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甘肃一起小反刍兽疫病例中流行毒株的生物学特性和遗传进化分析

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中国兽医科学 2025年

作者：刘萍杜国玉柳周斌聂帅帅吴锦艳曹小安何继军尚佑军中国农业科学院兰州兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室庄浪县通化镇畜牧兽医站

2023年11月，甘肃省临夏市某羊场羔羊死亡，根据临床症状、病理剖检及实时荧光定量RT-PCR结果诊断为小反刍兽疫病毒（PPRV）感染。采用RT-PCR扩增PPRV流行株全基因组序列，比对分析全基因组及其F基因、H基因和N基因序列，绘制进化树。... 详细信息

2023年11月，甘肃省临夏市某羊场羔羊死亡，根据临床症状、病理剖检及实时荧光定量RT-PCR结果诊断为小反刍兽疫病毒（PPRV）感染。采用RT-PCR扩增PPRV流行株全基因组序列，比对分析全基因组及其F基因、H基因和N基因序列，绘制进化树。为探讨不同滴度PPRV疫苗毒株Nigeria75/1对绵羊外周血单个核细胞（PBMCs）增殖和分化的影响，采用CCK-8检测PBMCs的增殖情况，流式细胞术对CD4+和CD8+T淋巴细胞进行分型分析。结果显示，PPRV流行毒株基因组全长15954 bp，属于基因Ⅳ型；该流行毒株与2013-2014年小反刍兽疫疫情分离毒株China/XJYL/2013、China/3/2013及China/GS/2018亲缘关系最近。另外，不同滴度的PPRV疫苗毒株Nigeria75/1均抑制绵羊PBMCs体外增殖，且高滴度的PPRV疫苗毒株抑制CD4+和CD8+T淋巴细胞的分化。以上结果表明，引起此次PPRV感染的毒株可能来源于2013—2014年小反刍兽疫疫情。PPRV疫苗重复免疫或高剂量免疫可能是造成我国PPRV疫苗免疫后仍然会感染和发病的原因。

关键词：病理剖检小反刍兽疫病毒遗传进化分析流行病学

复合植物精油和丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能以及血浆生化、抗氧化和免疫指标的影响

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动物营养学报 2025年

作者：方桂友刘景俞清霞陈鑫珠缪伏荣董志岩福建省农业科学院畜牧兽医研究所福州市畜牧站

本试验旨在探究饲粮添加复合植物精油和丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能以及血浆生化、抗氧化和免疫指标的影响。选取250头初始体重为(6.48±0.42) kg的“杜长大”三元杂交断奶仔猪[断奶日龄为(25±3)日龄],随机分成5个组,每组5个重复,每个... 详细信息

本试验旨在探究饲粮添加复合植物精油和丁酸梭菌对断奶仔猪生长性能以及血浆生化、抗氧化和免疫指标的影响。选取250头初始体重为(6.48±0.42) kg的“杜长大”三元杂交断奶仔猪[断奶日龄为(25±3)日龄],随机分成5个组,每组5个重复,每个重复10头猪(公母各5头)。负对照组(NC组)饲喂低蛋白质氨基酸平衡基础饲粮(不添加抗生素,饲粮粗蛋白质水平为17.72%),正对照组(抗生素组,PC组)饲喂基础饲粮+20 mg/kg硫酸黏杆菌素+50 mg/kg杆菌肽锌+75 mg/kg金霉素,试验1组(T1组)饲喂基础饲粮+500 mg/kg复合植物精油,试验2组(T2组)饲喂基础饲粮+500 mg/kg丁酸梭菌,试验3组(T3组)饲喂基础饲粮+500 mg/kg复合植物精油+500 mg/kg丁酸梭菌。预试期3 d,正试期16 d。结果表明:1)与NC组相比,PC组和T3组平均日增重(ADG)极显著提高(P0.05)。2)与NC组相比,PC组、T1组、T2组和T3组血浆二胺氧化酶(DAO)活性和内毒素含量显著降低(P0.05)。综上所述,在低蛋白质氨基酸平衡饲粮中添加复合植物精油和丁酸梭菌均可提高断奶仔猪ADG,降低腹泻率,改善肠道黏膜屏障功能,并增强机体抗氧化能力和免疫功能,且二者联合添加效果优于单一添加,与复合抗生素效果相近。

