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弹性蛋白酶调节中性粒细胞炎性募集的功能研究

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中国免疫学杂志 2024年第3期40卷 449-455页

作者：刘洋孟玲范思佳任春光张欢重庆医科大学基础医学院细胞与遗传教研室发育生物学研究室重庆400016

目的:探索中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对中性粒细胞炎性募集的影响。方法:采用外源性弹性蛋白酶抑制剂西维来司钠盐预处理小鼠骨髓来源的中性粒细胞,通过腹膜炎过继性迁移、细胞体外趋化、流动室黏附、免疫荧光染色、细胞伸展等实验,检测N... 详细信息

目的:探索中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)对中性粒细胞炎性募集的影响。方法:采用外源性弹性蛋白酶抑制剂西维来司钠盐预处理小鼠骨髓来源的中性粒细胞,通过腹膜炎过继性迁移、细胞体外趋化、流动室黏附、免疫荧光染色、细胞伸展等实验,检测NE的抑制对中性粒细胞体内炎性募集、体外趋化、牢固黏附、细胞极化与伸展能力的影响;利用流式细胞术及鲁米诺化学发光系统检测NE的抑制对中性粒细胞吞噬及活性氧(ROS)释放能力的影响。结果:西维来司钠盐预处理显著减弱了中性粒细胞体内炎性募集(P<0.001);减弱了中性粒细胞在体外趋化过程中对催化剂方向性的感知(P<0.05),减慢了趋化速率(P<0.05),降低了趋化距离(P<0.05);减少了中性粒细胞在炎性内皮细胞表面形成牢固黏附的能力(P<0.000 1),抑制了中性粒细胞对细菌的吞噬能力(P<0.01);但对中性粒细胞的伸展、极化及ROS的释放均无显著影响。结论:NE的抑制显著损害了中性粒细胞在体内外的炎性募集级联反应及吞噬作用,但对中性粒细胞的伸展、极化、ROS释放等功能无显著影响。

关键词：中性粒细胞弹性蛋白酶西维来司钠盐炎性募集

甘蓝型油菜自交不亲和性基因遗传分析与初定位

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植物生理学报 2024年第2期60卷 353-362页

作者：谢立人星晓蓉李开祥杜德志青海大学农林科学院西宁810016 青海省春油菜遗传改良重点实验室西宁810016

自交不亲和性是利用油菜(Brassica sp.)杂种优势的途径之一。自交不亲和系杂种有诸如没有不育胞质存在的负效应、恢复源广泛、可获得高质量F1代种子等优点,因此研究调控自交不亲和性的基因对利用油菜杂种优势具有重要意义。以甘白(甘蓝... 详细信息

自交不亲和性是利用油菜(Brassica sp.)杂种优势的途径之一。自交不亲和系杂种有诸如没有不育胞质存在的负效应、恢复源广泛、可获得高质量F1代种子等优点,因此研究调控自交不亲和性的基因对利用油菜杂种优势具有重要意义。以甘白(甘蓝型油菜×白菜型油菜,***×***)杂交选育的甘蓝型油菜自交不亲和系No.234为研究对象,通过遗传规律分析发现No.234不同遗传背景的恢复系的自交不亲和性分别受1、2对隐性基因(BnSI1、BnSI2)控制;利用AFLP(扩增片段长度多态性)标记和BSA-seq(极端性状混池重测序)将自交不亲和基因BnSI1初步定位在A07染色体2 Mb区间内。该研究为进一步定位、克隆BnSI1基因及后续的功能研究提供研究基础。

关键词：甘蓝型油菜自交不亲和性遗传规律分析初步定位分子标记

基于转录组的茎用莴苣抽薹相关差异表达基因分析

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江苏农业学报 2024年第4期40卷 711-720页

作者：武一孙雪梅杨世鹏谭龙王丽慧青海大学农林科学院青海省蔬菜遗传与生理重点实验室青海西宁810016

为探究影响茎用莴苣抽薹的相关关键基因,采用高通量转录组测序的方法,研究茎用莴苣产品器官收获期和抽薹期的差异表达基因。结果表明,茎用莴苣种质资源1号在产品器官收获期和抽薹期的差异表达基因数量为6 754个,茎用莴苣种质资源3号在... 详细信息

