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LncRNA HEIH和miR-103在非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 21-24页

作者：宋玉刘昱君青海大学附属医院急诊内科青海西宁810000 青海大学附属医院肿瘤内科青海西宁810000

目的分析长链非编码(lncRNA)RNA HEIH和微小RNA(miR)-103在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法选取行切除术的96例NSCLC患者,分析癌组织和癌旁组织lncRNA HEIH和miR-103表达水平,并探讨lncRNA HEIH和miR-103与患者临床病... 详细信息

目的分析长链非编码(lncRNA)RNA HEIH和微小RNA(miR)-103在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及临床意义。方法选取行切除术的96例NSCLC患者,分析癌组织和癌旁组织lncRNA HEIH和miR-103表达水平,并探讨lncRNA HEIH和miR-103与患者临床病理特征关系,Kaplan-Meier分析患者生存率,Cox回归分析影响NSCLC患者预后因素。结果NSCLC癌组织中lncRNA HEIH显著高于癌旁组织,miR-103表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。淋巴结转移、TMN分期与lncRNA-HEIH表达水平和miR-103表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier结果表明,NSCLC患者癌组织中lncRNA HEIH高表达患者生存率显著低于lncRNA HEIH低表达患者,miR-103低表达患者生存率显著低于miR-103高表达患者(P<0.05)。Cox回归结果表明,有淋巴结转移、TMN分期为Ⅲ期和Ⅳ期、lncRNA HEIH高表达和miR-103低表达是NSCLC患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论在NSCLC癌组织中lncRNA HEIH显著上调和miR-103显著下调,且二者均可作为评估NSCLC患者预后的生物标志物。

关键词：非小细胞肺癌长链非编码RNA 微小RNA 预后

沉默ciRS-7通过靶向miR-944逆转胃癌细胞顺铂耐药性机制

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中国药理学通报 2023年第7期39卷 1325-1332页

作者：魏文娥郭翠萍刁银卓骆玉霜青海大学附属医院肿瘤内科青海大学附属肿瘤医院肿瘤内科青海西宁810001

目的探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制。方法构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平,... 详细信息

目的探讨沉默环状RNA(circRNA)ciRS-7对胃癌细胞顺铂耐药性的影响及相关机制。方法构建顺铂耐药胃癌细胞HGC-27/DDP,沉默ciRS-7并用顺铂处理HGC-27/DDP细胞后,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ciRS-7、微小RNA-944(miR-944)表达水平,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞存活率、克隆形成实验检测克隆形成数,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡指数,双荧光素酶实验验证ciRS-7与miR-944的靶向关系。结果 ciRS-7在顺铂耐药胃癌组织和细胞中高表达,miR-944在顺铂耐药胃癌组织和细胞中低表达,沉默ciRS-7明显降低顺铂处理的HGC-27/DDP细胞存活率、克隆形成数、cyclinD1、PCNA、Bcl-2蛋白表达水平,明显增加顺铂处理的HGC-27/DDP细胞ciRS-7、凋亡率、凋亡指数、Bax、cleaved-caspase-3蛋白表达水平,ciRS-7靶向抑制miR-944的表达。结论沉默ciRS-7可逆转胃癌细胞对顺铂的耐药性,其机制可能与沉默ciRS-7可促进miR-944的表达有关。

关键词： ciRS-7 miR-944 胃癌顺铂耐药性增殖凋亡

长链非编码RNA GAS8-AS1与微小RNA 135b在肝细胞癌中的表达及临床意义

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中国普通外科杂志 2023年第1期32卷 87-93页

作者：王昀郜茜青海大学附属医院消化内科青海西宁810000

背景和目的:大量研究表明,长链非编码RNA (lncRNA)与微小RNA (miRNA)及其靶基因之间内源性竞争的调控模式与恶性肿瘤的发生发展密切相关。笔者团队前期通过软件预测发现,lncRNA GAS8-AS1和miR-135b之间存在结合位点,但两者在肝细胞癌(H... 详细信息

