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高原红细胞增多症多组学研究进展

中华血液学杂志 2024年第8期45卷 795-800页

作者：郑桂萍年蔚石雪峰解友邦青海省人民医院血液风湿科西宁810007 青海省人民医院老年医学科西宁810007 青海省人民医院呼吸与危重症医学科西宁810007

慢性高原病(chronic mountain sickness,CMS)或Monge综合征是一种在海拔超过2500 m地区流行的疾病,高原红细胞增多症(high altitude polycythemia,HAPC)是CMS的亚型之一。藏族人群基因组中的高原适应基因以EPAS1和EGNL1最为关键;HIF-PHD-VHL蛋白系统在HAPC发病机制中发挥重要的作用;SENP1基因编码一种蛋白酶,具有调节缺氧相关转录因子如HIF和GATA的功能,调节EPO或EPO受体表达参与红细胞生成。随着基因检测和组学技术的发展,关于HAPC发病机制的研究在转录组学、蛋白组学和代谢组学方面取得了一些新的进展,为骨髓血液生态和造血调控方面的研究奠定基础。CMS的诊断标准存在一定的局限性,尤其是高原红细胞增多症患者的诊断应该完善先天性和真性红细胞增多症推荐的基因检测。本文就HAPC在各组学技术、造血调控及诊断流程方面的最新研究作一综述,更有利于对HAPC发病机制的认识,强调基因检测在红细胞增多的临床诊断的重要性。

关键词：红细胞增多组学技术慢性高原病基因检测红细胞生成造血调控诊断流程代谢组学

miR-155/瘦素受体/AMPK轴在结核菌素诱导破骨细胞形成中的作用及机制

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中国组织工程研究 2024年第20期28卷 3190-3195页

作者：王增顺索南昂秀刘立民周京元青海省人民医院骨科青海省西宁市810000

背景:破骨细胞异常活化在脊柱结核骨质破坏中起重要作用。在骨质疏松发病过程中,敲低miR-155通过增加瘦素受体的表达来激活磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK),进而抑制破骨细胞分化及骨吸收。但miR-155/瘦素受... 详细信息

背景:破骨细胞异常活化在脊柱结核骨质破坏中起重要作用。在骨质疏松发病过程中,敲低miR-155通过增加瘦素受体的表达来激活磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK),进而抑制破骨细胞分化及骨吸收。但miR-155/瘦素受体/AMPK轴在脊柱结核骨质破坏中的作用尚不清楚。目的:研究miR-155/瘦素受体/AMPK轴在结核菌素诱导破骨细胞形成中的作用及机制。方法:培养单核巨噬细胞RAW264.7细胞,用不同浓度(1.0,2.5,5.0,10.0 IU/mL)结核菌素处理,转染阴性对照序列或miR-155抑制物、阴性对照siRNA序列或瘦素受体siRNA序列。采用抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞数量,荧光定量PCR检测miR-155 mRNA表达,Western blot检测瘦素受体、p-AMPK蛋白表达,双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向瘦素受体。结果与结论:①与对照组比较,2.5,5.0,10.0 IU/mL结核菌素组破骨细胞数量、miR-155 mRNA表达水平明显增加,瘦素受体、p-AMPK蛋白表达水平明显降低(P0.05),破骨细胞数量明显增加,瘦素受体、p-AMPK蛋白表达水平明显降低(P<0.05);⑤结果表明,结核菌素通过增加miR-155表达抑制下游瘦素受体表达及AMPK激活,进而诱导破骨细胞形成。

关键词：破骨细胞结核菌素单核巨噬细胞骨吸收 miR-155 瘦素受体 AMPK

miR-27a通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ/葡萄糖转运蛋白4调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞功能的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第1期32卷 51-58页

