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miR-155/瘦素受体/AMPK轴在结核菌素诱导破骨细胞形成中的作用及机制

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3190-3195页

作者：王增顺索南昂秀刘立民周京元青海省人民医院骨科青海省西宁市810000

背景:破骨细胞异常活化在脊柱结核骨质破坏中起重要作用。在骨质疏松发病过程中,敲低miR-155通过增加瘦素受体的表达来激活磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK),进而抑制破骨细胞分化及骨吸收。但miR-155/瘦素受... 详细信息

背景:破骨细胞异常活化在脊柱结核骨质破坏中起重要作用。在骨质疏松发病过程中,敲低miR-155通过增加瘦素受体的表达来激活磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK),进而抑制破骨细胞分化及骨吸收。但miR-155/瘦素受体/AMPK轴在脊柱结核骨质破坏中的作用尚不清楚。目的:研究miR-155/瘦素受体/AMPK轴在结核菌素诱导破骨细胞形成中的作用及机制。方法:培养单核巨噬细胞RAW264.7细胞,用不同浓度(1.0,2.5,5.0,10.0 IU/mL)结核菌素处理,转染阴性对照序列或miR-155抑制物、阴性对照siRNA序列或瘦素受体siRNA序列。采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞数量,荧光定量PCR检测miR-155 mRNA表达,Western blot检测瘦素受体、p-AMPK蛋白表达,双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向瘦素受体。结果与结论:①与对照组比较,2.5,5.0,10.0 IU/mL结核菌素组破骨细胞数量、miR-155 mRNA表达水平明显增加,瘦素受体、p-AMPK蛋白表达水平明显降低(P0.05),破骨细胞数量明显增加,瘦素受体、p-AMPK蛋白表达水平明显降低(P<0.05);⑤结果表明,结核菌素通过增加miR-155表达抑制下游瘦素受体表达及AMPK激活,进而诱导破骨细胞形成。

关键词：破骨细胞结核菌素单核巨噬细胞骨吸收 miR-155 瘦素受体 AMPK

连翘苷调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激蛋白信号通路对慢性阻塞性肺疾病急性加重期大鼠气道炎症的影响

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中国慢性病预防与控制 2024年第3期32卷 225-229页

作者：马生娟丁蕾韩娜青海省第五人民医院健康管理科青海省西宁810000 青海省第五人民医院康复科

目的初步探讨连翘苷(Phil)调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠气道炎症的影响,为临床治疗AECOPD提供依据。方法选用8~10周龄雄性SD大鼠84只,按照随机数字表... 详细信息

目的初步探讨连翘苷(Phil)调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路对慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)大鼠气道炎症的影响,为临床治疗AECOPD提供依据。方法选用8~10周龄雄性SD大鼠84只,按照随机数字表法分为6组,分别为对照组,模型组,Phil低、中、高剂量组,激活剂组,每组14只。除对照组外,其他组均采用气道滴注脂多糖联合烟雾暴露构建AECOPD大鼠模型,建模成功后,Phil低、中、高剂量组大鼠灌胃35、70、140 mg/kg的Phil,激活剂组灌胃140 mg/kg的Phil+尾静脉注射25 mg/kg cGAS-STING信号通路激活剂2.5-己酮可可碱(DMXAA),对照组与模型组灌胃并尾静脉注射等量的生理盐水,每日1次,连续4周;观察大鼠的一般形态,检测各组大鼠肺功能;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;采用苏木精和伊红(HE)染色法观察大鼠肺组织病理损伤情况;采用原位末端标记法(TUNEL)染色观察大鼠肺上皮细胞凋亡情况;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-1(cleaved Caspase-1)及cGAS-STING通路蛋白表达。采用Graphpad Prism 9.0软件进行t检验、方差分析,两两比较采用SNK-q检验。结果与对照组比较,模型组大鼠气道阻力(RI)、IL-6、IL-1β、TNF-α水平、肺上皮细胞凋亡率及cleaved Caspase-1、cGAS、STING、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平显著升高,呼气峰值流速(PEF)、吸气峰流速(PIF)、第1秒用力呼气容积/肺活量(FEV_(1)/FVC)比值显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,Phil低、中、高剂量组大鼠RI、IL-6、IL-1β、TNF-α、肺上皮细胞凋亡率及cleaved Caspase-1、cGAS、STING、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平显著降低,PEF、PIF、FEV_(1)/FVC比值显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与Phil高剂量组比较,激活剂组大鼠上述指标变化均显著逆转,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论Phil可能通过抑制cGAS-STING通路,改善气道炎症,进而改善AECOPD大鼠肺功能。

