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IL-17信号通路在高原低氧诱导小鼠脾脏炎症反应的作用机制

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四川大学学报（医学版） 2024年第1期55卷 118-124页

作者：永胜郭玉静陈晓晨许玉珍胡英青海大学医学院基础医学部免疫学教研室西宁810016

目的探究高原低氧环境诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为平原常氧组和高原低氧组,每组5只。其中,平原常氧组饲养于海拔400 m(氧浓度19.88%)常氧浓度环境,高原低氧组小鼠置于海拔4200 m(氧浓度14.23%)... 详细信息

目的探究高原低氧环境诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生的作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为平原常氧组和高原低氧组,每组5只。其中,平原常氧组饲养于海拔400 m(氧浓度19.88%)常氧浓度环境,高原低氧组小鼠置于海拔4200 m(氧浓度14.23%)高原环境,构建高原低氧动物模型。第30天取脾脏组织检测脾脏指数,HE染色观察小鼠脾脏组织病理学改变,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot检测小鼠脾脏组织白细胞介素(IL)-6、IL-12、IL-1β的mRNA和蛋白表达量;使用RNA测序(RNA-sequencing,RNA-seq)技术进行高通量转录组学测序,将差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行KEGG富集分析,对关键通路中的DEGs进行RT-qPCR验证。结果与平原常氧组相比,高原低氧环境下,小鼠脾脏指数降低(P<0.05),并出现白髓减少,生发中心扩大,边缘模糊,静脉充血等病理学改变;高原低氧组小鼠脾脏组织IL-6、IL-12、IL-1β的mRNA和蛋白表达量均上调(P<0.05)。经转录组测序,KEGG通路富集分析示,4218个DEGs共富集到178个富集通路(P<0.05),DEGs在T细胞受体信号通路、TNF信号通路和IL-17信号通路等多个与免疫、炎症相关通路中显著富集(P<0.05);其中,IL-17信号通路和下游炎症因子高度上调表达(P<0.05);与平原常氧组相比,高原低氧组小鼠脾脏组织IL-17信号通路中关键基因IL-17、IL-17R、MAPKs(mitogen-activated protein kinase genes)等和下游炎症因子MMP9(matrix metallopeptidase 9)、S100A8(S100 calcium binding protein A8 gene)、S100A9(S100 calcium binding protein A9 gene)、肿瘤坏死因子-α(tumour necrosis factorα,TNF-α)等基因的mRNA表达量均出现上调或下调差异表达(P<0.05)。经RT-qPCR验证,DEGs的mRNA表达量与RNA-seq结果一致。结论高原低氧环境可通过激活IL-17信号通路,促进下游炎症因子释放,诱导小鼠脾脏组织炎症反应发生。

关键词：高原低氧转录组学 IL-17信号通路脾脏组织炎症 RNA测序生物信息学

高原低氧暴露导致小鼠脾脏组织脂代谢发生紊乱的分子机制

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南方医科大学学报 2024年

作者：崔成玲许玉珍唐超群蒋佳颖胡英双杰青海大学医学院

目的探究高原低氧致使小鼠脾脏组织脂代谢发生紊乱的分子机制。方法本研究以C57BL/6雄性小鼠脾脏组织为对象，随机分为两组，5只/组：平原常氧组（PSC组），饲养于海拔400 m；高原低氧组（HST组），饲养于海拔4200 m，构建30 d的低氧... 详细信息

目的探究高原低氧致使小鼠脾脏组织脂代谢发生紊乱的分子机制。方法本研究以C57BL/6雄性小鼠脾脏组织为对象，随机分为两组，5只/组：平原常氧组（PSC组），饲养于海拔400 m；高原低氧组（HST组），饲养于海拔4200 m，构建30 d的低氧动物模型。通过脂质组学分析脂类代谢产物的变化，采用液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术对脾脏组织进行代谢组学分析，筛选差异代谢物，并对其进行KEGG富集注释分析和KEGG通路分析，进一步通过转录组测序筛选出差异基因。最后，运用生物信息学分析将代谢组学和转录组学联合，重点关注了类固醇激素的生物合成、花生四烯酸代谢和嘌呤代谢通路中差异代谢物的上游靶基因。通过RT-qPCR检测11β-羟化类固醇脱氢酶1(HSD11B1)、类固醇5α还原酶1(SRD5A1)、前列腺素-内过氧化物合酶1(PTGS1)、造血前列腺素D合成酶（HPGDS）、黄嘌呤脱氢酶（XDH）、嘌呤核苷磷酸化酶（PNP）、次黄嘌呤鸟嘌呤-磷酸核糖基转移酶（HPRT）、胞外5′-核苷酸酶（NT5E）的mRNA的表达量，通过Western blotting检测HSD11B1、SRD5A1、XDH、PNP、HPRT的蛋白表达量。结果脂质组学富集到41种差异脂类代谢物，通过代谢组学和转录组学联合分析，发现差异代谢物和差异基因显著富集于类固醇激素的生物合成、花生四烯酸代谢和嘌呤代谢。与平原常氧组相比，高原低氧组的差异代谢物肾上腺甾酮、雄甾酮、前列腺素D2、前列腺素J2、黄嘌呤、黄嘌呤碱、尿酸的表达量显著上调（P<0.05），且代谢物上游的关键基因HSD11B1、SRD5A1、PTGS1、HPGDS、XDH、PNP、HPRT、NT5E的mRNA表达量显著上调或下调（P<0.05），差异蛋白HSD11B1、SRD5A1、XDH、PNP、HPRT的表达量上调或下调（P<0.05）。结论高原低氧通过影响类固醇激素的生物合成、花生四烯酸代谢、嘌呤代谢三条通路来致使小鼠脾脏组织脂代谢发生紊乱。