为探究影响茎用莴苣抽薹的相关关键基因,采用高通量转录组测序的方法,研究茎用莴苣产品器官收获期和抽薹期的差异表达基因。结果表明,茎用莴苣种质资源1号在产品器官收获期和抽薹期的差异表达基因数量为6 754个,茎用莴苣种质资源3号在产品器官收获期和抽薹期的差异表达基因数量为5 444个。基因本体(GO)功能富集分析结果表明,差异表达基因主要富集在结合、催化活性、细胞过程、代谢过程、细胞解剖实体等GO条目中。京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析结果表明,茎用莴苣种质资源1号和茎用莴苣种质资源3号分别有133条和129条KEGG代谢通路,其中有128条代谢通路在2份种质资源中均被注释;差异表达基因富集较多的KEGG代谢通路有次生代谢物的生物合成、植物激素信号转导、植物-病原体的相互作用等。转录因子分析结果表明,茎用莴苣产品器官收获期和抽薹期的差异表达基因大多数属于AP2/ERF、bHLH、bZIP、C2H2、MYB、NAC、WRKY等转录因子家族。对茎用莴苣产品器官收获期和抽薹期差异表达基因的研究结果进行综合分析,发现在AP2/ERF、WRKY、bHLH等转录因子家族以及次生代谢物的生物合成、植物激素信号转导等通路中存在较多的差异表达基因,推测这些转录因子家族和代谢通路可能参与茎用莴苣抽薹的调控网络。本研究结果为解析茎用莴苣抽薹相关基因及其分子机制奠定了基础。

关键词：茎用莴苣抽薹转录组差异表达基因

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黄河上游地区三维生态足迹自然资本可持续评价及驱动力

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草地学报 2024年第1期32卷 284-296页

作者：郭婧魏珍周华坤青海省社会科学院生态文明研究所青海西宁810000 青海省社会科学院经济研究所青海西宁810000 中国科学院西北高原生物研究所青海省寒区恢复生态学重点实验室青海西宁810008

本文基于改进的三维生态足迹模型,测算了黄河上游4个省区2012-2021年的人均三维生态足迹,并利用偏最小二乘法进行了驱动力分析。结果表明:黄河上游的人均生态足迹从2012年的2.089 9 hm^(2)·人^(-1)上升至2021年的2.536 5 hm^(2)·人^(-... 详细信息

本文基于改进的三维生态足迹模型,测算了黄河上游4个省区2012-2021年的人均三维生态足迹,并利用偏最小二乘法进行了驱动力分析。结果表明:黄河上游的人均生态足迹从2012年的2.089 9 hm^(2)·人^(-1)上升至2021年的2.536 5 hm^(2)·人^(-1),10年间仍处于生态可持续状态;研究期间黄河上游各省区的人均生态足迹深度均超过1 hm^(2)·人^(-1),人均生态足迹广度在总体上呈先升后降的趋势;人均三维生态足迹整体处于波动上升趋势,其中内蒙古的人均三维生态足迹值偏高,2021年达到3.87 hm^(2)·人^(-1);5个时期的可持续发展水平变化特征呈现“西南高东北低”的分布格局,可持续发展水平较高的省份为青海省和甘肃省;驱动力分析模型表明,黄河上游地区自然资本驱动力整体受人口、社会消费、生态建设、科技和环境污染多重因素综合影响。未来需因地制宜制定和实施可持续发展策略,推动黄河上游地区生态保护与高质量发展。

关键词：改进三维生态足迹黄河上游地区驱动力自然资本可持续发展评价

番茄20S蛋白酶体基因家族鉴定及生物信息学分析

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园艺学报 2024年第2期51卷 266-280页

作者：闫超凡孙雪梅钟启文邵登魁邓昌蓉文军琴青海大学农林科学院园艺研究所青海省蔬菜遗传与生理重点实验室青藏高原种质资源研究与利用实验室西宁810016

20S蛋白酶体能够通过自身或泛素—蛋白酶体系统特异性降解细胞质和细胞核中的蛋白质,维持细胞蛋白质稳态。本研究中鉴定出21个番茄(Solanum lycopersicum L.)20S蛋白酶体基因家族成员,并对其进行生物信息分析。结果表明,番茄20S蛋白酶... 详细信息

20S蛋白酶体能够通过自身或泛素—蛋白酶体系统特异性降解细胞质和细胞核中的蛋白质,维持细胞蛋白质稳态。本研究中鉴定出21个番茄(Solanum lycopersicum L.)20S蛋白酶体基因家族成员,并对其进行生物信息分析。结果表明,番茄20S蛋白酶体大多数基因含有相似的启动子和内含子,其中,编码α亚基的基因保守性较好,而编码β亚基的基因保守性较差;亚细胞定位发现,绝大多数基因在细胞质中发挥功能;染色体定位和基因复制分析发现,21个20S蛋白酶体基因不均匀地分布在12条染色体上,存在2对片段复制基因对;进化分析表明,编码α亚基和编码β亚基的基因被划分在不同的类群或亚群;多物种共线性分析发现,番茄与辣椒(Capsicum annuum L.)和马铃薯(Solanum tuberosum L.)之间的同源基因对较多,而与拟南芥[Arabidopsis thaliana(L.)Heynh.]、水稻(Oryza sativa L.)和玉米(Zea mays L.)同源的基因对较少。SlPRA1-01、SlPRA10-04、SlPRA11-05和SlPRA16-09这4个基因在3个物种中均形成基因对;启动子和组织特异性表达分析结果显示,20S蛋白酶体基因家族在番茄逆境胁迫和生长发育中发挥着重要作用。

