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重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质构建转基因组织工程材料

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4851-4858页

作者：宁寅宽刘林志周次腊隆宇斌邵阳市中心医院血管外科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院内分泌科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院脊柱外科湖南省邵阳市422000

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与... 详细信息

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与脱钙骨基质体外构建转基因组织工程材料的生物矿化特性。方法:细胞贴壁及密度离心法获得兔骨髓间充质干细胞,增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒以感染复数为100转染第5代兔骨髓间充质干细胞,体外观察转染细胞与未转染细胞的增殖能力、细胞表型、细胞周期以及成骨诱导后碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素表达的差异;增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质在体外构建转基因组织工程材料,对其进行扫描电镜观察及元素能谱分析。结果与结论:增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞后,在转染24,48 h细胞增殖较未转染细胞缓慢(P 0.05);增强型绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞在脱钙骨基质支架上有较好的生物相容性,根据荧光表达强度推测目的基因在2周左右发挥最大生物学功能,且出现了钙磷矿化物沉积,体现出优越的生物矿化特性。

关键词：重组慢病毒载体增强绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞基因治疗生物学特性

个性化Gyroid结构髁突假体设计及对关节盘的有限元分析

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中国组织工程研究 2025年第28期29卷 6003-6011页

作者：姜婷婷刘丹瑜姜至秀季俣辰曹怡琳宿玉成王心彧佳木斯大学黑龙江省佳木斯市154003 黑龙江省口腔生物材料与临床应用重点实验室佳木斯大学口腔医学工程研究中心佳木斯大学附属口腔医院黑龙江省佳木斯市154007 中国医学科学院北京协和医院口腔种植中心北京市100032 北京瑞城口腔医院北京口腔种植培训中心北京市100032

背景:人工髁突假体置换作为治疗颞下颌关节疾病的手术方式之一,不仅要恢复形态和功能,还要保证长期稳定的应用。目的:设计个性化Gyroid结构髁突假体并进行有限元分析。方法:通过软件设计不同壁厚(250,350,450,550,650,750μm)的Gyroid... 详细信息

背景:人工髁突假体置换作为治疗颞下颌关节疾病的手术方式之一,不仅要恢复形态和功能,还要保证长期稳定的应用。目的:设计个性化Gyroid结构髁突假体并进行有限元分析。方法:通过软件设计不同壁厚(250,350,450,550,650,750μm)的Gyroid结构试件,分别进行有限元模拟压缩实验,检测试件的弹性模量,筛选出与下颌骨松质骨弹性模量相匹配且孔径满足成骨条件的Gyroid结构壁厚区间,对此区间进行细分并利用3D打印技术制作Gyroid结构试件,进行万能试验机力学压缩实验,通过弹性模量与抗压强度筛选符合下颌骨力学性能、孔径更易成骨且强度较小的Gyroid结构壁厚,进行后续实验。设计下颌骨个性化Gyroid结构髁突假体三维模型,分别模拟模型在自然咬合状态下对刃颌位、牙尖交错位的有限元分析。结果与结论:①有限元分析结果显示,随着壁厚的增加,Gyroid结构试件的弹性模量升高,其中壁厚350,450,550,650,750μm Gyroid结构试件的弹性模量与下颌骨松质骨弹性模量相匹配,由于后续实验需细分组别且550,650,750μm壁厚组孔径(800-1000μm)在成骨范围内,故筛选出壁厚550,600,650,700,750μm Gyroid结构试件进行万能试验机力学压缩实验;②力学压缩实验结果显示,随着壁厚的增加,Gyroid结构试件的弹性模量与抗压强度升高,其中壁厚550,600,650μm Gyroid结构试件的弹性模量在下颌骨松质骨弹性模量范围内,最终选取壁厚650μm、孔径900μm进行下颌骨个性化Gyroid结构髁突假体三维模型构建;③下颌骨个性化Gyroid结构髁突假体三维模型有限元分析结果显示,对刃颌位关节盘应力主要集中在前中带下表面,牙尖交错位关节盘应力主要集中在下表面外侧,左右侧关节盘在对刃颌位、牙尖交错位的最大位移和等效应力相近,最大位移分别为0.031,0.030,0.028,0.018 mm,最大等效应力分别为2.87,2.30,2.73,1.71 MPa;④结果表明,壁厚650μm Gyroid结构符合下颌骨力学性能,降低了钛合金强度、减轻了个性化Gyroid结构髁突假体对关节盘的损伤。