关键词：连翘苷环鸟苷酸-腺苷酸合成酶干扰素基因刺激蛋白气道炎症

“调中下气汤”联合胃黏膜保护剂对慢性萎缩性胃炎患者血清胃泌素的调节作用研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：郑靖松长青高丽丽张海梅刘琪青海省第五人民医院消化内科青海省人民医院药学部

目的：评价“调中下气汤”联合胃黏膜保护剂对慢性萎缩性胃炎患者血清胃泌素的调节作用研究。方法：以我院就诊的慢性萎缩性胃炎112例为此次试验的对象，随机分成2组。参照组56例病人实施西药常规治疗，口服胃复春片，1次4片，1天3次。... 详细信息

目的：评价“调中下气汤”联合胃黏膜保护剂对慢性萎缩性胃炎患者血清胃泌素的调节作用研究。方法：以我院就诊的慢性萎缩性胃炎112例为此次试验的对象，随机分成2组。参照组56例病人实施西药常规治疗，口服胃复春片，1次4片，1天3次。幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）阳性者采用Hp根除方案治疗，四联用药予以10天时长的治疗。研究组56例病人则另外口服“调中下气汤”予以治疗。两组病人均不间断的实施3个月的治疗。对比治疗前后两组病人胃脘冷痛、胃脘痞胀、喜温喜按、呕吐清水、气短懒言、大便稀溏等中医症候积分的变化，比较两组治疗前后胃镜下病理积分变化，比较治疗前后血清胃泌素(Gastrin，Gas)、生长抑素（Somatostatin，SS）和表皮生长因子（Epidermal growth factor，EGF）水平变化和治疗疗效。结果：治疗疗效方面，研究组较参照组更优，差异明显（P＜0.05）。脾胃虚寒证的相关症候积分方面，治疗后两组病人均出现了不同程度的下降，且研究组相关积分的改变幅度较参照组更高（P＜0.05）。胃镜下的病理积分方面，治疗后两组病人均出现了不同程度的下降，且的变化幅度较参照组更高（P＜0.05）。GAS水平方面，治疗后两组病人均出现了不同程度的下降，SS和EGF水平均出现了不同程度的上升，其中治疗后研究组血清GAS、SS和EGF的改变幅度均较参照组高（P＜0.05）。结论：调中下气汤联合胃黏膜保护剂在慢性萎缩性胃炎这一疾病的治疗中疗效确切，可以将病人的中医症候相关积分降低，让胃黏膜萎缩状态缓解，调节胃肠激素，让胃泌素不会过度的分泌，从而保护胃黏膜，加快胃相关功能的恢复，提升治疗效果。

关键词：调中下气汤胃黏膜保护剂慢性萎缩性胃炎血清胃泌素影响

miR-27a通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ/葡萄糖转运蛋白4调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞功能的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第1期32卷 51-58页

