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PGRN缺陷抑制IMQ诱导小鼠皮肤炎症组织的自噬和凋亡

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重庆医科大学学报 2019年第11期44卷 1500-1505页

作者：郑维谢巍伟胡勤刘敏罗瑞郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室、发育生物学与模式动物平台

目的:探讨颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)缺陷型小鼠与野生(wild type,WT)型小鼠在咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)诱导皮肤炎症模型中炎症及自噬的差异性。方法:运用IMQ涂抹WT(44只)和PGRN-/-(16只)小鼠背部皮肤构建银屑样皮肤炎症模型,并通... 详细信息

目的:探讨颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)缺陷型小鼠与野生(wild type,WT)型小鼠在咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)诱导皮肤炎症模型中炎症及自噬的差异性。方法:运用IMQ涂抹WT(44只)和PGRN-/-(16只)小鼠背部皮肤构建银屑样皮肤炎症模型,并通过蛋白质印迹(Western blot)、定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)、苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色等方法检测小鼠组织结构、炎性因子[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)、环氧化酶2(cyclo-oxygen-ase 2,COX2)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)]、凋亡相关蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase 3)]以及自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、泛素结合蛋白(ubiquitin binding protein,P62)、自噬相关蛋白5(autophagy related protein 5,ATG5)、自噬相关蛋白7(autophagy related protein 7,ATG7)、自噬相关蛋白5和12的复合物(complex of autophagy related protein 5 and 12,ATG5-ATG12)]的变化。结果:成功建立了小鼠皮肤炎症模型,在WT小鼠模型中观察到上皮组织明显增厚,炎性细胞浸润增多,血管生成增加,炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α、NOS2、COX2在第6天表达最高(P<0.05),自噬随着时间的增加而增加;此外,第6天脾脏比重明显增加(P<0.05),炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α、NOS2、COX2、IL-1β表达最高(P<0.05)。与WT模型小鼠相比,PGRN-/-模型小鼠背部皮肤加厚更加明显,炎性因子IL-6、NOS2表达更高(P<0.05),组织自噬与凋亡水平明显降低(P<0.05)。结论:WT小鼠和PGRN-/-小鼠都能够在第6天成功建立小鼠皮肤炎症模型;与WT小鼠皮肤炎症模型相比,PGRN-/-小鼠加重了皮肤炎症模型症状,这一过程可能与PGRN缺陷阻碍了自噬的产生有关。

关键词：咪喹莫特颗粒蛋白前体自噬炎症凋亡

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情绪的脑机制在神经生物学教学中的实践

基础医学教育 2024年第5期26卷 351-354页

作者：赵丽杨予涛首都医科大学基础医学院神经生物学系北京100069

情绪的脑机制是神经科学的热点和前沿,也是首都医科大学神经生物学课程的重要组成部分。文章结合近年来的教学实践,通过精心选择教学内容,合理选择教学方法,主动将科研思维融入教学,积极使用新媒体辅助教学和科学选择双语教学等五个方... 详细信息

情绪的脑机制是神经科学的热点和前沿,也是首都医科大学神经生物学课程的重要组成部分。文章结合近年来的教学实践,通过精心选择教学内容,合理选择教学方法,主动将科研思维融入教学,积极使用新媒体辅助教学和科学选择双语教学等五个方面探讨了情绪的脑机制的教学经验,以期进一步提高神经生物学课程的教学质量。

关键词：神经生物学情绪的脑机制教学方法多媒体教学双语教学

结核分枝杆菌Ag85B蛋白真核表达质粒构建及其对小鼠肺免疫功能影响

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中国病原生物学杂志 2023年第8期18卷 905-910页

作者：张炜李慧杨雨欣姚思王天松万巧凤宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系宁夏银川750004 宁夏医科大学临床医学院

目的构建结核分枝杆菌Ag85B的真核表达质粒pcD-Ag85B,经肌肉免疫小鼠,观察其对小鼠肺免疫功能及下呼吸道菌群的影响。方法将信号肽基因及编码Ag85B的基因共963 bp核苷酸序列与pcDNA3.1^(+)连接,构建真核表达质粒pcD-Ag85B,经双酶切及测... 详细信息

