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灵芝多糖通过Akt/mTOR通路调控肝母细胞瘤细胞凋亡及自噬的机制研究

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中国中药杂志 2025年

作者：葛洋高航覃云鹏沈瑞吴华彰叶婷宋航安徽中医药大学中西医结合学院张家界学院医学院蚌埠医学院安徽省癌症转化医学重点实验室

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖... 详细信息

通过探讨灵芝多糖（Ganoderma lucidum polysaccharide， GLP）对肝母细胞瘤HepG2、Huh6细胞模型及KM小鼠原位移植瘤模型的作用机制，以期为GLP的临床应用提供理论依据。采用CCK-8法检测细胞活力；BeyoClickTMEdU-488实验检测细胞增殖能力；Hochest 33258染色检测细胞凋亡情况；Mrfp-GFP-LC3双荧光染色检测细胞自噬情况；采用HepG2细胞建立原位移植瘤动物模型，分别用生理盐水及100、200、300 mg·kg-1GLP处理小鼠，分析取材后肿瘤数目和大小的变化；苏木精-伊红（hematoxylin-eosin，HE）染色观察肿瘤组织及主要脏器（心、肝、脾、肺、肾）组织病理情况；Western blot法检测细胞中肿瘤抑制蛋白53（tumor protein P53， P53）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（B-cell lymphoma-2， Bcl-2）、Bcl-2关联X蛋白（Bcl-2-associated X protein， Bax）、裂解半胱氨酸蛋白酶蛋白-3（cleaved-caspase-3）、苄氯素-1（Beclin-1）、自噬相关蛋白-5（autophagy related protein-5， Atg-5）、微管相关蛋白轻链-3Ⅰ（microtubule-associated protein-light chain-3Ⅰ， LC3Ⅰ）/LC3Ⅱ、自噬衔接蛋白62（autophagy adapter protein 62， P62）、蛋白激酶B（protein kinase B， Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin， mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）的蛋白表达。体外实验结果显示，与对照组相比，GLP处理后肿瘤细胞活力显著降低，细胞凋亡比例呈剂量依赖性增高，且自噬流被抑制。在体内实验中，与模型组相比，GLP处理后小鼠的肿瘤数目和大小显著下降；Western blot结果显示，与对照组或模型组相比，GLP处理后P53、Bax、cleaved-caspase-3、Beclin-1、Atg-5、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ水平显著升高，Bcl-2、P62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR水平显著降低。这些结果表明GLP能够通过调控Akt/mTOR途径诱导肝母细胞瘤细胞凋亡与自噬。

关键词：灵芝多糖肝母细胞瘤凋亡自噬 Akt/mTOR信号通路

三种不同剂型的硝硫氰胺治疗血吸虫病2,204例的临床观察

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四川医学院学报 1980年第3期11卷 222-228页

作者： Department of Infectious Diseases 四川医学院传染病学教研室

本文报告用硝硫氰胺的微囊片、微粉及滴丸三种剂型治疗血吸虫病2,204例的临床观察。经3～6月的疗效考核证实三种剂型的疗效相等,均在80％以上。作者认为微囊片型具有剂量准确,服用方便,疗效与其他二型相等而付作用比其他二型轻的优点,... 详细信息

本文报告用硝硫氰胺的微囊片、微粉及滴丸三种剂型治疗血吸虫病2,204例的临床观察。经3～6月的疗效考核证实三种剂型的疗效相等,均在80％以上。作者认为微囊片型具有剂量准确,服用方便,疗效与其他二型相等而付作用比其他二型轻的优点,是值得推广的一种剂型。

关键词：血吸虫病临床观察寄生虫病裂体吸虫病地方病寄生虫感染传染病治疗后硝硫氰胺抗血吸虫药疗效考核不同剂型微囊片

骨关节炎软骨细胞中hsa-miR-3202的生物信息分析与功能验证

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中国组织工程研究 2025年第12期29卷 2458-2465页

作者：张佳琪刘艳虹梁慧婷周晶晶王雅雯许憬瑜李煜爽雷立健胡晓琴山西医科大学公共卫生学院流行病学教研室山西省太原市030001

背景:软骨细胞增殖与凋亡的失衡在骨关节炎发生发展中起着重要作用,已有研究发现hsa-miR-3202参与调节多种细胞的增殖和凋亡过程,然而尚未有研究探讨hsa-miR-3202与骨关节炎的相关性。目的:探讨hsa-miR-3202在骨关节炎软骨细胞中的表达... 详细信息