作者：王睿郭清民尹正芳熊正方青海省人民医院生殖医学中心西宁810000 青海省人民医院妇科西宁810000

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-I... 详细信息

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-IR组,HOMA-IR≥2.57,n=23)和非IR组(PCOS-NIR组,HOMA-IR<2.57,n=22),另选取同期本院因男性或输卵管因素的已婚不孕患者为对照组(Con,n=21)。miR-27a模拟物(miR-27a mimics)、miR-27a抑制剂(miR-27a inhibitor)和相应对照(mimics NC和inhibitor NC)转染PCOS-IR组颗粒细胞,分为miR-27a mimics组、miR-27a inhibitor组、mimics-NC组和inhibitor-NC组。双荧光素酶报告试验证实miR-27a与PPARγ结合。CCK-8法和Annexinv-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡。定量实时PCR和Western blot法分别检测miR-27a、GluT4、PPARγ、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果与Con组比较,PCOS-NIR、PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.01),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与PCOS-NIR组比较,PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。双荧光素酶报告显示,PPARγ和miR-27a之间有靶向结合位点。与inhibitor-NC组比较,miR-27a inhibitor组24、48、72和96 h时细胞活性升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a inhibitor、mimics-NC组凋亡率降低(P<0.05或P<0.01),miR-27a mimics组凋亡率升高,48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组凋亡率升高,24、48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.05或P<0.01)。与inhibitor-NC组比较,miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),miR-27a inhibitor组GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达表达升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论miR-27a表达与颗粒细胞IR,细胞增殖及细胞凋亡相关,其过程可能与PPARγ信号通路相关。

关键词： miR-27a 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 葡萄糖转运蛋白4 颗粒细胞多囊卵巢综合征

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高原红细胞增多症多组学研究进展

中华血液学杂志 2024年第08期45卷 795-800页

作者：郑桂萍年蔚石雪峰解友邦青海省人民医院血液风湿科西宁青海省人民医院老年医学科西宁青海省人民医院呼吸与危重症医学科西宁

慢性高原病(chronic mountain sickness, CMS)或Monge综合征是一种在海拔超过2 500 m地区流行的疾病, 高原红细胞增多症(high altitude polycythemia, HAPC)是CMS的亚型之一。藏族人群基因组中的高原适应基因以EPAS1和EGNL1最为关键;HIF...

慢性高原病(chronic mountain sickness, CMS)或Monge综合征是一种在海拔超过2 500 m地区流行的疾病, 高原红细胞增多症(high altitude polycythemia, HAPC)是CMS的亚型之一。藏族人群基因组中的高原适应基因以EPAS1和EGNL1最为关键;HIF-PHD-VHL蛋白系统在HAPC发病机制中发挥重要的作用;SENP1基因编码一种蛋白酶, 具有调节缺氧相关转录因子如HIF和GATA的功能, 调节EPO或EPO受体表达参与红细胞生成。随着基因检测和组学技术的发展, 关于HAPC发病机制的研究在转录组学、蛋白组学和代谢组学方面取得了一些新的进展, 为骨髓血液生态和造血调控方面的研究奠定基础。CMS的诊断标准存在一定的局限性, 尤其是高原红细胞增多症患者的诊断应该完善先天性和真性红细胞增多症推荐的基因检测。本文就HAPC在各组学技术、造血调控及诊断流程方面的最新研究作一综述, 更有利于对HAPC发病机制的认识, 强调基因检测在红细胞增多的临床诊断的重要性。

关键词：

突出的皮质静脉-磁敏感加权评分和分级与高海拔地区缺血性脑卒中出血转化相关性研究

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第8期26卷 942-947页

作者：李宝娜杨晓莉张庆欣青海省人民医院影像中心西宁810000 青海省人民医院神经内科

目的在用突出的皮质静脉-磁敏感加权成像(prominent cortical vein-susceptibility weightedimaging,PCV-SWI)评分和PCV分级分别评价急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者侧支循环,分析这两个影像学特征指标与出血转化(hemorrhagic transformation,HT)之间的关系。方法选取2018年1月至2022年12月青海省人民医院收治的AIS患者68例,所有患者行头颅多模态MRI扫描,观察并分析其侧支循环,侧支循环用PCV-SWI评分和PCV分级进行评估,2周内复查头颅MRI,根据有无HT分为HT组39例和非HT组29例。分析侧支循环与HT之间的关系。结果HT组PVC 3级比例高于非HT组,差异有统计学意义(P7分7例,HT组DWI-ASPECTS≤7分比例高于非HT组,差异有统计学意义(97.44%vs 79.31%,P<0.05)。二元logistic回归分析显示,PCV分级、入院10~14 d美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分是HT发生的独立危险因素(OR=2.128,95%CI:1.200~3.774,P=0.010;OR=1.308,95%CI:1.057~1.620,P=0.014),DWI-ASPECTS是HT发生的保护因素(OR=0.646,95%CI:0.442~0.945,P=0.024)。结论DWI-ASPECTS、PCV分级、入院10~14 d NIHSS评分是高海拔地区AIS患者HT发生的独立预测因素。临床上进一步进行影像学的PCV征象及梗死面积评价,有助于HT发生的早期预测。

