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实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠发病中Tim-3的表达及其作用

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眼科新进展 2025年第1期 10-14页

作者：吴雄飞张秋瑾郑柳杨彬彬李金清丁芝祥桂林医学院桂林医学院附属医院眼科

目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发病中的表达和作用。方法选取4～5周龄雄性C57BL/6J小鼠共12只；采用随机数字表法将12只小鼠分为对照组(3只)和实验组(9只)。对照组(造模时间节点为造模... 详细信息

目的探讨T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发病中的表达和作用。方法选取4～5周龄雄性C57BL/6J小鼠共12只；采用随机数字表法将12只小鼠分为对照组(3只)和实验组(9只)。对照组(造模时间节点为造模后0 d)不做任何处理，实验组小鼠诱导建立EAU模型(按造模时间节点分为造模后7 d、14 d、21 d三个小组，每组3只小鼠)。将光感受器间维生素A类结合蛋白651-670和完全弗氏佐剂充分混合乳化后，在实验组小鼠的双侧大腿、尾根部及颈后部皮下注射配制好的免疫乳剂(每只注射200μL免疫乳剂，含500μg光感受器间维生素A类结合蛋白651-670),随后实验组每只小鼠腹腔注射1μg百日咳毒素。通过裂隙灯显微镜观察各组小鼠眼前节及眼底表现并采集图像。根据炎症程度采用Caspi分级标准对小鼠行临床评分及组织病理学评分。ELISA法检测小鼠血清中IFN-γ、IL-17的表达；实时荧光定量PCR法检测小鼠脾脏及眼球组织中Tim-3 mRNA的表达；Western blot法检测Tim-3蛋白的表达；免疫组织化学法检测脾脏组织Tim-3蛋白的表达。采用Graphpad Prism 9.0统计软件进行数据分析。结果造模后小鼠的眼前节临床评分、眼底临床评分、组织病理学评分均随造模后时间的延长呈升高趋势，各组间的评分差异均有统计学意义(均为P<0.05)。造模后小鼠血清中IFN-γ、IL-17的表达量均随造模后时间的延长呈升高趋势，且各组间的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。造模后小鼠脾脏与眼球组织中Tim-3 mRNA的相对表达量均随造模后时间的延长呈下降趋势，且各组间的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。小鼠眼球和脾脏组织中Tim-3蛋白的表达情况和mRNA相同。结论 Tim-3在EAU发病进程中的表达随着炎症的加重呈下调趋势，Tim-3在葡萄膜炎发病进程中可能发挥着负性免疫调控作用。

关键词：实验性自身免疫性葡萄膜炎自身免疫性疾病 Tim-3 干扰素-γ 白细胞介素

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EB病毒vIL-10基因的表达与功能研究

中国病原生物学杂志 2025年第2期 131-135+140页

作者：刘瑞坪陈彦妤王俊颖孙德月辛宪云张栋薛庆节王晖济宁医学院临床医学院济宁医学院生物科学学院济宁学院附属高级中学临沂市荣军医院济宁医学院基础医学院

目的构建EB病毒vIL-10基因的原核表达载体并纯化vIL-10,进行小鼠实验探究其对MC38肿瘤细胞的作用，为进一步探究vIL-10的在机体内的作用及其机制奠定基础。方法根据vIL-10的DNA序列，设计引物并通过PCR扩增获得vIL-10基因；构建重组质... 详细信息

