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miR-155/瘦素受体/AMPK轴在结核菌素诱导破骨细胞形成中的作用及机制

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3190-3195页

作者：王增顺索南昂秀刘立民周京元青海省人民医院骨科青海省西宁市810000

背景:破骨细胞异常活化在脊柱结核骨质破坏中起重要作用。在骨质疏松发病过程中,敲低miR-155通过增加瘦素受体的表达来激活磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK),进而抑制破骨细胞分化及骨吸收。但miR-155/瘦素受... 详细信息

背景:破骨细胞异常活化在脊柱结核骨质破坏中起重要作用。在骨质疏松发病过程中,敲低miR-155通过增加瘦素受体的表达来激活磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK),进而抑制破骨细胞分化及骨吸收。但miR-155/瘦素受体/AMPK轴在脊柱结核骨质破坏中的作用尚不清楚。目的:研究miR-155/瘦素受体/AMPK轴在结核菌素诱导破骨细胞形成中的作用及机制。方法:培养单核巨噬细胞RAW264.7细胞,用不同浓度(1.0,2.5,5.0,10.0 IU/mL)结核菌素处理,转染阴性对照序列或miR-155抑制物、阴性对照siRNA序列或瘦素受体siRNA序列。采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞数量,荧光定量PCR检测miR-155 mRNA表达,Western blot检测瘦素受体、p-AMPK蛋白表达,双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向瘦素受体。结果与结论:①与对照组比较,2.5,5.0,10.0 IU/mL结核菌素组破骨细胞数量、miR-155 mRNA表达水平明显增加,瘦素受体、p-AMPK蛋白表达水平明显降低(P0.05),破骨细胞数量明显增加,瘦素受体、p-AMPK蛋白表达水平明显降低(P<0.05);⑤结果表明,结核菌素通过增加miR-155表达抑制下游瘦素受体表达及AMPK激活,进而诱导破骨细胞形成。

关键词：破骨细胞结核菌素单核巨噬细胞骨吸收 miR-155 瘦素受体 AMPK

miR-27a通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ/葡萄糖转运蛋白4调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞功能的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第1期32卷 51-58页

作者：王睿郭清民尹正芳熊正方青海省人民医院生殖医学中心西宁810000 青海省人民医院妇科西宁810000

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-I... 详细信息

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-IR组,HOMA-IR≥2.57,n=23)和非IR组(PCOS-NIR组,HOMA-IR<2.57,n=22),另选取同期本院因男性或输卵管因素的已婚不孕患者为对照组(Con,n=21)。miR-27a模拟物(miR-27a mimics)、miR-27a抑制剂(miR-27a inhibitor)和相应对照(mimics NC和inhibitor NC)转染PCOS-IR组颗粒细胞,分为miR-27a mimics组、miR-27a inhibitor组、mimics-NC组和inhibitor-NC组。双荧光素酶报告试验证实miR-27a与PPARγ结合。CCK-8法和Annexinv-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡。定量实时PCR和Western blot法分别检测miR-27a、GluT4、PPARγ、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果与Con组比较,PCOS-NIR、PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.01),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与PCOS-NIR组比较,PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。双荧光素酶报告显示,PPARγ和miR-27a之间有靶向结合位点。与inhibitor-NC组比较,miR-27a inhibitor组24、48、72和96 h时细胞活性升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a inhibitor、mimics-NC组凋亡率降低(P<0.05或P<0.01),miR-27a mimics组凋亡率升高,48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组凋亡率升高,24、48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.05或P<0.01)。与inhibitor-NC组比较,miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),miR-27a inhibitor组GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达表达升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论miR-27a表达与颗粒细胞IR,细胞增殖及细胞凋亡相关,其过程可能与PPARγ信号通路相关。

关键词： miR-27a 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 葡萄糖转运蛋白4 颗粒细胞多囊卵巢综合征

二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对IGFBP-6影响的研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：王森林张永刚张英沈括郑桂萍青海省人民医院中医科青海省人民医院血液风湿科

目的观察二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-6（insulin-likegrowthfactorbindingprotein-6，IGFBP-6）水平影响。方法研究纳入我院收治的高原地区类风湿性关节炎... 详细信息