背景和目的:大量研究表明,长链非编码RNA (lncRNA)与微小RNA (miRNA)及其靶基因之间内源性竞争的调控模式与恶性肿瘤的发生发展密切相关。笔者团队前期通过软件预测发现,lncRNA GAS8-AS1和miR-135b之间存在结合位点,但两者在肝细胞癌(HCC)中是否存在竞争关系及其作用尚不清楚。因此,本研究探讨lncRNA GAS8-AS1和miR-135b在HCC组织中的表达及其临床意义。方法:收集2017年2月—2019年2月在青海大学附属医院行手术切除的110例HCC患者的癌组织及癌旁组织标本,通过qRT-PCR检测lncRNA GAS8-AS1和miR-135b的表达,分析两者与患者临床病理特征及预后的关系。结果:lncRNA GAS8-AS1在HCC组织中的表达明显低于癌旁组织,而miR-135b在HCC组织中的表达明显高于癌旁组织(均P<0.05)。两者的表达水平均与HCC患者的Edmondson分期、TNM分期、分化程度及淋巴结转移情况有关(均P<0.05)。lncRNA GAS8-AS1低表达患者与miR-135b高表达患者的3年总生存率分别明显低于lncRNA GAS8-AS1高表达患者与miR-135b低表达患者(均P<0.05)。lncRNA GAS8-AS1低表达、miR-135b高表达以及高Edmondson分级、高TNM分期、有乙肝病史是影响HCC患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论:在HCC组织中lncRNA GAS8-AS1低表达,miR-135b高表达,两者表达水平的消长可能与HCC的发生发展以及患者的预后密切相关。

关键词：癌,肝细胞 RNA 长链非编码微RNAs 预后

LINC00707靶向miR-876-5p影响缺氧缺血脑损伤后海马神经元凋亡及氧化应激的机制

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中国老年学杂志 2023年第14期43卷 3493-3497页

作者：李肃马海军拜承萍青海大学附属医院急诊科青海西宁810000 青海大学附属医院急救中心青海西宁810000 青海大学附属医院神经内科青海西宁810000

目的探讨LINC00707对缺氧缺血脑损伤后海马神经元凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法采用谷氨酸与D-Hanks液处理大鼠海马神经元细胞HT-22建立缺氧缺血脑损伤模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-876-5p mimics、anti-miR-NC... 详细信息

目的探讨LINC00707对缺氧缺血脑损伤后海马神经元凋亡及氧化应激的影响及其可能作用机制。方法采用谷氨酸与D-Hanks液处理大鼠海马神经元细胞HT-22建立缺氧缺血脑损伤模型,si-NC、si-LINC00707、miR-NC、miR-876-5p mimics、anti-miR-NC+si-LIN C00707、anti-miR-876-5p+si-LINC00707分别转染至HT-22细胞后进行缺氧缺血处理;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00707、miR-876-5p的表达量;利用试剂盒检测丙二醛(MDA)水平与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测LINC00707与miR-876-5p的靶向关系;Western印迹检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸水解酶(Cleaved-caspase)-3蛋白表达量。结果缺氧缺血脑损伤后HT-22细胞中LINC00707的表达量显著升高(P<0.05),miR-876-5p的表达量显著降低(P<0.05);缺氧缺血脑损伤后HT-22细胞中转染si-LINC00707或转染miR-876-5p mimics后,MDA的水平、细胞凋亡率和Cleaved-caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05),SOD、CAT的活性显著升高(P<0.05);LINC00707可靶向调控miR-876-5p的表达;共转染anti-miR-876-5p+si-LINC00707可降低转染si-LINC00707对缺氧缺血脑损伤后HT-22细胞凋亡及氧化应激的作用。结论干扰LINC00707表达可通过靶向调控miR-876-5p表达而抑制缺氧缺血脑损伤后海马神经元凋亡及氧化应激。

