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转化生长因子β1对口腔鳞癌及腺样囊性癌细胞纤维黏连蛋白基因EDA片段调节作用的探讨

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中华口腔医学杂志 2007年第1期42卷 47-51页

作者：张建鹏李翠英首都医科大学口腔医学院牙体牙髓科 100050

目的探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对口腔鳞癌及腺样囊性癌细胞中纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)基因 EDA 片段的调节作用。方法应用免疫组织化学及半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR),分别从蛋白及 mR... 详细信息

目的探讨转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)对口腔鳞癌及腺样囊性癌细胞中纤维黏连蛋白(fibronectin,FN)基因 EDA 片段的调节作用。方法应用免疫组织化学及半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR),分别从蛋白及 mRNA 水平观察口腔鳞癌及腺样囊性癌高、低转移潜能细胞中加入外源性 TGF-β1后 FN 基因 EDA 片段的表达变化情况。结果 3株细胞加入 TGF-β1组与未加 TGF-β1组 EDA 片段蛋白表达阳性细胞率比较显示,口腔鳞癌细胞株(Tca83)阳性细胞率由15.4±4.1增加到50.7±10.5,差异有统计学意义(P细胞率由71.9±4.8增加到86.1±5.5,差异也有统计学意义(P细胞率由93.3±2.4增加到94.1±3.4,差异无统计学意义(P>0.05)。3株细胞加入 TGF-β1组 EDA^+ mRNA 表达较未加 TGF-β1组明显升高,而 EDA^- mRNA 的表达下降,且差异均有统计学意义(P口腔鳞癌及腺样囊性癌细胞中FN 基因 EDA 片段的剪切并促进 EDA 片段的表达,可能成为影响肿瘤细胞黏附能力及肿瘤侵袭和转移的相关因素。

关键词：转化生长因子β 癌,鳞状细胞癌,腺样囊性纤维黏连蛋白

酪氨酸激酶抑制剂GW2974对口腔鳞状细胞癌生长抑制作用的实验研究

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中华口腔医学杂志 2007年第7期42卷 432-435页

作者：李萍葛化冰孙正首都医科大学口腔医学院牙周黏膜科

目的评价表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 GW2974对由二甲基苯并蒽(dimethyl-benzanthracene,DMBA)诱导的金黄地鼠颊囊癌发生模型的抑制作用。方法 100只金黄地鼠,10只为阴性对照,其余90只于左侧颊囊涂0.5%DMBA,每周3次。6周后随机分... 详细信息

目的评价表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂 GW2974对由二甲基苯并蒽(dimethyl-benzanthracene,DMBA)诱导的金黄地鼠颊囊癌发生模型的抑制作用。方法 100只金黄地鼠,10只为阴性对照,其余90只于左侧颊囊涂0.5%DMBA,每周3次。6周后随机分为阳性对照组、GW2974低浓度组、GW2974高浓度组。阳性对照组不做处理,其余两组于左侧颊囊涂不同浓度的(4 mmol/L,8 mmol/L)GW2974。24周末处死所有动物,取左侧颊囊黏膜,计算肿瘤发生率、平均肿瘤数目、肿瘤体积和肿瘤负荷,光镜下观察各组单纯增生、异常增生和鳞癌数目并计算鳞癌的发生率。结果通过局部应用4 mmol/L 和8 mmol/L的 GW2974,肿瘤发生率从80.0%分别下降到43.3%(13/30,P口腔鳞状细胞癌发生率分别从70.0%下降到40.0%(12/30,P口腔鳞状细胞癌数目分别从1.83±1.91下降到0.67±0.99(P口腔癌可能具有较强的癌症化学预防和治疗作用,口腔黏膜局部用药可能是预防和治疗口腔癌的一个有效途径。

关键词：口腔癌化学预防受体表皮生长因子动物实验

牙体与充填体间微隙对微生物致龋影响的实验研究

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中华口腔医学杂志 2012年第5期47卷 296-300页