关键词：番茄 20S蛋白酶体泛素—蛋白酶体系统生物信息分析

改进和优化黑果枸杞及其制品中花青素测定的pH示差法

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食品与发酵工业 2024年第4期50卷 267-278页

作者：谭亮杲秀珍王环赵静李玉林中国科学院西北高原生物研究所/青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室青海西宁810008

建立一种基于美国官方分析化学师协会(Association of Official Analytical Chemists,AOAC)方法检测黑果枸杞及其制品中花青素含量的改进pH示差法。考察了黑果枸杞及其制品中花青素的最佳提取和检测条件,通过液相色谱-三重四级杆串联质... 详细信息

建立一种基于美国官方分析化学师协会(Association of Official Analytical Chemists,AOAC)方法检测黑果枸杞及其制品中花青素含量的改进pH示差法。考察了黑果枸杞及其制品中花青素的最佳提取和检测条件,通过液相色谱-三重四级杆串联质谱法鉴别出黑果枸杞中花青素的具体化学结构,并计算出混合花青素的平均摩尔质量。通过分光光度法测得混合花青素的平均摩尔消光系数,对改进后的pH示差法进行方法学验证和花青素的含量测定。结果显示,最佳提取和检测条件如下:黑果枸杞花青素提取溶剂为盐酸-80%(体积分数)乙醇(3∶97,体积比),料液比为1∶100(g∶mL),提取温度为50℃,提取时间为30 min,缓冲溶液稀释5倍后静置平衡20 min。液相色谱-三重四级杆串联质谱法鉴别黑果枸杞中主要以矮牵牛素类花青素为主(占97.96%),黑果枸杞特有的混合花青素平均摩尔质量为912.7 g/mol,平均摩尔消光系数为29591 L/(mol·cm)。pH示差法改进后能够满足方法学验证要求,固体样品和液体样品最低检出限分别为28.2 mg/100 g、0.282 mg/100 mL。方法改进后花青素提取增长率均大于20%,静置平衡20 min后单次检测结果精密度小于0.3%。以矮牵牛素类花青素代替矢车菊素-3-O-葡萄糖苷计算花青素含量平均提高了2.41倍,能真实地反映黑果枸杞及其制品中花青素的含量。

关键词：黑果枸杞及其制品花青素 AOAC法 pH示差法改进提取和检测条件优化液相色谱-三重四级杆串联质谱法鉴别平均摩尔质量和平均摩尔消光系数优化

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降解霉菌毒素乳酸菌的筛选及鉴定

动物营养学报 2024年第4期36卷 2674-2689页

作者：姚有莉张朋王永奔卢博雨吴国芳张剑搏王磊青海省畜牧兽医科学院(青海大学) 西宁810016 青海大学青海省高原放牧家畜动物营养与饲料科学重点实验室西宁810016 青海省高原家畜遗传资源保护与创新利用重点实验室西宁810016 农业农村部青藏高原畜禽遗传育种重点实验室西宁810016

本试验旨在获得可高效降解霉菌毒素和具有益生特性的乳酸菌,为后期其作为饲料添加剂在饲料中应用奠定基础。试验通过对分离自青海牦牛和藏羊瘤胃中的169株乳酸菌进行霉菌毒素降解能力比较,以及形态学、生理生化特性、分子生物学、益生... 详细信息

本试验旨在获得可高效降解霉菌毒素和具有益生特性的乳酸菌,为后期其作为饲料添加剂在饲料中应用奠定基础。试验通过对分离自青海牦牛和藏羊瘤胃中的169株乳酸菌进行霉菌毒素降解能力比较,以及形态学、生理生化特性、分子生物学、益生性和安全性的综合评定,最终获得4株可以同时降解饲料原料中4种真菌毒素的菌株(菌株C2、E28、C16和A16)。在本研究中,初筛获得的15株乳酸菌对黄曲霉毒B 1(AFB 1)、呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEA)和硫代葡萄糖苷(GLUS)的降解率最高分别为70.95%、60.11%、64.00%和59.18%;复筛获得的4株乳酸菌对AFB 1、DON、ZEA和GLUS的降解率分别为33.53%、60.18%、51.45%和43.41%。16S rRNA测序结果表明:菌株C2和E28为乳酸片球菌,菌株A16为戊糖片球菌,菌株C16为乳肠球菌;这4株乳酸菌起酵时间短,产酸能力强(pH<4.5),能在pH 3.5和胆盐浓度为0.1%的环境中正常生长,且有良好的自凝集力和疏水性。通过安全性试验得知,4株乳酸菌均不溶血,其中乳肠球菌C16和戊糖片球菌A16对红霉素和青霉素敏感,乳酸片球菌C2和E28对红霉素和青霉素敏感或中度敏感,且乳酸片球菌C2和E28对金黄色葡萄球菌有强抑菌性,抑菌圈直径≥20 mm,是优良的候选菌株。

