差异，从而阐明石斛“唯生石上者胜”的科学内涵，为金钗石斛的栽培和品质评价提供方向。方法：采用超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱法（UPLC-QTRAP-MS/MS）广泛靶向代谢组学技术对仿野生附石和附木栽培金钗石斛次生代谢物进行检测，结合主成分分析（PCA）、层级聚类分析（HCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）等方法对代谢物进行多元统计分析，以变量重要性投影（VIP）值≥1和差异倍数(log2FC)≥1或log2FC≤-1筛选差异代谢物，并进行京都基因与基因组百科全书（KEGG）代谢通路富集分析。结果：2种栽培模式的金钗石斛茎中共鉴定到1 267个代谢产物，以黄酮类（292个）、酚酸类（284个）和生物碱类（189个）为主；通过OPLS-DA筛选得到473个差异代谢物，附石金钗石斛上调代谢物主要为黄酮类、酚酸类、生物碱类；附木金钗石斛中上调主要为醌类和萜类，差异代谢物对表征2种栽培模式金钗石斛贡献明显；KEGG富集分析发现，仿野生附石金钗石斛在黄酮和黄酮醇生物合成、类黄酮生物合成途径发生了显著富集，进一步分析发现附石金钗石斛中，石斛酯碱、石斛胺碱、肉桂酰酪胺等生物碱及槲皮素糖苷、香叶木素糖苷、金圣草黄素糖苷等黄酮苷类化合物含量增加明显。结论：附石栽培有利于金钗石斛酚酸类、黄酮类、生物碱类化合物的积累，提示本草所载“唯生石上者胜”具有一定的科学依据，同时也为仿野生附石和附木金钗石斛的质量评价和判别研究提供参考。

关键词：金钗石斛仿野生栽培附石附木广泛靶向代谢组学超高效液相色谱-三重四极杆/线性离子阱质谱法(UPLC-QTRAP-MS/MS)

基于XRD、FTIR、TG-DTA结合化学计量学鉴别白矾与铵明矾

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：王彬张皇生李晗溪蒋家全陈鸿平王福胡媛刘友平陈林成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室

目的：利用X射线衍射法（XRD）、傅里叶变换红外光谱法（FTIR）、热重-差热法（TG-DTA）建立中药白矾的多技术特征图谱，并探索用于白矾及易混品铵明矾快速鉴别的图谱特征。方法：共收集27批来自湖南、安徽、四川、浙江、江苏、山东、... 详细信息

目的：利用X射线衍射法（XRD）、傅里叶变换红外光谱法（FTIR）、热重-差热法（TG-DTA）建立中药白矾的多技术特征图谱，并探索用于白矾及易混品铵明矾快速鉴别的图谱特征。方法：共收集27批来自湖南、安徽、四川、浙江、江苏、山东、山西、河南共8个产地的白矾样品，通过性状观察进行初步鉴别。用XRD的PDF标准卡片对白矾及铵明矾进行区分，并建立白矾的XRD特征图谱，筛选共有峰。根据聚类分析（HCA），以及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）的变量重要性投影（VIP）值>1，筛选出可用于白矾鉴别的特征信息。利用FTIR建立白矾的FTIR特征图谱，并结合HCA和OPLS-DA模型的VIP值>1筛选出可用于鉴别的特征波数。同时，通过TG-DTA分析白矾和铵明矾的热重关系差异，并筛选出可用于鉴别的热重特征。结果：仅通过性状无法有效区分白矾和铵明矾。通过XRD的PDF标准卡片比对，能够鉴别出15批白矾和12批铵明矾。在XRD图谱中，确认了10个特征峰，分别对应衍射角14.560°、24.316°、12.620°、32.122°、17.898°、34.642°、27.496°、46.048°、40.697°和21.973°；在FTIR图谱中，确定了4个波数范围(399.193～403.050 cm-1、1 186.010～1 471.420 cm-1、1 801.190～2 620.790 cm-1、3 612.020～3 997.710 cm-1)和12个特征波数(1 428.994、1 430.922、1 432.851、1 434.779、1 436.708、1 438.636、1 440.565、1 442.493、1 444.422、1 446.350、1 448.279、1 450.207 cm-1)；在TG-DTA图谱中，存在555.34 ℃附近铵明矾的铵根离子分解峰和质量降低特征。这些特征可作为白矾真伪鉴别的重要依据。结论：利用XRD、FTIR和TG-DTA可以快速检测白矾和铵明矾，结合化学计量学筛选出的鉴别特征，能够实现对白矾及伪品铵明矾的快速准确鉴别。该研究结果为白矾的快速鉴别提供了新的思路。