作者：芦文彬李涢首都医科大学口腔医学院牙体牙髓科 100050

目的体外建立经变形链球菌致龋的人工龋模型，评价牙与充填体间微隙大小对微生物致龋的影响。方法用无龋磨牙制备的牙块和形态大小相同的复合树脂块制作二者间隙分别为0、25、50、100、190及250um的6个实验组样本，对照组样本使用粘接... 详细信息

目的体外建立经变形链球菌致龋的人工龋模型，评价牙与充填体间微隙大小对微生物致龋的影响。方法用无龋磨牙制备的牙块和形态大小相同的复合树脂块制作二者间隙分别为0、25、50、100、190及250um的6个实验组样本，对照组样本使用粘接剂粘接牙面和复合树脂，6个实验组及对照组每组各8个样本，共56个样本经14d变形链球菌连续培养后切片，采用激光共聚焦扫描显微镜（confocal laser scanning microscope，CLSM）检测牙体洞外表面龋损及洞壁龋损的脱矿程度，分别测定龋损最大深度、最大长度、荧光面积及平均荧光量等参数并进行统计学分析；扫描电镜观察界面微隙内沉积物与龋损形成情况。结果CLSM和扫描电镜观察显示，除2个对照组样本未形成洞壁龋损外其余样本均形成了不同程度的洞外表面龋损和洞壁龋损；各组表面龋损脱矿程度差异均无统计学意义（P〉0．05）。190um组及250um组洞壁龋损最大深度[分别为（1145．37±198．98）、（1190.12±290．80）um]、最大长度、荧光面积及平均荧光度均显著高于0、25、50及100um组[龋损最大深度分别为（205．25±122．61）、（303．87±118．80）、（437．75±154．88）、（602．87±269．13）um]，差异均有统计学意义（P〈0．01），脱矿程度随微隙增加而加重；而0、25、50um组洞壁龋损最大深度、最大长度及荧光面积差异均无统计学意义。结论体外牙与充填体间的微隙大于100um时提示洞壁龋损有明显进展；微隙的存在是影响牙与充填体间微生物致龋的重要因素。

关键词：龋齿显微镜检查,共焦显微镜检查,电子,扫描微隙

往复运动镍钛锉预备S形树脂根管成形能力的体外研究

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中华口腔医学杂志 2014年第5期49卷 279-283页

作者：邵彤菲侯晓玫侯本祥首都医科大学口腔医学院牙体牙髓科 100050

目的比较4种机用镍钛器械预备S形树脂模拟根管的成形能力，为临床应用提供实验依据。方法将40个S形树脂模拟根管按随机数字表法分为4组，每组10个，分别使用Reciproc （A组）、WaveOne（B组）、Mtwo（C组）和ProTaper（D组）进行根管预... 详细信息

目的比较4种机用镍钛器械预备S形树脂模拟根管的成形能力，为临床应用提供实验依据。方法将40个S形树脂模拟根管按随机数字表法分为4组，每组10个，分别使用Reciproc （A组）、WaveOne（B组）、Mtwo（C组）和ProTaper（D组）进行根管预备，记录预备时间，测量预备后根管工作长度，扫描仪获取预备前后根管图像，使用Photoshop 和ImageJ 软件进行图像重叠并分别测量预备后根管冠方弯曲角度和根方弯曲角度的变化值，从距根尖孔1 mm处开始，每隔1 mm测量根管内外侧壁树脂去除量，共10个测量点，各观测点弯曲外侧树脂去除量减去内侧树脂去除量所得差值即为器械的中心定位能力。以单因素方差分析和Student-Newman-Keuls检验进行统计学分析，检验水准为双侧α＝0.05。结果 A、B、C、D组器械预备时间分别为（42.1±2.7）、（41.5±3.2）、（62.7±2.8）及（62.8±5.2） s，A、B组的根管预备时间均显著短于C、D组（P＜0.05）。4种器械预备后根管工作长度变化值差异无统计学意义（ P ＞0.05）。 A、B、D 组根管冠方弯曲角度变化值[分别为（4.69±0.63）°、（4.15±0.89）°及（4.13±0.59）°]均显著小于C组[（5.26±0.70）°]（P＜0.05），4种器械根管根方弯曲角度变化值差异无统计学意义（ P＞0.05）。距根尖孔2 mm位点，A、B和D组的中心定位能力[分别为（-0.242±0.042）、（-0.191±0.077）、（-0.272±0.046） mm]显著优于C组[（-0.343±0.057） mm]（P＜0.05）；距根尖孔3 mm和4 mm位点，A、B组的中心定位能力均显著优于C、D组（P＜0.05）；距根尖孔5 mm处，D组的中心定位能力显著优于A、B组（P＜0.05）。结论 A锉和B锉可以快速有效地预备根管，且能较好地保持S形树脂根管的原始形态，在根管根方弯曲部分具有较好的中心定位能力。

