检索结果-南通市图书馆

安徽农学通报 2020年第8期26卷 145-146页

作者：赵铁丰郭景茹原冬伟韦春波沈冰蕾张旭王艳超黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

为全面提升农业院校应用型人才培养质量,探讨农业院校构建校企合作协同育人模式,有效提升育人效果,该文以黑龙江八一农垦大学为例,从不同角度分析了校企协同育人机制的创新研究,以期达到全方位育人的目的。

关键词：校企合作协同育人人才培养

获能物质及微流控精子分离器对牛性控精子的影响

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中国畜牧杂志 2024年

作者：宋宇伦冯赫泽张涵李天峰王赫川朱思兵黄大鹏李井春黑龙江八一农垦大学动物科技学院

实验旨在研究获能物质及微流控精子分离器（MFSS）对牛性控精子的影响。在BO液中添加获能物质（空白对照组、10 μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10 μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组）对牛性控精子进行获能，比较各组性控精子活率、活力... 详细信息

实验旨在研究获能物质及微流控精子分离器（MFSS）对牛性控精子的影响。在BO液中添加获能物质（空白对照组、10 μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10 μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组）对牛性控精子进行获能，比较各组性控精子活率、活力及运动参数；利用MFSS（MFSS分为入口A储精室、B培养液室和出口C运动不良精子分离室、D运动良好精子分离室4个小室）分离获能效果较好的牛性控精液，测定A、C、D各小室精子的活率、活力、密度以及运动参数，分离后的精子经JC-1染色，流式细胞仪检测各小室精子线粒体相对活性和线粒体活性均衡精子。结果表明：空白对照组、10 μg/mL肝素组、5 mmol/L咖啡因组、10 μg/mL肝素+5 mmol/L咖啡因组精子获能后的精子活力、活率、运动性能均无显著差异。5 mmol/L咖啡因组经MFSS分离5 min后D室中精子活力、活率和线粒体相对活性高于A室和C室（P<0.05），精子密度低于A室（P<0.05），其他各组间差异均不显著。由此可见，获能物质咖啡因能够诱导牛精子体外获能，但作用效果不显著；MFSS能分离出高活力、高运动性能的精子，且精子的活力、运动性能与精子线粒体活性有关。

关键词：肝素咖啡因微流控精子分离器

基于T7 RNA聚合酶的犬瘟热病毒微型基因组构建与拯救

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中国动物传染病学报 2024年

作者：王慧孙艺洋王哲赵建军黑龙江八一农垦大学动物科技学院

为建立基于T7 RNA聚合酶的CDV反向遗传操作平台，以犬瘟热活疫苗CDV3弱毒株基因组序列为基础，人工合成CDV3株基因组3’-leader、5’-tailer序列和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因序列，反向克隆入T7启动子调控的表达质粒pCRscript，同... 详细信息

为建立基于T7 RNA聚合酶的CDV反向遗传操作平台，以犬瘟热活疫苗CDV3弱毒株基因组序列为基础，人工合成CDV3株基因组3’-leader、5’-tailer序列和增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因序列，反向克隆入T7启动子调控的表达质粒pCRscript，同时在微型基因组5’端和3’末端分别引入锤状核酶和丁肝核酶序列，构建犬瘟热病毒CDV3株微型基因组质粒pCR-mCDV3-EGFP。将pCR-mCDV3-EGFP质粒和表达麻疹病毒（MeV）N、P和L蛋白的3个辅助质粒共转染表达T7 RNA聚合酶BSR细胞后，通过荧光显微镜观察EGFP荧光。质粒共转染BSR细胞48 h后，在BSR细胞内可观察到特异绿色荧光成功拯救CDV微型基因组。本研究成功建立了基于CDV微型基因组的反向遗传操作平台，有望后期进行CDV的病毒拯救，为CDV新型疫苗研制和致病机理研究奠定基础。

关键词：犬瘟热病毒微型基因组病毒反向遗传技术

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慢性冷暴露对小鼠肝脏抗氧化功能的影响

动物营养学报 2022年第3期34卷 2023-2040页

作者：刘媛媛薛念宇张博熙李士泽吕红明黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319

本试验旨在探讨慢性冷暴露对小鼠肝脏抗氧化功能的影响。体内慢性冷暴露模型建立:试验将12只3周龄C57BL/6雄性小鼠饲养1周后随机分为2组(对照组和冷暴露组),每组6只。冷暴露组小鼠每日随机放置在4℃环境中3 h,连续4周。冷暴露结束后将... 详细信息