目的构建EB病毒vIL-10基因的原核表达载体并纯化vIL-10,进行小鼠实验探究其对MC38肿瘤细胞的作用，为进一步探究vIL-10的在机体内的作用及其机制奠定基础。方法根据vIL-10的DNA序列，设计引物并通过PCR扩增获得vIL-10基因；构建重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1,将重组质粒转化***5α;抗性平板筛选阳性菌落，提取质粒后做PCR、双酶切及测序鉴定；将鉴定正确的重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1转化***3并用氨苄西林筛选、IPTG诱导表达，超声波破碎菌体提取蛋白并做SDS-PAGE、Western blot鉴定；大量培养阳性菌株，破碎菌体后提取蛋白，利用GST标签纯化vIL-10,取少量纯化产物再次做SDS-PAGE、Western blot鉴定；凝血酶切掉GST标签，透析袋除盐、浓缩蛋白后测定蛋白含量，备用；收集MC38细胞，皮下注射6周龄体重相近的野生型、IL-10基因敲除型C57BL/6J小鼠，3周后取成功构建的肿瘤模型小鼠，按400μg/kg肿瘤周围浸润注射vIL-10,每7天注射1次，共注射2次。末次注射7 d后处死小鼠，剥离肿瘤称重并记录、分析。结果 PCR获得的vIL-10基因大小约为513 bp,重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1的PCR、双酶切结果均符合预期，基因测序结果与vIL-10模板序列相符；转化vIL-10-pGEX-4T-1的***3经IPTG诱导表达，SDS-PAGE电泳显示与对照组对比可见45 ku条带，Western blot显示该蛋白表达成功；阳性菌株经大量培养，提取蛋白后用GST标签进行纯化，Western blot结果显示该蛋白能被特异性纯化，经切割透析浓缩后测定蛋白含量为0.56 mg/mL;动物实验结果显示，野生型(C57BL/6J)小鼠注射vIL-10蛋白组比未注射组肿瘤重量明显增加(P<0.05);IL-10基因敲除(IL-10-KO)小鼠注射vIL-10组比未注射组肿瘤重量明显增加(P<0.001)。结论经Western blot鉴定含有重组质粒vIL-10-pGEX-4T-1的***3能成功表达vIL-10,动物实验表明vIL-10能够促进肿瘤生长。为探究vIL-10对肿瘤的作用研究及其机制奠定了基础。

关键词： EB病毒 vIL-10 原核表达 GST标签纯化 MC38

益肾化湿颗粒通过p38 MAPK信号通路对db/db小鼠肾脏保护机制

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中国实验方剂学杂志 2025年第3期 58-68页

作者：周楷栋王思童靳鸽蔡炎沫周鑫刘运华张新雪张敏赵宗江北京中医药大学中医学院首都医科大学附属北京朝阳医院

目的：观察益肾化湿颗粒对丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的影响，减轻肾小管上皮细胞损伤，延缓糖尿病肾病的作用机制。方法：12周龄db/db小鼠随机分为模型组、达格列净组(1.6 mg·kg-1)和益肾化湿颗粒组(4.7 g·kg-1),db/m小鼠... 详细信息