关键词：白矾铵明矾 X射线衍射法(XRD) 傅里叶变换红外光谱法(FTIR) 热重-差热法(TG-DTA) 真伪鉴别化学计量学

经典名方桃红四物汤抗血栓药效作用及其机制研究

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中草药 2024年

作者：马川吴彦欣李敏敏何小芳李如萍何瑶杜克群西南特色中药资源国家重点实验室成都中医药大学药学院

目的探讨桃红四物汤（Taohong Siwu Decoction,THSWD）抗血栓形成的药理作用及机制。方法通过ip卡拉胶溶液（10 mL/kg）建立小鼠血栓模型，将小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组和THSWD低、中、高剂量（7.74、15.48、30.96g/kg）... 详细信息

目的探讨桃红四物汤（Taohong Siwu Decoction,THSWD）抗血栓形成的药理作用及机制。方法通过ip卡拉胶溶液（10 mL/kg）建立小鼠血栓模型，将小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组和THSWD低、中、高剂量（7.74、15.48、30.96g/kg）组，观察小鼠黑尾长度，检测血清和肝脏中相关因子；同时，进行凝血酶诱导血小板激活和脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVECs）损伤体外实验，检测血小板和内皮细胞中相关因子，观察THSWD对血小板和内皮细胞黏附作用的影响。结果与模型组比较，THSWD各剂量组可显著减少小鼠体内的血栓并显著降低小鼠肝脏中高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)的水平（P实验发现，THSWD可升高血小板中超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的水平（P<0.01）、抑制血小板凝块收缩、降低细胞外调节蛋白激酶1/2(extracellular-regulated kinase 1/2,ERK1/2)和HMGB1的蛋白表达（P<0.05）、有降低蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)蛋白表达的趋势；THSWD能显著降低LPS诱导的HUVECs损伤过程中活性氧（reactive oxygen species,ROS）的水平（P<0.01）、抑制相关黏附因子血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达、减少HUVECs与血小板的黏附（P<0.05、0.01）。结论 THSWD可通过抑制炎症反应、促进纤维蛋白酶原激活剂生成、抑制氧化应激反应、抑制血小板激活、抑制内皮细胞损伤及与血小板的黏附发挥抗血栓作用。

关键词：经典名方桃红四物汤抗炎氧化应激抗血栓地黄苷D 阿魏酸芍药苷苦杏仁苷羟基红花黄色素A

金茵清热口服液通过NF-κB/NLRP3信号通路改善小鼠急性肺损伤

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医药导报 2024年第4期43卷 520-525页

作者：王淑惠李小兵沈婷雷攀刘泽干杜士明湖北医药学院药学院十堰442000 湖北医药学院附属太和医院呼吸与危重症医学科十堰442000 湖北中医药大学药学院武汉430065 湖北医药学院附属太和医院科研处十堰442000 武当特色中药研究湖北省重点实验室·湖北医药学院十堰442000

目的探究金茵清热口服液对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为6组:空白对照组、模型对照组、金茵清热口服液小剂量组、金茵清热口服液中剂量组、金茵清热口服液大剂量组和地塞米松组... 详细信息

目的探究金茵清热口服液对脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。方法C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为6组:空白对照组、模型对照组、金茵清热口服液小剂量组、金茵清热口服液中剂量组、金茵清热口服液大剂量组和地塞米松组。除空白对照组,其他各组气管滴注LPS溶液(5 mg·kg^(-1))构建小鼠急性肺损伤模型,金茵清热口服液低中高组连续灌胃给药3 d。24 h后,6组分别取小鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar larage fluid,BALF)进行后续检测,HE染色观察各组小鼠肺组织病理损伤;检测肺泡灌洗液总细胞数;BCA法检测BALF的总蛋白含量;ELISA法检测BALF中炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和免疫球蛋白M(IgM)的含量;免疫组化和Western blotting法检测肺组织核因子κB(NF-κB)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)蛋白的表达情况。结果与模型对照组比较,金茵清热口服液减轻了肺组织的病理学损伤(P<0.05),降低了肺泡灌洗液中总细胞数、总蛋白含量和IgM的表达(P<0.05),肺泡灌洗液中炎性细胞因子的TNF-α、IL-6和IL-1β的表达(P<0.01),肺组织NF-κB、NLRP3蛋白表达(P<0.05)。结论金茵清热口服液减轻了LPS诱导小鼠肺损伤的病理损伤,降低了炎性渗出和炎性细胞因子的表达,其作用机制可能是通过调控NF-κB/NLRP3信号通路,为其临床应用提供理论依据。