作者：王睿郭清民尹正芳熊正方青海省人民医院生殖医学中心西宁810000 青海省人民医院妇科西宁810000

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-I... 详细信息

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-IR组,HOMA-IR≥2.57,n=23)和非IR组(PCOS-NIR组,HOMA-IR<2.57,n=22),另选取同期本院因男性或输卵管因素的已婚不孕患者为对照组(Con,n=21)。miR-27a模拟物(miR-27a mimics)、miR-27a抑制剂(miR-27a inhibitor)和相应对照(mimics NC和inhibitor NC)转染PCOS-IR组颗粒细胞,分为miR-27a mimics组、miR-27a inhibitor组、mimics-NC组和inhibitor-NC组。双荧光素酶报告试验证实miR-27a与PPARγ结合。CCK-8法和Annexinv-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡。定量实时PCR和Western blot法分别检测miR-27a、GluT4、PPARγ、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果与Con组比较,PCOS-NIR、PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.01),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与PCOS-NIR组比较,PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。双荧光素酶报告显示,PPARγ和miR-27a之间有靶向结合位点。与inhibitor-NC组比较,miR-27a inhibitor组24、48、72和96 h时细胞活性升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a inhibitor、mimics-NC组凋亡率降低(P<0.05或P<0.01),miR-27a mimics组凋亡率升高,48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组凋亡率升高,24、48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.05或P<0.01)。与inhibitor-NC组比较,miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),miR-27a inhibitor组GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达表达升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论miR-27a表达与颗粒细胞IR,细胞增殖及细胞凋亡相关,其过程可能与PPARγ信号通路相关。

关键词： miR-27a 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 葡萄糖转运蛋白4 颗粒细胞多囊卵巢综合征

颅脑损伤后认知障碍患者早期康复方案的构建及应用研究

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中国护理管理 2024年第8期24卷 1170-1174页

作者：龙登英魏生蕙王丽庭李瑜李晓芳王洪莲青海省人民医院神经外科西宁市810007 青海省人民医院康复科西宁市810007 青海省人民医院护理部西宁市810007

目的:构建颅脑损伤后认知障碍患者早期康复训练方案并探讨其应用效果,为临床指导患者早期康复提供借鉴。方法:通过文献分析法和专家函询构建早期康复训练方案,选择青海省某三级甲等医院神经外科2021年3月至2023年9月住院的颅脑损伤后认... 详细信息

目的:构建颅脑损伤后认知障碍患者早期康复训练方案并探讨其应用效果,为临床指导患者早期康复提供借鉴。方法:通过文献分析法和专家函询构建早期康复训练方案,选择青海省某三级甲等医院神经外科2021年3月至2023年9月住院的颅脑损伤后认知障碍患者194例,按照随机数字表法将其分成对照组和观察组,各97例。对照组给予神经外科常规干预训练;观察组在对照组基础上应用康复训练方案进行早期干预。采用认知功能评定量表(LOTCA)、简易智能量表(MMSE)、神经功能评定量表(NIHSS)、日常生活能力评定量表(ADL)进行评定,比较两组患者认知功能、神经功能、日常生活能力。结果:干预2个月后,观察组患者LOTCA评分、MMSE评分、ADL评分明显高于对照组,NIHSS评分明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论:颅脑损伤后认知障碍患者早期康复方案的应用能有效改善患者认知功能及神经功能,促进康复,提高生活质量。

关键词：颅脑损伤认知障碍认知功能认知训练康复效果

突出的皮质静脉-磁敏感加权评分和分级与高海拔地区缺血性脑卒中出血转化相关性研究

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第8期26卷 942-947页

作者：李宝娜杨晓莉张庆欣青海省人民医院影像中心西宁810000 青海省人民医院神经内科

目的在用突出的皮质静脉-磁敏感加权成像(prominent cortical vein-susceptibility weightedimaging,PCV-SWI)评分和PCV分级分别评价急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者侧支循环,分析这两个影像学特征指标与出血转化(hemorrhagic transformation,HT)之间的关系。方法选取2018年1月至2022年12月青海省人民医院收治的AIS患者68例,所有患者行头颅多模态MRI扫描,观察并分析其侧支循环,侧支循环用PCV-SWI评分和PCV分级进行评估,2周内复查头颅MRI,根据有无HT分为HT组39例和非HT组29例。分析侧支循环与HT之间的关系。结果HT组PVC 3级比例高于非HT组,差异有统计学意义(P7分7例,HT组DWI-ASPECTS≤7分比例高于非HT组,差异有统计学意义(97.44%vs 79.31%,P<0.05)。二元logistic回归分析显示,PCV分级、入院10~14 d美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分是HT发生的独立危险因素(OR=2.128,95%CI:1.200~3.774,P=0.010;OR=1.308,95%CI:1.057~1.620,P=0.014),DWI-ASPECTS是HT发生的保护因素(OR=0.646,95%CI:0.442~0.945,P=0.024)。结论DWI-ASPECTS、PCV分级、入院10~14 d NIHSS评分是高海拔地区AIS患者HT发生的独立预测因素。临床上进一步进行影像学的PCV征象及梗死面积评价,有助于HT发生的早期预测。