目的：观察益肾化湿颗粒对丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的影响，减轻肾小管上皮细胞损伤，延缓糖尿病肾病的作用机制。方法：12周龄db/db小鼠随机分为模型组、达格列净组(1.6 mg·kg-1)和益肾化湿颗粒组(4.7 g·kg-1),db/m小鼠为正常组。观察小鼠一般状况，给药前和第12周检测空腹血糖、24 h尿蛋白定量和尿白蛋白/尿肌酐（ACR）；给药12周后取材，收集血清检测血肌酐（SCr）、血尿素（UREA）、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）指标；采用苏木素-伊红（HE）染色法、过碘酸雪夫（PAS）染色法、马洛里（Mallory）三色染色法和透射电镜观察肾组织病理形态；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测小鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CC基序趋化因子受体2（CCR2） mRNA水平；免疫组化检测小鼠肾组织p38蛋白激酶（p38）、磷酸化（p）-p38、MCP-1、CCR2蛋白表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测小鼠肾组织p38、p-p38、MCP-1、CCR2蛋白水平。体外培养HK-2细胞分为空白组、高糖组(30 mmol·L-1)、益肾化湿含药血清组及SB203580组，各组细胞培养48 h后，提取细胞RNA和蛋白，通过Real-time PCR检测MCP-1、CCR2 mRNA水平，通过Western blot检测p38、p-p38、MCP-1、CCR2蛋白水平。结果：体内实验中，给药前与正常组比较，各组db/db小鼠体质量显著升高、血糖、24 h尿蛋白定量、ACR均显著升高（P<0.01）；给药12周后，与模型组比较，益肾化湿颗粒组一般状态明显改善，体质量有下降趋势，血糖、24 h尿蛋白定量、ACR均明显下降（P<0.05,P<0.01）,SCr和UREA显著降低（P<0.01）,TC、TG、LDL水平明显降低（P<0.05,P<0.01）。与模型组比较，益肾化湿颗粒组病理染色显示肾组织损伤及肾间质纤维化水平明显改善，电镜观察发现肾小球足突融合、基底膜增厚情况减轻，PCR显示肾组织MCP-1、CCR2 mRNA表达显著降低（P<0.01）,Western blot显示肾组织p-p38、MCP-1、CCR2蛋白表达显著降低（P<0.01），肾组织p-p38/p38、MCP-1、CCR2表达明显降低（P<0.05）。体外实验中，与高糖组比较，益肾化湿颗粒含药血清组MCP-1、CCR2 mRNA表达显著降低（P<0.01）,p-p38/p38、MCP-1、CCR2蛋白表达明显降低（P<0.05,P<0.01）。结论：益肾化湿颗粒可以调节db/db小鼠糖脂代谢，降低24 h尿蛋白和尿ACR，改善肾功能，并能减轻高糖导致的肾小管损伤，对肾小管上皮细胞有保护作用，其机制可能是通过p38 MAPK信号通路，减少MCP-1/CCR2激活而实现的。

关键词：糖尿病肾病益肾化湿颗粒 db/db小鼠 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路肾痿

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脐膨出的临床特征及其不良结局危险因素分析

中华儿科杂志 2025年第1期63卷 43-49页

作者：石巍韩铭玉陈正程晓英陈军津王鹏钭金法施丽萍马晓路浙江大学医学院附属儿童医院新生儿重症监护室杭州浙江大学医学院附属儿童医院新生儿内科杭州浙江大学医学院附属儿童医院医院质量管理办公室杭州浙江大学医学院附属儿童医院新生儿外科杭州

目的探讨脐膨出的临床特征, 评估脐膨出不良结局的相关危险因素。方法回顾性队列研究, 收集2013年1月至2022年12月在浙江大学医学院附属儿童医院因脐膨出住院治疗的224例患儿临床资料。根据患儿出院时状况分为预后良好及预后不良2组, ... 详细信息

目的探讨脐膨出的临床特征, 评估脐膨出不良结局的相关危险因素。方法回顾性队列研究, 收集2013年1月至2022年12月在浙江大学医学院附属儿童医院因脐膨出住院治疗的224例患儿临床资料。根据患儿出院时状况分为预后良好及预后不良2组, 采用χ2检验、连续校正χ2检验、Fisher确切概率法、Mann-WhitneyU 检验比较两组患儿的疾病特点及诊治情况。通过Logistic回归分析寻找与脐膨出不良结局相关的危险因素。结果 224例脐膨出患儿中男126例, 208例(92.9%)预后良好, 16例(7.1%)预后不良。预后不良组患儿中巨型脐膨出14例, 预后良好组患儿中巨型脐膨出100例。预后不良组疝囊中疝入2个以上腹腔脏器、合并心脏畸形、动脉导管未闭、肺动脉高压、败血症、疝囊表面感染的比例均高于预后良好组(均P<0.05)。预后不良组患儿有创机械通气、氧疗应用、静脉营养应用和总住院时间均长于预后良好组, 出现静脉营养相关胆汁淤积的比例高于预后良好组(均P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示, 肺动脉高压(OR=9.39, 95%CI 1.20～73.32)、败血症(OR=8.59, 95%CI 1.32～55.86)、合并心脏畸形(OR=6.55, 95%CI 1.11～38.73)均为脐膨出不良结局的独立危险因素(均P<0.05)。结论脐膨出易合并心脏畸形、败血症、肺动脉高压等, 不良结局的危险因素包括肺动脉高压、败血症及合并心脏畸形。