关键词：金茵清热口服液脂多糖急性肺损伤 NF-κB/NLRP3信号通路炎症反应

商陆属植物的化学成分、药理作用、毒性及重金属富集特性研究进展

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中国中药杂志 2024年第16期49卷 4359-4371页

作者：柴雪赵宏李晓亮佳木斯大学药学院黑龙江佳木斯154000 海南医学院、药学院、热带转化医学教育部重点实验室、海南省热带药用植物研究开发重点实验室、海口市黎族医药重点实验室海南海口571199

在我国,商陆属植物商陆Phytolacca acinosa或垂序商陆***的干燥根被列为中药商陆。商陆属植物含有三萜类、三萜皂苷类、多糖类、抗病毒蛋白类、黄酮类等多种化学成分,其中最主要的是三萜类及三萜皂苷类化合物。商陆属植物具有抗炎、抗... 详细信息

在我国,商陆属植物商陆Phytolacca acinosa或垂序商陆***的干燥根被列为中药商陆。商陆属植物含有三萜类、三萜皂苷类、多糖类、抗病毒蛋白类、黄酮类等多种化学成分,其中最主要的是三萜类及三萜皂苷类化合物。商陆属植物具有抗炎、抗肿瘤、抗细菌、抗真菌、抗疟、驱虫等活性。该文对近年来商陆属植物的化学成分、药理作用、毒性及重金属富集特性进行了归纳整理,以期为商陆属植物的活性成分研究和药物开发提供理论依据。

关键词：商陆属化学成分药理作用毒性重金属富集特性

生物传感器分析技术及其在阿尔茨海默病药物研发中的研究进展

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药学学报 2024年第3期59卷 554-564页

作者：沈淑琦方家豪王辉晁亮游飘雪洪战英海军军医大学药学院上海市药物(中药)代谢产物重点实验室上海200433 福建中医药大学药学院福建福州350122

生物传感器分析技术是一类可将生物反应转换为光电信号的高特异性技术,在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)药物研发中,针对AD不同假说、不同靶点,该技术在确证靶标、筛选活性化合物方面发挥了重要作用。该文简述AD发病机制与治疗... 详细信息

生物传感器分析技术是一类可将生物反应转换为光电信号的高特异性技术,在阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)药物研发中,针对AD不同假说、不同靶点,该技术在确证靶标、筛选活性化合物方面发挥了重要作用。该文简述AD发病机制与治疗药物现况,重点介绍了AD药物研发中常用的表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)、生物膜干涉技术(biolayer interferometry,BLI)与荧光分析技术这三类生物传感器分析技术,阐释其基本原理及其应用进展,并总结各自的优势与局限。

关键词：阿尔茨海默病生物传感器表面等离子共振技术生物膜干涉技术荧光分析技术药物筛选

糖代谢重编程及其靶向治疗药物在炎症相关疾病中的作用

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药学学报 2024年第3期59卷 511-519页

作者：未怡江小慢夏仕林许静李雅邓然王言吴虹安徽中医药大学药学院新安医学教育部重点实验室中药研究与开发安徽省重点实验室安徽合肥230012 安徽中医药大学中西医结合学院安徽合肥230012

细胞在炎性微环境影响下发生糖代谢重编程,使其主要供能方式由氧化磷酸化转变为有氧糖酵解,该过程参与炎症相关疾病发生发展的各个阶段。糖代谢重编程不仅改变单个细胞的代谢模式,而且打破了机体微环境的代谢稳态,进一步促进细胞有氧糖... 详细信息

