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川西小黄菊HPLC指纹图谱建立及7种成分含量测定

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中成药 2024年第6期46卷 1794-1799页

作者：李蕊陈文莉康点点孙杰玉孙泽元古锐蒋桂华成都中医药大学药学院西南特色中药资源国家重点实验室/中药材标准化重点实验室四川成都611137 成都中医药大学民族医药学院四川成都611137

目的建立川西小黄菊HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法分析采用Agilent ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 m... 详细信息

目的建立川西小黄菊HPLC指纹图谱,并测定绿原酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷、芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法分析采用Agilent ZORBAX Extend C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,0.5μm);流动相0.5%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温35℃;检测波长350 nm。再进行主成分分析、偏最小二乘法判别分析和聚类分析。结果14批样品指纹图谱中有12个共有峰,相似度0.761~0.975。7种成分在各自范围内线性关系良好(R^(2)≥0.9991),平均加样回收率84.00%~105.11%,RSD 1.28%~2.86%。各批样品聚为3类,发现7种差异成分,包括峰4(木犀草素-7-O-葡萄糖苷)、12(芹菜素)、9(芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、8、11(木犀草素)、5(木犀草素-7-O-葡萄糖醛酸苷)、2。结论该方法精密稳定,专属性强,重复性好,可用于川西小黄菊的质量控制。

关键词：川西小黄菊 HPLC指纹图谱化学成分含量测定主成分分析偏最小二乘法判别分析聚类分析

1β-/3R-芳基硫代糖的区域与立体选择性合成

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有机化学 2024年第2期44卷 593-604页

作者：邹发凯王能中姚辉王慧刘明国黄年玉三峡大学生物与制药学院天然产物研究与利用湖北省重点实验室中国轻工业功能酵母重点实验室湖北宜昌443002

硫代糖因具有优良的生物活性在生物医药领域备受关注,化学合成是得到硫代糖的重要途径.采用6-膦酸酯3,4-碳酸酯半乳烯糖和硫酚为原料,分别以Pd_(2)(dba)_(3)和NiBr_(2)为催化剂调控了1β-芳基硫代糖和(3R)-芳基硫代糖的区域和立体选择... 详细信息

硫代糖因具有优良的生物活性在生物医药领域备受关注,化学合成是得到硫代糖的重要途径.采用6-膦酸酯3,4-碳酸酯半乳烯糖和硫酚为原料,分别以Pd_(2)(dba)_(3)和NiBr_(2)为催化剂调控了1β-芳基硫代糖和(3R)-芳基硫代糖的区域和立体选择性合成.目标化合物的结构通过核磁共振、高分辨质谱和单晶X射线衍射进行了表征.该合成方法对各类官能团取代的硫酚都有良好的兼容性,可用于活性天然产物的硫糖基化修饰,为1β-/(3R)-芳基硫代糖化合物库的快速构建和药物发现提供了新方法.

关键词： Pd催化 Ni催化 D-半乳糖硫代糖合成

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人参二醇衍生物的合成及其细胞毒活性研究

中国现代应用药学 2024年第13期41卷 1765-1774页

作者：蒲洪董成梅邹澄赵庆段文越陈艳梅张莲卿胡建林湖南医药学院药学院中药合成生物学研究湖南省重点实验室湖南怀化418000 昆明医科大学药学院云南省天然药物药理重点实验室昆明650500 昆明卫生职业学院药学院昆明650600 云南中医药大学中药学院昆明650500

目的制备细胞毒活性更强的人参二醇衍生物。方法利用生物电子等排原理制备3位氨基-人参二醇,再合成人参二醇3位氨基的肉桂酸类、NO供体类衍生物以及其他类型的人参二醇衍生物18个,其中有12个化合物未见文献报道,其结构均经过^(1)H-NMR... 详细信息