目的观察二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-6（insulin-likegrowthfactorbindingprotein-6，IGFBP-6）水平影响。方法研究纳入我院收治的高原地区类风湿性关节炎患者合计81例（2020年1月～2023年1月收治）以随机数字表法分为西药组与观察组，西药组患者（40例）采取单纯西药治疗，观察组患者（41例）采取西药结合二十八味风湿骨痛汤加减方治疗，观察各组患者临床数据：疗效、中医症候总积分变化及晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数变化、C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）及类风湿因子（rheumatoidfactor，RF）、血沉指标变化、IGFBP-6水平变化、血浆D-二聚体（plasmaD-dimer，D-D）与纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）水平变化、免疫球蛋白A、G、M（ImmunoglobulinA，IgA、ImmunoglobulinG，IgG、ImmunoglobulinM，IgM）指标变化、不良反应。结果观察组患者治疗效果优于西药组，P＜0.05；治疗前两组患者中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标比较，P＞0.05，治疗后各组患者中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标均改善，且观察组治疗后中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标均优于西药组，P＜0.05；观察组患者治疗不良反应率与西药组相当，P＞0.05。结论二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效显著，可较好提升患者IGFBP-6水平，改善患者病症及凝血功能、免疫功能，治疗不良反应较少，值得应用。

关键词：高原地区类风湿性关节炎二十八味风湿骨痛汤加减西药免疫功能 IGFBP-6水平

茯苓多糖对肺气肿大鼠肺损伤及TLR4/NF-κB信号通路的影响

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中国老年学杂志 2024年第10期44卷 2497-2501页

作者：才让吉朵德龙李娟才让卓玛宋康王小蕊吴尚洁青海省人民医院医务处青海省人民医院药学部治疗药物监测室青海省人民医院药学部青海省人民医院心血管内科青海省人民医院糖尿病科青海省人民医院血液风湿科青海红十字医院呼吸内科

目的探究茯苓多糖对肺气肿大鼠肺损伤及Toll样受体（TLR）4/核转录因子（NF）-κB信号通路的影响。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、茯苓多糖低（50 mg/kg）、中（100 mg/kg）、高（200 mg/kg）剂量组、地塞米松组（2 mg/kg... 详细信息

目的探究茯苓多糖对肺气肿大鼠肺损伤及Toll样受体（TLR）4/核转录因子（NF）-κB信号通路的影响。方法 Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、茯苓多糖低（50 mg/kg）、中（100 mg/kg）、高（200 mg/kg）剂量组、地塞米松组（2 mg/kg）各12只，采用气管滴入猪胰蛋白酶构建肺气肿大鼠模型。测定大鼠动脉血气指标二氧化碳分压（PaCO2）与氧分压（PaO2）;苏木素-伊红（HE）染色检测肺组织病理形态变化；检测肺组织淋巴细胞功能相关抗原（LFA）-1阳性细胞比例与肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测BALF与血清中肿瘤坏死因子（TNF）-α、环氧化酶（COX）-2、白细胞介素（IL）-17水平；Western印迹检测肺组织TLR4/NF-κB通路蛋白表达。结果与假手术组相比，模型组产生肺气肿样损伤改变，动脉血PaO2明显降低，PaCO2、LFA-1阳性细胞比例、白细胞计数、BALF与血清TNF-α、COX-2、IL-17水平、肺组织细胞质TLR4、髓样分化因子（MyD）88、核内NF-κB p65蛋白表达明显升高（P<0.05）。与模型组相比，给药干预的各组产生肺气肿样损伤改变减轻，动脉血PaO2明显升高，PaCO2、LFA-1阳性细胞比例、白细胞计数、BALF与血清TNF-α、COX-2、IL-17水平、肺组织细胞质TLR4、MyD88、核内NF-κB p65蛋白表达明显降低，茯苓多糖各剂量组呈明显剂量依赖性（P<0.05）。结论茯苓多糖可通过下调TLR4/NF-κB通路蛋白表达而抑制炎性介质生成，减少炎性细胞产生及浸润，缓解肺组织炎症损伤，减轻肺气肿样肺损伤，改善肺功能。

关键词：茯苓多糖肺气肿肺损伤 Toll样受体4/核转录因子-κB通路

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即刻种植早期稳定性的影响因素及评价方法

中南大学学报（医学版） 2024年第2期49卷 305-311页

作者：邵雯婷张东甘肃省人民医院口腔医学中心兰州730000 甘肃省人民医院质控处兰州730000

种植修复现已成为口腔修复领域研究的热点,对新材料和新技术的深入研究使即刻种植和即刻、早期负载得以运用,满足了患者对缩短种植修复疗程、获得更美观效果的需求。相比传统延期种植技术,目前临床医师对于即刻种植技术面临的挑战是如... 详细信息