本试验旨在探讨慢性冷暴露对小鼠肝脏抗氧化功能的影响。体内慢性冷暴露模型建立:试验将12只3周龄C57BL/6雄性小鼠饲养1周后随机分为2组(对照组和冷暴露组),每组6只。冷暴露组小鼠每日随机放置在4℃环境中3 h,连续4周。冷暴露结束后将所有小鼠同时安乐死,并收集其血液和肝脏。体外冷暴露模型建立:将小鼠肝细胞系AML12细胞随机分为4组(对照组、冷暴露1 h组、冷暴露3 h组、冷暴露6 h组),先在37℃培养箱中培养24 h,然后将冷暴露组细胞置于32℃培养箱中分别亚低温冷刺激0、12、24、36 h,冷刺激结束后将细胞刮取下来进行后续试验。用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对小鼠血清中谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量进行检测,用Western Blot检测小鼠肝细胞和肝脏组织中抗氧化蛋白硫氧还蛋白-1(Trx-1)和硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的表达情况。结果显示:与对照组相比,冷刺激36 h后AML12细胞数量显著下降(P<0.05)。与对照组相比,Trx-1的蛋白表达量在组织和细胞中都显著降低(P<0.05),TXNIP的蛋白表达量显著增加(P<0.05),ELISA检测发现血清GSH含量显著减少(P<0.05),血清MDA含量显著增加(P<0.05)。综上所述,32℃亚低温处理一段时间后会对小鼠肝细胞造成一定的氧化损伤。4℃慢性冷暴露4周后,导致小鼠的抗氧化功能下降。

关键词：冷暴露抗氧化硫氧还蛋白-1 硫氧还蛋白互作蛋白肝脏

O-GlcNAc糖基化修饰对小鼠骨骼肌纤维的影响

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中国病理生理杂志 2022年第10期38卷 1828-1832页

作者：寇乐乐张萌李晓双徐彬李士泽黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

目的:体外探讨O连接的N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰对小鼠骨骼肌纤维的影响。方法:选取5周龄SPF级C57BL/6雄性野生型(wild-type,WT)小鼠和Ogt小鼠各10只,分为两组进行适应性饲喂,每组小鼠均于人工智能气... 详细信息

目的:体外探讨O连接的N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰对小鼠骨骼肌纤维的影响。方法:选取5周龄SPF级C57BL/6雄性野生型(wild-type,WT)小鼠和Ogt小鼠各10只,分为两组进行适应性饲喂,每组小鼠均于人工智能气候室内自由采食、独立生长。饲养至8周龄时将小鼠麻醉后,用脱颈法处死采集腓肠肌。利用免疫荧光染色法检测小鼠骨骼肌纤维组成,利用Western blot方法对小鼠骨骼肌发育相关的蛋白进行定量检测,利用Seahorse线粒体能量代谢分析仪检测线粒体呼吸情况,明确骨骼肌O-GlcNAc修饰对小鼠骨骼肌发育的影响。结果:耗氧量分析表明,与WT小鼠相比,Ogt小鼠的线粒体耗氧率(oxygen consumption rate,OCR;包括基础有氧呼吸、ATP合成、最大呼吸值及非线粒体呼吸)均显著降低(P<0.01);免疫荧光与Western blot结果显示,与WT小鼠相比,Ogt小鼠骨骼肌组织中I型肌纤维(肌球蛋白重链7,myosin heavy chain 7,Myh7)显著升高(P<0.05),II型肌纤维(肌球蛋白重链2,myosin heavy chain 2,Myh2)显著降低(P<0.05)。结论:Ogt基因缺失会引起小鼠骨骼肌线粒体功能损伤,骨骼肌质量减少,肌纤维比例发生变化。

关键词： O连接的N-乙酰葡萄糖胺骨骼肌纤维线粒体

基于网络药理学探讨EGCG对顺铂所致大鼠急性肾损伤的保护作用

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中国实验动物学报 2024年第5期32卷 638-647页