关键词：复合植物精油丁酸梭菌断奶仔猪生长性能血浆生化指标抗氧化免疫

不同来源功能性寡糖对奶牛体外瘤胃发酵产气参数、发酵参数和微生物区系的影响

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动物营养学报 2025年

作者：郭芸芳常帅飞程雨辰李彩琴刘小女徐晓锋张力莉宁夏大学动物科技学院庄浪县畜牧兽医中心

本试验旨在研究不同来源功能性寡糖对奶牛体外瘤胃发酵产气参数、发酵参数和微生物区系的影响。采用体外瘤胃发酵法,以苜蓿干草为发酵底物,选取大豆寡糖、壳寡糖和甘露寡糖,并分别添加0（对照）、0.5%、1.5%和3.0%,每个处理6个重复。结... 详细信息

本试验旨在研究不同来源功能性寡糖对奶牛体外瘤胃发酵产气参数、发酵参数和微生物区系的影响。采用体外瘤胃发酵法,以苜蓿干草为发酵底物,选取大豆寡糖、壳寡糖和甘露寡糖,并分别添加0（对照）、0.5%、1.5%和3.0%,每个处理6个重复。结果表明:1)体外瘤胃发酵48 h产气快速产气部分按甘露寡糖<大豆寡糖<壳寡糖的顺序依次显著升高（P<0.05）,慢速产气部分和潜在产气量按壳寡糖<甘露寡糖<大豆寡糖的顺序依次显著升高（P<0.05）,产气速率按壳寡糖<大豆寡糖<甘露寡糖的顺序依次显著升高（P<0.05）。当添加水平为3.0%时,3种寡糖慢速产气部分、产气速率和潜在产气量均显著高于对照处理（P<0.05）,而快速产气部分显著低于对照处理（P<0.05）。2)3种寡糖的添加水平显著影响体外瘤胃发酵总挥发性脂肪酸（TVFA）和氨态氮（NH3-N）)含量（P<0.05）,当添加水平为3.0%时TVFA含量最高,NH3-N含量最低,显著高于（或低于）对照处理和0.5%添加水平处理（P<0.05）。3)与对照处理相比,添加3.0%大豆寡糖和3.0%壳寡糖显著提高体外瘤胃发酵微生物群落Shannon指数（P<0.05）;添加3.0%壳寡糖和3.0%甘露寡糖均显著提高厚壁菌门相对丰度（P<0.05）,显著降低变形菌门相对丰度（P<0.05）;添加3.0%大豆寡糖和3.0%壳寡糖均显著提高拟杆菌门相对丰度（P<0.05）;添加3.0%的3种寡糖均显著降低埃希氏-志贺氏菌属相对丰度（P<0.05）,添加3.0%大豆寡糖显著提高链球菌属和柠檬酸杆菌属相对丰度（P<0.05）,添加3.0%壳寡糖显著提高月形单胞菌属1相对丰度（P<0.05）,添加3.0%甘露寡糖显著提高瘤胃球菌属、链球菌属和克里斯滕森菌科R-7群相对丰度（P<0.05）。综上所述,在本试验条件下,添加不同来源功能性寡糖对体外瘤胃发酵模式和挥发性脂肪酸生成均产生一定影响,且呈剂量依赖趋势提高瘤胃发酵效率;添加3.0%大豆寡糖、壳寡糖和甘露寡糖能够提高部分纤维降解菌和淀粉降解菌的相对丰度,有利于提高发酵液中乙酸和丙酸含量,提高能量利用效率,同时降低部分有害菌相对丰度。

