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基于METTL3介导的miR-29a-3p的m^(6)A修饰探讨平喘颗粒抑制气道上皮细胞泛凋亡治疗哮喘的机制研究

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海南医学院学报 2024年第15期30卷 1139-1146页

作者：毛旭杨柳欣高佳炜王瑶袁星星黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150040 黑龙江省中医药科学院黑龙江哈尔滨150006

目的:观察平喘颗粒对METTL3介导的气道上皮细胞中miR-29a-3p的m^(6)A修饰的影响,明确其抑制哮喘气道炎症的分子机制。方法:16HBE采用LPS诱导(50 mg/L)构建细胞模型,并给予平喘颗粒含药血清和地塞米松进行干预。分别采用CCK8法检测细胞... 详细信息

目的:观察平喘颗粒对METTL3介导的气道上皮细胞中miR-29a-3p的m^(6)A修饰的影响,明确其抑制哮喘气道炎症的分子机制。方法:16HBE采用LPS诱导(50 mg/L)构建细胞模型,并给予平喘颗粒含药血清和地塞米松进行干预。分别采用CCK8法检测细胞活性、ELISA法检测炎症因子(TNF-α、IL-6和IL-8)的含量和miR-29a-3p的m^(6)A修饰水平、Western blot检测METTL3与泛凋亡蛋白的表达和qRT-PCR检测METTL3与miR-29a-3p的表达。结果:与模型组相比,平喘颗粒能够显著增加16HBE的活力,抑制炎症因子TNF-α、IL-6和IL-8的含量,下调泛凋亡相关蛋白p-RIPK3、p-MLKL、cleaved Caspase-1、cleaved Caspase-3的表达和GSDMD-NT/FL-GSDMD与GSDME-NT/FL-GSDME的比值,差异均具有统计学意义(P<0.01)。此外,平喘颗粒能够显著上调细胞中miR-29a-3p和METTL3的表达水平,促进miR-29a-3p的m^(6)A修饰水平,与模型组相比差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:平喘颗粒主要通过METTL3增强miR-29a-3p的m^(6)A修饰水平,抑制气道上皮细胞泛凋亡,改善气道炎症。

关键词：平喘颗粒支气管哮喘泛凋亡 m^(6)A甲基化修饰气道上皮细胞

电针干预对慢性疲劳综合征大鼠海马组织蛋白质磷酸化表达的影响

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针刺研究 2024年第6期49卷 594-603页

作者：杨燕孙忠人李超然冯楚文王玉琳王德龙屈媛媛郭静石天宇孙闻孙维伯杨添淞黑龙江中医药大学哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第二医院哈尔滨150001 浙江中医药大学附属第三医院杭州310005 黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040 河北燕达医院河北廊坊065201 北京中医药大学北京100029 黑龙江神志医院哈尔滨150036 哈尔滨医科大学第一临床医学院哈尔滨150001 黑龙江省中医药信息学重点实验室哈尔滨150040

目的:观察电针对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠行为学和海马组织蛋白磷酸化的影响,探讨电针治疗CFS的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组12只。采用多因素慢性复合应激法制备CFS模型。电针组大鼠给予电针“神庭... 详细信息