关键词：先天畸形预后危险因素脐膨出

生物学检测与影像学综合评估1017例肺部结节良恶性的回顾性队列研究

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中国胸心血管外科临床杂志 2025年第1期 60-66页

作者：张蕾李子豪李楠程钧张锋夏平会吕望胡坚浙江大学医学院附属第一医院干部保健中心浙江大学医学院附属第一医院普胸外科浙江大学医学院附属第一医院健康管理中心

目的通过联合生物学检测与影像学评估，在大型队列基础上构建临床预测模型，以提高肺结节良恶性鉴别的准确性。方法回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院2020年1月—2024年4月接受胸部CT和7种肺癌相关血清自身抗体（7-AABs）检测32 ... 详细信息

目的通过联合生物学检测与影像学评估，在大型队列基础上构建临床预测模型，以提高肺结节良恶性鉴别的准确性。方法回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院2020年1月—2024年4月接受胸部CT和7种肺癌相关血清自身抗体（7-AABs）检测32 627例肺结节患者的临床资料。通过单因素和多因素logistic回归分析筛选肺结节良恶性的独立风险因素，并构建列线图模型。通过受试者工作特征（receiver operating characteristic,ROC）曲线、校准曲线及决策曲线分析（decision curve analysis,DCA）评估模型性能。结果共纳入1 017例肺结节患者。训练集共712例，其中男291例、女421例，平均年龄（58±12）岁；验证集共305例，其中男129例、女176例，平均年龄（58±13）岁。单因素ROC曲线分析显示，CT联合7-AABs检测的诊断效能[曲线下面积（area under the curve,AUC）=0.794]，高于单独使用CT(AUC=0.667)或7-AABs(AUC=0.514)。多因素logistic回归分析显示，影像学结节直径、结节性质及CT联合7-AABs检测为肺结节良恶性诊断的独立预测因子，以此构建列线图预测模型。该模型在训练集和验证集的AUC值分别为0.826和0.862。DCA结果显示，该模型能够为临床决策提供较高的净收益。结论联合7-AABs与CT能够显著提高肺结节良恶性鉴别的准确性。构建的预测模型为临床决策提供了有力支持，有助于肺结节的精准诊断与治疗。

关键词：肺结节自身抗体胸部影像学预测模型

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ChatGPT在医学影像领域的应用前景

临床放射学杂志 2025年第1期44卷 179-182页

作者：王可欣(综述) 谢辉辉(审校) 首都医科大学基础医学院北京100069 首都医科大学附属北京朝阳医院放射介入中心北京100020

ChatGPT是一款人工智能(AI)工具,是基于OpenAI的GPT系列大型语言模型(LLM)。OpenAI于2022年11月30日公开发布了基于GPT-3的版本,并在2023年3月14日更新为GPT-4版本[1]。近期,多家公司也相继发布了多种大型语言模型,例如LaMDA、BARD、PaL... 详细信息

ChatGPT是一款人工智能(AI)工具,是基于OpenAI的GPT系列大型语言模型(LLM)。OpenAI于2022年11月30日公开发布了基于GPT-3的版本,并在2023年3月14日更新为GPT-4版本[1]。近期,多家公司也相继发布了多种大型语言模型,例如LaMDA、BARD、PaLM、Claude、文心一言、盘谷大模型等。这些模型都有自己的特点,但它们的基本功能都是根据用户提出的问题生成自然语言的回答。虽然ChatGPT在发布时间和用户数量方面处于领先地位,但理论上其他LLM也可以实现相同的功能。本文以ChatGPT为例,综述LLM在医学影像领域的应用前景。