关键词：功能性寡糖瘤胃产气参数发酵参数微生物区系体外

鸽圆环病毒荧光定量PCR检测方法的建立及应用

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动物医学进展 2025年第1期46卷 68-73页

作者：刘存刘砚涵祝夕超李法凯张栋邵新宇田野孙圣福陈静山东省动物疫病预防与控制中心(山东省人畜共患病流调监测中心) 山东济南250100 莱州市程郭畜牧兽医站山东烟台261437 山东省农业科学院家禽研究所山东济南250023

为了建立鸽圆环病毒(PiCV)的快速检测方法,依据PiCV Rep基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速检测PiCV的荧光定量PCR方法。结果显示,构建的PiCV荧光定量PCR方法在1.44×10,1~1.44×10^(7)/μL拷贝标准品间具... 详细信息

为了建立鸽圆环病毒(PiCV)的快速检测方法,依据PiCV Rep基因的保守序列区域设计了荧光定量PCR的引物和探针,并建立了快速检测PiCV的荧光定量PCR方法。结果显示,构建的PiCV荧光定量PCR方法在1.44×10,1~1.44×10^(7)/μL拷贝标准品间具有良好的线性关系,线性相关系数达0.9866;该方法具有良好的敏感性,其检测病毒系列含量下限为14.4拷贝/μL;该方法特异性良好,与鸽新城疫病毒、鸽疱疹病毒、鸽腺病毒等病毒及鸽组织DNA不存在交叉反应;该方法重复性较好,批内重复试验变异系数均介于0.454%~0.473%,批间重复试验变异系数均介于0.367%~0.869%。与传统普通PCR方法相比,所建立的PiCV荧光定量PCR方法敏感性更高,临床样品PiCV检出率更高,两者检测符合率为93.75%。结果表明,所建立的PiCV荧光定量PCR方法为临床检测鸽圆环病毒提供了一种快速、灵敏的检测方法,为PiCV的流行病学调查和主动监测提供了技术支撑。

关键词：鸽圆环病毒荧光定量PCR Rep基因检测

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坡向和坡位对祁连山高寒灌丛植物群落多样性的影响

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草业学报 2025年第1期 17-28页

作者：王文虎王世林梁国玲李文曹文侠青海大学畜牧兽医科学院青海省畜牧兽医科学院青藏高原种质资源研究与利用实验室甘肃农业大学草业学院

明晰坡向和坡位对祁连山高寒灌丛植物群落多样性的影响过程及其路径系数，能够为祁连山地区高寒灌丛系统进行精准分区利用管理提供科学依据。本研究以祁连山地区山体不同坡向和坡位高寒灌丛为对象，对阴坡、半阴坡和半阳坡高寒灌丛植物... 详细信息

明晰坡向和坡位对祁连山高寒灌丛植物群落多样性的影响过程及其路径系数，能够为祁连山地区高寒灌丛系统进行精准分区利用管理提供科学依据。本研究以祁连山地区山体不同坡向和坡位高寒灌丛为对象，对阴坡、半阴坡和半阳坡高寒灌丛植物群落组成与结构、光照强度和土壤理化特征进行了系统研究，并采用分段式结构方程模型解析坡向和坡位对高寒灌丛植物群落多样性的影响过程及其路径系数。结果表明：草本和灌木的高度、盖度及地上、地下生物量均在下坡位最高（P<0.05）。β多样性在阴坡最高、半阳坡最低（P<0.05）。草本、灌木和群落Shannon-Wiener多样性指数、丰富度指数、Pielou均匀度指数均随坡位的上升而呈降低趋势。光照强度和土壤物理化学性质均在下坡位显著高于上坡位。分段式结构方程模型分析表明，坡向和坡位主要通过影响光照强度和土壤有机质含量影响草本植物群落的多样性，而坡向和坡位主要通过影响光照强度、土壤含水量和土壤速效氮含量影响灌木植物群落的多样性。在山地小尺度地形条件下，坡向和坡位主要通过影响光照、水分、土壤有机质含量、土壤速效氮含量等因子进而影响植物群落多样性分布格局。因此，对山地高寒灌丛系统进行精准分区利用管理及退化草地生态恢复时，应考虑小尺度地形条件下坡向和坡位变化引起的植物群落微生境条件及植被分布格局异质性差异。