关键词： LINC00707 miR-876-5p 缺氧缺血脑损伤凋亡氧化应激

LncRNA SNHG5/miR-26a-5p/MTDH信号轴促进结直肠癌转移的机制研究

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中国癌症杂志 2023年第7期33卷 673-685页

作者：冶俊玲郑小影郭新建陈瑞慧杨柳苟笑丹蒋汉梅青海大学附属医院病理科青海西宁810001 青海大学附属医院消化内科青海西宁810001

背景与目的:长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5(long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 5,lncRNA SNHG5)在多种癌症中发挥促癌作用,但其对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)的影响和调节机制尚不清楚。本研究旨在探究lncRNA SNHG5/miR-26a-5p/异粘蛋白(metadherin,MTDH)信号轴促进CRC转移的机制。方法:分析癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中的数据,探索CRC中异常表达的lncRNA并进行生存分析。收集2020年10月—2021年10月经手术切除的100例CRC、癌旁组织样本及患者的完整临床资料,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测lncRNA SNHG5、miR-26a-5p表达水平,采用免疫组织化学法检测MTDH的表达水平,分析lncRNA SNHG5在CRC中的相对表达水平与临床病理学特征及生存期的关系。通过细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)检测、克隆形成、划痕、transwell实验及体内异种移植实验检测lncRNA SNHG5对CRC细胞增殖、迁移及侵袭的影响,通过蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组织化学检测CRC细胞转移、上皮-间充质转化相关分子表达水平与lncRNA SNHG5表达水平的关系。通过RNA下拉实验、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀实验探究SNHG5与miR-26a-5p、MTDH与miR-26a-5p在物理上的相互作用,通过CCK-8、EdU、transwell实验验证三者在功能上的相互关系,采用Western blot检测分析SNHG5、miR-26a-5p、MTDH表达对迁移、侵袭相关分子的影响。结果:TCGA数据库分析结果显示,lncRNA SNHG5在CRC中显著上调。RTFQ-PCR和免疫组织化学检测结果显示,CRC组织中lncRNA SNHG5、MTDH水平显著上调(P<0.05),miR-26a-5p水平下降(P<0.05),SNHG5高表达的样本中MTDH水平也较高。浆膜及浆膜外浸润、远处转移、淋巴结转移、TNMⅢ期的CRC组织lncRNA SNHG5表达量高于浆膜下浸润、无远处转移、无淋巴结转移、TNMⅠ~Ⅱ期的组织,差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析结果显示,lncRNA SNHG5高表达与总生存率显著相关(P<0.05)。过表达lncRNA SNHG5能够提升CRC细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力,促进移植瘤生长和肺转移,提高Ki-67增殖指数和波形蛋白(vimentin)的相对表达水平(P<0.05),降低E钙粘蛋白(E-cadherin)的相对表达水平(P<0.05),而抑制lncRNA SNHG5表达后CRC细胞的发展受到抑制。RNA下拉实验、双荧光素酶报告基因检测、RNA免疫共沉淀实验证实SNHG5与miR-26a-5p、MTDH及miR-26a-5p存在物理上的相互作用,在lncRNA SNHG5过表达细胞中上调miR-26a-5p或下调MTDH表达可部分逆转lncRNA SNHG5对CRC细胞增殖、迁移、侵袭及相关分子表达水平的影响。结论:LncRNA SNHG5在CRC组织和细胞中表达上调,其高表达与肿瘤进展及生存不良有关,可作为miR-26a-5p的分子海绵调节MTDH表达促进SW620细胞增殖和转移。

关键词：长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5 miR-26a-5p 异黏蛋白结直肠癌转移

血必净对脓毒症患者血清中甲壳质酶蛋白40和sE-选择素水平的影响

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中国老年学杂志 2018年第9期38卷 2173-2175页

作者：吕荣华侯明李肃关巍青海大学附属医院急诊内科青海西宁810001

目的探讨血必净对脓毒症患者血清中甲壳质酶蛋白(YKL)-40和可溶性E(sE)-选择素的影响。方法 78例脓毒症患者随机分为观察组和对照组各39例,对照组应用常规治疗方法,观察组在常规治疗的基础上加用血必净注射液,观察治疗效果,同时应用酶... 详细信息

目的探讨血必净对脓毒症患者血清中甲壳质酶蛋白(YKL)-40和可溶性E(sE)-选择素的影响。方法 78例脓毒症患者随机分为观察组和对照组各39例,对照组应用常规治疗方法,观察组在常规治疗的基础上加用血必净注射液,观察治疗效果,同时应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测治疗前后血清中YKL-40和sE-选择素的含量。结果两组治疗后急性生理学与慢性健康状况评分系统(APACHE)Ⅱ的评分、血清YKL-40和sE-选择素表达均显著下降,但是观察组下降值明显高于对照组(P<0.05)。结论血必净对脓毒症患者有一定的疗效,同时能改善血清中YKL-40和sE-选择素的含量,对优化内环境有一定作用。

