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HPLC-ABTS-DAD-ESI-TOF/MS在线筛选柴银颗粒抗氧化成分及指纹图谱研究

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中草药 2024年第16期55卷 5484-5493页

作者：郭焕滢胡思萌关永霞纪文华张贵民赵恒强王晓齐鲁工业大学(山东省科学院)山东省分析测试中心山东省大型精密分析仪器应用技术重点实验室山东济南250014 齐鲁工业大学(山东省科学院)药学院山东省高等学校天然药物活性成分研究重点实验室山东济南250014 鲁南制药集团股份有限公司中药制药共性技术国家重点实验室山东临沂276006

目的建立HPLC-ABTS-DAD-ESI-TOF/MS在线筛选、鉴别柴银颗粒抗氧化活性成分的方法,并探讨抗氧化活性成分指纹图谱联合多成分定量用于柴银颗粒质量评价的可行性。方法采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以甲醇-0.2... 详细信息

目的建立HPLC-ABTS-DAD-ESI-TOF/MS在线筛选、鉴别柴银颗粒抗氧化活性成分的方法,并探讨抗氧化活性成分指纹图谱联合多成分定量用于柴银颗粒质量评价的可行性。方法采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),以甲醇-0.2%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,柱温为25℃,在280 nm下实现柴银颗粒提取物的色谱分析。柱后通过三通与ABTS溶液混合进入反应线圈,ABTS体积流量为0.6 mL/min,反应管内径为0.25 mm,长度为10 m。通过检测ABTS在734 nm下产生倒峰所对应的色谱峰,筛选出抗氧化成分。结果在柴银颗粒中筛选出44种抗氧化成分,采用DAD-ESI-Q-TOF/MS初步鉴别出37种。活性验证表明,连翘酯苷A、木犀草苷、黄芩苷、绿原酸、葛根素均具有较好的抗氧化活性,其中,连翘酯苷A半数清除浓度(IC_(50))为(11.08±1.21)μmol/L,优于阳性对照抗坏血酸。对该5种活性成分进行了含量测定。以筛选出的抗氧化成分为共有峰,建立了柴银颗粒抗氧化成分指纹图谱;相似度分析表明,不同批次样品相似度均在0.99以上。结论建立的抗氧化成分在线筛选、鉴别方法分析速度快、灵敏度高,可以快速辨识柴银颗粒中的抗氧化成分。由此建立的抗氧化活性成分指纹图谱,把化学成分与生物活性相关联,为中成药的整体质量评价研究提供方法与思路支持。

关键词：柴银颗粒 HPLC-ABTS 抗氧化成分在线筛选指纹图谱多成分测定连翘酯苷A 木犀草苷黄芩苷绿原酸葛根素

基于代谢组学探讨首荟通便胶囊对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用及机制研究

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中国中药杂志 2024年

作者：韦方娇张丛慧王秀文汪琨王志康姚景春张贵民山东中医药大学药学院临沂市天然药物免疫药理毒理重点实验室鲁南制药集团股份有限公司经方与现代中药融合创新全国重点实验室

探讨首荟通便胶囊（SHTB）对大鼠脑缺血再灌注模型的保护作用及潜在机制。将大鼠随机分为假手术组、模型组、首荟通便胶囊低剂量组(0.2 g·kg-1·d-1) 、首荟通便胶囊高剂量组(0.4g·kg-1·d-1)、依达拉奉阳性药组(5.4 mg·kg-1·d-1)... 详细信息