关键词：高寒灌丛植物多样性坡向坡位

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腾冲马成纤维细胞系建立及其生物学特性分析

中国草食动物科学 2025年

作者：付晶相德才刘艺端穆德孟浦仕奇吴国权云南省畜牧兽医科学院国家区域性(云南)畜禽遗传资源基因库云南省畜牧总站

为建立快速稳定的腾冲马成纤维细胞分离培养体系，采用组织块贴壁培养法和差速胰酶消化法对腾冲马耳组织成纤维原代细胞进行了分离纯化及传代培养，并进行相关生物学特性检测及鉴定。结果表明：腾冲马耳成纤维细胞呈典型的纺锤形、不规... 详细信息

为建立快速稳定的腾冲马成纤维细胞分离培养体系，采用组织块贴壁培养法和差速胰酶消化法对腾冲马耳组织成纤维原代细胞进行了分离纯化及传代培养，并进行相关生物学特性检测及鉴定。结果表明：腾冲马耳成纤维细胞呈典型的纺锤形、不规则三角形或者多角形漩涡状；细胞冻存前与复苏后存活率均在95%以上；细胞生长态势良好，生长曲线呈“S”型；染色体条数为2n=64，其中31对常染色体，1对性染色体；荧光定量检测成纤维细胞特征Vimentin基因在2～7代次细胞中均有表达，细胞免疫荧光检测波形蛋白(Vimentin)的表达比例达99%；培养的细胞未受微生物污染。综上，试验成功建立了遗传特性稳定的腾冲马成纤维细胞系。

关键词：腾冲马成纤维细胞分离培养生物学特性冷冻保存

基于微滴式数字PCR检测牛病毒性腹泻病毒方法的建立及初步应用

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 190-199页

作者：刘芯怡李丹秦刚陈俊贞付强史慧君新疆农业大学动物医学学院新疆草食动物新药研究与创制重点实验室天康生物制药有限公司新疆巴楚县畜牧兽医站中国农业科学院西部农业研究中心

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)是引起犊牛(Bos sp.)病毒性腹泻的主要病原之一，导致犊牛免疫力降低，患病率和死亡率升高。目前对BVDV常用的检测方法存在灵敏度较低、容易出现假阳性等状况。本研究基于微滴式数... 详细信息

牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus, BVDV)是引起犊牛(Bos sp.)病毒性腹泻的主要病原之一，导致犊牛免疫力降低，患病率和死亡率升高。目前对BVDV常用的检测方法存在灵敏度较低、容易出现假阳性等状况。本研究基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR, ddPCR)技术，建立BVDV精准检测技术。首先针对BVDV 5'UTR基因保守序列区域设计引物和探针，合成BVDV 5'UTR基因并构建质粒标准品。使用BVDV质粒标准品分别建立实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qPCR)和ddPCR检测方法，并优化其反应参数和条件，分析其灵敏度、特异性和重复性，并进行了临床应用。结果显示，本研究建立的qPCR方法中，最佳引物和探针浓度分别为300和500 nmol/L，标准曲线呈良好的线性关系，最低检测下限为1×10～4 copies/μL，具有良好的特异性和重复性。建立的ddPCR方法中，最低检测下限为0.64 copies/μL，比qPCR灵敏性高15 625倍，该方法具有良好的特异性和重复性。临床检测了82份样品，ddPCR检出率为15.58%,qPCR检出率为14.63%。本研究建立的ddPCR方法比qPCR方法更加灵敏、高效、特异且重复性良好，为BVDV鉴别诊断提供了技术支持。

关键词：牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 微滴式数字PCR(ddPCR) 实时荧光定量PCR(qPCR) 灵敏性特异性重复性