关键词：医学影像 Open 语言模型 Chat 自然语言 GPT 用户数量

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人体囊虫病3650例临床研究

中华医学杂志 1993年第3期73卷 178-179页

作者：谢淑萍魏岗之首都医学院宜武医院 100053

近年来囊虫病的发病有增长趋势。现将我们诊治的3650例人体囊虫病临床资料报道如下。一、一般资料 1、性别和年龄:男 2514例(69%),女 1136例(31%)。31～45岁者2935例(80.4%)。 2、职业和生活环境:农民 2151例,占59%;城镇居民1499例。其... 详细信息

近年来囊虫病的发病有增长趋势。现将我们诊治的3650例人体囊虫病临床资料报道如下。一、一般资料 1、性别和年龄:男 2514例(69%),女 1136例(31%)。31～45岁者2935例(80.4%)。 2、职业和生活环境:农民 2151例,占59%;城镇居民1499例。其中职业为司机、下乡知识青年、肉食加工者802例。 3、病史和病程:有便绦虫病史1251例(34%),有食豆猪肉796例(22%)。病史在一年以内949例(26%);1～5年2226例(61%);6年以上475例(13%)。 4、临床类型:3650例其中单纯皮肌型囊虫病1009例、单纯脑囊虫病980例、单纯眼囊虫病30

关键词：囊尾蚴病诊断

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外泌体微小RNA参与糖尿病足溃疡修复的研究进展

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中国全科医学 2025年第9期28卷 1156-1160页

作者：岑妮秒韦云师黄丽娜吴标良右江民族医学院附属医院内分泌科右江民族医学院研究生学院

糖尿病足溃疡（DFU）通常伴有不同程度的周围神经病变和血管病变，是一种难愈合创面，其愈合延迟过程主要是有新血管再生障碍、持续的创面炎症反应、创面再上皮化障碍及成纤维细胞增殖异常。外泌体微小RNA(miRNA)作为细胞间通讯的重要... 详细信息

糖尿病足溃疡（DFU）通常伴有不同程度的周围神经病变和血管病变，是一种难愈合创面，其愈合延迟过程主要是有新血管再生障碍、持续的创面炎症反应、创面再上皮化障碍及成纤维细胞增殖异常。外泌体微小RNA(miRNA)作为细胞间通讯的重要介质，参与多种生物学过程，可调控影响DFU愈合的多种靶基因转录翻译。本文旨在简要综述外泌体miRNA对新血管再生、炎症反应、创面再上皮化功能以及成纤维细胞增殖功能在DFU修复中的调控作用，以期为DFU的治疗提供新思路。

关键词：糖尿病足溃疡外泌体微小核糖核酸综述

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外科医师的创新之路：临床问题驱动的外科学发展

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 24-27页

作者：彭淑牖浙江大学医学院附属第二医院肝胆胰外科杭州

外科是以手术为主要治病手段的一门学科, 学习外科手术技术的过程漫长而艰辛。在进行手术操作时, 提高操作的精准度、简化流程、提升患者术后的生活质量, 是外科医师不断追求的目标。作者及其团队在四十余年的临床实践中, 通过创新发明... 详细信息

外科是以手术为主要治病手段的一门学科, 学习外科手术技术的过程漫长而艰辛。在进行手术操作时, 提高操作的精准度、简化流程、提升患者术后的生活质量, 是外科医师不断追求的目标。作者及其团队在四十余年的临床实践中, 通过创新发明优化了诸多临床实践过程中发现的问题, 不仅推动了外科技术的发展, 提高了手术的安全性和效率, 还为年轻医师树立了典范。本文阐述了作者几个具有代表性的创新技术的设计灵感来源、设计过程及初步的临床效果, 希望鼓励更多的外科医师在临床实践中积极探索与思考, 发挥创新精神, 共同为我国外科事业的发展贡献力量。

关键词：外科手术外科器械多功能解剖器捆绑式胰腺消化道吻合外科创新