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马铃薯主产区病毒病发生情况调查分析

植物保护 2011年第3期37卷 149-151页

作者：高艳玲张威白艳菊申宇范国权耿宏伟刘玮婷黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所农业部马铃薯种薯质量监督检验测试中心哈尔滨150086

在我国马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、贵州采集了752份具有典型病毒病症状的样品和疑似样品,应用DAS-ELISA方法进行检测。主要筛查6种病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM、PVA。结果显示:270份样品检测到病毒,总体上,PVY的检出率最高,... 详细信息

在我国马铃薯主产区黑龙江、内蒙古、甘肃、贵州采集了752份具有典型病毒病症状的样品和疑似样品,应用DAS-ELISA方法进行检测。主要筛查6种病毒:PVX、PVY、PVS、PLRV、PVM、PVA。结果显示:270份样品检测到病毒,总体上,PVY的检出率最高,PVS次之,33份样品是由多种病毒混合侵染造成的,田间PVY+PLRV混合侵染率最高,PVS+PVY次之。试管苗PVS病毒发生较多,原原种和大田种薯PVY病毒发生比例最高。

关键词：马铃薯病毒普查 DAS-ELISA

不同探针大小、标记物及反应底物对马铃薯类病毒杂交检测的影响

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植物病理学报 2011年第2期41卷 154-160页

作者：吕典秋刘尚武邱彩玲李勇宿飞飞王绍鹏吕文河东北农业大学农学院哈尔滨150030 黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所农业部脱毒马铃薯质量监督检验测试中心哈尔滨150086

灵敏可靠地检测马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd)对脱毒种薯的生产具有重要意义。本研究探索了影响核酸杂交检测技术的关键因素。通过基因克隆技术构建了插有PSTVd全长单体、双体及片段的载体。分别以地高辛和... 详细信息

灵敏可靠地检测马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTVd)对脱毒种薯的生产具有重要意义。本研究探索了影响核酸杂交检测技术的关键因素。通过基因克隆技术构建了插有PSTVd全长单体、双体及片段的载体。分别以地高辛和同位素为标记物,利用PCR和转录标记技术制备cDNA和RNA探针。比较探针大小、标记物、标记方法、反应底物等对检测灵敏度的影响。结果显示,以地高辛为标记物,利用PCR标记制备的PSTVd双体cDNA探针,在以CDP-Star为底物,通过在柯达X-OMAT BT胶片进行化学发光反应来分析结果的检测灵敏度最高,可以检测到0.05 pg总RNA中的PSTVd,是国外报道检测灵敏度的500倍。利用核酸斑点杂交技术检测PSTVd具有灵敏度高,一次可检测样品数量多等特点,对于大规模PSTVd检测更加方便可行。

关键词：马铃薯纺锤块茎类病毒探针核酸斑点杂交标记

利用cDNA双体探针检测马铃薯纺锤块茎类病毒

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植物保护学报 2009年第2期36卷 187-188页

作者：吕典秋刘尚武宿飞飞吕文河东北农业大学农学院哈尔滨150030 黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所农业部脱毒马铃薯种薯质量监督检验测试中心哈尔滨150086

类病毒是已知最小的可以在植物体内进行自我复制的病原,具有广泛的寄主范围.由于类病毒缺少外壳蛋白,因此不能通过免疫学方法进行诊断.

关键词：马铃薯纺锤块茎类病毒早期检测 cDNA 探针双体免疫学方法自我复制植物体内

马铃薯纺锤块茎类病毒RT-qPCR检测技术体系的建立

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作物杂志 2020年第3期 79-84页

作者：邱彩玲范国权申宇高艳玲张威韩树鑫张抒董学志马纪白艳菊黑龙江省农业科学院马铃薯研究所/农业农村部脱毒马铃薯种薯质量监督检验测试中心(哈尔滨) 黑龙江哈尔滨150086 黑龙江省农垦科学院植物保护研究所黑龙江哈尔滨150000

马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)是马铃薯生产中的一种重要病害,目前主要通过使用脱毒种薯及隔离措施来防控,探索高效、灵敏、特异性强的检测技术对于防治该病害具有重要意义。设计了3组引物,1条探针,从3组引物中筛选出最优组合,并以他们... 详细信息

马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd)是马铃薯生产中的一种重要病害,目前主要通过使用脱毒种薯及隔离措施来防控,探索高效、灵敏、特异性强的检测技术对于防治该病害具有重要意义。设计了3组引物,1条探针,从3组引物中筛选出最优组合,并以他们为引物,以PSTV 251T为探针,利用5′FAM、3′TAMRA标记,建立了PSTVd的RT-qPCR检测技术体系。利用该检测体系成功地检测了22份马铃薯样本。与灵敏度相对较高的RT-PCR技术相比,该检测技术体系的检测灵敏度又提升了100~1000倍。

关键词：马铃薯纺锤块茎类病毒(PSTVd) RT-qPCR 检测技术

马铃薯生产中马铃薯纺锤块茎类病毒的综合防治

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中国马铃薯 2017年第3期31卷 154-159页

作者：邱彩玲范国权申宇马纪高艳玲张威张抒胡林双芦娜韩树新白艳菊吕典秋黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所/农业部脱毒马铃薯种薯质量监督检验测试中心黑龙江哈尔滨150086

马铃薯纺锤块茎类病毒是影响中国马铃薯生产重要的检疫性病害。该病害具有广泛的自然寄主,可侵染马铃薯、番茄和辣椒等重要作物。该病害可通过植物学种子、花粉或卵细胞、无性繁殖以及机械等方式传播。马铃薯纺锤块茎类病毒可造成马铃... 详细信息