目的:观察电针对慢性疲劳综合征(CFS)大鼠行为学和海马组织蛋白磷酸化的影响,探讨电针治疗CFS的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组12只。采用多因素慢性复合应激法制备CFS模型。电针组大鼠给予电针“神庭”(透刺“百会”)和“大椎”治疗,每日1次,每次15 min,连续28 d。治疗结束后观察各组大鼠体质量、摄食量和饮水量,采用实验大鼠一般情况半定量评分观察表评价大鼠的疲劳程度,采用旷场实验及Morris水迷宫实验评价大鼠焦虑程度和学习记忆能力。取各组大鼠海马组织进行磷酸化Label-free定量蛋白质组学检测。结果:治疗结束后,与空白组比较,模型组大鼠体质量降低(P<0.01),摄食量减少(P<0.05),一般情况半定量评分升高(P<0.01),旷场实验总穿格次数和进入中央区次数均增多(P<0.01),Morris水迷宫实验逃避潜伏期延长(P<0.01)、穿越原平台次数减少(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠一般情况半定量评分降低(P<0.01),旷场实验总穿格次数减少(P<0.05),Morris水迷宫实验逃避潜伏期缩短(P<0.01)、穿越原平台次数增加(P<0.01)。与空白组比较,模型组有297个差异表达肽段,对应255个蛋白,与模型组比较,电针组有245个差异表达肽段,对应198个蛋白,其中共有24个重合蛋白在电针治疗后表达回调。GO分析表明,电针干预的作用在生物学过程方面主要为对蛋白质聚合和细胞骨架组织的调节,在分子功能聚类上表现为对蛋白质聚合的调节,在细胞组分聚类方面表现为对突触功能的影响。KEGG分析结果显示,电针干预对胰岛素分泌、轴突导引、磷脂酰肌醇信号系统及赖氨酸生物合成等对中枢神经系统组织功能有重要作用的信号通路产生了影响。结论:电针可以改善CFS模型大鼠的疲劳状态,缓解焦虑情绪,提高学习记忆能力,其机制可能与调节海马组织蛋白磷酸化水平有关。

关键词：电针慢性疲劳综合征磷酸化蛋白质组学液相色谱-质谱海马

六味地黄丸对秀丽隐杆线虫AD模型线粒体损伤的保护作用

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中国实验方剂学杂志 2024年第3期30卷 18-25页

作者：张金凤佟玉良王加朋苏婷赵德萍于浩左坤朱紫悦金美玲张宁雷霞黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 佳木斯大学药学院黑龙江佳木斯154007 南京中医药大学无锡附属医院江苏省中医退行性骨关节病临床医学创新中心江苏无锡214071

目的:探讨六味地黄丸提取物对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)阿尔茨海默病(AD)模型线粒体损伤的保护作用。方法:使用转染人源β淀粉样蛋白(Aβ)1-42基因的秀丽隐杆线虫为AD模型,实验设空白组、模型组、二甲双胍组(50 mmol·L^(-... 详细信息

目的:探讨六味地黄丸提取物对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)阿尔茨海默病(AD)模型线粒体损伤的保护作用。方法:使用转染人源β淀粉样蛋白(Aβ)1-42基因的秀丽隐杆线虫为AD模型,实验设空白组、模型组、二甲双胍组(50 mmol·L^(-1))及六味地黄丸低、中、高剂量组(1.04、2.08、4.16 g·kg^(-1))。行为学方法观察线虫5-羟色胺(5-HT)的敏感性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线虫体内Aβ表达,腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)试剂盒检测线虫体内总ATP含量,线粒体膜电位检测试剂盒法(JC-1法)检测线粒体膜电位,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测Aβ表达基因(Amy-1),超氧化物歧化酶-1(SOD-1)、线粒体转录因子A同源高迁移率族蛋白-5(HMG-5)、线粒体动力相关蛋白1(DRP1)、线粒体分裂蛋白1(FIS1)mRNA的表达。结果:六味地黄丸提取物能够降低AD模型线虫对外源5-HT的超敏感性(P<0.05),延缓AD模型线虫神经元中由于Aβ过度表达所引起的对外源性5-HT超敏感性的AD样病理特征;与空白组比较,模型组Aβ蛋白和Amy-1mRNA的表达升高(P<0.01),SOD-1与HMG-5 mRNA表达下降(P<0.01),DRP1与FIS1 mRNA表达升高(P<0.01),线粒体膜电位水平下降(P<0.05),ATP含量下降(P<0.01);与模型组比较,二甲双胍组、六味地黄丸中、高剂量组Aβ蛋白和Amy-1mRNA的表达明显降低(P<0.05,P<0.01),SOD-1与HMG-5 mRNA表达显著升高(P<0.01),DRP1 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),FIS1 mRNA表达降低(P<0.01),线粒体膜电位水平升高(P<0.01),ATP含量升高(P<0.05,P<0.01)。结论:六味地黄丸提取物可能通过增强线粒体抗氧化能力,保护线粒体DNA,减少线粒体分裂碎片化,修复受损的线粒体,回调线粒体膜电位,恢复神经元ATP水平,减轻Aβ沉积导致的神经元损伤。