关键词：卒中侧支循环数据相关性出血转化皮质静脉-磁敏感加权成像评分皮质静脉分级

二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对IGFBP-6影响的研究

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中华中医药学刊 2024年

作者：王森林张永刚张英沈括郑桂萍青海省人民医院中医科青海省人民医院血液风湿科

目的观察二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-6（insulin-likegrowthfactorbindingprotein-6，IGFBP-6）水平影响。方法研究纳入我院收治的高原地区类风湿性关节炎... 详细信息

目的观察二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效及对血清中胰岛素样生长因子结合蛋白-6（insulin-likegrowthfactorbindingprotein-6，IGFBP-6）水平影响。方法研究纳入我院收治的高原地区类风湿性关节炎患者合计81例（2020年1月～2023年1月收治）以随机数字表法分为西药组与观察组，西药组患者（40例）采取单纯西药治疗，观察组患者（41例）采取西药结合二十八味风湿骨痛汤加减方治疗，观察各组患者临床数据：疗效、中医症候总积分变化及晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数变化、C反应蛋白（C-reactiveprotein，CRP）及类风湿因子（rheumatoidfactor，RF）、血沉指标变化、IGFBP-6水平变化、血浆D-二聚体（plasmaD-dimer，D-D）与纤维蛋白原（fibrinogen，FIB）水平变化、免疫球蛋白A、G、M（ImmunoglobulinA，IgA、ImmunoglobulinG，IgG、ImmunoglobulinM，IgM）指标变化、不良反应。结果观察组患者治疗效果优于西药组，P＜0.05；治疗前两组患者中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标比较，P＞0.05，治疗后各组患者中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标均改善，且观察组治疗后中医症候总积分、晨僵时间、关节压痛数及关节肿胀数、CRP及RF、血沉、IGFBP-6水平、D-D、FIB、IgA、IgG、IgM等指标均优于西药组，P＜0.05；观察组患者治疗不良反应率与西药组相当，P＞0.05。结论二十八味风湿骨痛汤加减结合西药治疗高原地区类风湿性关节炎的疗效显著，可较好提升患者IGFBP-6水平，改善患者病症及凝血功能、免疫功能，治疗不良反应较少，值得应用。

关键词：高原地区类风湿性关节炎二十八味风湿骨痛汤加减西药免疫功能 IGFBP-6水平

利妥昔单抗治疗磷脂酶A2受体相关膜性肾病患者的临床研究

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中国临床药理学杂志 2024年第15期40卷 2165-2169页

作者：刘海霞褚夫宝安玲刘文花青海省人民医院肾内科青海西宁810001

目的观察利妥昔单抗注射液治疗磷脂酶A2受体相关膜性肾病(PLA2R-MN)患者的临床疗效及安全性。方法将PLA2R-MN患者随机分为对照组和试验组。对照组给予口服醋酸泼尼松片,初始用量为40~60 mg·d^(-1),2个月后根据患者情况逐渐降低剂量,环... 详细信息

目的观察利妥昔单抗注射液治疗磷脂酶A2受体相关膜性肾病(PLA2R-MN)患者的临床疗效及安全性。方法将PLA2R-MN患者随机分为对照组和试验组。对照组给予口服醋酸泼尼松片,初始用量为40~60 mg·d^(-1),2个月后根据患者情况逐渐降低剂量,环磷酰胺注射剂每次0.6 g,静脉滴注,每2周1次,连续6次,然后调整为每次1.0 g,静脉滴注,每月1次;试验组在对照组治疗的基础上,联合375 mg·m^(-2)利妥昔单抗注射液静脉滴注,每周1次,连续4周。2组患者均治疗6个月。比较2组患者的临床疗效、24 h尿蛋白定量、血清肌酸酐(SCr)、肾小球滤过率(eGFR)、尿微量白蛋白(UAlb)、尿肌酸酐(UCr),以及药物不良反应的发生情况。结果试验组入组53例,脱落2例,最终有51例纳入统计分析;对照组入组53例,脱落2例,最终有51例纳入统计分析。治疗后,试验组和对照组的总有效率分别为92.16%(47例/51例)和76.47%(39例/51例),在统计学上差异有统计学意义(P0.05)。结论利妥昔单抗注射液治疗PLA2R-MN患者的临床疗效确切,其能显著改善患者的肾功能,且不增加药物不良反应的发生率。