马铃薯纺锤块茎类病毒是影响中国马铃薯生产重要的检疫性病害。该病害具有广泛的自然寄主,可侵染马铃薯、番茄和辣椒等重要作物。该病害可通过植物学种子、花粉或卵细胞、无性繁殖以及机械等方式传播。马铃薯纺锤块茎类病毒可造成马铃薯产量降低,块茎畸形、变小,商品性和商品薯率下降。该病害主要可通过培育抗病品种、使用脱毒种薯、加强种质资源和种薯卫生管理、加强检验检疫以及实行马铃薯种薯质量认证制度等措施进行综合防治。

关键词：马铃薯马铃薯纺锤块茎类病毒综合防治

应用自制检测试剂盒(NCM-ELISA)检测马铃薯环腐病菌

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中国马铃薯 2007年第4期21卷 231-234页

作者：胡林双闵凡祥王晓丹郭梅吕典秋于德才马纪黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所农业部脱毒马铃薯种薯质量监督检验测试中心黑龙江哈尔滨150086

马铃薯环腐病（Potato Ring Rot）是由Clavibacter michiganensis ***引起的一种危害输导系统的细菌性病害,它是马铃薯生产上危害较大的病害之一,在全国各地都有分布,每年都造成较大损失,世界各国也把它列为重要的进出口植物检疫对象,... 详细信息

马铃薯环腐病（Potato Ring Rot）是由Clavibacter michiganensis ***引起的一种危害输导系统的细菌性病害,它是马铃薯生产上危害较大的病害之一,在全国各地都有分布,每年都造成较大损失,世界各国也把它列为重要的进出口植物检疫对象,要求种薯带病允许率为＂0＂。近几年来，在我国马铃薯主产区环腐病普遍发生，危害日趋严重。这种病菌主要通过种薯传播蔓延，而种薯带菌又是马铃薯环腐病历年发病和远距离传播的主要侵染源，由此可见，控制种薯病原菌是防治环腐病蔓延的重要措施。马铃薯环腐病菌在马铃薯块茎上侵染后，前期没有症状表现，用传统的革兰氏染色、双抗体夹心酶联免疫吸附测定法等检测方法又无法检测到病菌；用分子检测方法成本比较高，要求操作人员素质也很高，需要的仪器也比较多、昂贵，很多实验室没有相应的人员和仪器设备，所以该检测方法无法普及。因此，限制了对马铃薯环腐病的检测检疫。

关键词：马铃薯环腐病菌检测试剂盒酶联免疫吸附测定法植物检疫对象细菌性病害远距离传播应用仪器设备

DAS-ELISA与RT-PCR法检测马铃薯S病毒的比较

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黑龙江农业科学 2016年第10期 58-60页

作者：申宇高艳玲范国权张威张抒白艳菊黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所/农业部脱毒马铃薯种薯质量监督检验测试中心黑龙江哈尔滨150086

在马铃薯种薯生产中,马铃薯S病毒是田间发病率较高的病毒之一,同时也是最不易脱掉的病毒。为了更准确地筛查马铃薯病毒病,减少病毒病在田间的侵染,保证种薯质量,提高种薯产量,用DAS-ELISA和RT-PCR两种方法对马铃薯S病毒筛查的效果进行... 详细信息

在马铃薯种薯生产中,马铃薯S病毒是田间发病率较高的病毒之一,同时也是最不易脱掉的病毒。为了更准确地筛查马铃薯病毒病,减少病毒病在田间的侵染,保证种薯质量,提高种薯产量,用DAS-ELISA和RT-PCR两种方法对马铃薯S病毒筛查的效果进行了比较。结果表明:两种方法间有较高的吻合度,但也存在一定的差异。DAS-ELISA相对RT-PCR而言成本更低效率更高,但灵敏度略低。同一条件下,对于同一样本,不同的试验方法会对试验结果有一定的影响。因此,在病毒检测工作中,应根据检测的实际要求,谨慎合理选取正确的方法,灵活利用RT-PCR进行补充检测,以保证检测及科研工作结果更加可靠。

关键词：马铃薯 PVS 检测方法

马铃薯环腐病菌快速检测方法(NCM-ELISA)的建立

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中国马铃薯 2007年第3期21卷 142-145页

作者：胡林双王晓丹闵凡祥郭梅李学湛白艳菊黑龙江省农业科学院植物脱毒苗木研究所农业部脱毒马铃薯种薯质量监督检验测试中心(哈尔滨) 黑龙江哈尔滨150086

建立检测马铃薯环腐病菌NCM-ELISA方法并组装成试剂盒,应用于检测、检疫和流行病学调查具有实践意义。本研究以马铃薯环腐病菌为抗原,制备兔抗血清,利用碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔血清(GAR-AP)为酶标二抗,建立了马铃薯环腐病菌NCM-ELISA... 详细信息

建立检测马铃薯环腐病菌NCM-ELISA方法并组装成试剂盒,应用于检测、检疫和流行病学调查具有实践意义。本研究以马铃薯环腐病菌为抗原,制备兔抗血清,利用碱性磷酸酯酶标记的羊抗兔血清(GAR-AP)为酶标二抗,建立了马铃薯环腐病菌NCM-ELISA快速检测方法。结果表明:抗血清的最佳工作浓度为1:400,最低检出菌液浓度为1.0×106个.mL-1,特异性也比较强。因此,该方法具有敏感性高、特异性强、速度快、实用方便等特点,可以应用于马铃薯环腐病菌的快速检测和诊断。

关键词：马铃薯环腐病 ELISA NCM-ELISA

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国内外马铃薯种薯标准比较与解析

国内外马铃薯种薯标准比较与解析