关键词：阿尔茨海默病六味地黄丸秀丽隐杆线虫线粒体损伤

基于16S rDNA测序研究当归拈痛汤对膝骨关节炎小鼠肠道菌群的影响

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中国实验方剂学杂志 2024年第11期30卷 9-17页

作者：吴霜袁立霞廖晴蔡义思钟威陈宏南方医科大学中医药学院国家中医药管理局科研三级实验室中药药理实验室广州510515 齐齐哈尔市第一医院黑龙江齐齐哈尔161000 黑龙江省中医药科学院哈尔滨150036

目的:本研究旨在通过16S rDNA探讨当归拈痛汤调控肠道菌群进而治疗膝骨关节炎(KOA)的潜在作用机制。方法:将36只C57BL/6J小鼠采用前交叉韧带切断(ACLT)的方法构建膝骨关节炎疾病模型,并随机分为假手术组、模型组、当归拈痛汤低剂量组(0.... 详细信息

目的:本研究旨在通过16S rDNA探讨当归拈痛汤调控肠道菌群进而治疗膝骨关节炎(KOA)的潜在作用机制。方法:将36只C57BL/6J小鼠采用前交叉韧带切断(ACLT)的方法构建膝骨关节炎疾病模型,并随机分为假手术组、模型组、当归拈痛汤低剂量组(0.819 g·kg^(-1))、当归拈痛汤中剂量组(1.638 g·kg^(-1))、当归拈痛汤高剂量组(3.276 g·kg^(-1))、美洛昔康组(0.975 mg·kg^(-1)),每组6只。除给药组外,假手术组与模型组均予生理盐水灌胃,连续干预4周后,分别收取小鼠粪便和完整膝关节,苏木素-伊红(HE)和番红O-固绿染色观察膝关节组织形态的病理改变;采用16S rDNA测序分析给药前后肠道微生物丰度、多样性变化及相对应的功能预测。结果:高剂量当归拈痛汤和美洛昔康可以明显缓解KOA小鼠的疼痛症状,改善关节结构的紊乱,维持膝关节软骨的完整性,提高关节软骨Ⅱ型胶原a1(Col2a1)表达,降低关节软骨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)表达。16S rDNA结果显示,高剂量当归拈痛汤可调整肠道菌群物种丰富度与菌群结构,与假手术组比较,模型组中变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、瘤胃球菌属(Ruminococcus)、拟杆菌属(Bacteroides)丰度显著提高(P<0.05),与模型组比较,当归拈痛汤组中这4种菌群丰富度显著降低;与假手术组比较,模型组疣微菌门(Verrucomicrobia)、颤螺菌属(Oscillospira)和阿克曼氏菌属(Akkermansia)丰度明显降低(P<0.05),与模型组比较,当归拈痛汤组中这三类菌群丰度明显升高(P<0.05)。对差异菌属进行功能学通路预测发现,各组间差异物种涉及到丰度较高的代谢通路主要涉及到生物合成及前体代谢物和能量的产生,包括氨基酸生物合成、核苷和核苷酸生物合成、辅因子、假体基团、电子载体和维生素生物合成。结论:当归拈痛汤能够有效保护关节软骨,延缓KOA疾病进展,可能是通过调节肠道菌群结构、促进益生菌、抑制有害致病菌生长实现的。

关键词：膝骨关节炎当归拈痛汤肠道菌群 16S rDNA高通量测序关节软骨

中医药干预慢性阻塞性肺疾病相关信号通路的研究进展

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中国实验方剂学杂志 2024年第15期30卷 244-255页