种植修复现已成为口腔修复领域研究的热点,对新材料和新技术的深入研究使即刻种植和即刻、早期负载得以运用,满足了患者对缩短种植修复疗程、获得更美观效果的需求。相比传统延期种植技术,目前临床医师对于即刻种植技术面临的挑战是如何维持或提高种植体初期和长期的稳定性,以提高即刻种植修复的成功率。种植体初期稳定性主要受种植体、患者自身状况、手术过程等多种因素共同影响。总结和分析即刻种植稳定性、骨愈合的影响因素及常用评价方法,可为后期即刻种植修复术前评估、手术方案和种植时机的选择提供参考依据。

关键词：种植体稳定性骨愈合影响因素评价方法

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基于NOD2介导的AMPK/mTOR信号通路探讨宫颈癌细胞恶性行为的机制

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 316-324页

作者：杜瑞亭伍东月郭清民靳冬梅青海省人民医院妇科西宁810007

目的基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC... 详细信息

目的基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC)以及NOD2过表达(NOD2)质粒和载体(Vec)转染CC细胞。通过CCK-8测定、集落形成和Transwell细胞侵袭测定来确定NOD2对CC细胞生长的影响。通过高通量RNA测序(RNA-Seq)进行转录组分析。Western blot试验检测细胞系中NOD2、AMPK/mTOR信号通路和自噬蛋白的表达。24只雌性BALB/c裸鼠随机分为4组,每组6只:载体组(Vec组)、NOD2过表达组(NOD2组)、shNC组和shNOD2组。构建小鼠远处转移模型,监测肺转移的荧光强度,计数肺转移结节的数量。结果在线数据库分析显示,NOD2在CC组织中表达明显高于正常组织,并且不同分期的CC中NOD2的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。此外,NOD2的高表达与较差的总生存期和无病生存期相关(P<0.05)。NOD2过表达对CC细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭具有促进作用,而NOD2敲低则相反。与体外结果一致,在转移的小鼠尾静脉注射模型中,NOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较Vec组增加(P<0.05),而shNOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较shNC组减少(P<0.05)。RNA-Seq结果显示NOD2表达与AMPK信号激活、mTOR信号抑制、自噬调节途径激活和自噬体形成显著相关。与shNC组相比,shNOD2组磷酸化AMPK、LC3蛋白表达水平减少(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平增加(P<0.05);与Vec组相比,NOD2组LC3、AMPK蛋白表达水平增加(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平减少(P<0.05)。与shNC组相比,shNOD2组GFP-mRFP-LC3的点积累减少(P<0.05);与Vec组相比,GFP-mRFP-LC3的点积累增加(P<0.05)。结论 NOD2可能通过AMPK/mTOR信号促进CC增殖、迁移和侵袭,其作用机制部分涉及自噬激活。

关键词：核苷酸结合寡聚化结构域受体2 AMP活化蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白宫颈癌细胞自噬

白藜芦醇通过TGF-β1/Smad3信号转导途径改善间质性肺病模型大鼠的研究

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中国临床药理学杂志 2024年第12期40卷 1789-1793页

作者：祁晓静张娜张月琴青海省人民医院呼吸重症科青海西宁810007

目的研究白藜芦醇(RSV)改善间质性肺病(ILD)模型大鼠的作用机制。方法用博来霉素单次气管灌注给药构建ILD模型大鼠,随机分为模型组和低、中、高剂量实验组,每组12只;另取12只正常大鼠作为空白组。低、中、高剂量实验组分别灌胃给予25、5... 详细信息

目的研究白藜芦醇(RSV)改善间质性肺病(ILD)模型大鼠的作用机制。方法用博来霉素单次气管灌注给药构建ILD模型大鼠,随机分为模型组和低、中、高剂量实验组,每组12只;另取12只正常大鼠作为空白组。低、中、高剂量实验组分别灌胃给予25、50、100 mg·kg^(-1)RSV;空白组和模型组均灌胃给予等体积0.9%NaCl。5组大鼠每天给药1次,连续给药14 d。用酶联免疫吸附试验法检测肺组织中炎性因子和超氧化物歧化酶(SOD)水平,用蛋白质印迹法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad同源物3(Smad3)蛋白的表达水平。结果中、高剂量实验组和模型组、空白组的白细胞介素-1β水平分别为(7.32±0.33)、(5.07±0.39)、(11.28±0.72)和(3.78±0.12)pg·mL^(-1),SOD水平分别为(4.73±0.06)、(6.55±0.15)、(1.21±0.12)和(8.27±0.56)pg·mL^(-1),TGF-β1蛋白相对表达水平分别为0.49±0.06、0.34±0.04、0.78±0.08和0.11±0.02,Smad3蛋白相对表达水平分别为0.44±0.07、0.19±0.03、0.93±0.08和0.07±0.01;中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论白藜芦醇通过抑制EMT和下调TGF-β1/Smad3信号通路的表达,从而发挥保护ILD大鼠的作用。