目的制备细胞毒活性更强的人参二醇衍生物。方法利用生物电子等排原理制备3位氨基-人参二醇,再合成人参二醇3位氨基的肉桂酸类、NO供体类衍生物以及其他类型的人参二醇衍生物18个,其中有12个化合物未见文献报道,其结构均经过^(1)H-NMR、^(13)C-NMR、质谱确证。这些化合物中的16个化合物用MTS法对人白血病细胞株HL-60、肝癌细胞株SMMC-7721、肺癌细胞株A-549、乳腺癌细胞株MCF-7、结肠癌细胞株SW480等肿瘤细胞株进行细胞毒活性评价。结果药理活性评价结果显示,化合物6c、7以及7j对5株肿瘤细胞均有较强的抑制活性,特别是化合物7对HL-60与SMMC-7721细胞抑制的IC_(50)值分别为3.41、4.51μmol·L^(-1),显著优于人参二醇的细胞毒活性。结论 7和7j可以作为先导化合物进行更深入的研究。

关键词：人参二醇生物电子等排体 NO供体肉桂酸衍生物细胞毒活性

当归芍药散对肾病综合征大鼠水肿的改善作用及机制

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中国药理学通报 2024年第6期40卷 1172-1178页

作者：马晓雯范胜楠许在平项庆镇宣自华王运来许钒安徽中医药大学药学院中药复方安徽省重点实验室安徽合肥230012

目的探究当归芍药散对肾病综合征大鼠水肿的改善作用及作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、当归芍药散组(17.2 g·kg^(-1)·d^(-1))、氯沙坦组(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))、托伐普坦组(3 mg·kg^(-1)·d^(-1))。尾静脉注射阿霉... 详细信息

目的探究当归芍药散对肾病综合征大鼠水肿的改善作用及作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、当归芍药散组(17.2 g·kg^(-1)·d^(-1))、氯沙坦组(30 mg·kg^(-1)·d^(-1))、托伐普坦组(3 mg·kg^(-1)·d^(-1))。尾静脉注射阿霉素建立肾病综合征大鼠模型。给药4周后,检测各组大鼠肾功能指标及24 h尿蛋白含量变化;免疫组化法检测肾组织中水通道蛋白2(aquaporin 2,AQP2)和pS256-AQP2的分布;放射免疫法测定血浆精氨酸加压素(arginine vasopressin,AVP)和血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)水平;Western blot和RT-PCR法分别检测肾脏AQP2、pS256-AQP2、血管紧张素1型受体(angiotensin type 1 receptor,AT1R)、精氨酸加压素受体2(arginine vasopressin receptor 2,V2R)蛋白及mRNA的表达。结果3种药物均可改善肾病综合征大鼠肾功能,减轻蛋白尿,降低血浆AVP及AngⅡ水平,下调AQP2、pS256-AQP2蛋白和mRNA表达。当归芍药散与托伐普坦对于降低血浆AVP水平的效果优于氯沙坦。结论当归芍药散可能通过降低AVP及AngⅡ水平,进而调节AQP2的表达,改善肾病综合征大鼠水肿。

关键词：肾病综合征水肿水通道蛋白2 精氨酸加压素血管紧张素Ⅱ 当归芍药散

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白鹤灵芝化学成分及其体外抗肿瘤与降脂活性研究

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中成药 2024年第8期46卷 2630-2637页

作者：龚志强肖阳韩沙刘颖齐晋霍宇黄艳红杨立芳广西中医药大学赛恩斯新医药学院瑶医药学院广西壮瑶药重点实验室广西南宁530200 广西民族大学化学化工学院广西林产化学与工程重点实验室广西南宁530008

目的研究白鹤灵芝的化学成分及其体外抗肿瘤与降脂活性。方法白鹤灵芝乙酸乙酯部位采用正相、反相硅胶柱和半制备HPLC分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法测定体外抗肿瘤活性,采用油酸诱导的HepG2高脂细胞... 详细信息