关键词：利妥昔单抗注射液醋酸泼尼松片环磷酰胺注射剂膜性肾病磷脂酶A2受体肾功能安全性评价

基于NOD2介导的AMPK/mTOR信号通路探讨宫颈癌细胞恶性行为的机制

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安徽医科大学学报 2024年第2期59卷 316-324页

作者：杜瑞亭伍东月郭清民靳冬梅青海省人民医院妇科西宁810007

目的基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC... 详细信息

目的基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC)以及NOD2过表达(NOD2)质粒和载体(Vec)转染CC细胞。通过CCK-8测定、集落形成和Transwell细胞侵袭测定来确定NOD2对CC细胞生长的影响。通过高通量RNA测序(RNA-Seq)进行转录组分析。Western blot试验检测细胞系中NOD2、AMPK/mTOR信号通路和自噬蛋白的表达。24只雌性BALB/c裸鼠随机分为4组,每组6只:载体组(Vec组)、NOD2过表达组(NOD2组)、shNC组和shNOD2组。构建小鼠远处转移模型,监测肺转移的荧光强度,计数肺转移结节的数量。结果在线数据库分析显示,NOD2在CC组织中表达明显高于正常组织,并且不同分期的CC中NOD2的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。此外,NOD2的高表达与较差的总生存期和无病生存期相关(P<0.05)。NOD2过表达对CC细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭具有促进作用,而NOD2敲低则相反。与体外结果一致,在转移的小鼠尾静脉注射模型中,NOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较Vec组增加(P<0.05),而shNOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较shNC组减少(P<0.05)。RNA-Seq结果显示NOD2表达与AMPK信号激活、mTOR信号抑制、自噬调节途径激活和自噬体形成显著相关。与shNC组相比,shNOD2组磷酸化AMPK、LC3蛋白表达水平减少(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平增加(P<0.05);与Vec组相比,NOD2组LC3、AMPK蛋白表达水平增加(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平减少(P<0.05)。与shNC组相比,shNOD2组GFP-mRFP-LC3的点积累减少(P<0.05);与Vec组相比,GFP-mRFP-LC3的点积累增加(P<0.05)。结论 NOD2可能通过AMPK/mTOR信号促进CC增殖、迁移和侵袭,其作用机制部分涉及自噬激活。

关键词：核苷酸结合寡聚化结构域受体2 AMP活化蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白宫颈癌细胞自噬

白藜芦醇通过TGF-β1/Smad3信号转导途径改善间质性肺病模型大鼠的研究

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中国临床药理学杂志 2024年第12期40卷 1789-1793页

作者：祁晓静张娜张月琴青海省人民医院呼吸重症科青海西宁810007

目的研究白藜芦醇(RSV)改善间质性肺病(ILD)模型大鼠的作用机制。方法用博来霉素单次气管灌注给药构建ILD模型大鼠,随机分为模型组和低、中、高剂量实验组,每组12只;另取12只正常大鼠作为空白组。低、中、高剂量实验组分别灌胃给予25、5... 详细信息

目的研究白藜芦醇(RSV)改善间质性肺病(ILD)模型大鼠的作用机制。方法用博来霉素单次气管灌注给药构建ILD模型大鼠,随机分为模型组和低、中、高剂量实验组,每组12只;另取12只正常大鼠作为空白组。低、中、高剂量实验组分别灌胃给予25、50、100 mg·kg^(-1)RSV;空白组和模型组均灌胃给予等体积0.9%NaCl。5组大鼠每天给药1次,连续给药14 d。用酶联免疫吸附试验法检测肺组织中炎性因子和超氧化物歧化酶(SOD)水平,用蛋白质印迹法检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad同源物3(Smad3)蛋白的表达水平。结果中、高剂量实验组和模型组、空白组的白细胞介素-1β水平分别为(7.32±0.33)、(5.07±0.39)、(11.28±0.72)和(3.78±0.12)pg·mL^(-1),SOD水平分别为(4.73±0.06)、(6.55±0.15)、(1.21±0.12)和(8.27±0.56)pg·mL^(-1),TGF-β1蛋白相对表达水平分别为0.49±0.06、0.34±0.04、0.78±0.08和0.11±0.02,Smad3蛋白相对表达水平分别为0.44±0.07、0.19±0.03、0.93±0.08和0.07±0.01;中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论白藜芦醇通过抑制EMT和下调TGF-β1/Smad3信号通路的表达,从而发挥保护ILD大鼠的作用。

关键词：白藜芦醇间质性肺疾病大鼠博来霉素转化生长因子-β1