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1株鸡源鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及其生物学特性分析

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中国动物传染病学报 2024年第3期32卷 57-63页

作者：李维升王艳高亚东赵神鸿孙景昱张越尹建华青岛汇丰动物保健品有限公司青岛266109

为了解鸡源鸭疫里默氏杆菌(RA)的致病性,对1株2021年从病鸡肝脏中分离的RA疑似菌株进行染色镜检、生化鉴定、血清型鉴定、药敏试验、动物致病性试验及病理学观察并分析其16S rRNA序列。结果显示:菌株不发酵糖类,脲酶试验、触酶试验、氧... 详细信息

为了解鸡源鸭疫里默氏杆菌(RA)的致病性,对1株2021年从病鸡肝脏中分离的RA疑似菌株进行染色镜检、生化鉴定、血清型鉴定、药敏试验、动物致病性试验及病理学观察并分析其16S rRNA序列。结果显示:菌株不发酵糖类,脲酶试验、触酶试验、氧化酶还原试验、明胶液化试验和枸橼酸盐试验均为阳性,硫化氢、VP、MR试验均为阴性;血清型鉴定为血清10型;分离菌对氨苄西林、阿莫西林、头孢噻呋、环丙沙星、磺胺异噁唑、红霉素、多西环素、氟苯尼考高敏,对头孢曲松、恩诺沙星、大观霉素、庆大霉素耐药;动物试验表明,能引起鸭和鸡的“三炎”症状,对鸭具有高致死率且能导致鸡出现严重关节软组织病变;病理学变化显示人工感染鸡心外膜增厚,充满纤维蛋白,炎性细胞浸润,主要炎性细胞为淋巴细胞;肝脏局灶性炎性细胞浸润,主要为淋巴细胞,部分肝细胞出现胞浆和核深染的固缩现象;脾脏血管周围有少量淋巴细胞浸润;腿部组织中充满渗出液,大量炎性细胞浸润于血管周围。16S rRNA序列比对显示分离株与GenBank RA参考株同源性均在99%以上,确认其为RA。遗传进化分析显示分离株与当前毒力最强的RA Hxb2株高度同源。本试验证明鸡源RA QD01株对鸡和鸭都具有强致病性并能在鸡群中流行传播。

关键词：鸭疫里默氏杆菌致病性生物学特性

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恩诺沙星纳米乳的制备及抑菌活性研究

黑龙江畜牧兽医 2023年第2期 119-122,136,137页

作者：刘旭王艳高亚东江晓阳孙景昱张越尹建华青岛汇丰动物保健品有限公司山东青岛266109

为了制备恩诺沙星纳米乳并确定其抑菌效果,试验采用低能乳化法中的相转变法制备恩诺沙星纳米乳,对制备的恩诺沙星纳米乳进行了乳液类型的判定、形态观察、粒径分布测定,研究存放时间、存放温度对制备的恩诺沙星纳米乳外观状态及粒径的影... 详细信息

为了制备恩诺沙星纳米乳并确定其抑菌效果,试验采用低能乳化法中的相转变法制备恩诺沙星纳米乳,对制备的恩诺沙星纳米乳进行了乳液类型的判定、形态观察、粒径分布测定,研究存放时间、存放温度对制备的恩诺沙星纳米乳外观状态及粒径的影响,以及测定恩诺沙星纳米乳的抑菌活性。结果表明:以肉豆蔻酸异丙酯(IPM)为油相、聚氧乙烯蓖麻油-40(EL-40)为表面活性剂、乙酸为助表面活性剂,纯化水为水相制备的水包油(O/W)型恩诺沙星纳米乳外观澄清、透明,电镜下观察恩诺沙星纳米乳粒子呈圆球形,分布均匀,不粘连;粒径范围为10~100 nm,粒径大小在纳米乳标准范围内,乳液多分散系数(PDI)为0.192;8000 r/min离心15 min不分层,乳液性质稳定;10%恩诺沙星纳米乳对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分别为3.72,2.71,3.82 cm,10%恩诺沙星可溶性粉为2.73,1.30,2.84 cm,10%恩诺沙星溶液为3.55,2.56,3.64 cm;10%恩诺沙星纳米乳对金黄色葡萄球菌和沙门氏菌抑菌效果较好,最小抑菌浓度(MIC)均为0.0625μg/mL,对大肠杆菌MIC为0.125μg/mL。10%恩诺沙星纳米乳对3种细菌的MIC与10%恩诺沙星溶液相当,差异不明显,均优于10%恩诺沙星可溶性粉。说明制备的恩诺沙星纳米乳性质稳定,抑菌效果比商品化可溶性粉好,与恩诺沙星溶液相当。

关键词：恩诺沙星纳米乳抑菌活性抑菌圈最小抑菌浓度

一株禽多瘤病毒的分离鉴定及其VP1基因序列分析

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中国家禽 2020年第4期42卷 110-114页

作者：王艳高亚东江晓阳李维升尹建华青岛汇丰动物保健品有限公司山东青岛266111

从陕西某养鸟场发病鹦鹉幼雏体内分离到1株禽多瘤病毒(201808SX株),该病毒能在7日龄SPF鸡胚上繁殖,并呈现明显的胚体病变。通过克隆测序,获得了禽多瘤病毒(201808SX株)VP1基因全基因序列。同源性分析表明,201808SX分离株与不同地区不同... 详细信息