目的研究白鹤灵芝的化学成分及其体外抗肿瘤与降脂活性。方法白鹤灵芝乙酸乙酯部位采用正相、反相硅胶柱和半制备HPLC分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法测定体外抗肿瘤活性,采用油酸诱导的HepG2高脂细胞模型评价体外降脂活性。结果从中分离得到20个化合物,分别鉴定为rhinacanthin A(1)、rhinacanthin B(2)、rhinacanthin C(3)、rhinacanthin D(4)、rhinacanthin E(5)、rhinacanthin M(6)、rhinacanthin N(7)、rhinacanthin Q(8)、rhinacanthin T(9)、rhinacanthone(10)、β-谷甾醇(11)、没食子酸(12)、香草酸(13)、丁香酸(14)、拉帕醇(15)、伞形花内酯(16)、sambucunlin A(17)、17α,21-dihydroxy-1,4-pregnadiene-3,11,20-trione,21-acetate(18)、1,8-二羟基蒽醌(19)、2,6-二甲氧基-1,4-苯醌(20)。化合物3、7抑制HepG2、Hela、A549、H22肿瘤细胞增殖的IC_(50)值为(0.66±0.17)~(3.22±0.49)μmol/L,且呈时间和浓度依赖性;化合物3、7、9对油酸诱导的HepG2高脂细胞脂质的清除率高达50%以上。结论化合物16~20为首次从该植物中分离得到。化合物3、7具有良好的体外抗肿瘤活性,3、7、9具有较好的体外降脂活性。

关键词：白鹤灵芝化学成分分离鉴定抗肿瘤降脂

美洲大蠊粪便中微生物的分离和鉴定及其抗菌活性分析

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昆虫学报 2024年第9期67卷 1190-1199页

作者：官婷婷许文慧肖光帅杨大松杨银河大理大学药学院云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

【目的】探究美洲大蠊Periplaneta americana粪便中具有抗菌活性的真菌和放线菌,为抗菌药物的开发提供微生物来源。【方法】利用稀释涂布法与选择培养法,从云南省大理白族自治州巍山县美洲大蠊养殖场收集的美洲大蠊成虫粪便中分离纯化... 详细信息

【目的】探究美洲大蠊Periplaneta americana粪便中具有抗菌活性的真菌和放线菌,为抗菌药物的开发提供微生物来源。【方法】利用稀释涂布法与选择培养法,从云南省大理白族自治州巍山县美洲大蠊养殖场收集的美洲大蠊成虫粪便中分离纯化放线菌和真菌;采用牛津杯琼脂扩散法检测菌株代谢产物对6种病原细菌大肠杆菌Escherichia coli、粪肠球菌Enterococcus faecalis、金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant ***)、铜绿假单胞菌Pseudomonas aeruginosa和鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium的抗菌活性;通过16S rDNA和ITS rDNA基因测序鉴定抗菌活性菌株,并利用邻接法构建抗菌活性菌株系统发育树。【结果】从美洲大蠊成虫粪便中分离出真菌17株,放线菌19株。共有6株真菌和12株放线菌表现出不同程度的抗菌活性,其中真菌EPAF15-EPAF17及放线菌EPAA12和EPAA17对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和鼠伤寒沙门氏菌表现出较为广谱的抗菌活性。系统发育分析显示,具有抗菌活性的真菌隶属于镰刀菌属Fusarium、生丝毕赤酵母属Hyphopichia和丝孢酵母属Trichosporon;具有抗菌活性的放线菌隶属于链霉属Streptomyces。【结论】美洲大蠊成虫粪便中具有种类丰富的可培养微生物,其中的抗菌活性真菌和放线菌的发现不仅能作为进一步深入挖掘新型抗菌活性天然药物的重要微生物储备资源,也为特境微生物资源的充分利用提供了新的思路。

关键词：美洲大蠊粪便真菌放线菌抗菌活性分子鉴定系统发育

唐古特大黄FTIR的双指标序列分析及抗炎谱效关系研究

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光谱学与光谱分析 2024年第1期44卷 188-196页

作者：郭亚菲曹强叶蕾蕾张成园寇仁博王君梅郭玫甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730000 甘肃省高校中(藏)药化学与质量研究省级重点实验室甘肃兰州730000

对于中药材的质量控制研究是中医药现代化的主要研究内容之一。唐古特大黄是一种常用中药,目前对唐古特大黄的质量控制研究多集中在总蒽醌类成分、游离蒽醌类成分以及指纹图谱,基于抗炎效果的质量标准研究尚为少数。采集不同产地、不同... 详细信息