背景:软骨细胞增殖与凋亡的失衡在骨关节炎发生发展中起着重要作用,已有研究发现hsa-miR-3202参与调节多种细胞的增殖和凋亡过程,然而尚未有研究探讨hsa-miR-3202与骨关节炎的相关性。目的:探讨hsa-miR-3202在骨关节炎软骨细胞中的表达及其对软骨细胞增殖与凋亡能力的影响。方法:①通过生物信息分析筛选骨关节炎软骨细胞中差异表达的microRNA,基于国内外研究现状,选择hsa-miR-3202进行后续研究,采用GO功能富集和KEGG通路富集对其进行靶基因预测。②选择对数生长期的人正常软骨细胞系C28/I2,随机分4组培养:正常组加入普通培养基培养24 h,更换普通培养基培养6 h,更换普通培养基继续培养;脂多糖组加入含脂多糖的培养基培养24 h,更换普通培养基培养6 h,更换普通培养基继续培养;脂多糖+NC组加入含脂多糖的培养基培养24 h,加入has-miR-3202 mimics对照转染6 h,更换普通培养基继续培养;脂多糖+hsa-miR-3202 mimics组加入含脂多糖的培养基培养24 h,加入has-miR-3202 mimics转染6 h,更换普通培养基继续培养。继续培养48 h后,采用RT-qPCR检测细胞hsa-miR-3202表达,流式细胞术检测细胞凋亡;继续培养0-72 h,采用CCK-8检测细胞增殖活力。结果与结论:①生物信息分析结果显示,hsa-miR-3202表达在骨关节炎软骨细胞中显著下调;GO功能富集与KEGG通路富集结果显示,hsa-miR-3202靶基因功能与细胞生长、凋亡密切相关。②体外细胞实验结果显示,与正常组比较,脂多糖组软骨细胞hsa-miR-3202表达与细胞增殖能力下降(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.05);与脂多糖组比较,脂多糖+hsa-miR-3202 mimics组软骨细胞hsa-miR-3202表达与细胞增殖能力升高(P<0.05),细胞凋亡率减少(P<0.05)。③结果表明,hsa-miR-3202在骨关节炎软骨细胞中表达下调,其表达下调可抑制细胞增殖并促进细胞凋亡,进而影响骨关节炎疾病的发生和发展。

关键词： has-miR-3202 骨关节炎生物信息学软骨细胞炎症细胞增殖细胞凋亡老年人

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胃印戒细胞癌的H3K27me3沉默子重塑特征及转录调控功能

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陆军军医大学学报 2025年

作者：杜艾贝任原锋储召乐刘碧颖李先锋向俊宇陈东风王涛王斌郭海英张璇李玉红陆军军医大学基础医学院细胞生物学教研室陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)消化内科消化系统肿瘤精准防治重庆市重点实验室重庆市中医院肿瘤科

目的本研究旨在通过表观遗传组学技术，解析胃印戒细胞癌（Signet-Ring Cell Carcinoma of the stomach，SRCC）的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用，以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法本研究收集2021年1... 详细信息

目的本研究旨在通过表观遗传组学技术，解析胃印戒细胞癌（Signet-Ring Cell Carcinoma of the stomach，SRCC）的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用，以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法本研究收集2021年1月至2023年12月期间就诊于陆军特色医学中心消化内科患者内镜下获得的15例正常胃窦/胃体样本和20例SRCC样本，进行染色质可及性测序（Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high-throughput Sequencing，ATAC-seq），H3K27me3沉默子的染色质靶向捕获测序（Cleavage Under Targets and Tagmentation，CUT&Tag）以及RNA测序，并联合分析。筛选受沉默子调控的候选差异表达基因，利用GO和KEGG分析其潜在肿瘤生物学功能。富集SRCC特征性沉默子的关键转录因子调控基序，构建转录因子调控网络，探讨其调控机制。结果 SRCC沉默子主要分布于基因组远端基因间区（占37.06%）。与正常组织相比，SRCC中H3K27me3沉默子信号显著降低（P＜0.01），共鉴定出6 257个丢失位点。CUT&Tag和RNA-seq整合分析显示，380个因沉默子丢失而上调的基因显著富集于免疫相关通路，如T细胞受体信号通路（P＜0.01）。免疫组化验证表明转录因子EHF表达显著升高（P＜0.05）。结论本研究揭示SRCC中H3K27me3沉默子的重塑现象及其转录调控关键作用，为SRCC的防治提供了干预新思路。

