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C反应蛋白激活原纤毛抑制颅骨成骨细胞的增殖和分化

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中国骨质疏松杂志 2021年第8期27卷 1163-1168页

作者：许洁刘杰汪长东重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室肿瘤与分子医学中心基础医学院重庆400016

目的研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对原代培养SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖及成骨分化的影响。方法取SD乳鼠颅骨组织用胰蛋白酶和胶原蛋白酶Ⅰ消化得到原代ROB,随后将ROB用α-MEM培养基培养,传... 详细信息

目的研究C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)对原代培养SD大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖及成骨分化的影响。方法取SD乳鼠颅骨组织用胰蛋白酶和胶原蛋白酶Ⅰ消化得到原代ROB,随后将ROB用α-MEM培养基培养,传代3次后用于后续实验。在对照组和5 mg/mL CRP的处理组中,成骨分化培养基诱导3 d进行免疫荧光检测两组Ki-67和acetylated-α-tubulin和γ-tubulin表达情况;同时,蛋白质印迹分析osteopontin(OPN)、alkaline phosphatase(ALP)、acetylated-α-tubulin和γ-tubulin的表达;成骨分化培养基诱导21 d茜素红染色检测成骨基质矿化结节量。结果免疫荧光显示,5 mg/mL CRP抑制成骨细胞增殖,与对照组差异有统计学意义(P学意义;免疫荧光结果显示,细胞原纤毛长度增加(P<0.001),免疫印迹结果显示acetylated-α-tubulin和γ-tubulin蛋白的表达均升高(P<0.001)。结论5 mg/mL CRP显著抑制ROB增殖与成骨分化矿化并且显著激活细胞原纤毛。CRP为炎症因子典型代表,这些数据表明炎症因子激活细胞原纤毛发挥其抑制成骨细胞的增殖与分化作用,提示抑制原纤毛或阻断炎症因子的释放可以治疗炎症引起的骨丢失疾病。

关键词： C反应蛋白颅骨细胞增殖分化炎症

布拉酵母菌制剂辅助治疗艰难拟梭菌相关腹泻有效性和安全性的系统评价

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中国微生态学杂志 2022年第11期34卷 1299-1305页

作者：刘一锋苏建荣首都医科大学附属北京友谊医院临床检验中心北京100050

目的评估布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii,S. boulardii)制剂辅助治疗艰难拟梭菌相关腹泻(Clostridioides difficile associated diarrhea,CDAD)的有效性和安全性。方法首先通过计算机检索中国知网、万方数据知识服务平台、中国... 详细信息

目的评估布拉酵母菌(Saccharomyces boulardii,S. boulardii)制剂辅助治疗艰难拟梭菌相关腹泻(Clostridioides difficile associated diarrhea,CDAD)的有效性和安全性。方法首先通过计算机检索中国知网、万方数据知识服务平台、中国生物医学文献服务系统、PubMed、Embase、Cochrane Library数据库中发表的有关布拉酵母菌治疗CDAD的临床随机对照试验;然后按照纳入及排除标准进行文献筛选、质量评价和数据提取,并根据干预措施的不同将纳入研究对象分为试验组(抗生素联合口服布拉酵母菌制剂治疗)和对照组(抗生素联用或不联用安慰剂治疗),利用Review Manager 5.4软件对符合纳入标准的文献进行Meta分析,最后利用Stata 12.0软件对纳入文献各结局指标的发表偏倚进行定量评估。结果共纳入9篇文献,包含2 036例研究对象。Meta分析结果显示,与对照组相比,试验组患者CDAD的整体患病率降低,差异有统计学意义(RR=0.47,95%CI:0.27~0.81,P=0.007)。亚组分析发现,在儿童患者中,试验组患儿的CDAD患病率比对照组低,差异有统计学意义(RR=0.23,95%CI:0.08~0.68,P=0.008),两组患儿均无药物不良反应的病例报告;在成人患者中,试验组和对照组CDAD患病率(RR=0.67, 95%CI:0.35~1.31,P=0.240)和药物不良反应发生率(RR=0.94,95%CI:0.70~1.27,P=0.690)差异均无统计学意义,两组患者均无严重不良反应的病例报告。Begg和Egger检验均未发现纳入文献的各结局指标有显著发表偏倚。结论布拉酵母菌制剂辅助治疗CDAD的策略表现出良好的临床安全性,有助于减少儿童患者的患病率,但对成人患者无效。由于受到纳入文献数量和质量的限制,以上结论仍需要更多高质量的研究进一步验证。