关键词：血必净脓毒症甲壳质酶蛋白40 可溶性E-选择素

木犀草素调控Nrf2-Gpx4介导铁死亡途径抑制Ang Ⅱ诱导心肌细胞肥大

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中药材 2022年第11期45卷 2731-2736页

作者：马春剑马晓静鲍海咏韩梅翟红林卢彭晨青海大学附属医院急诊内科青海西宁810000 青海大学附属医院血液科青海西宁810000 青海民族大学药学院青海西宁810007

目的:探究木犀草素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下心肌细胞肥大的影响及分子机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,MTT法检测木犀草素对AngⅡ诱导下心肌细胞活力的影响,以筛选木犀草素的实验浓度。将H9c2细胞分为6组:正常对照组、模型组... 详细信息

目的:探究木犀草素对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下心肌细胞肥大的影响及分子机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,MTT法检测木犀草素对AngⅡ诱导下心肌细胞活力的影响,以筛选木犀草素的实验浓度。将H9c2细胞分为6组:正常对照组、模型组、木犀草素25μmol/L组、木犀草素50μmol/L组、Nrf2抑制剂brusatol(100 nmol/L)组、木犀草素50μmol/L+brusatol组,根据分组给予相应的药物预处理,再用AngⅡ诱导建立心肌细胞肥大模型。AngⅡ处理48 h后,Texas Red^(TM)-X鬼笔环肽免疫荧光染色检测各组细胞表面积;RT-qPCR检测各组细胞中肥大相关基因(ANP、BNP、NFATc1)的mRNA表达;试剂盒检测各组细胞中MDA、GSH、SOD、Fe^(2+)水平,DCFH-DA荧光探针法检测各组细胞中ROS含量;Western Blot检测各组细胞核Nrf2、HO-1、Gpx4、xCT蛋白表达。结果:木犀草素50μmol/L对AngⅡ处理的细胞活力无明显影响,经100μmol/L木犀草素处理的细胞活力显著降低(P<0.05),故采用25、50μmol/L木犀草素研究其抗心肌细胞肥大作用。与正常对照组比较,模型组心肌细胞表面积、ROS荧光强度、MDA、Fe^(2+)水平及ANP、BNP、NFATc1 mRNA表达显著升高,细胞中SOD、GSH水平及核Nrf2、Gpx4、xCT、HO-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,木犀草素25、50μmol/L组心肌细胞表面积、ROS荧光强度、MDA、Fe^(2+)水平及ANP、BNP、NFATc1 mRNA表达显著降低,细胞中SOD、GSH水平及核Nrf2、Gpx4、xCT、HO-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。Brusatol可逆转木犀草素的作用(P<0.05)。结论:木犀草素可抑制氧化应激,减轻AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞肥大,其作用机制可能与增强Nrf2的核转录,激活Nrf2/Gpx4通路,抑制铁死亡有关。

关键词：木犀草素心肌细胞肥大血管紧张素Ⅱ 铁死亡核因子E2相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4

基于磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/核因子κB通路探讨高原缺氧对大鼠蛛网膜下腔出血后血脑屏障的作用

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解剖学报 2023年第2期54卷 156-164页

作者：魏艳娜王锋存马香莲索田莎陈胜王兰桂孙娟赵秀丽青海大学附属医院神经内科西宁810001

目的探讨高原缺氧对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后血脑屏障的作用及其机制。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠(n=78),随机分为4组:假手术组(sham)、蛛网膜下腔出血模型组(SAH)、高原缺氧假手术组(Hp sham)和高原缺氧蛛网膜下腔出血模型组(Hp S... 详细信息