对于中药材的质量控制研究是中医药现代化的主要研究内容之一。唐古特大黄是一种常用中药,目前对唐古特大黄的质量控制研究多集中在总蒽醌类成分、游离蒽醌类成分以及指纹图谱,基于抗炎效果的质量标准研究尚为少数。采集不同产地、不同采收时间的18批唐古特大黄药材,对其粉末进行傅里叶变换红外光谱(FTIR)研究,发现16个共有峰,18批次之间具有较高的相似性(0.798~0.900),相同产地(甘南产、青海产)的唐古特大黄相似度较高(相似度大于0.900的达80%以上),但两产地之间的相似度相对较低(相似度大于0.900的仅为69.44%),结合聚类分析发现不同产地唐古特大黄FTIR谱图存在一定差异性,产地可能是主要影响因素。建立双指标分析序列,可在一定程度上区分药材不同产地。脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞建立炎性细胞模型,以NO抑制率作为炎性指标,测定不同批次唐古特大黄的NO抑制率。以共有峰透过率作为X, NO抑制率作为Y,采用SMICA14.1软件构建PLSR模型建立谱效关系,谱图中X_(14)、X_(15)、X_(11)、X_(2)四个共有峰VIP>1,其中X_(2)与抗炎效果呈正相关关系,X_(14)、X_(15)、X_(11)与抗炎效果现负相关关系。进一步建立数学模型得共有峰(X)与NO抑制率(Y)的关系Y=237.618+2.992X_(2)-0.845X_(4)+2.979X_(6)-3.722X_(7)+0.433X_(8)-0.957X_(12)-0.759X_(14)-0.632X_(15)(p=0.003<0.01,R=0.935),p<0.01代表构建数学模型有意义,R=0.935代表所构建数学模型可解释93.5%的数据。可知X_(2)、X_(6)与抗炎效果呈正相关关系,X_(4)、X_(7)与抗炎效果呈负相关关系,可预测体外抗炎效果,准确率达93.5%,但由于样本量过小,仅可用于解释本研究纳入数据。X_(6)是由甲基的β(C—H)产生,可能与大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素等蒽醌类成分有关。该研究将抗炎活性与红外光谱数据相结合,引入唐古特大黄质量评价体系,为唐古特大黄产业的健康发展提供新思路。

关键词：唐古特大黄傅里叶变换红外光谱双指标序列聚类分析抗炎谱效关系

HPLC法同时测定白鹤灵芝茎叶及根中9个成分含量

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中药材 2024年 1472-1476页

作者：韩沙张译霍宇蒙田秀黄艳红黄敏龚志强广西中医药大学瑶医药学院广西壮瑶药重点实验室广西中医药大学赛恩斯新医药学院

目的:建立HPLC法同时测定白鹤灵芝中白鹤灵芝素-A、白鹤灵芝素-E、heliobuphthalmin、2,2-dipheny-2H-benzo chromene、白鹤灵芝素-D、白鹤灵芝素-Q、白鹤灵芝素-B、白鹤灵芝素-C、白鹤灵芝素-N的含量。方法:色谱柱为Phenomenex Luna C1... 详细信息

目的:建立HPLC法同时测定白鹤灵芝中白鹤灵芝素-A、白鹤灵芝素-E、heliobuphthalmin、2,2-dipheny-2H-benzo chromene、白鹤灵芝素-D、白鹤灵芝素-Q、白鹤灵芝素-B、白鹤灵芝素-C、白鹤灵芝素-N的含量。方法:色谱柱为Phenomenex Luna C18（250 mm×4.6 mm,5μm）柱;流动相为0.1%三氟乙酸溶液-乙腈（20∶80）;流速为1.0m L/min;检测波长为250 nm;柱温为25℃;进样量为10μL。结果:白鹤灵芝中上述9个成分均在一定的浓度范围内与峰面积的线性关系良好（r≥0.9990）;平均加样回收率分别为97.08%、97.52%、97.84%、97.20%、98.04%、97.13%、99.50%、101.41%、97.59%,RSD分别为1.04%、1.38%、2.14%、2.31%、1.49%、0.98%、2.30%、1.21%、1.37%。白鹤灵芝茎叶中上述9个成分的平均含量分别为0.0511、0.1057、0.0574、0.0467、0.0486、0.0502、0.0808、0.1745、0.0504 mg/g,根中上述9个成分平均含量分别为0.0457、0.3764、0.1588、0.0612、0.0913、0.3536、0.3678、1.5966、0.3011 mg/g,根中上述成分（白鹤灵芝素-A除外）平均含量高于茎叶。结论:该研究建立的白鹤灵芝中9个成分的含量测定方法简便、准确、重复性好,可为其药用部位合理选用及质量评价提供参考。