关键词：白藜芦醇间质性肺疾病大鼠博来霉素转化生长因子-β1

“调中下气汤”联合胃黏膜保护剂对慢性萎缩性胃炎患者血清胃泌素的调节作用研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：郑靖松长青高丽丽张海梅刘琪青海省第五人民医院消化内科青海省人民医院药学部

目的：评价“调中下气汤”联合胃黏膜保护剂对慢性萎缩性胃炎患者血清胃泌素的调节作用研究。方法：以我院就诊的慢性萎缩性胃炎112例为此次试验的对象，随机分成2组。参照组56例病人实施西药常规治疗，口服胃复春片，1次4片，1天3次。... 详细信息

目的：评价“调中下气汤”联合胃黏膜保护剂对慢性萎缩性胃炎患者血清胃泌素的调节作用研究。方法：以我院就诊的慢性萎缩性胃炎112例为此次试验的对象，随机分成2组。参照组56例病人实施西药常规治疗，口服胃复春片，1次4片，1天3次。幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）阳性者采用Hp根除方案治疗，四联用药予以10天时长的治疗。研究组56例病人则另外口服“调中下气汤”予以治疗。两组病人均不间断的实施3个月的治疗。对比治疗前后两组病人胃脘冷痛、胃脘痞胀、喜温喜按、呕吐清水、气短懒言、大便稀溏等中医症候积分的变化，比较两组治疗前后胃镜下病理积分变化，比较治疗前后血清胃泌素(Gastrin，Gas)、生长抑素（Somatostatin，SS）和表皮生长因子（Epidermal growth factor，EGF）水平变化和治疗疗效。结果：治疗疗效方面，研究组较参照组更优，差异明显（P＜0.05）。脾胃虚寒证的相关症候积分方面，治疗后两组病人均出现了不同程度的下降，且研究组相关积分的改变幅度较参照组更高（P＜0.05）。胃镜下的病理积分方面，治疗后两组病人均出现了不同程度的下降，且的变化幅度较参照组更高（P＜0.05）。GAS水平方面，治疗后两组病人均出现了不同程度的下降，SS和EGF水平均出现了不同程度的上升，其中治疗后研究组血清GAS、SS和EGF的改变幅度均较参照组高（P＜0.05）。结论：调中下气汤联合胃黏膜保护剂在慢性萎缩性胃炎这一疾病的治疗中疗效确切，可以将病人的中医症候相关积分降低，让胃黏膜萎缩状态缓解，调节胃肠激素，让胃泌素不会过度的分泌，从而保护胃黏膜，加快胃相关功能的恢复，提升治疗效果。

关键词：调中下气汤胃黏膜保护剂慢性萎缩性胃炎血清胃泌素影响

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硝化应激在肺动脉高压中的研究进展

中国药理学通报 2024年第4期40卷 606-611页

作者：冀磊杨进芦殿香青海省人民医院青海西宁810007 成都大学附属医院四川成都610081

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是一种进行性发展的肺血管疾病,病理基础包括内皮功能障碍、平滑肌细胞异常增生、炎症浸润以及肺纤维化。PH的发生机制尚不完全清楚,但硝化应激已经证实在PH中发挥了重要作用。该文综述了活性氮(r... 详细信息

肺动脉高压(pulmonary hypertension,PH)是一种进行性发展的肺血管疾病,病理基础包括内皮功能障碍、平滑肌细胞异常增生、炎症浸润以及肺纤维化。PH的发生机制尚不完全清楚,但硝化应激已经证实在PH中发挥了重要作用。该文综述了活性氮(reactive nitrogen species,RNS)的种类及肺循环中RNS的来源,以及由此引发的硝化应激在PH发生发展中的作用,以期为靶向抗硝化治疗的临床应用提供参考依据。

关键词：肺动脉高压活性氮硝化应激一氧化氮内皮细胞一氧化氮合酶小窝蛋白-1

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