关键词：布拉酵母菌艰难拟梭菌腹泻系统评价

染色质免疫沉淀技术及其在基因表达调控研究中的初步应用

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中国医学科学院学报 2004年第1期26卷 52-55页

作者：张勇程小款吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的验证抑癌基因表达产物p53蛋白在体内是否结合于p21WAF1/CIP1基因的启动子区,并检测p53蛋白对热休克蛋白hsp90β基因启动子区的结合情况。方法采用染色质免疫沉淀(ChIP)及PCR技术检测特异基因调节序列,Western印迹分析p53蛋白。结果... 详细信息

目的验证抑癌基因表达产物p53蛋白在体内是否结合于p21WAF1/CIP1基因的启动子区,并检测p53蛋白对热休克蛋白hsp90β基因启动子区的结合情况。方法采用染色质免疫沉淀(ChIP)及PCR技术检测特异基因调节序列,Western印迹分析p53蛋白。结果在p53抗体免疫沉淀的DNA片段中含有p21WAF1/CIP1和hsp90β基因的启动子区p53蛋白结合序列,免疫沉淀样品中含有p53蛋白。结论p53蛋白在体内结合于p21WAF1/CIP1和hsp90β基因的启动子区,参与两基因的表达调控。

关键词：染色质免疫沉淀 hsp90β p53 p21^WAF1/CIP1

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急性心肌梗死患者的院内早期心脏康复新进展

中国介入心脏病学杂志 2023年第7期31卷 541-546页

作者：高逸凡胡荣张瀛月徐勇马晶首都医科大学附属北京天坛医院心脏大血管中心北京100070

心脏康复(CR)是在生物-心理-社会医学模式指导下的一种新型综合性管理方法,是针对患者的一系列协调且多方面的干预措施,旨在全面优化心血管疾病患者的身体、心理和社会功能,减轻疾病的不利影响。完整的CR从急性心肌梗死(AMI)患者的住院... 详细信息

心脏康复(CR)是在生物-心理-社会医学模式指导下的一种新型综合性管理方法,是针对患者的一系列协调且多方面的干预措施,旨在全面优化心血管疾病患者的身体、心理和社会功能,减轻疾病的不利影响。完整的CR从急性心肌梗死(AMI)患者的住院早期开始,贯穿住院治疗及后续门诊治疗,最长可持续终身。《中国心脏康复与二级预防指南》指出,条件允许的情况下,AMI患者应当尽快开始CR。本文结合相关文献,旨在从运动训练、心理干预、药物治疗、营养膳食及戒烟干预等5个方面对AMI患者的住院早期CR方案做一综述。

关键词：心脏康复急性心肌梗死二级预防

重庆地区幽门螺杆菌的EPIYA基序多态性与胃十二指肠疾病的关系

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中国新药杂志 2015年第10期24卷 1160-1165,1170页

作者：林震田志颖朱黎黎田玲郑建杨致邦重庆医科大学附属第二医院检验科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院感染性疾病分子生物学实验室重庆400016

目的：幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）产生的细胞毒素相关蛋白A（cytotoxin associated antigen A,Cag A）羧基末端的EPIYA序列与胃十二指肠疾病的关系一直存在争议。本研究采集大量H.pylori高感染率同时也是胃癌高发病率... 详细信息