关键词：根管制备牙科器械往复运动单支锉成形能力

牙龈卟啉单胞菌血凝素2基因缺陷型突变株的构建

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中华口腔医学杂志 2009年第11期44卷 672-676页

作者：林梅杨秋波杨圣辉首都医科大学口腔医学院北京口腔医学研究所 100050 首都医科大学附属北京朝阳医院口腔科

目的构建牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）血凝素2（hemagglutinin—adhesin2，HA-2）基因缺陷型突变株，为研究HA-2基因功能奠定基础。方法PCR扩增PgHA-2基因两翼片段HAu、HAl，将抗性基因ermF—ermAM连接到两者之间构... 详细信息

目的构建牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis，Pg）血凝素2（hemagglutinin—adhesin2，HA-2）基因缺陷型突变株，为研究HA-2基因功能奠定基础。方法PCR扩增PgHA-2基因两翼片段HAu、HAl，将抗性基因ermF—ermAM连接到两者之间构建打靶载体HA—ermF—ermAM。将HA—ermF—ermAM电转化PgATCC33277，基因同源重组整合进入PgATCC33277染色体，用选择性培养基筛选获得PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株。进行PgATCC33277HA．2基因缺陷型突变株与其野生株凝血功能试验，比较二者的凝血功能差异。结果PCR、酶切和测序鉴定结果表明，打靶载体HA—ermF—ermAM成功构建。经PCR鉴定，打靶载体HA—ermF—ermAM通过同源重组整合进入PgATCC33277染色体，成功获得PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株。凝血实验结果表明，PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株与野生株相比凝血能力明显减弱。结论成功获得PgATCC33277HA-2基因缺陷型突变株，为进一步研究HA-2的生物学性质奠定了基础。

关键词：紫单胞菌龈血凝素类基因打靶血液凝固

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几种齿科合金生物相容性的比较

材料研究学报 2012年第2期26卷 211-217页

作者：洪岩松李秀梅孟贺战德松艾红军中国医科大学口腔医学院沈阳110002 河北联合大学口腔医学院唐山063000

用银钯合金、镍铬合金、钴铬合金、2号合金的浸提液体外培养小鼠成纤维细胞(L929),以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基作为阴性对照组。用5种浸提液分别培养L929细胞4 h、7 h、24 h、48 h后,用MTT法检测细胞增值率并计算caspase-3活化度... 详细信息

用银钯合金、镍铬合金、钴铬合金、2号合金的浸提液体外培养小鼠成纤维细胞(L929),以含10%胎牛血清的RPMI1640培养基作为阴性对照组。用5种浸提液分别培养L929细胞4 h、7 h、24 h、48 h后,用MTT法检测细胞增值率并计算caspase-3活化度。在荧光显微镜下观察48 h后各组细胞的状态。使用凋亡相关因子caspase-3的表达强度辅以时间梯度分析其与齿科合金生物相容性的相关性。结果表明:加样培养48 h后各实验组均有大量凋亡细胞,但是有明显的不同,在镍铬合金组内可见橙色坏死细胞;各组细胞的毒性为0级,其细胞增值率的排序为:钴铬合金组>2号合金组>银钯合金组>镍铬合金组;各实验组的Caspase-3活性有显著的差异(P2号合金组银钯合金组>镍铬合金组。各时间点Caspase-3活化度也有显著的差异(P生物相容性由高至低的排序为:钴铬合金>2号合金>银钯合金>镍铬合金。镍离子、银离子是影响其生物相容性的主要因素。在时间梯度的辅助下评价4种齿科合金生物相容性,Caspase-3与MTT的结果一致.