目的构建结核分枝杆菌Ag85B的真核表达质粒pcD-Ag85B,经肌肉免疫小鼠,观察其对小鼠肺免疫功能及下呼吸道菌群的影响。方法将信号肽基因及编码Ag85B的基因共963 bp核苷酸序列与pcDNA3.1^(+)连接,构建真核表达质粒pcD-Ag85B,经双酶切及测序鉴定后体外转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),并验证其表达;用该质粒经肌肉注射免疫C57BL/6J小鼠,42 d时收集小鼠呼吸道灌洗液,采用间接ELISA法测定SIgA及IgG特异性抗体效价。取小鼠右肺,分离淋巴细胞,采用流式术检测分泌IFN-γ的CD4^(+)T及CD8^(+)T细胞比例;取小鼠左肺,提取核酸进行16S RNA高通量测序及菌群结构分析。结果成功构建真核表达质粒pcD-Ag85B并检测到Ag85B蛋白的表达。ELISA检测pcD-Ag85B免疫C57BL/6J小鼠呼吸道灌洗液SIgA及特异性IgG抗体效价分别为1∶640和1∶400;流式细胞术检测Ag85B能诱导分泌IFN-γ的CD4^(+)T及CD8^(+)T细胞增殖,所占百分比分别为0.72%和0.57%;16S RNA高通量测序分析显示免疫鼠呼吸道菌群多样性增加,厚壁菌门-乳杆菌属丰富度增高(P基础。

关键词：结核分枝杆菌 Ag85B 真核表达载体适应性免疫益生菌

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副突变及其表观遗传机制的研究进展

生理科学进展 2016年第1期47卷 7-13页

作者：程杉王晓荣丁卫首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系北京100069

经典遗传学的研究方法为许多遗传性疾病和遗传相关性疾病的预防、诊断和治疗提供了在分子水平上的直接线索,然而人类疾病的遗传表现始终存在着经典遗传学法则所不能解释的现象。副突变(paramutation)是上世纪50年代首次在玉米中发现的... 详细信息

经典遗传学的研究方法为许多遗传性疾病和遗传相关性疾病的预防、诊断和治疗提供了在分子水平上的直接线索,然而人类疾病的遗传表现始终存在着经典遗传学法则所不能解释的现象。副突变(paramutation)是上世纪50年代首次在玉米中发现的一种非孟氏遗传模式,其传递的等位基因不存在核苷酸序列的差异,提示了表观遗传机制可能参与了基因表达和表型的可遗传变化。近期的研究发现关于副突变现象的解释可能涉及一种新的表观遗传学调控机制,即由RNA(特别是非编码RNA)引发的基因组改变参与了副突变的发生和维持。其中DNA甲基转移酶II所介导的RNA甲基化发挥了极其重要的作用。对副突变及其机制的研究不仅能够深化人类对遗传和生命本质的认识,还有助于开拓在生物工程和疾病诊疗等应用领域的新思路。本文综述了副突变的分子机制和研究进展,并且探讨了副突变在疾病研究和基因治疗中的应用前景。

关键词：副突变表观遗传学非孟氏遗传重复序列 DNA甲基转移酶

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刚地弓形虫蛋白质组学研究进展

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第3期33卷 214-218,221页

作者：邱竞帆葛可王勇南京医科大学基础医学院病原生物学系南京210029

近10年,蛋白质组学技术广泛应用于刚地弓形虫研究中,研究结果为全面深入揭示该虫体的生命活动本质奠定了基础。目前,关于刚地弓形虫的整体蛋白质组学研究仅限于速殖子和卵囊阶段的蛋白质组学;亚蛋白质组学研究包括一些重要抗原,如可溶... 详细信息

近10年,蛋白质组学技术广泛应用于刚地弓形虫研究中,研究结果为全面深入揭示该虫体的生命活动本质奠定了基础。目前,关于刚地弓形虫的整体蛋白质组学研究仅限于速殖子和卵囊阶段的蛋白质组学;亚蛋白质组学研究包括一些重要抗原,如可溶性速殖子抗原、糖蛋白和免疫蛋白质组学研究等;差异蛋白质组学研究着眼于阐明不同虫株或不同虫种的差异蛋白。本文综述了弓形虫蛋白质组学的研究现状,详细阐述了弓形虫整体蛋白质组学、亚蛋白质组学和差异蛋白质组学的主要研究进展。此外,本文还概述了弓形虫蛋白质组学的生物信息学平台,并对弓形虫蛋白质组学的应用前景进行了展望。

关键词：刚地弓形虫蛋白质组学排泄-分泌抗原可溶性速殖子抗原

光遗传学技术——2021年拉斯克奖基础医学研究奖

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首都医科大学学报 2021年第5期42卷 888-892页

作者：宫平徐志卿首都医科大学基础医学院病理学系北京100069 首都医科大学基础医学院神经生物学系北京100069

光遗传学在发现之初,就受到了广泛关注。这项突破性技术的诞生,有助于我们精准地探究大脑的神经环路和功能。光遗传学也因此荣获了许多科学奖项。本文就光遗传学的发展过程和工作原理进行了简要的介绍。

关键词：拉斯克奖光遗传学基础医学研究奖

“虚实结合”实验教学新模式在《人体寄生虫学》教学中的应用——以“血吸虫综合实验”为例

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中国血吸虫病防治杂志 2023年第2期35卷 180-183,216页