目的：幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）产生的细胞毒素相关蛋白A（cytotoxin associated antigen A,Cag A）羧基末端的EPIYA序列与胃十二指肠疾病的关系一直存在争议。本研究采集大量H.pylori高感染率同时也是胃癌高发病率的中国重庆地区的病例,通过检测患者感染的H.pylori Cag A羧基末端EPIYA基序的多态性,探讨EPIYA基序与临床胃十二指肠疾病发生的潜在关系。方法：收集消化不良患者的胃黏膜标本分离培养H.pylori,提取细菌基因组DNA,PCR扩增Cag A基因的3＇端区域并分型,根据分型结果随机抽样测序确认,结合分离出H.pylori患者的病历资料,分析EPIYA类型与胃十二指肠疾病之间的关系。结果：292（97.3%）株为Cag A阳性,但Cag A阳性与胃十二指肠疾病病型无关（P〉0.5）。19例（6.51%）为不同EPIYA类型菌株混合感染,胃癌病例中混合感染出现的概率明显高于NUD者（OR=4.46,95%CI=1.17~17.03）。单一菌株感染者273株（93.49%）,其中EPIYA-ABD型254株（93.04%）,EPIYA分型和胃十二指肠疾病的临床病型之间无显著性差异。另外,基因测序标本中发现8株EPIYA-B基序的核苷酸序列存在基因突变。结论：该研究中EPIYA-ABD型占H.pylori感染者的绝大多数,但Cag A阳性和EPIYA-ABD型均与H.pylori感染引起的胃十二指肠疾病无关;然而胃癌患者中混合感染出现的概率明显高于非溃疡性胃炎患者。

关键词：幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A EPIYA基序多态性胃十二指肠疾病混合感染

999感冒灵颗粒抗呼吸道合胞病毒的初步研究

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安徽医科大学学报 2018年第6期53卷 938-942页

作者：孙涛程茂胜袁晓玲张晓燕黄升海安徽医科大学基础医学院微生物学教研室合肥230032

目的探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用。方法采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒(RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增... 详细信息

目的探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用。方法采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒(RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增殖和阻断作用)及不同给药浓度下对RSV的抑制作用。测定细胞的半数中毒浓度(TC_(50))、药物半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI)。结果细胞的TC_(50)为25 mg/ml;直接灭活和抑制增殖均对RSV有明显作用(P学意义。结论 999感冒灵颗粒在直接灭活以及抑制病毒增殖两种给药方式下对RSV有一定的抑制作用。

关键词：呼吸道合胞病毒细胞病变法 CCK-8法感冒灵颗粒抗病毒作用

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大鼠神经干细胞体外生长特性

解剖学杂志 2004年第6期27卷 634-638,F002页

作者：曹翠丽阎蕴力马常升郑力芬李学平周娜静杨天祝河北医科大学基础医学研究所神经生物学室石家庄050017 河北医科大学基础医学研究所细胞生物学室石家庄050017

目的 :观察大鼠神经干细胞的体外生长特性。方法 :利用无血清培养基悬浮培养 ,观察神经干细胞的体外生长过程。并比较不同接种密度 ,不同传代时间对神经干细胞生长的影响。用免疫细胞化学技术检测神经干细胞巢蛋白 (nestin)的表达 ;用... 详细信息

目的 :观察大鼠神经干细胞的体外生长特性。方法 :利用无血清培养基悬浮培养 ,观察神经干细胞的体外生长过程。并比较不同接种密度 ,不同传代时间对神经干细胞生长的影响。用免疫细胞化学技术检测神经干细胞巢蛋白 (nestin)的表达 ;用吖啶橙 (AO) /溴化乙啶 (EB)检测细胞活性 ;用DAPI荧光染料标记细胞。结果 :神经干细胞聚合成细胞团生长 ,细胞团成分复杂。细胞接种密度以 5× 1 0 5个细胞 /ml组生长较好 ;原代细胞生长 3～ 4d后传代为宜。传代后 4d时可获得大量nestin阳性细胞。DAPI标记率为 1 0 0 %。结论 :细胞团成分复杂。神经干细胞要高密度接种 ,及时传代。