关键词：胃印戒细胞癌表观遗传组蛋白修饰沉默子

基于高通量测序技术分析中国荷斯坦奶牛瘤胃纤毛虫的物种多样性

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河南师范大学学报(自然科学版) 2025年

作者：何金英徐勤辉王宇嘉江奕希黄一菲李曼熊杰冯金梅江汉大学医学部病原生物学教研室中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室

瘤胃纤毛虫是反刍动物瘤胃微生态系统的重要组成部分,在调控瘤胃微环境及参与其宿主动物的生理功能等方面具有重要作用.然而,家养反刍动物瘤胃中的瘤胃纤毛虫物种多样性及不同动物个体间瘤胃纤毛虫群落结构的差异仍不清楚.采用基于18S r... 详细信息

瘤胃纤毛虫是反刍动物瘤胃微生态系统的重要组成部分,在调控瘤胃微环境及参与其宿主动物的生理功能等方面具有重要作用.然而,家养反刍动物瘤胃中的瘤胃纤毛虫物种多样性及不同动物个体间瘤胃纤毛虫群落结构的差异仍不清楚.采用基于18S rRNA基因的高通量测序技术,解析了中国荷斯坦奶牛瘤胃内纤毛虫的物种多样性和宿主不同个体间的差异.选取3头成年健康中国荷斯坦奶牛共采集了9个瘤胃液样品,提取样品总DNA后,采用瘤胃纤毛虫18S rRNA基因V5～V8区特异性引物进行扩增,扩增产物使用Ion S5TMXL平台测序.去除低质量序列和嵌合体后,共获得721 250条高质量有效序列,基于97%的序列一致性聚类获得38个操作分类单元（operational taxonomic units,OTU）.不同个体样品间在α多样性Chao1、ACE、Shannon和Simpson指数上,差异不显著.OTUs的物种分布属于纤毛门裂口纲毛口亚纲.在属水平分类上,它们主要分布于10个已知的瘤胃纤毛虫的属,其中内毛属是相对丰度最高的属,同时还检测到一些未被分类和鉴定的瘤胃纤毛虫.同一牧场同一饲喂条件下的不同个体之间,瘤胃纤毛虫的物种多样性没有显著差异,但不同个体之间在均匀度上存在一定的差异.研究结果将为瘤胃纤毛虫的高通量测序分析和综合分类学研究提供参考.

关键词：瘤胃纤毛虫原生生物多样性 18S rRNA基因测序分类学

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N-甲基小檗胺对细胞内钙稳态的调节作用

中国医科大学学报 2025年

作者：杨东凝周诗李玥霖朱俊蒙郝丽英胡慧媛中国医科大学药学院药物毒理学教研室

目的探讨N-甲基小檗胺（N-MB）对H9c2心肌细胞内钙稳态的调节作用，从而明确N-MB心肌保护作用的可能机制。方法通过MOE软件预测N-MB与CaV1.2通道的结合并判断二者的结合能力与结合模式。通过全细胞膜片钳技术记录稳定表达h CaV1.2的HEK... 详细信息

目的探讨N-甲基小檗胺（N-MB）对H9c2心肌细胞内钙稳态的调节作用，从而明确N-MB心肌保护作用的可能机制。方法通过MOE软件预测N-MB与CaV1.2通道的结合并判断二者的结合能力与结合模式。通过全细胞膜片钳技术记录稳定表达h CaV1.2的HEK293细胞内CaV1.2钙通道电流的变化，观察N-MB （30μmol/L）对CaV1.2钙通道电流的影响。将Fluo 3-AM荧光探针装载至H9c2心肌细胞中，激光共聚焦显微镜检测N-MB （3、30μmol/L）对心肌细胞内Ca2+浓度的影响。实时定量PCR检测N-MB （3、30μmol/L）对H9c2心肌细胞中Ca2+调控相关基因Cacna1c、Cacnb2、Ryr2、Serca2a、Ncx1表达的影响。结果经MOE软件预测，N-MB和CaV1.2通道可以结合，二者相互作用的结合位点主要涉及Phe1191、Thr1420、Asn771等，作用方式有H-donor、pi-pi、pi-H 3种。N-MB（30μmol/L）对CaV1.2钙通道电流可产生明显抑制作用，其抑制率为（76.09±7.41）%。N-MB （3μmol/L、30μmol/L）作用于H9c2心肌细胞后细胞内钙信号的荧光强度明显增强（P 学意义（P> 0.05），而Cacnb2表达显著减少（P <0.001）,Ryr2表达显著增加（P <0.05）。结论 N-MB可以与CaV1.2钙通道结合。N-MB可能通过抑制CaV1.2钙通道的表达而抑制钙电流；同时可能通过促进Ryr2表达而升高细胞内Ca2+浓度来参与调节细胞内钙稳态，发挥其心肌保护作用。