关键词：卒中侧支循环数据相关性出血转化皮质静脉-磁敏感加权成像评分皮质静脉分级

二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对IGFBP-6影响的研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：王森林张永刚张英沈括郑桂萍青海省人民医院中医科青海省人民医院血液风湿科

目的观察二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-6（insulin-likegrowthfactorbindingprotein-6，IGFBP-6）水平影响。方法研究纳入我院收治的高原地区类风湿性关节炎... 详细信息

目的观察二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-6（insulin-likegrowthfactorbindingprotein-6，IGFBP-6）水平影响。方法研究纳入我院收治的高原地区类风湿性关节炎患者合计81例（2020年1月～2023年1月收治）以随机数字表法分为西药组与观察组，西药组患者（40例）采取单纯西药治疗，观察组患者（41例）采取西药结合二十八味风湿骨痛汤加减方治疗，观察各组患者临床数据：疗效、中医症候总积分变化及晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数变化、C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）及类风湿因子（rheumatoidfactor，RF）、血沉指标变化、IGFBP-6水平变化、血浆D-二聚体（plasmaD-dimer，D-D）与纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）水平变化、免疫球蛋白A、G、M（ImmunoglobulinA，IgA、ImmunoglobulinG，IgG、ImmunoglobulinM，IgM）指标变化、不良反应。结果观察组患者治疗效果优于西药组，P＜0.05；治疗前两组患者中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标比较，P＞0.05，治疗后各组患者中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标均改善，且观察组治疗后中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标均优于西药组，P＜0.05；观察组患者治疗不良反应率与西药组相当，P＞0.05。结论二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效显著，可较好提升患者IGFBP-6水平，改善患者病症及凝血功能、免疫功能，治疗不良反应较少，值得应用。

关键词：高原地区类风湿性关节炎二十八味风湿骨痛汤加减西药免疫功能 IGFBP-6水平

血脂异常与结直肠锯齿状病变、结直肠癌相关性研究进展

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中国全科医学 2024年第12期27卷 1424-1430页

作者：冉东升逯艳艳辛春玲马颖才青海大学研究生院青海省西宁市810000 青海省人民医院消化内科青海省西宁市810000

血脂水平异常可能与结直肠肿瘤的发生、发展有关。目前,众多研究证实血脂异常增加了患结直肠腺瘤的风险,然而血脂异常与结直肠锯齿状病变、结直肠癌的关联仍存在争议,并且国内相关综述较少。本文全面探讨了血脂异常与结直肠锯齿状病变... 详细信息

血脂水平异常可能与结直肠肿瘤的发生、发展有关。目前,众多研究证实血脂异常增加了患结直肠腺瘤的风险,然而血脂异常与结直肠锯齿状病变、结直肠癌的关联仍存在争议,并且国内相关综述较少。本文全面探讨了血脂异常与结直肠锯齿状病变、结直肠癌相关性,分析了可能造成争议的原因,指出后续的研究方向,并讨论了血脂异常在结直肠肿瘤发生、发展中发挥的作用,提示血脂异常与结直肠锯齿状病变、结直肠癌有关。血脂异常可能是通过胰岛素抵抗、炎性因子、氧化应激、高脂饮食、免疫抑制等多种机制相互作用参与了结直肠肿瘤的发生、发展。结直肠癌发病率逐年上升,而其具有较缓慢的自然病程和较明确的癌前病变,因此明确血脂指标与结直肠肿瘤的相关性,便于早期预防和有针对性的筛查,为未来制订有针对性的预防结直肠癌策略提供参考。