作者：杨春雪徐恩爽张风郑家三黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163000

目的基于网络药理学和体内动物模型实验,评价表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对顺铂(cisplatin,CIS)诱导的大鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)的保护效果。方法通过TCMSP、Gene Cards、OMIM网站收集EGCG、AKI作用靶点,取交集后构建蛋白质-蛋白质互作网络(PPI),Cytoscape 3.9.1对交集靶点进行可视化分析,筛选出关键靶点,通过DAVID数据库进行KEGG和GO富集分析。32只雄性Wistar大鼠,随机分为对照组(CON组)、EGCG组、顺铂组(CIS组)和CIS+EGCG组。CON组和CIS组灌胃生理盐水,EGCG组和CIS+EGCG组灌胃EGCG(40 mg/kg),连续28 d,第26天CIS组、CIS+EGCG组腹腔注射CIS(7 mg/kg),第29天收集血液和组织。检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肾病理变化;TUNEL检测肾组织细胞凋亡情况;Western Blot、qRT-PCR及免疫组化验证分析结果。结果网络药理学筛选出87个EGCG与AKI交集基因,25个核心靶点,通过PI3K/AKT等信号通路和多种生物过程影响AKI的发展;EGCG预处理明显降低AKI大鼠血清中BUN、SCr水平,改善AKI大鼠肾病变,缓解AKI大鼠肾组织凋亡;Western Blot、qRT-PCR及免疫组化结果表明预处理EGCG可激活PI3K/AKT通路。结论基于以上研究结果,推测出EGCG可能通过激活PI3K/AKT信号通路进而缓解CIS诱导的大鼠AKI。

关键词：顺铂 EGCG 急性肾损伤网络药理学

基于HPLC-MS/MS技术的酮病奶牛血清脂质代谢物分析

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中国兽医学报 2024年第4期44卷 802-807页

作者：李卓常仁旭孙旭东徐闯黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

对25头荷斯坦奶牛进行初次筛选,包含13头疑似酮病和12头疑似健康奶牛。依据临床症状和血液酮体浓度将其分为临床型酮病组(血液中BHBA≥3.0mmol/L,NEFA>0.5mmol/L,且表现消瘦、食欲减退)及健康组(血液中BHBA1的脂质分子。结果显示:共筛选... 详细信息

对25头荷斯坦奶牛进行初次筛选,包含13头疑似酮病和12头疑似健康奶牛。依据临床症状和血液酮体浓度将其分为临床型酮病组(血液中BHBA≥3.0mmol/L,NEFA>0.5mmol/L,且表现消瘦、食欲减退)及健康组(血液中BHBA1的脂质分子。结果显示:共筛选出18个与酮病相关的差异代谢物,与健康组相比,酮病组其中有5种磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,PC)、4种胆固醇酯(cholesterol esters,CE)、2种鞘磷脂(sphingomyelin,SM)、2种溶血磷脂酰胆碱(lyso-phosphatidyl choline,LPC)、2种甘油三酯(triglyceride,TAG)降低;有3种游离脂肪酸(free fat acid,FFA)升高。结果表明,这些异常的脂质可能是酮病奶牛的新型标志物。

关键词：奶牛围产期酮病脂质组学 HPLC-MS/MS

PRRSV经典毒株、高致病毒株、类NADC30毒株及类NADC34毒株鉴别RT-PCR检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2024年第4期54卷 465-471页

作者：蹇艳银张佳怡张耕馨倪民婷卢淳师源王金涛黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

为提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)不同流行毒株的快速鉴别诊断能力,本研究对近几年国内外流行的PRRSV不同毒株的Nsp2核苷酸序列进行比对,设计了1对可用于鉴别4类不同PRRSV毒株的简并引物,建立了鉴别PRRSV经典毒株(C-PRRSV)、高致病... 详细信息

为提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)不同流行毒株的快速鉴别诊断能力,本研究对近几年国内外流行的PRRSV不同毒株的Nsp2核苷酸序列进行比对,设计了1对可用于鉴别4类不同PRRSV毒株的简并引物,建立了鉴别PRRSV经典毒株(C-PRRSV)、高致病毒株(HP-PRRSV)、类NADC30毒株(NADC30-like)及类NADC34毒株(NADC34-like)的RT-PCR检测方法。结果显示,C-PRRSV、HP-PRRSV、NADC30-like、NADC34-like毒株Nsp2基因的扩增片段大小分别为1072 bp、982 bp、679 bp、772 bp,检测限分别为4.70×10 copies/μL、3.34×10^(2)copies/μL、8.57×10 copies/μL、5.71×10^(2)copies/μL,对其他常见猪病病原均未扩增出特异性条带,3次重复试验均能够扩增出均匀一致的目的片段;83份临床组织样品共检出阳性27份,其中NADC30-like毒株7份、NADC34-like毒株20份,与GP5基因检测结果的符合率为97.6%。上述结果表明,本研究建立的PRRSV鉴别RT-PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于C-PRRSV、HP-PRRSV、NADC30-like、NADC34-like毒株的快速鉴别和流行病学调查。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株高致病毒株类NADC30毒株类NADC34毒株鉴别