关键词：神经干细胞体外生长大鼠细胞团观察标记率免疫细胞化学技术传代接种密度特性

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幽门螺杆菌粪便抗原诊断方法的系统评价

中华医学杂志 2005年第22期85卷 1564-1567页

作者：郭银燕张澍田彭晓霞詹思延北京海淀医院消化内科 100080 首都医科大学附属北京友谊医院首都医科大学流行病学教研室北京大学循证医学中心

目的评价幽门螺杆菌(Hp)粪便抗原诊断Hp感染的价值。方法电子检索以中国生物医学文献数据库、中国生物医学期刊文献数据库、中国学术期刊全文数据库与中文科技期刊全文数据库为主进行文献检索,再根据已发表文献中的参考文献追溯进行手... 详细信息

目的评价幽门螺杆菌(Hp)粪便抗原诊断Hp感染的价值。方法电子检索以中国生物医学文献数据库、中国生物医学期刊文献数据库、中国学术期刊全文数据库与中文科技期刊全文数据库为主进行文献检索,再根据已发表文献中的参考文献追溯进行手工检索。发表时间截止至2004年3月1日。按确定的纳入标准筛选文献,对纳入的文献进行质量评价,运用Cochrane协作网诊断与筛查小组推荐的SROC曲线法,以敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值及似然比等指标行Meta分析。结果19篇文献、3123例符合纳入标准。Hp粪便抗原诊断Hp感染的敏感度及特异度为94%和93%。结论Hp粪便抗原诊断Hp感染简便、无创、准确度高。

关键词：幽门螺杆菌粪便抗原系统评价诊断方法中国生物医学文献数据库中文科技期刊全文数据库中国学术期刊全文数据库幽门螺杆菌(Hp) 中国生物医学期刊 2004年3月 Hp感染抗原诊断 Meta分析纳入标准阳性预测值阴性预测值

内皮-单核细胞激活多肽对人U118胶质瘤细胞自噬的影响及机制

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中国药理学通报 2013年第7期29卷 922-926页

作者：刘丽波孟繁杰薛一雪刘云会中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属盛京医院神经外科辽宁沈阳110004

目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对人U118脑胶质瘤细胞自噬的影响及可能机制。方法 EMAP-Ⅱ处理人U118胶质瘤细胞后,采用MTT检测细胞活力;用免疫荧光法检测自噬标记物微管相关蛋白轻链-3(LC3)在U118细胞的分布;Western blot方... 详细信息

目的研究内皮-单核细胞激活多肽(EMAP-Ⅱ)对人U118脑胶质瘤细胞自噬的影响及可能机制。方法 EMAP-Ⅱ处理人U118胶质瘤细胞后,采用MTT检测细胞活力;用免疫荧光法检测自噬标记物微管相关蛋白轻链-3(LC3)在U118细胞的分布;Western blot方法检测LC3-Ⅱ、自噬降解底物p62/SQSTM1和自噬相关蛋白Beclin1的蛋白表达水平。结果与EMAP-Ⅱ0 h组相比,0.05 nmol.L-1剂量以上的EMAP-Ⅱ可明显抑制人U118胶质瘤细胞的活力,降低线粒体膜电位(MMP),在EMAP-Ⅱ作用0.5 h时效果最明显;自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)能够阻断EMAP-Ⅱ的作用,使细胞活力和线粒体膜电位基本恢复;EMAP-Ⅱ作用0.5 h后自噬标记物LC3在胞质内呈点状分布,荧光表达明显增强,并且LC3-Ⅱ的蛋白表达水平明显上调;同时伴有自噬降解底物p62/SQSTM1的表达下降;此外,自噬相关蛋白Beclin1的蛋白表达水平明显上调。结论 EMAP-Ⅱ能明显抑制人U118胶质瘤细胞活力,诱导U118细胞发生自噬,其机制可能与自噬相关蛋白Beclin1上调有关。

关键词：内皮-单核细胞激活多肽人U118胶质瘤细胞自噬 LC3 p62/SQSTM1 Beclin1