关键词：金属材料,生物相容性,细胞凋亡,caspase-3,分光光度法

放射性及双膦酸盐相关性颌骨坏死的发病机制及治疗进展

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中华口腔医学杂志 2021年第5期56卷 404-409页

作者：徐骏疾周建王松灵首都医科大学口腔医学院全牙再生与口腔组织功能重建北京市重点实验室 100050

放射治疗及双膦酸盐类药物的应用可导致颌骨坏死及骨缺损,严重影响患者颌面部的形态与功能。近年,放射性及双膦酸盐相关性颌骨坏死的发病机制研究及临床治疗取得了一系列进展。研究发现,放疗15 d内颌骨中仍有骨改建活动,但由于内皮细胞... 详细信息

放射治疗及双膦酸盐类药物的应用可导致颌骨坏死及骨缺损,严重影响患者颌面部的形态与功能。近年,放射性及双膦酸盐相关性颌骨坏死的发病机制研究及临床治疗取得了一系列进展。研究发现,放疗15 d内颌骨中仍有骨改建活动,但由于内皮细胞及微血管损伤,放疗15 d后微血管闭锁,骨改建停止,颌骨内开始出现纤维化。基于干细胞的生物性治疗可使颌骨内微循环得到恢复并修复骨质,为重度放射性颌骨坏死的治疗提供了新方法、新思路。双膦酸盐除了可沉积于颌骨使破骨细胞大量凋亡外,还可抑制骨髓间充质干细胞功能,并引起机体的免疫失衡。异体骨髓间充质干细胞能修复颌骨损伤并调节免疫,对双膦酸盐相关性颌骨坏死有良好的治疗作用,具有较好的潜在应用前景。随着生物工程技术的发展及间充质干细胞的逐步应用,有望在放射性及双膦酸盐相关性颌骨坏死等颌骨疾病的诊疗中发挥重要作用。

关键词：骨坏死,放射性双膦酸盐相关性颌骨坏死微血管损伤免疫失衡干细胞治疗

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尼古丁对人牙周膜成纤维细胞增殖能力的影响

口腔医学研究 2009年第1期25卷 41-43页

作者：李卫红刘晓勇葛丽华张海燕首都医科大学基础医学院实验教学中心北京100069 首都医科大学口腔医学院首都医科大学细胞生物学系

目的:体外研究尼古丁对人牙周膜成纤维细胞增殖能力的影响。方法:用不同浓度的尼古丁与体外培养的人牙周膜成纤维细胞作用不同时间,用MTT比色法测定细胞的生长情况,流式细胞分析法测定尼古丁对细胞周期的影响。结果:各浓度的尼古丁组均... 详细信息

目的:体外研究尼古丁对人牙周膜成纤维细胞增殖能力的影响。方法:用不同浓度的尼古丁与体外培养的人牙周膜成纤维细胞作用不同时间,用MTT比色法测定细胞的生长情况,流式细胞分析法测定尼古丁对细胞周期的影响。结果:各浓度的尼古丁组均能抑制人牙周膜成纤维细胞的生长,但不同浓度尼古丁对牙周膜细胞的抑制作用无明显差异;各浓度组尼古丁均能降低G1的比例,高浓度尼古丁(5×10-1g/L)组G1期比例降至84.62%,G2/M期升高至12.83%。结论:尼古丁能抑制人牙周膜成纤维细胞的生长,并影响其细胞周期的进程。