关键词：霉菌毒素乳酸菌益生性安全性

一株扎布耶盐碱湖伪盐生杜氏藻的分离鉴定及生长影响因素分析

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微生物学通报 2024年

作者：郭敏韩睿陶宇杰高翔邢江娃王嵘朱德锐青海大学医学院基础医学研究中心青海大学农林科学院蔬菜遗传与生理重点实验室

【背景】杜氏藻(Dunaliella)具有独特的生理特性和丰富的胞内次级代谢物，在医药、食品、养殖业、化工、轻工等领域具有广泛的应用价值。【目的】分析影响杜氏藻生物量的生长因素和最优培养条件，以期提高杜氏藻的生物量；明确最佳培养... 详细信息

【背景】杜氏藻(Dunaliella)具有独特的生理特性和丰富的胞内次级代谢物，在医药、食品、养殖业、化工、轻工等领域具有广泛的应用价值。【目的】分析影响杜氏藻生物量的生长因素和最优培养条件，以期提高杜氏藻的生物量；明确最佳培养条件下杜氏藻胞内次级代谢物的种类。【方法】采用纯培养法分离伪盐生杜氏藻株ZBY-1，18S rRNA基因测序明确其分类学地位；采用单因素实验探究其生长最佳条件以及营养盐种类及浓度；采用正交实验优化分离藻株的培养条件；利用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)检测ZBY-1在最佳培养条件下的次级代谢产物。【结果】藻株ZBY-1的最适生长盐度为10%，最适生长pH值为8.5，最适生长温度为25 ℃。单因素分析显示最适碳源/氮源/磷源的种类和浓度分别为NaHCO31.26 g/L、CO(NH2)20.84 g/L、NaH2PO40.06 g/L。优化生长条件后，藻株ZBY-1的细胞密度可达(2.57±0.12)×107个/mL，较优化前提高了1.25倍。LC-MS分析表明胞内次级代谢物的种类主要是萜类、生物碱类、苯丙素类、氨基酸相关化合物等；显著富集的代谢物通路是辅助因子生物合成、植物类次级代谢物合成和ABC转运等途径。【结论】扎布耶盐碱湖地理位置特殊，但藻类资源未被深入挖掘。分离藻株ZBY-1可适应高盐碱环境，为后续胞内次级代谢物的应用开发提供一定的参考依据。

关键词：伪盐生杜氏藻分离生长特性正交实验代谢组学

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香瓜茄新品种‘青甜香’

园艺学报 2024年第S1期51卷 97-98页

作者：司诚孙雪梅王丽慧钟启文张广楠杨世鹏青海大学农林科学院青海省蔬菜遗传与生理重点实验室青海西宁810016

青甜香’是由常规栽培种变异株中系统选育而成的香瓜茄新品种,分枝性极强,茎直立,上被刺毛和紫色针点。叶卵圆形,叶边缘有锯齿。无限花序,花色白紫相间,结实率高。果实近球形,表皮淡黄色带紫色条纹,平均单果质量(113.92±26.79)g,肉浅黄... 详细信息

青甜香’是由常规栽培种变异株中系统选育而成的香瓜茄新品种,分枝性极强,茎直立,上被刺毛和紫色针点。叶卵圆形,叶边缘有锯齿。无限花序,花色白紫相间,结实率高。果实近球形,表皮淡黄色带紫色条纹,平均单果质量(113.92±26.79)g,肉浅黄色,含类黄酮26.40 mg·g^(-1)、总酚10.52mg·g^(-1)、维生素C 204.36μg·g^(-1)、柠檬酸454.54μg·g^(-1)、蔗糖10.52 mg·g^(-1)、葡萄糖4.39 mg·g^(-1)、果糖8.39 mg·g^(-1)。较耐旱和盐碱。适宜青海高原的黄河流域和湟水河流域(海拔1800~2200 m)露地栽培。

关键词：香瓜茄品种