关键词： Gyroid结构壁厚髁突假体有限元分析关节盘颞下颌关节

piR-7472影响电压调控钾离子通道促进小鼠成骨细胞分化的机制

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中国组织工程研究 2025年第14期29卷 2868-2874页

作者：隆宇斌王湘斌樊基耿杨厚志杨洋李勇邵阳市中心医院脊柱外科湖南省邵阳市422000 天津医科大学研究生院天津市300070 邵阳市中心医院肿瘤内科湖南省邵阳市422000

背景:现有研究在PIWI相互作用RNA(piRNA)抗骨质疏松方面取得了重大进展,但piRNA发挥功能的具体靶点和相关机制仍有待探索。目的:探讨piR-7472对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)分化的影响及下游机制。方法:①12只C57/BL6J小鼠随机分为假手... 详细信息

背景:现有研究在PIWI相互作用RNA(piRNA)抗骨质疏松方面取得了重大进展,但piRNA发挥功能的具体靶点和相关机制仍有待探索。目的:探讨piR-7472对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1细胞)分化的影响及下游机制。方法:①12只C57/BL6J小鼠随机分为假手术组和卵巢切除组,每组6只,术后8周通过Micro-CT检测小鼠的骨量,RT-qPCR检测piR-7472的表达;②将MC3T3-E1细胞分为NC mimics组、piR-7472 mimics组、NC inhibitor组与piR-7472 inhibitor组,转染后成骨诱导7 d采用RT-qPCR检测piR-7472、骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2、钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1 mRNA的表达;成骨诱导7 d采用Western blot检测骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2、钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1(KCNF1)蛋白表达;成骨诱导14 d通过碱性磷酸酶染色检测碱性磷酸酶的表达;成骨诱导21 d通过茜素红染色检测矿化结节数量;③双荧光素酶报告基因实验观察piR-7472是否能与钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1相结合。结果与结论:①与假手术组相比,卵巢切除组小鼠骨密度、骨体积分数、骨小梁厚度、骨小梁数量明显下降,骨小梁分离度明显升高,并且骨组织中piR-7472 mRNA表达明显下调;②与NC组相比,piR-7472 mimics组骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2的mRNA表达明显升高,骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达明显升高,矿化沉积与碱性磷酸酶表达增多;与NC inhibitor组相比,piR-7472 inhibitor组骨桥蛋白、胶原蛋白Ⅰ、Runt相关转录因子2的mRNA表达明显降低,骨桥蛋白、Runt相关转录因子2、骨形态发生蛋白2的蛋白表达明显降低,矿化沉积与碱性磷酸酶表达降低;③通过miRanda数据库预测发现piR-7472能与KCNF1相互作用;双荧光素酶报告基因实验发现piR-7472 mimcis能与钾电压门控通道调节因子亚家族F成员1结合并促进其表达。结果表明:piR-7472能够促进成骨前体细胞MC3T3-E1成骨分化,其发挥作用的机制可能是通过促进KCNF1表达实现的。

关键词：成骨细胞MC3T3-E1 PIWI相互作用RNA 成骨分化骨质疏松症电压调控的钾离子通道 KCNF1

PTEN在动脉粥样硬化中的表达及对血管内皮细胞增殖凋亡的影响研究

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中国免疫学杂志 2018年第5期34卷 745-750页

作者：闫博阳赵津璋陈虹黑龙江省佳木斯市中心医院佳木斯154002

目的:探讨第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)在动脉粥样硬化中的表达及对血管内皮细胞(VEC)增殖凋亡的影响。方法:构建动脉粥样硬化小鼠模型,Real-time PCR和Western blot检测动脉粥样硬化组织中PTEN水平;用不同浓度的氧化... 详细信息