作者：陈晓军周莎邱竞帆陈琳徐志鹏季旻珺郭静张戎南京医科大学基础医学院病原生物学系、江苏省现代病原生物学重点实验室江苏南京211166 南京医科大学人事处江苏南京211166 南京医科大学基础医学院基础医学实验教学中心江苏南京211166

“新医科”背景下,信息技术已成为推动高等教育发展的重要驱动力之一。南京医科大学基础医学实验教学中心联合基础医学院病原生物学系将信息技术与实验教学相融合,设计和构建了“虚实结合”实验教学新模式,并应用于《人体寄生虫学》教学... 详细信息

“新医科”背景下,信息技术已成为推动高等教育发展的重要驱动力之一。南京医科大学基础医学实验教学中心联合基础医学院病原生物学系将信息技术与实验教学相融合,设计和构建了“虚实结合”实验教学新模式,并应用于《人体寄生虫学》教学,取得了良好的教学效果。该模式有助于学生加深对人体寄生虫学基础知识的理解,锻炼实践操作技能,培养医学生道德素养和综合能力。本文以“血吸虫综合实验”为例,对教学方案和实施、教学效果和评价、教学体会等进行了总结。

关键词：人体寄生虫学血吸虫虚实结合实验教学混合式教学

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神经胶质细胞转分化为神经元的研究进展

生物化学与生物物理进展 2022年第11期49卷 2087-2098页

作者：赵晓初罗兆莉杨菲李纤首都医科大学基础医学院北京100069 首都医科大学基础医学院生物化学与分子生物学学系北京100069 首都医科大学基础医学院神经生物学学系北京100069

细胞转分化是通过基因重编程,诱导某种细胞直接转变为另一种细胞,而不经过其他中间状态的过程。神经元丢失是神经系统疾病中常见的病理过程,神经元丢失通常不可逆转,且造成运动、感觉、精神症状。而由于人中枢神经系统神经元再生能力十... 详细信息

细胞转分化是通过基因重编程,诱导某种细胞直接转变为另一种细胞,而不经过其他中间状态的过程。神经元丢失是神经系统疾病中常见的病理过程,神经元丢失通常不可逆转,且造成运动、感觉、精神症状。而由于人中枢神经系统神经元再生能力十分有限,仅有部分区域在神经损伤的刺激下能够新生少量神经元。在这样的背景下,将神经胶质细胞(星形胶质细胞、小胶质细胞和少突胶质前体细胞)在神经元丢失处原位转分化为功能性神经元并整合进神经网络的治疗性策略,受到了广泛关注。近年来,学者通过在神经胶质细胞中将神经元命运决定的重要转录因子过表达或敲减等手段,成功实现其向神经元的转分化,取得多项重大进展,但由于目前研究手段的局限性、判断标准的分歧性、结果和结论间较难自洽等问题,部分研究成果的结论仍存在很大的争议。本文系统地回顾了神经胶质细胞转分化为神经元的发现与发展历程,总结了神经胶质细胞转分化为神经元的重要发现,并进行讨论与展望。

关键词：神经胶质细胞神经元转分化神经再生神经修复

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大鼠类胚体的制备及实时观察

宁夏医科大学学报 2022年第6期44卷 573-579页

作者：李家瑞徐彧徐海瑾李建宁李岩宋辉杨怡宁夏医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系银川750004 宁夏医科大学内分泌学研究所银川750004 宁夏医科大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学系银川750004

目的探讨悬滴法与悬浮法制备的大鼠类胚体(embryoid bodies,EBs)的差异以及培养时间对EBs所包含三胚层组织特异性基因表达的影响。方法使用悬滴法与悬浮法将大鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)制备为EBs并连续培养10 d,在第5天... 详细信息

目的探讨悬滴法与悬浮法制备的大鼠类胚体(embryoid bodies,EBs)的差异以及培养时间对EBs所包含三胚层组织特异性基因表达的影响。方法使用悬滴法与悬浮法将大鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)制备为EBs并连续培养10 d,在第5天和第10天分别对两种方法制备的EBs进行形态学观察,并进行数量统计与直径检测,随后提取EBs蛋白与mRNA,通过Western blot与RT-qPCR实验检测EBs三胚层特异性蛋白和基因的表达水平。结果与悬浮法相比,悬滴法制备的EBs生成率低(P0.05);中胚层基因Brachyury表达降低(P0.05);外胚层基因VIM表达降低(P0.05)。在同时期不同方法制备的EBs中,xf10的EBs三胚层特异性基因表达高于xd10的EBs(P<0.05)。结论悬滴法制备的EBs生成率低于悬浮法,但大小均一,分化同步,培养时间对EBs特异性基因的表达具有重要的影响。

关键词：大鼠胚胎干细胞类胚体悬浮法悬滴法