探讨首荟通便胶囊（SHTB）对大鼠脑缺血再灌注模型的保护作用及潜在机制。将大鼠随机分为假手术组、模型组、首荟通便胶囊低剂量组(0.2 g·kg-1·d-1) 、首荟通便胶囊高剂量组(0.4g·kg-1·d-1)、依达拉奉阳性药组(5.4 mg·kg-1·d-1)，每组 12只。大鼠于术前7 d连续灌胃给药，使用线栓法建立大鼠脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia-reperfusion injury，CIRI）模型。通过Zea-Longa 等级神经功能评分表评定大鼠神经功能受损情况；苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织病理损伤情况；2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定大鼠脑梗死体积；酶联免疫吸附测定（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒检测各组大鼠血清白细胞介素-6 （interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-1β （interleukin-1β，IL-1β）、肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor-α，TNF-α）的水平；蛋白免疫印记（Western blot）技术检测大鼠血脑屏障以及肠道屏障相关紧密连接蛋白水平和脑组织Toll样受体4（Toll-like receptor 4，TLR4），髓样分化因子88（myeloid differentiation factor 88，MyD88）和核因子κB（nuclear factor-κB，NF-κB）TLR4/MyD88/NF-κB通路相关蛋白表达；超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）检测大鼠脑组织和血清代谢物的变化，挖掘出SHTB治疗大鼠脑缺血再灌注损伤的潜在机制。与模型组相比，SHTB可明显缓解脑缺血再灌注损伤（cerebral ischemia/reperfusion injury，CIRI）大鼠脑部病理损伤，减少脑梗体积，降低血清中炎症水平；Western blot 结果显示，与模型组相比，SHTB 能够调控CIRI大鼠血脑屏障及肠道屏障相关紧密连接蛋白的表达，下调脑组织TLR4、NF-κB、MyD88蛋白表达；UPLC-MS/MS结果表明，SHTB可显著调节脂肪酸类等潜在差异代谢物的含量，血清与脑组织的共有通路涉及不饱和脂肪酸生物合成等通路。SHTB可修复肠道屏障功能，降低机体炎症水平，进而改善受损的血脑屏障，发挥保护脑神经的作用，其机制可能是通过平衡脂肪酸代谢，调节TLR4/MyD88/NF-κB信号通路蛋白的表达来实现。

关键词：首荟通便胶囊脑缺血再灌注血脑屏障肠道屏障炎症代谢组学

响应面试验优化金银花浸膏的真空带式干燥工艺研究

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现代药物与临床 2024年第10期 2521-2526页

作者：郭田甜杨本官张丽萍房兆营孙艳庄会芳刘震远马庆文毕艳艳王永刚鲁南制药集团经方与现代中药融合创新全国重点实验室鲁南厚普制药有限公司中药制药共性技术山东省工程研究中心鲁南制药集团股份有限公司鲁南贝特制药有限公司

目的优化金银花浸膏的真空带式干燥工艺。方法将单因素试验和响应面试验法结合，确定考察金银花浸膏的相对密度、第2段加热温度、履带速率和布料速度4个影响因素，以金银花干浸膏的水分和绿原酸转移率的综合评分作为考察指标，对金银... 详细信息

目的优化金银花浸膏的真空带式干燥工艺。方法将单因素试验和响应面试验法结合，确定考察金银花浸膏的相对密度、第2段加热温度、履带速率和布料速度4个影响因素，以金银花干浸膏的水分和绿原酸转移率的综合评分作为考察指标，对金银花浸膏的真空带式干燥工艺参数进行优化。结果最优化工艺参数为第2段加热温度为90℃、浸膏相对密度为1.27、履带速率110 mm/min，布料速度为1.6 L/h。结论所得工艺耗时短、效率高，工艺稳定，可操作性强，为金银花工业化生产提供了参考。

关键词：金银花提取物带式真空干燥水分绿原酸转移率响应面试验

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小建中合剂活性炭除杂工艺优化及其制剂稳定性影响研究

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山东科学 2024年第4期37卷 1-8页

作者：张微刘震远杜昊忱郭田甜杨梅王善栋韩培宋祥云张贵民鲁南厚普制药有限公司中药制药共性技术山东省工程研究中心山东临沂276006 鲁南制药集团股份有限公司经方与现代中药融合创新全国重点实验室山东临沂276006 鲁南制药集团股份有限公司山东临沂276006

为提高小建中合剂制剂澄清度与稳定性,选用活性炭除杂工艺纯化小建中合剂,采用正交试验评价法,以活性炭的用量、煮炭时间、除炭时的药液温度为考察因素,以芍药苷转移率、干物质转移率为考察指标,进行方差分析、直观分析结合加速稳定性... 详细信息

为提高小建中合剂制剂澄清度与稳定性,选用活性炭除杂工艺纯化小建中合剂,采用正交试验评价法,以活性炭的用量、煮炭时间、除炭时的药液温度为考察因素,以芍药苷转移率、干物质转移率为考察指标,进行方差分析、直观分析结合加速稳定性试验结果,优选小建中合剂活性炭除杂工艺,并在该条件下生产3批小建中合剂制剂进行长期稳定性试验。结果表明小建中合剂制剂煮炭除杂最佳工艺参数为活性炭使用量0.4%、煮炭时间30 min及滤过时药液温度100℃,此工艺条件扩大生产的平均芍药苷转移率为75.24%、干物质转移率为89.08%。该试验所得最佳煮炭除杂工艺可保证小建中合剂澄清度及稳定性,同时最大程度保留芍药苷及干物质,从而保证药品疗效的稳定均一,为小建中合剂煮炭除杂纯化工艺参数的明确及优化提供了科学、合理的依据。