作者：杨洋李竹英田春燕李星黑龙江中医药大学哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种气流受限不完全可逆的异质性疾病,呈进行性发展。其反复发作,难以根治的特性为患者带来了沉重的健康负担。COPD发病机制繁杂,尚未完全阐明。当前临床多采用西医药物治疗方式,疗效不理想,易出现不良反应和... 详细信息

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种气流受限不完全可逆的异质性疾病,呈进行性发展。其反复发作,难以根治的特性为患者带来了沉重的健康负担。COPD发病机制繁杂,尚未完全阐明。当前临床多采用西医药物治疗方式,疗效不理想,易出现不良反应和耐药性等。因此,寻找一种高效、安全的治疗方法是现今医学研究领域的重要课题。随着对疾病研究的不断深入,诸多学者发现,中医药通过靶向核转录因子-κB(NF-κB)、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、神经源性位点缺口同源蛋白(Notch)、Janus酪氨酸激酶(JAK)/信号转导与转录激活因子(STAT)、转化生长因子-β(TGF-β)/Smad、分泌型糖蛋白(Wnt)、河马(Hippo)和核因子E2相关因子2(Nrf2)等信号通路,影响气道黏液分泌,抑制炎症及氧化应激反应,缓解气道重塑及微血管重塑,调节细胞凋亡与自噬等,从而达到减轻疾病症状,改善肺功能的目的。中医对于本病已有数千年的临床实践经验,且疗效显著。因此从细胞分子层面深入挖掘,为临床应用中医药诊治COPD提供可靠的理论依据。但目前中医药调控COPD相关信号通路的系统性总结较少,现对近年来国内外中药单体或中药复方干预COPD相关文献进行广泛检索查阅,整理归纳出多条相关通路,旨在为之后的临床组方用药与实验研究提供新的思路予以借鉴。将中医基础理论和现代药理研究机制相结合共同推动中医药在防治COPD方面的蓬勃发展。

关键词：慢性阻塞性肺疾病信号通路中医药研究进展

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基于阴阳理论探讨自噬在卵巢癌中的作用

中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 185-192页

作者：彭成郭滢于洋刘芳媛韩凤娟黑龙江中医药大学哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院哈尔滨150040

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤之一,早期症状不典型,转移复发率高,是严重威胁女性健康的重要杀手。中医认为,阴阳平衡指导机体功能与物质的动态转换,实现气血津液的正常输布,协调肌肉官窍的充盛强壮;而阴阳失衡,气血积聚络于胞宫发为卵巢癌。... 详细信息

卵巢癌作为妇科恶性肿瘤之一,早期症状不典型,转移复发率高,是严重威胁女性健康的重要杀手。中医认为,阴阳平衡指导机体功能与物质的动态转换,实现气血津液的正常输布,协调肌肉官窍的充盛强壮;而阴阳失衡,气血积聚络于胞宫发为卵巢癌。随着现代研究的进展发现,自噬作为机体内代谢与产能的变化过程,亦具有阴阳的动态属性,自噬抑制“阳衰阴盛”促进卵巢癌的形成、自噬激活“阳生阴长”推动卵巢癌的发展、瘤体机体“阴阳自噬紊乱”卵巢癌复发耐药,提示卵巢癌的发生发展与阴阳二者的病理状态高度契合。故该文以中医阴阳理论对卵巢癌及自噬相关机制阐释为基础,以卵巢癌不同阶段的主体矛盾为出发点,提出各阶段的防治原则:初以“益火源”激活自噬“消阴翳”,进以“攻毒结”抑制自噬“通阳滞”,末以“平阴阳”控制自噬“缓病势”。强调在动态调度阴阳、调和自噬、正邪同治、扶祛兼顾为定法的基础上,随变治之,依症加减。提出中西医结合治疗卵巢癌的临床方法及理论依据,以期为卵巢癌的防治拓展新思路、促进中医理论的现代化诊疗进程。

关键词：阴阳理论卵巢癌自噬

重复经颅磁刺激对帕金森病患者步行能力和平衡功能影响的meta分析

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中国康复医学杂志 2024年第4期39卷 550-557页