目的:探讨第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)在动脉粥样硬化中的表达及对血管内皮细胞(VEC)增殖凋亡的影响。方法:构建动脉粥样硬化小鼠模型,Real-time PCR和Western blot检测动脉粥样硬化组织中PTEN水平;用不同浓度的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理大鼠VEC,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性。VEC转染PTEN过表达载体(pSicoR-PTEN),用ox-LDL处理细胞,Real-time PCR和Western blot检测PTEN水平,MTT检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测磷酸化的STAT3(p-STAT3)、信号转导与转录因子3(STAT3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)水平。结果:动脉粥样硬化组织中的PTEN水平明显低于正常的动脉组织(P<0.05)。不同浓度的oxLDL处理后的VEC存活率明显降低,并且细胞存活率随着ox-LDL浓度的升高而降低。ox-LDL作用后的VEC中PTEN表达水平下降,而转染pSicoR-PTEN后可以提高VEC中PTEN表达水平。ox-LDL处理后的VEC凋亡率增加,细胞中Cleaved Caspase-3水平升高,p-STAT3水平下降,与正常培养的VEC相比差异具有统计学意义(P<0.05)。转染pSicoR-PTEN后VEC经过ox-LDL处理后细胞存活率、p-STAT3水平明显升高,而细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3水平明显降低,与单纯ox-LDL处理后的细胞相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PTEN在动脉粥样硬化组织中表达下调,PTEN可以逆转ox-LDL对VEC增殖抑制和凋亡促进作用,作用机制可能与STAT3信号通路的激活有关。

关键词：动脉粥样硬化血管内皮细胞 PTEN 凋亡

下调动脉粥样硬化斑块中TRPC5的表达对人巨噬细胞凋亡的影响及机制研究

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中国免疫学杂志 2018年第10期34卷 1472-1477页

作者：闫博阳赵津璋陈虹黑龙江省佳木斯市中心医院佳木斯154002

目的:探讨动脉粥样硬化病变时瞬时受体电位通道5(TRPC5)基因表达对人巨噬细胞凋亡的影响。方法:建立小鼠动脉粥样硬化模型,通过RT-PCR检测动脉粥样硬化斑块TRPC5基因表达;将巨噬细胞分为对照组、NC组、ox-LDL组、TRPC5-siRNA组和TRPC5-s... 详细信息

目的:探讨动脉粥样硬化病变时瞬时受体电位通道5(TRPC5)基因表达对人巨噬细胞凋亡的影响。方法:建立小鼠动脉粥样硬化模型,通过RT-PCR检测动脉粥样硬化斑块TRPC5基因表达;将巨噬细胞分为对照组、NC组、ox-LDL组、TRPC5-siRNA组和TRPC5-siRNA+ox-LDL组,细胞处理24 h后Western blot检测各组细胞中TRPC5的蛋白表达; CCK8法及流式细胞术分别检测细胞的增殖及凋亡; Western blot检测凋亡蛋白含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)及丝氨酸苏氨酸激酶(AKT)信号通路AKT及磷酸化的AKT的蛋白表达。结果:成功建立动脉粥样硬化模型。TRPC5基因在动脉粥样硬化组中的表达显著高于对照组(P0. 05)。结论:TRPC5基因在动脉粥样硬化斑块中表达升高,下调TRPC5表达可减弱ox-LDL对巨噬细胞增殖的抑制作用和凋亡的促进作用,机制与AKT信号通路有关。

关键词：动脉粥样硬化 TRPC5基因巨噬细胞凋亡 AKT信号通路

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4p15.2缺失综合征1例报告及文献复习

中国实用儿科杂志 2020年第7期35卷 574-576页

作者：王萌萌王菊莉曹洪涛陶英贤黑龙江省佳木斯市中心医院癫痫科黑龙江佳木斯154000 黑龙江省佳木斯市中心医院儿外科黑龙江佳木斯154000

4号染色体短臂末端缺失综合征又称Wolf-Hirschhorn综合征(Wolf-Hirschhorn,WHS),是由于4号染色体短臂末端缺失而导致的一种罕见染色体病,是一组包括严重的发育迟缓、智力低下、小头畸形、"希腊头盔脸"、癫痫及多系统先天畸形组成的临床... 详细信息