关键词：人牙周膜成纤维细胞尼古丁增殖细胞周期

吸烟个体血清对牙龈卟啉单胞菌内化KB细胞及KB细胞产生基质金属蛋白酶1、9和金属蛋白酶组织抑制剂1的影响

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中华口腔医学杂志 2014年第1期49卷 15-20页

作者：王宏岩谭丽思刘俊超李倩潘亚萍钟鸣中国医科大学口腔医学院牙周科·辽宁省口腔医学研究所沈阳110002 中国医科大学口腔医学院口腔生物教研室沈阳110002 中国医科大学口腔医学院中心实验室沈阳110002

目的探讨慢性牙周炎患者中吸烟个体血清在牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonasgingivalis,Pg）内化KB细胞及在内化过程中对KB细胞分泌基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinase,MMP）1、MMP-9及金属蛋白酶组织抑制剂1（tissueinhibitorofmetalloproteinase-1,TIMP-1）的作用.方法抽取20例（吸烟个体10例,非吸烟个体10例）就诊于中国医科大学口腔医学院牙周科的慢性牙周炎患者前臂静脉血5ml,离心提取血清.在试验组（吸烟组）和对照组（非吸烟组）中分别加入吸烟个体和非吸烟个体血清200、400及800μl至Pg感染KB细胞模型,作用12h,脑心浸液琼脂培养基培养细菌5～7d,计数细菌菌落.采用人酶联免疫吸附测定（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）试剂盒检测两组上清液中MMP-1、MMP-9及TIMP-1的浓度差异.采用单因素方差分析比较两组中分别加入不同体积（200、400、800μl）血清对Pg内化KB细胞的影响及KB细胞分泌MMP-1、MMP-9、TIMP-1的差异;采用t检验比较吸烟组与非吸烟组加入相同血清量Pg内化KB细胞及KB细胞分泌MMP-1、MMP-9、TIMP-1的浓度差异.结果加入200、400、800μl血清时,吸烟组血清与非吸烟组血清引起Pg内化KB细胞的菌落数分别为（11.2±1.1）×104、（12.6±1.2）×104、（44.7±1.3）×104CFU/ml和（33.6±1.4）×104、（38.9±1.1）×104、（11.2±1.2）×104CFU/ml（P＜0.05）.在加入200、400、800μl吸烟个体血清时,KB细胞分泌MMP-1的质量浓度分别为（107.2±21.5）、（165.9±20.2）及（434.4±48.0）μg/L,分泌MMP-9的质量浓度分别为（3.99±0.29）、（4.21±0.61）及（5.62±0.47）μg/L,分泌TIMP-1的质量浓度分别为（401.3±12.7）、（418.3±28.5）及（637.3±37.3）μg/L;加入200、400、800μl非吸烟个体血清时,KB细胞分泌MMP-1的质量浓度分别为（77.6±10.8）、（84.7±10.2）及（98.2±9.7）μg/L,分泌MMP-9的质量浓度分别为（3.84±0.52）、（4.02±0.68）及（4.25±0.37）μg/L,分泌TIMP-1的质量浓度分别为（67.3±26.9）、（89.4±22.7）及（78.2±16.5）μg/L.随着吸烟组血清剂量的增加,KB细胞表达MMP-1、MMP-9、TIMP-1的质量浓度增加,不同体积血清引起MMP-1、MMP-9及TIMP-1表达的差异具有统计学意义（P＜0.05）;加入800μl吸烟组血清与加入800μl非吸烟组血清相比,KB细胞分泌MMP-1、MMP-9及TIMP-1的质量浓度均显著升高（P＜0.05）.结论吸烟个体的血清可能在Pg内化KB细胞的过程中发挥作用,并促进KB细胞产生MMP-1、MMP-9及TIMP-1;吸烟个体的口腔局部微环境可能有利于慢性牙周炎的进展及复发.

关键词：吸烟紫单胞菌,龈 KB细胞基质金属蛋白酶类