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奶牛趾间皮肤外植体模型的构建及效果评价

中国农业大学学报 2023年第1期28卷 172-179页

作者：张鹤飞周志新孙悦杨春雪郑家三黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

为建立一种可用于奶牛蹄部感染性疾病研究的皮肤外植体模型,本研究利用气液交界面皮肤组织培养模式离体培养健康奶牛后蹄趾间皮肤,分别于培养0、12、24、36、48和72 h收集皮肤组织并采用HE染色法、原位末端标记(TUNEL)法及免疫组织化学... 详细信息

为建立一种可用于奶牛蹄部感染性疾病研究的皮肤外植体模型,本研究利用气液交界面皮肤组织培养模式离体培养健康奶牛后蹄趾间皮肤,分别于培养0、12、24、36、48和72 h收集皮肤组织并采用HE染色法、原位末端标记(TUNEL)法及免疫组织化学方法对外植体的病理组织变化、组织细胞凋亡及凋亡相关蛋白Caspase-3表达进行检测。结果表明:1)与0 h对照组模型相比,培养12、24和36 h的皮肤组织表皮结构完整,真皮层发生不同程度变性;36 h皮肤组织上皮细胞出现变性迹象;48 h皮肤组织上皮细胞发生不同程度变性、坏死,并伴有核固缩;72 h皮肤组织表皮脱落、缺失,皮肤附属器官发生不同程度坏死,无法保持正常的组织结构和功能。2)皮肤外植体细胞发生不同程度凋亡,Caspase-3蛋白呈阳性表达,且表皮中凋亡细胞数量及Caspase-3蛋白阳性表达情况高于真皮。与对照组相比,24 h皮肤外植体细胞凋亡情况出现显著差异(P<0.05),36 h皮肤外植体Caspase-3蛋白阳性率出现显著差异(P<0.05)。本研究构建了一种稳定的奶牛趾间皮肤外植体模型,离体培养24 h仍保持正常的组织结构、形态功能及活性,为奶牛蹄部感染性疾病体外研究提供一种新方法。

关键词：奶牛肢蹄病动物模型皮肤外植体病理变化细胞凋亡

酪氨酸联合半胱氨酸对冷暴露小鼠肝脏产热能力的影响

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中国兽医学报 2023年第11期43卷 2321-2327页

作者：孟凡舜李仕韦夏榕鸽徐彬李士泽黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319

运用HE染色法观察小鼠肝脏在添加酪氨酸和半胱氨酸后是否有损伤;油红O染色法观察小鼠肝脏脂质沉积的变化;血清生化检测小鼠血脂四项的表达水平;最后用RT-qPCR和Western blot法检测小鼠肝脏中产热相关基因的表达水平。结果显示,添加酪氨... 详细信息

运用HE染色法观察小鼠肝脏在添加酪氨酸和半胱氨酸后是否有损伤;油红O染色法观察小鼠肝脏脂质沉积的变化;血清生化检测小鼠血脂四项的表达水平;最后用RT-qPCR和Western blot法检测小鼠肝脏中产热相关基因的表达水平。结果显示,添加酪氨酸和半胱氨酸后小鼠体质量下降,肝脏并未出现明显损伤并且小鼠肝脏中的脂滴含量下降;除Ⅱ组的低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)无显著下降外,添加了酪氨酸和半胱氨酸的小鼠血液中的甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和LDL-C都显著降低;高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)只有Ⅵ组显著升高。RT-qPCR结果显示,常温条件下除Ⅱ组的PPAR-α的mRNA无显著表达外,其他产热相关mRNA显著升高;冷暴露条件下只有Ⅴ组的PPAR-α的mRNA上升显著,除Ⅵ组UCP1的mRNA上升显著,其他3个产热相关mRNA极显著上升。Western blot结果显示,常温条件下Ⅱ组的产热相关蛋白显著上升,其中PGC-1α上升极显著,Ⅲ组除UCP1上升显著外,其他产热蛋白无显著上升;冷暴露条件下Ⅴ组的PPAR-α升高显著,其他产热蛋白上升不显著,Ⅵ组的产热相关蛋白都有显著上升,其中PPAR-α和PPAR-γ上升极显著。结果表明,联合使用酪氨酸和半胱氨酸可以降低小鼠体质量并改善小鼠的血脂水平,提高小鼠肝脏的产热能力。

关键词：冷暴露酪氨酸半胱氨酸肝脏产热小鼠