4号染色体短臂末端缺失综合征又称Wolf-Hirschhorn综合征(Wolf-Hirschhorn,WHS),是由于4号染色体短臂末端缺失而导致的一种罕见染色体病,是一组包括严重的发育迟缓、智力低下、小头畸形、"希腊头盔脸"、癫痫及多系统先天畸形组成的临床综合征。该病国内外报道极少。现将1例4p15.2缺失综合征的临床表现特点和诊治经过报道如下。

关键词： 4号染色体短臂末端缺失综合征(Wolf-Hirschhorn综合征) 精神运动发育迟缓脑电图癫痫

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左侧永存Ⅰ型前寰椎动脉一例

介入放射学杂志 2010年第1期19卷 68-69页

作者：钱宝刘晓东王廉田震宇张成黑龙江省佳木斯市中心医院神经外科 154002

患者男,45岁。主诉为发作性多次短暂意识丧失1年。神经系统检查正常,头部CT和MRI检查正常。入院后行弓上DSA检查,显示双侧椎动脉起始部缺如。左颈总动脉造影证实吻合血管起源于左颈内动脉第三椎体水平。

关键词：前寰椎动脉

B超对恶性肝门部胆管梗阻应用经皮经肝自膨式金属内支架疗效的评价

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中国超声医学杂志 1996年第11期 48-50页

作者：杨秀华曲和平姜晓龙朱春兰韩淑芳樊淑梅黑龙江省医院佳木斯市中心医院

本文对１６例恶性肝门部胆管梗阻（ＭＨＢＯ）在超声引导下采用经皮经肝自膨式金属内支架（ＥＭＢＥ）治疗结果表明：①超声引导下行ＥＭＢＥ可避开肝内血管，且不受扩张胆管内径大小及走行方向的影响，一次性成功率高，负损伤小。②用... 详细信息

本文对１６例恶性肝门部胆管梗阻（ＭＨＢＯ）在超声引导下采用经皮经肝自膨式金属内支架（ＥＭＢＥ）治疗结果表明：①超声引导下行ＥＭＢＥ可避开肝内血管，且不受扩张胆管内径大小及走行方向的影响，一次性成功率高，负损伤小。②用Ｂ超监测肝内胆管径可观察胆管开通状况，作为衡量减黄效果的重要指标。③ＥＭＢＥ早期合并症少，术后生存期长，如加用放射疗法，可大大提高生存期。

关键词：恶性肝门部胆管梗阻经皮经肝自膨式金属内支架 B型超声

川芎嗪含药血清通过抑制抗氧化能力在肝癌HepG2细胞中发挥抗肿瘤作用

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医学分子生物学杂志 2025年第1期22卷 35-40页

作者：张义芳戴毅遂宁市中心医院肝胆外科四川省遂宁市629000

目的探究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)含药血清对肝癌细胞增殖的影响及其机制。方法制备SD大鼠0、30、60、120 mg/kg TMP含药血清,并分别处理HepG2细胞,克隆形成和CCK-8法检测HepG2细胞的增殖;流式细胞术检测HepG2细胞周期和凋亡,流... 详细信息

目的探究川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)含药血清对肝癌细胞增殖的影响及其机制。方法制备SD大鼠0、30、60、120 mg/kg TMP含药血清,并分别处理HepG2细胞,克隆形成和CCK-8法检测HepG2细胞的增殖;流式细胞术检测HepG2细胞周期和凋亡,流式JC-1检测HepG2细胞线粒体膜电位变化,蛋白质印迹检测HepG2细胞中PCNA、P27、cleaved caspase-3(cas-3),Bax,Bcl-2和Cyt C的表达;试剂盒检测HepG2细胞中SOD和MDA的含量;2,7-二氯二乙酸酯(DCFH-DA)测定HepG2细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生。结果与对照组比较,TMP 60、120 mg/kg组细胞增殖能力受抑制,细胞周期受阻滞;凋亡率明显升高;抗氧化能力受抑制。结论TMP可抑制肝癌细胞的增殖,并通过线粒体依赖途径诱导肝癌细胞凋亡,刺激ROS的生成降低癌细胞抗氧化能力,从而抑制肝癌的发展。

关键词：肝癌川芎嗪增殖细胞凋亡线粒体活性氧