关键词：脂代谢高原低氧代谢组学转录组学脾脏脂质组学

高原低氧环境抑制小鼠脾脏组织碳代谢的分子机制

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中山大学学报（医学科学版） 2024年第5期45卷 806-817页

作者：陈晓晨胡英许玉珍龙启福马茹雪永胜青海大学医学院基础医学部免疫学教研室青海西宁810016

【目的】探究低氧暴露对小鼠脾脏组织碳代谢通路的调控机制。【方法】将C57BL/6小鼠分别在海拔400 m和4200 m饲养,每组5只,30 d后无菌取出脾脏组织,通过转录组测序,蛋白质组学和非靶向代谢组学分析差异表达基因、差异蛋白以及差异代谢物... 详细信息

【目的】探究低氧暴露对小鼠脾脏组织碳代谢通路的调控机制。【方法】将C57BL/6小鼠分别在海拔400 m和4200 m饲养,每组5只,30 d后无菌取出脾脏组织,通过转录组测序,蛋白质组学和非靶向代谢组学分析差异表达基因、差异蛋白以及差异代谢物,利用GO和KEGG富集分析,挖掘关键通路,并通过RT-qPCR和Western blot对通路中关键基因和蛋白进行验证。【结果】转录组测序发现,低氧暴露下有4213个基因出现显著性差异表达,其中1947个基因表达上调,2266个基因表达下调;差异表达蛋白分析发现166个蛋白表达上调,39个蛋白表达下调;非靶向代谢组学结果表明,高原低氧条件下存在133个差异代谢物,95个上调,38个下调;通过KEGG富集分析表明,差异表达基因、差异蛋白以及差异代谢物共同富集到碳代谢通路,因此,对碳代谢通路中的关键基因和蛋白进行验证,发现碳代谢通路中PGAM2、ENO3、PRPS2、PGLS、RPE、IDH3A、SUCLA2、MDH2的mRNA和蛋白表达量显著下调。【结论】高原低氧环境通过抑制机体碳代谢通路,减弱了糖酵解、三羧酸循环、磷酸戊糖途径,致使机体发生氧化应激、能量代谢失衡等。

关键词：多组学低氧脾脏碳代谢能量小鼠

基于脂质组学分析揭示高原低氧对小鼠脾组织磷脂代谢的调控机制

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第9期40卷 1289-1299页

作者：王昕郭玉静王嘉阳汪晓筠胡英青海大学医学院基础医学部免疫学教研室西宁810016

脾是机体最大的淋巴器官,参与病原体清除和抗体产生的免疫反应过程,并参与代谢平衡调节。高原低氧环境可影响脾组织脂质代谢,但影响脂质代谢的关键机制仍不清楚。我们旨在使用脂质组学分析方法研究高原低氧对小鼠脾组织脂质代谢的影响。... 详细信息

脾是机体最大的淋巴器官,参与病原体清除和抗体产生的免疫反应过程,并参与代谢平衡调节。高原低氧环境可影响脾组织脂质代谢,但影响脂质代谢的关键机制仍不清楚。我们旨在使用脂质组学分析方法研究高原低氧对小鼠脾组织脂质代谢的影响。将C57BL/6小鼠分别置于海拔4200 m(高原低氧组,HST组)和400 m(平原常氧组,PSC组),30 d取脾组织。使用超高效液相色谱-Orbitrap质谱系统进行脂质组学分析。30 d时在高原低氧环境下,小鼠脾指数降低,并出现白髓减少,生发中心扩大,边缘模糊,静脉充血等病理学改变。脂质组学分析结果显示,共鉴定到41种脂质亚类和2473种脂质分子,甘油三酯(triacylglycerides,TGs)和磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PCs)为脂质分子鉴别到最多的2种。使用单变量和多变量分析,鉴定到44个差异脂质分子,它们主要集中于磷脂代谢。随后,对磷脂代谢途径中的关键酶进行RT-qPCR检测,发现其mRNA表达量均有差异(P<0.05)。提示高原低氧环境主要影响小鼠脾组织磷脂代谢,并通过减少PC和磷脂酸(phosphatidic acid,PA)含量,促进其转化为磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)和心磷脂(cardiolipin,CL)并通过CDP-乙醇胺(CDP-Ethanolamine,CDP-Etn)途径促进PE生成。该研究为高原低氧环境下脾组织中磷脂代谢异常提供新的实验依据。