细胞在炎性微环境影响下发生糖代谢重编程,使其主要供能方式由氧化磷酸化转变为有氧糖酵解,该过程参与炎症相关疾病发生发展的各个阶段。糖代谢重编程不仅改变单个细胞的代谢模式,而且打破了机体微环境的代谢稳态,进一步促进细胞有氧糖酵解,为炎症相关疾病的恶性进展提供有利条件。有氧糖酵解的相关代谢酶、转运蛋白、代谢产物等均为关键信号分子,药物通过靶向这些特异性强的关键分子,抑制有氧糖酵解从而发挥治疗作用。本文围绕糖代谢重编程对炎症相关肿瘤、类风湿关节炎、阿尔茨海默病等炎症相关疾病发生发展的影响以及药物靶向糖代谢重编程对疾病的治疗作用展开综述。

关键词：糖代谢重编程有氧糖酵解炎症相关疾病炎性微环境靶向治疗

IRES核心区12-bp非连续插入突变对猪塞内卡病毒复制和细胞嗜性的影响

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中国农业科学 2024年第7期57卷 1407-1416页

作者：张晓战董轩志吕楠楠刘懿雯马新甜王林青夏艳勋蒋增海郭运泽赵攀登宋予震杨德成边传周河南牧业经济学院动物医药学院郑州师范学院/分子生物学郑州市重点实验室中国农业科学院哈尔滨兽医研究所/动物疫病防控全国重点实验室

【背景】塞内卡病毒（senecavirus A, SVA）是新近暴发的一种引起猪特发性水疱病及仔猪死亡的小核糖核酸病毒。该病毒基因组5′非编码区（untranslated region, UTR）中的内部核糖体进入位点（IRES）元件在病毒复制过程中发挥重要作用。... 详细信息

【背景】塞内卡病毒（senecavirus A, SVA）是新近暴发的一种引起猪特发性水疱病及仔猪死亡的小核糖核酸病毒。该病毒基因组5′非编码区（untranslated region, UTR）中的内部核糖体进入位点（IRES）元件在病毒复制过程中发挥重要作用。2017年我国出现IRES核心区Domain II 12个碱基非连续插入的自然突变SVA毒株，在病毒复制和致病性方面存在明显改变。【目的】探讨IRES Domain II区域发生的突变对SVA的复制及细胞嗜性的影响，为进一步了解SVA致病机制奠定基础。【方法】以实验室前期构建的含HeN-1/2018株全基因组感染性克隆pHeN-1/2018为基础，通过定点突变的方式，逐步将其IRES Domain II核心区域308—317 nt的9个碱基（ACTCAAGCG）替换为GD04/2017株基因组308—328 nt的21个碱基（CACGCCTGCCGATAGACGATT），构建重组载体pHeN-1/2018-i12并进行了病毒拯救。随后，利用病毒基因组克隆测序、间接免疫荧光试验和Western blot试验对所拯救病毒进行鉴定，同时验证了IRES核心区12个碱基插入突变对SVA病毒体外复制能力和细胞嗜性的影响。【结果】将构建完成的重组载体pHeN-1/2018-i12转染细胞，盲传至P2代，获得致使感染细胞病变明显、病变时间稳定的IRES突变病毒rHeN-1/2018-i12。病毒连续传代后测序结果表明rHeN-1/2018-i12遗传稳定，P5代病毒基因组序列未发生碱基突变，P10代病毒IRES区域没有出现突变现象。用低代次的突变病毒rHeN-1/2018-i12体外感染本体动物猪源细胞系PK-15和IBRS-2，及仓鼠源细胞系BHK-21，进行细胞感染试验，结果表明rHeN-1/2018-i12与亲本毒株rHeN-1/2018在PK-15、IBRS-2和BHK-21中均能导致明显的细胞病变，表现出相似的生长曲线趋势，表明IRES核心区Domain II 12个碱基突变不能够改变对上述细胞的嗜性；但SVA突变病毒和亲本株在不同细胞中的病变时间及病毒滴度上存在较大的差异，rHeN-1/2018-i12株在细胞中生长能力较其亲本株rHeN-1/2018差，诱使细胞病变的时间较晚，在感染24 hpi，两者病毒滴度相差可达10倍。【结论】本研究基于SVA反向遗传操作系统构建并拯救SVA IRES突变毒株，确定了IRES突变对SVA生物学特性的影响，有助于我们更好地了解SVA致病机制，拓宽我们对病毒IV型IRES功能的认识。

关键词：塞内卡病毒内部核糖体进入位点反向遗传操作系统病毒复制细胞嗜性