关键词：小建中合剂活性炭高效液相色谱芍药苷干物质

基于超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱和网络药理学技术的清肝颗粒质量评价研究

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世界中医药 2024年第14期19卷 2035-2047页

作者：王璟璐关永霞范建伟李艳芳张贵民广东药科大学中药学院广州510000 经方与现代中药融合创新全国重点实验室临沂276000 鲁南制药集团股份有限公司临沂276006

目的:阐明清肝颗粒治疗黄疸性肝炎的物质基础,建立科学的质量控制方法。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术对清肝颗粒的活性成分进行表征分析;以清肝颗粒中鉴定出的活性成分为目标对象,进... 详细信息

目的:阐明清肝颗粒治疗黄疸性肝炎的物质基础,建立科学的质量控制方法。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)技术对清肝颗粒的活性成分进行表征分析;以清肝颗粒中鉴定出的活性成分为目标对象,进行网络药理学和分子对接研析,并建立多成分含量测定方法。结果:共鉴定出134个成分,其中黄酮类50个、糖苷类8个、苯丙素类17个、三萜类11个、萜类6个、氨基酸类11个、有机酸类9个、脂肪酸类7个、生物碱类8个、挥发油类5个、醌类1个,并解析了黄酮类、萜类、有机酸类、生物碱类以及糖苷类代表性化合物的裂解规律。通过网络药理学分析筛选出8个核心靶点。预测了主要活性成分为异甘草素、腺苷、甘草素、鸟苷、4,5-二咖啡酰奎宁酸等。其次,依据可测性、特征性以及活性相关性的原则,建立了3,4-二咖啡酰奎宁酸、(R,S)-告依春、甘草素、4,5-二咖啡酰奎宁酸和甘草酸铵等5个潜在活性成分的含量测定方法。结论:筛选出了清肝颗粒治疗黄疸性肝炎的主要药效活性成分,并展开定量研究,可为清肝颗粒质量控制水平的提高提供了依据。

关键词：清肝颗粒超高效液相色谱-四级杆-静电场轨道阱定性分析裂解途径网络药理学分子对接黄疸性肝炎多成分含量测定

外来植物药卡瓦胡椒的文献研究及中药药性探讨

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世界中医药 2024年第10期19卷 1526-1531页

作者：王晨曦赵天伦秦露刘广绪刘亚丽杨敏冯帅李峰山东中医药大学药学院济南250355 鲁南制药集团股份有限公司经方与现代中药融合创新全国重点实验室临沂276006

卡瓦胡椒药用价值广泛,在欧洲和美国颇负盛名,是欧美地区最受欢迎的植物药之一。要加强对外来植物药的“中药化”研究,赋予其中药药性,必将产生巨大的经济和社会价值,促进中医药事业的长远发展。卡瓦胡椒主要以根及根茎入药,性温热,味苦... 详细信息

卡瓦胡椒药用价值广泛,在欧洲和美国颇负盛名,是欧美地区最受欢迎的植物药之一。要加强对外来植物药的“中药化”研究,赋予其中药药性,必将产生巨大的经济和社会价值,促进中医药事业的长远发展。卡瓦胡椒主要以根及根茎入药,性温热,味苦辛,归心、肝、肾经;有镇静安神,息风止痉,疏肝解郁,麻醉止痛,祛湿利水等功效。可用于心神不宁,心悸失眠,抽搐痉挛,风湿、舌苔厚白、小便不畅等证。

关键词：中医药外来植物卡瓦胡椒中药药性归经性味升降浮沉

黄芪饮片不同灭菌方式考察及最佳灭菌工艺研究

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中国药师 2024年第7期27卷 1134-1141页

作者：高艳红曹玲崔琳琳金宗元周冰李晨鹏赵利枝鲁南制药集团股份有限公司山东临沂276006 经方与现代中药融合创新全国重点实验室山东临沂276006 中药制药共性技术山东省工程研究中心山东临沂276006

目的对比黄芪饮片的性状、气味、指纹图谱、灭菌效果及浸出物、有效成分含量,以考察不同灭菌方式对黄芪饮片质量的影响,进一步优选黄芪饮片的最佳灭菌工艺参数。方法对比湿热灭菌、辐照灭菌、干热灭菌对黄芪饮片质量的影响,选择最佳灭... 详细信息