关键词：低氧脾脂质组学磷脂酰乙醇胺心磷脂

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藏羊血红蛋白抗氧化肽模拟酶解筛选及活性验证

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食品与发酵工业 2024年

作者：刘鑫罗唐君韩丽娟桂林生侯生珍孙胜男赵成周 1.青海大学医学部药学系 2.青海大学农牧学院 3.青海大学藏医学院青海大学藏医学院青海大学农牧学院青海大学医学部药学系

Based on the theoretical basis of bioinformatics， this paper used the computer to simulate the enzymatic digestion of Tibetan sheep hemoglobin， using online activity scoring， activity prediction， and molecular docking techniques to screen their antioxidant peptides and verify their antioxidant properties by DPPH free radical and ABTS cationic radical scavenging rate experiments. The amino acid sequences of Tibetan sheep hemoglobin were screened using the Uni Prot database to evaluate its potential bioactivities， ExPASy Peptide Cutter online tool was applied to enzymatically digest the screened peptide chains， Peptide Ranker was applied to score the bioactivity prediction， and the online tools Innovagen， ToxinPred， iBitter-SCM， A11erTOP， and AdmetSAR for solubility， toxicity， bitterness， sensitization and ADMET， molecular docking using Keap1 receptor for activity prediction， and finally validation of the screened antioxidant peptides of Tibetan sheep hemoglobin using DPPH free radical and ABTS cationic radical scavenging rate assay. Results showed that five Tibetan sheep hemoglobin chains contained 20 amino acids， and a total of 258 peptides （485 peptides） were obtained by enzymatic digestion， and 110 peptides （194 peptides） with ratings greater than 0.5 were screened out by the bioactivity scoring system， and 18 peptides with good solubility， non-toxicity， non-bitterness， and non-allergenicity were obtained through the prediction of their activities， and the molecular docking was carried out for the 10 peptides that had a better intestinal absorption， and the top three peptides with molecular docking scores， KRM， FPL， and FL， were subjected to in vitro antioxidant activity assay， and the results showed that the free radical scavenging ability of FPL and KRM exceeded that of the positive control， with IC50of 0.125 0±0.012 3， 0.339 1±0.031 4， 0.256 5±0.014 1，（0.374 6±0.047 1） mg/mL， respectively， and the free radical scavenging ability of FL reached 88.90% and 94.40%

关键词：藏羊血红蛋白虚拟酶解模拟筛选抗氧化肽分子对接

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古菌酯酶的最新进展及应用

中国生物工程杂志 2024年

作者：吕佳萱龙启福朱德锐邢江娃青海大学医学院基础医学部

酯酶是全球商业化的重要酶类，其最有趣和有待被探索的来源之一是古菌酯酶。古菌酯酶通常表现出广泛的pH值、温度和底物特异性，不同程度的对金属离子、溶剂和盐的耐受性，以及特定的区域、化学和立体选择性，是重要的工业生物催化剂，... 详细信息

酯酶是全球商业化的重要酶类，其最有趣和有待被探索的来源之一是古菌酯酶。古菌酯酶通常表现出广泛的pH值、温度和底物特异性，不同程度的对金属离子、溶剂和盐的耐受性，以及特定的区域、化学和立体选择性，是重要的工业生物催化剂，在医药、化工、环境生物修复、食品加工等领域具有巨大的应用潜力。然而，目前只有少数古菌的酯酶被描述，且由于古菌酯酶产量低、稳定性差等原因阻碍了其进一步挖掘和应用。本文对嗜盐古菌酯酶和超嗜热古菌酯酶两大古菌酯酶的分布、酶学性质表征和应用前景进行了综述，介绍了固态发酵、基因工程策略、固定化技术和纳米技术等能够显著提升古菌酯酶产量与性能的相关技术，并对古菌酯酶的后续开发与应用进行了展望。