目的探讨高原缺氧对大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后血脑屏障的作用及其机制。方法SPF级健康成年雄性SD大鼠(n=78),随机分为4组:假手术组(sham)、蛛网膜下腔出血模型组(SAH)、高原缺氧假手术组(Hp sham)和高原缺氧蛛网膜下腔出血模型组(Hp SAH)。通过低压模拟舱(海拔5000 m)饲养4 d建立高原缺氧大鼠动物模型,采用颈内动脉刺破法建立SAH大鼠动物模型。SAH后24 h,各组大鼠进行神经功能学评分和出血严重程度评估,Nissl染色和TUNEL染色分别观察大鼠海马组织CA1区神经元形态变化和神经细胞凋亡,Western blotting检测大鼠海马组织磷酸化PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、Akt、磷酸化核因子κB(p-NF-κB)、NF-κB及基质金属蛋白酶9(MMP-9)、闭锁蛋白(occludin)、紧密连接蛋白-5(claudin-5)的表达,免疫荧光染色观察大鼠海马组织CA1区occludin、claudin-5蛋白表达。结果SAH后24 h,SAH组与Sham组、Hp SAH组与Hp Sham组比较,大鼠神经功能评分明显下降,颅底出血量明显增加(P<0.05),Hp SAH组与SAH组比较,神经功能评分明显下降(P<0.05);SAH组与sham组比较,大鼠海马组织CA1区神经元形态萎缩变形,神经元细胞排列紊乱,神经元数量明显下降,神经细胞凋亡明显增加(P<0.05),高原缺氧后上述神经元形态损伤和神经细胞凋亡进一步加重;SAH组与sham组、Hp SAH组与Hp sham组比较,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、occludin及claudin-5蛋白的表达明显下降,p-NF-κB/NF-κB和MMP-9蛋白表达明显升高(P<0.05),Hp SAH组与SAH组比较,p-PI3K/PI3K和MMP-9蛋白表达明显升高,Hp sham组与sham组比较,claudin-5蛋白表达明显升高,差异均具有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色发现,SAH组大鼠海马组织CA1区occludin、claudin-5蛋白的表达下降,高原缺氧后occludin、claudin-5蛋白的表达进一步降低。结论高原缺氧通过抑制PI3K/Akt/NF-κB通路加重蛛网膜下腔出血大鼠模型后血脑屏障破坏。

关键词：高原缺氧蛛网膜下腔出血血脑屏障磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/核因子κB通路免疫印迹法免疫荧光大鼠

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血钙浓度与急性肺栓塞患者短期预后的关系

中华急诊医学杂志 2023年第9期32卷 1245-1249页

作者：郑伟吕卓航张怡欣夏明香吴占庆青海大学附属医院急诊科西宁810000

目的本研究旨在评估血钙与急性肺栓塞(acute pulmonary embolism,APE)患者短期预后的关系,并优化简化的肺栓塞严重程度指数(simplified pulmonary embolism severity indexs,sPESI)评分。方法这是一项单中心、回顾性研究,采集2015年1月... 详细信息

目的本研究旨在评估血钙与急性肺栓塞(acute pulmonary embolism,APE)患者短期预后的关系,并优化简化的肺栓塞严重程度指数(simplified pulmonary embolism severity indexs,sPESI)评分。方法这是一项单中心、回顾性研究,采集2015年1月至2022年1月就诊于青海大学附属医院并诊断为APE患者的一般资料、临床指标等,排除合并影响本研究结果疾病的患者。根据患者住院期间是否发生临床不良事件分为两组,选用两独立样本t检验、两样本秩和检验、卡方检验等单因素分析方法,然后进行多因素Logistic回归分析,最后将与APE患者短期预后有关的指标加入sPESI评分系统中组成新的预测模型,并绘制ROC曲线、与sPESI评分进行比较。结果73名APE患者纳入本研究,入院时有50.7%的APE患者存在低钙血症(血钙≤2.225 mmoL/L),血钙水平低的患者其住院不良事件的发生率高、短期预后差(OR=24.81,95%CI:1.07~576.03,P=0.045)。新预测模型中包含低钙与sPESI评分中的指标,其AUC=0.919,高于sPESI评分(AUC=0.880)和校正血钙(AUC=0.863)。结论低钙血症与APE患者住院不良事件相关,血钙能作为APE患者短期预后的独立预测因子。

关键词：急性肺栓塞血钙低钙血症预后