关键词：白鹤灵芝 HPLC 含量测定药用部位

香砂六君子汤合除痰解毒中药对Lewis肺癌小鼠免疫逃逸的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第7期30卷 78-86页

作者：杨倩王淑美冯诗函詹雪夏琳涛吴明星中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室重庆400016 重庆医科大学中医药学院重庆400016

目的:观察香砂六君子汤合除痰解毒中药对Lewis肺癌小鼠免疫逃逸的作用及机制。方法:取60只SPF级C57BL/6J雄鼠,于右侧腋中线皮下注射Lewis细胞悬液0.2 m L(含细胞数2×10^(6)个/m L),接种7 d后,将造模成功的小鼠随机分为模型组、顺铂组... 详细信息

目的:观察香砂六君子汤合除痰解毒中药对Lewis肺癌小鼠免疫逃逸的作用及机制。方法:取60只SPF级C57BL/6J雄鼠,于右侧腋中线皮下注射Lewis细胞悬液0.2 m L(含细胞数2×10^(6)个/m L),接种7 d后,将造模成功的小鼠随机分为模型组、顺铂组、香砂六君子汤低、中、高剂量组、联合组,每组10只。香砂六君子汤低、中、高剂量组分别灌胃17.88、35.75、71.50 g·kg^(-1)香砂六君子汤加减溶液,1次/d,顺铂腹腔注射小鼠用量换算为5 mg·kg^(-1),2次/周,各组均连续干预14 d,每2 d测量肿瘤体积。治疗结束后称取各组小鼠肿瘤质量并计算抑瘤率;苏木素-伊红(HE)染色观察各组肿瘤的形态学特征;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组肿瘤组织中自然杀伤(NK)细胞杀伤受体2(NKG2D)、核糖核酸输出因子-1(RAE-1)、γ干扰素(IFN-γ)mRNA含量;免疫组化法(IHC)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组肿瘤RAE-1、NKG2D、IFN-γ表达;Western blot检测各组小鼠肿瘤中IL-6、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3及脾脏组织中NKG2D、RAE-1蛋白含量。结果:与模型组比较,香砂六君子汤各剂量组肿瘤质量均下降,差异无统计学意义;肿瘤体积均缩小(P<0.05,P<0.01);病理学形态改善;香砂六君子汤中剂量组NKG2D、RAE-1、IFN-γ mRNA含量均升高(P<0.05,P<0.01),肿瘤组织中NKG2D、RAE-1、IFN-γ蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01),p-JAK2、p-STAT3蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01);脾脏组织中,香砂六君子汤各剂量组NKG2D、RAE-1蛋白表达均显著升高(P<0.01)。与顺铂组比较,香砂六君子汤中剂量组NKG2D、RAE-1、IFN-γ mRNA含量升高,差异无统计学意义;IHC显示联合组NKG2D、IFN-γ蛋白表达显著升高(P<0.01),Western blot结果表明RAE-1、NKG2D、IFN-γ蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);联合组p-JAK2、p-STAT3蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01);脾脏组织中,香砂六君子汤中剂量组、联合组NKG2D、RAE-1蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论:香砂六君子汤合除痰解毒中药能够通过上调RAE-1/NKG2D表达,促进NK细胞活化,抑制免疫逃逸,抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,其机制可能与下调JAK2/STAT3通路相关。

关键词：香砂六君子汤 Lewis肺癌免疫逃逸 NK细胞杀伤受体2(NKG2D) 核糖核酸输出因子-1(RAE-1)