关键词：古菌酯酶嗜盐古菌超嗜热古菌应用

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青海医学院实验室改革探索

青海科技 2000年第3期7卷 58-58,57页

作者：袁宁寻秋红青海医学院教材设备中心西宁810001

分析了医学院校实验室传统模式存在“小而全”的弊端 ,阐述了青海省医学院实验室体制改革的现状 ,　　提出了进一步改革的设想。

关键词：规划青海医学院实验室改革

青藏高原尕斯库勒盐湖可培养嗜盐耐盐微生物的群落结构与分离方法对比研究

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海洋与湖沼 2024年第4期55卷 916-930页

作者：马欣马想蓉朱德锐李轩领沈国平邢江娃青海大学医学院基础医学研究中心青海西宁810016

嗜盐耐盐微生物在生物医药、生物酶等领域有着重要的应用潜力。为更好地利用青藏高原的盐湖微生物资源,以青藏高原尕斯库勒盐湖为研究对象,借助Illumina MiSeq测序平台分析盐湖微生物的群落组成,并采用寡营养培养、富集培养和梯度稀释... 详细信息

嗜盐耐盐微生物在生物医药、生物酶等领域有着重要的应用潜力。为更好地利用青藏高原的盐湖微生物资源,以青藏高原尕斯库勒盐湖为研究对象,借助Illumina MiSeq测序平台分析盐湖微生物的群落组成,并采用寡营养培养、富集培养和梯度稀释等方法对嗜盐耐盐微生物进行大规模分离与培养。结果表明,高通量测序获得明确分类地位的细菌有30门50纲81目162科417属,古菌6门7纲9目15科39属。细菌优势属类群以矿生菌属(Fodinibius)和纤维单胞菌属(Gracilimonas)为主。古菌优势属类群以盐红菌属(Halorubrum)为主;纯培养法共获得502株嗜盐耐盐微生物,其中嗜盐耐盐细菌472株,分布在4门5纲7目9科13属,优势属为芽孢杆菌属(Bacillus)和盐单胞菌属(Halomonas),其中巴纽尔斯菌(Balneolota)门Fodinibius属可培养细菌是首次从盐湖中分离得到;嗜盐古菌30株,分布在1门1纲1目3科5属,优势属为Halorubrum。对比不同培养条件下的分离结果发现,1/2 TSA培养基和1/2 RCA培养基更有利于嗜盐耐盐细菌的分离,最佳富集天数为7天和30天,稀释梯度10-1和10-2可与未稀释样本互为补充来增加可培养嗜盐耐盐细菌的多样性;1/102216E培养基更适合于古菌的分离,最佳富集天数为7天和14天,且样本不稀释分离效果更好。研究结果可为青藏高原盐湖可培养微生物的分离方案优化提供理论依据和数据支撑。

关键词：尕斯库勒盐湖嗜盐耐盐微生物分离培养生物多样性高盐环境

不同形态氮添加对多年生高寒栽培草地土壤理化性质和微生物群落结构的影响

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环境科学 2024年第6期45卷 3595-3604页

作者：童永尚张春平董全民杨增增张小芳霍丽安曹铨张正社俞旸杨晓霞青海大学畜牧兽医科学院青海省畜牧兽医学院西宁810016 青海省高寒草地适应性管理重点实验室西宁810016 青海大学三江源区高寒草地生态教育部重点实验室西宁810016

探究不同氮素形态对多年生高寒栽培草地土壤理化性质和微生物群落结构的影响,以期为制定多年生高寒栽培草地氮添加方案提供科学依据.于2022年6月,在青海省海南藏族自治州共和县巴卡台农牧场以建植4龄的青海草地早熟禾(Poa pratensis Qin... 详细信息

探究不同氮素形态对多年生高寒栽培草地土壤理化性质和微生物群落结构的影响,以期为制定多年生高寒栽培草地氮添加方案提供科学依据.于2022年6月,在青海省海南藏族自治州共和县巴卡台农牧场以建植4龄的青海草地早熟禾(Poa pratensis Qinghai)+青海中华羊茅(Festuca sinensis Qinghai)混播草地为研究对象,以不施肥为对照(CK),设置3个不同形态氮素处理,分别为U:尿素(酰胺态氮)、A:硫酸铵(铵态氮)和N:硝酸钙(硝态氮),各处理的氮素施用量均为67.5 kg·(hm^(2)·a)^(-1),对不同处理下土壤养分和微生物群落组成及多样性进行分析.结果表明,外源铵态氮输入显著提高了NH_(4)^(+)-N含量、AP含量和EC,酰胺态氮输入显著提高了SOC含量和TN含量,硝态氮输入显著提高了NO_(3)^(-)-N含量、AN含量和TC含量.外源氮输入改变了土壤细菌和真菌群落结构以及优势菌门和属的相对丰度,但对细菌和真菌群落的Alpha多样性没有显著影响.主坐标分析(PCo A)表明,不同形态氮添加对细菌群落的Beta多样性具有显著影响,而对真菌群落影响不显著.冗余分析(RDA)表明,氮添加主要通过土壤铵态氮来改变微生物群落组成和结构.综合而言,在青藏高原多年生栽培草地土壤修复过程中,应优先考虑铵态氮肥.

关键词：氮素形态高寒栽培草地土壤养分微生物多样性土壤修复