关键词：高脂血症血脂异常结直肠肿瘤结直肠锯齿状病变结直肠癌综述

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lncRNA MIAT调节miR-495-3p/STAT3信号通路对高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞凋亡的影响

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中国老年学杂志 2024年第11期44卷 2784-2790页

作者：魏雪梅谈丽丽韩崇岭陈平青海省第五人民医院眼科青海西宁810000

目的探讨长链非编码RNA心肌梗死相关转录物(lncRNA MIAT)对高糖(HG)诱导的人视网膜色素上皮细胞(RPE)凋亡的影响及分子机制。方法用HG处理人RPE细胞系ARPE-19以在体外模拟糖尿病视网膜病变(DR)。将用于lncRNA MIAT沉默的小干扰RNA(siRNA... 详细信息

目的探讨长链非编码RNA心肌梗死相关转录物(lncRNA MIAT)对高糖(HG)诱导的人视网膜色素上皮细胞(RPE)凋亡的影响及分子机制。方法用HG处理人RPE细胞系ARPE-19以在体外模拟糖尿病视网膜病变(DR)。将用于lncRNA MIAT沉默的小干扰RNA(siRNA,si-MIAT)和阴性对照(si-NC)、miR-495-3p抑制剂(miR-495-3p inhibitor)及抑制剂对照(inhibitor-NC)转染ARPE-19细胞,分为HG+si-NC组、HG+si-MIAT组、HG+si-MIAT+anti-NC组、HG+si-MIAT+anti-miR-495-3p组,另设正常糖(NG)组和HG组。使用逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞lncRNA MIAT、miR-495-3p、信号转导和转录激活因子(STAT)3 mRNA水平,MTT法测定细胞活性,流式细胞术测定细胞凋亡,蛋白质印迹分析STAT3与凋亡相关蛋白表达。双荧光素酶实验检测miR-495-3p与lncRNA MIAT或STAT3的靶标关系。建立DR小鼠模型,分为对照(Control)组、DR组、DR+si-NC组、DR+si-MIAT组,苏木素-伊红(HE)染色和原位末端标记染色(TUNEL)染色观察lncRNA MIAT敲低对DR小鼠视网膜组织损伤的影响,RT-qPCR和Western印迹检测视网膜组织lncRNA MIAT、miR-495-3p、STAT3表达。结果与NG组相比,HG组lncRNA MIAT、STAT3 mRNA和蛋白水平、细胞凋亡率、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2相关X蛋白(Bax)蛋白水平和(Cleaved-Caspase)-3/Caspase-3比值升高,miR-495-3p水平、细胞存活率、Bcl-2蛋白水平降低(均P<0.05)。敲低lncRNA MIAT可明显上调miR-495-3p,明显抑制STAT3表达,明显升高细胞存活率和Bcl-2蛋白水平,明显降低细胞凋亡率、Bax蛋白水平和Cleaved-Caspase-3/Caspase-3比值(均P<0.05)。下调miR-495-3p可升高STAT3水平,部分消除lncRNA MIAT敲低对HG诱导的ARPE-19细胞凋亡的抑制作用(均P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,过表达miR-495-3p可降低MIAT-野生型(WT)和STAT3-WT的荧光素酶活性(P<0.05)。体内实验结果显示,lncRNA MIAT敲低可通过上调miR-495-3p抑制STAT3表达,减轻DR小鼠视网膜损伤,抑制视网膜细胞凋亡。结论敲低lncRNA MIAT可能通过增强miR-495-3p对STAT3的抑制作用,减少HG诱导的人RPE细胞凋亡,减缓DR进展。

关键词：糖尿病视网膜病变长链非编码RNA心肌梗死相关转录物 miR-495-3p 信号转导和转录激活因子3 人视网膜色素上皮细胞凋亡