关键词： N-甲基小檗胺细胞内钙稳态 CaV1.2钙通道

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促黄体激素释放激素类似物的制备

化学与生物工程 2025年第1期 49-52页

作者：李松涛杨雪郝婷范彦芳王燕承德医学院中药研究所河北省中药研究与开发重点实验室承德医学院基础医学院

以Rink Amide树脂为固相载体、N-芴甲氧羰基（Fmoc）保护氨基酸为原料，采用固相多肽合成法制备了一种促黄体激素释放激素（luteinizing hormone-releasing hormone, LHRH）6位经D-构型半胱氨酸（D-Cys）取代的类似物[D-Cys6]-LHRH。优... 详细信息

以Rink Amide树脂为固相载体、N-芴甲氧羰基（Fmoc）保护氨基酸为原料，采用固相多肽合成法制备了一种促黄体激素释放激素（luteinizing hormone-releasing hormone, LHRH）6位经D-构型半胱氨酸（D-Cys）取代的类似物[D-Cys6]-LHRH。优化的裂解试剂为三氟乙酸-水-三异丙基硅烷（95.0∶2.5∶2.5,体积比）,纯品的HPLC纯度为97.8%,总收率为47.5%。该方法简便高效、总收率高，为LHRH类似物的制备提供了参考，也为进一步构建LHRH受体靶向的多肽-药物偶联物奠定了基础。

关键词：促黄体激素释放激素类似物多肽固相合成 D-构型半胱氨酸

来源：博看期刊

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肠致病性大肠杆菌的致病机理

国外医学（微生物学分册） 1993年第4期16卷 162-163,159页

作者：林尔昕黄谷良安徽蚌埠医学院传染病学教研室

目前认为肠致病性大肠杆菌引起腹泻的致病机理为:粘附因子质粒编码的束状形成纤毛是感染初期细菌在微绒毛上产生局部粘附的原因,而染色体基因启动信号转换导致细胞支架损伤及微绒毛退变。继之eae基因簇激活产生紧密素(intimin)使细胞支... 详细信息

目前认为肠致病性大肠杆菌引起腹泻的致病机理为:粘附因子质粒编码的束状形成纤毛是感染初期细菌在微绒毛上产生局部粘附的原因,而染色体基因启动信号转换导致细胞支架损伤及微绒毛退变。继之eae基因簇激活产生紧密素(intimin)使细胞支架进一步破坏,一部分细菌侵入上皮细胞。

关键词：大肠杆菌肠致病性病理

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弓形虫(滋养体)的组织培养

国外医学（寄生虫病分册） 1990年第3期17卷 107-109页

作者：李宏军解中坚山西医学院传染病学教研室

弓形虫的组织培养在弓形虫及弓形虫病研究领域有着重要的应用价值和广阔的应用前景。为了使这项研究方法在国内的研究领域充分发挥其应有的作用,作者综述了弓形虫组织培养的研究概况。这篇综述分三个部分:(1)简述弓形虫组织培养的意义。... 详细信息

弓形虫的组织培养在弓形虫及弓形虫病研究领域有着重要的应用价值和广阔的应用前景。为了使这项研究方法在国内的研究领域充分发挥其应有的作用,作者综述了弓形虫组织培养的研究概况。这篇综述分三个部分:(1)简述弓形虫组织培养的意义。(2)重点论述弓形虫对组织细胞的感染过程。即虫体对宿主细胞的侵入,包括虫体侵入的方式、侵入开始的时间、侵入动力学及影响虫体侵入的因素;宿主细胞内虫体的增殖,包括虫体增殖的场所、增殖的方式、增殖开始的时间、增殖动力学及影响虫体增殖的因素;虫体从宿主细胞内释出,包括虫体释出的方式、宿主细胞破坏的机理、破坏开始的时间及宿主细胞破坏动力学。(3)介绍弓形虫组织培养的条件和方法。包括对培养基的要求、环境因素对虫体组织培养的影响,并转荐了一种弓形虫组织培养的“标准化”方法。

关键词：弓形体滋养体组织培养

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