作者：庞瑞丰唐强宋文婧吴民民朱路文黑龙江中医药大学黑龙江省哈尔滨市150040 黑龙江中医药大学附属第二医院

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元进行性退变为特征的神经系统疾病。临床表现为静止性震颤,运动迟缓,肌肉强直和姿势异常。在我国,65岁以上人群的PD患病率估计为1.70%[1],大约有300万例PD患者[2]。... 详细信息

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一种以黑质纹状体多巴胺能神经元进行性退变为特征的神经系统疾病。临床表现为静止性震颤,运动迟缓,肌肉强直和姿势异常。在我国,65岁以上人群的PD患病率估计为1.70%[1],大约有300万例PD患者[2]。步态异常是帕金森病的主要临床表现,主要分为早期、中期和晚期,早期步态特点为步长、步幅及步速的下降,步态变异性地增加,双手摆动减少,双下肢支撑相延长,双侧运动协调性改变等轻微表现[3—4],中后期继而发展为慌张步态、冻结步态。由于中枢神经和周围神经控制能力受损引起患者肌肉力量降低,进而导致患者的平衡功能下降及步态不稳,影响患者的活动能力、PD患者容易发生跌倒的危险[5].

关键词：重复经颅磁刺激 meta分析肌肉强直姿势异常步态异常步行能力运动迟缓神经系统疾病

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中药灌肠治疗慢性肾脏病的研究进展

Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences 2024年第4期33卷 305-315页

作者：桑永浩贠捷代丽娟宋立群黑龙江中医药大学黑龙江哈尔滨150040 黑龙江中医药大学附属第一医院黑龙江哈尔滨150036

慢性肾脏病(CKD)作为一个公共卫生问题,发病率高,死亡率高,寻找有效控制发展的治疗手段是亟待解决的难题。“肠-肾轴”理论的核心观点认为,随着CKD的进展,尿毒症毒素(UTs)逐渐蓄积,肠道屏障功能受损,肠道菌群失调;反过来,失调的肠道菌... 详细信息

慢性肾脏病(CKD)作为一个公共卫生问题,发病率高,死亡率高,寻找有效控制发展的治疗手段是亟待解决的难题。“肠-肾轴”理论的核心观点认为,随着CKD的进展,尿毒症毒素(UTs)逐渐蓄积,肠道屏障功能受损,肠道菌群失调;反过来,失调的肠道菌群和受损的肠道屏障通过加剧UTs的蓄积和诱导全身炎症反应等途径加重肾脏的损伤。基于此理论指导下的中药灌肠在治疗CKD上取得了一定的进展,本文结合国内外相关文献对“肠-肾轴”理论和运用中药灌肠联合基础治疗、中药灌肠联合结肠透析和中药灌肠联合口服中药等进行综述,以期为后续CKD的治疗提供新思路、新靶点。

关键词：肠肾轴中药灌肠慢性肾脏病研究进展

孕期行盆底肌肉训练预防或治疗大小便失禁效果的meta分析

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中国康复医学杂志 2024年第7期39卷 1019-1026页

作者：张世雯黄美灵支金草裴飞王艳黑龙江中医药大学黑龙江省哈尔滨市150040 黑龙江中医药大学附属第二医院

大便失禁(fecal incontinence,FI)和小便失禁(urinary incontinence,UI)是指在任何场合下尿液或液体、固体粪便不受控地流出[1-2]。大小便失禁是在妊娠或分娩后的女性中一类十分常见的疾病,约30%的孕产妇经历不同程度的UI,以及10%左右... 详细信息

大便失禁(fecal incontinence,FI)和小便失禁(urinary incontinence,UI)是指在任何场合下尿液或液体、固体粪便不受控地流出[1-2]。大小便失禁是在妊娠或分娩后的女性中一类十分常见的疾病,约30%的孕产妇经历不同程度的UI,以及10%左右的孕产妇伴有FI的发生[3-4]。

关键词：大小便失禁 meta分析大便失禁盆底肌肉训练孕产妇分娩后