目的对比黄芪饮片的性状、气味、指纹图谱、灭菌效果及浸出物、有效成分含量,以考察不同灭菌方式对黄芪饮片质量的影响,进一步优选黄芪饮片的最佳灭菌工艺参数。方法对比湿热灭菌、辐照灭菌、干热灭菌对黄芪饮片质量的影响,选择最佳灭菌方式。基于此,以黄芪甲苷含量、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量、两者总含量和灭菌率为考察指标,灭菌温度、灭菌时间、物料厚度为考察因素,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化黄芪饮片最佳干热灭菌工艺。结果选择干热灭菌方式对黄芪饮片进行灭菌;干热灭菌最佳工艺为:灭菌温度113℃、灭菌时间5.1 h、物料厚度19 mm。结论综合考虑灭菌效果、对有效成分含量的影响、操作性及经济成本,选择干热灭菌为黄芪饮片的最佳灭菌方式,优选得到的灭菌工艺稳定可行、重复性好,可为其工业化生产提供科学依据。

关键词：黄芪湿热灭菌干热灭菌辐照灭菌层次分析法响应面

基于HPLC指纹图谱的葶苈大枣泻肺汤相关评价

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中国现代中药 2024年第2期26卷 342-347页

作者：马云关永霞王艳严琴琴周冰申凤霞李倩聂宗恒范建伟赵利枝鲁南制药集团股份有限公司经方与现代中药融合创新全国重点实验室山东临沂276006 鲁南厚普制药有限公司中药制药共性技术山东省工程研究中心山东临沂276006 临沂大学山东临沂276000

目的:建立葶苈大枣泻肺汤物质基准的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱和6个指标成分的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱梯度洗脱法,借助“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012A版)建立14批葶苈大枣泻肺汤的HPLC特征指纹图谱,同... 详细信息

目的:建立葶苈大枣泻肺汤物质基准的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱和6个指标成分的含量测定方法。方法:采用反相高效液相色谱梯度洗脱法,借助“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012A版)建立14批葶苈大枣泻肺汤的HPLC特征指纹图谱,同时测定槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、芦丁、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和异鼠李素6个指标成分的含量。结果:葶苈大枣泻肺汤的HPLC特征指纹图谱共标定了27个共有峰,6个特征峰分别为5号峰(槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷)、18号峰(芦丁)、19号峰(异槲皮苷)、21号峰(异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖)、24号峰(槲皮素)和27号峰(异鼠李素)。对14批葶苈大枣泻肺汤进行含量测定,槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷、芦丁、异槲皮苷、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素和异鼠李素质量浓度分别为111.33~118.71、9.16~9.36、16.51~17.26、12.23~12.62、3.10~3.36、3.51~3.62μg·mL-1,方法精密度、稳定性、重复性均良好。结论:建立的HPLC指纹图谱和多指标成分含量测定方法稳定可靠,可为葶苈大枣泻肺汤的质量标准研究提供参考。

关键词：葶苈大枣泻肺汤物质基准高效液相色谱法指纹图谱含量测定

金藤清痹颗粒多波长融合指纹图谱建立及质量评价

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中成药 2024年第10期 3400-3405页

作者：郭威田雨晴唐云峰王亮王晓关永霞张贵民山东中医药大学药学院鲁南制药集团股份有限公司经方与现代中药融合创新全国重点实验室青岛大学附属山东省妇幼保健院齐鲁工业大学(山东省科学院) 山东省分析测试中心山东省中药质量控制技术重点实验室

目的建立金藤清痹颗粒多波长融合指纹图谱，并对其质量进行评价。方法分析采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5μm）;流动相水（含0.5%磷酸）-甲醇，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长262、280、330 n... 详细信息

目的建立金藤清痹颗粒多波长融合指纹图谱，并对其质量进行评价。方法分析采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5μm）;流动相水（含0.5%磷酸）-甲醇，梯度洗脱；体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长262、280、330 nm。以分离度大于1.5以上峰数及共有峰数为指标，对比传统分段融合指纹图谱。采用主成分分析、正交偏最小二乘判别分析考察质量一致性。结果共有峰融合柱指纹图谱优于传统分段融合指纹图谱，19批样品指纹图谱中有22个共有峰，相似度均不低于0.9,指认出7种成分。其中，没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C、青藤碱相对峰面积分别为1.088～1.880、0.016～0.027、2.184～3.594、1.133～1.874、0.691～1.137、1.039～1.632。确定4种主成分，VIP大于1的成分有9种。结论该方法稳定可行，区分度良好，可用于金藤清痹颗粒的质量评价，新绿原酸、异绿原酸B、绿原酸可作为该制剂质量评价和工艺优化的重点成分。

关键词：金藤清痹颗粒多波长融合指纹图谱主成分分析质量评价正交偏最小二乘判别分析