从陕西某养鸟场发病鹦鹉幼雏体内分离到1株禽多瘤病毒(201808SX株),该病毒能在7日龄SPF鸡胚上繁殖,并呈现明显的胚体病变。通过克隆测序,获得了禽多瘤病毒(201808SX株)VP1基因全基因序列。同源性分析表明,201808SX分离株与不同地区不同时间APV分离株的VP1基因核苷酸同源性均较高,不低于99.4%,与2006年日本分离株、2009年中国潍坊分离株、2018年中国山东分离株和2018年中国C4-15分离株等同源性最高,均为100%。遗传进化分析表明,201808SX分离株在遗传进化上与2006年日本分离株、2009年中国潍坊分离株、2018年中国山东分离株、2018年中国C4-15株、2010年波兰分离株和2016年葡萄牙分离株处于同一小分支,均属于CladeⅡ分支。这是国内首次报道,将临床病料组织上清经卵黄囊接种7日龄SPF鸡胚成功地分离到APV,这为BFD的研究和防控奠定基础。试验结果也首次证实陕西地区虎皮鹦鹉中存在APV感染,丰富了国内APV流行的基础数据。

关键词：禽多瘤病毒(APV) 分离鉴定分子进化分析

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一株鹅源禽腺病毒4型的分离及致病性

畜牧兽医学报 2024年第9期55卷 4232-4240页

作者：王艳高亚东蒋成辉曾巧英甘肃农业大学动物医学院兰州730070 青岛汇丰动物保健品有限公司青岛266111

2023年,昆明一朗德鹅场部分雏鹅出现软脖子症状,伴有零星死亡,病变疑似禽心包积液综合征(hydropericardium syndrome,HPS)。本研究旨在对本次雏鹅病因进行分子病毒学诊断和病原的致病性研究。采集肝病料接种鸡肝癌细胞(leghorn male hep... 详细信息

2023年,昆明一朗德鹅场部分雏鹅出现软脖子症状,伴有零星死亡,病变疑似禽心包积液综合征(hydropericardium syndrome,HPS)。本研究旨在对本次雏鹅病因进行分子病毒学诊断和病原的致病性研究。采集肝病料接种鸡肝癌细胞(leghorn male hepatocellular cells,LMH):1)观察细胞病变效应(cytopathic effect,CPE),取培养液负染、电镜观察病毒粒子形态;2)靶标4型禽腺病毒(serotype 4 fowl adenovirus,FAdV-4)的衣壳蛋白编码基因hexon基因进行PCR诊断,对扩增基因序列进行遗传演化分析;3)以5×10^(5.5)TCID_(50)/羽的剂量皮下注射感染10日龄健康泰州鹅,进行动物回归感染以确证其致病性。结果显示,将病料上清接种LMH细胞48~72 h后CPE明显,细胞圆缩、间隙变大、随后碎裂、逐渐脱落,电镜观察见二十面体无囊膜病毒粒子;PCR检测FAdV-4阳性,分离纯化病毒,命名为YNKM2023株;hexon基因的遗传演化分析显示,分离株与国内已有的鸡、鸭FAdV-4流行毒株相似性高达99.8%~99.9%,与印度分离株相似性为99.5%~99.6%。接种感染后,泰州鹅未出现典型的临床症状,但感染后3 d开始出现HPS的特征性病变,感染后6 d检测到中和抗体。综上,本研究成功分离到鹅源FAdV-4/YNKM2023株,该毒株与国内已有的鸡鸭流行毒株高度同源,尚未发生明显的基因漂移。分离株可以感染鹅,病毒可以在雏鹅体内复制引起组织器官病变并产生免疫应答,对鹅表现出一定的致病性,这有助于了解FAdV-4在鹅群的流行情况及其对雏鹅的致病性。

关键词：鹅源禽腺病毒4型(FAdV-4) 分离致病性

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一株Ⅰ群禽腺病毒血清8b型的分离与鉴定

黑龙江畜牧兽医 2020年第21期 109-112,176-177页

作者：王恩丽高亚东李志中王赛赛魏笑笑刁秀国张瑞丽吴海洋张欣秦立廷山东新希望六和集团有限公司山东青岛266000 青岛汇丰动物保健品有限公司山东青岛266000

为了鉴定分离得到的毒株为禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)血清8b型,试验用LMH细胞对病毒进行分离,然后对分离毒株进行PCR扩增、hexon基因序列分析、TCID50测定、动物回归试验。结果表明:分离毒株在鸡肝癌细胞(LMH)中连续盲传3代后会稳... 详细信息

为了鉴定分离得到的毒株为禽腺病毒(Fowl adenovirus,FAdV)血清8b型,试验用LMH细胞对病毒进行分离,然后对分离毒株进行PCR扩增、hexon基因序列分析、TCID50测定、动物回归试验。结果表明:分离毒株在鸡肝癌细胞(LMH)中连续盲传3代后会稳定地出现明显的细胞病变,在接毒48小时时会出现特异的细胞病变,接毒72 h后有90%的细胞脱落,病毒毒价为1×10-8.1TCID50/0.1 mL。目的基因序列与GenBank中的Ⅰ群FAdV基因的核苷酸序列同源性为62.3%~93.4%,与GenBank中的Ⅰ群FAdV-8b毒株处于同一个分支,亲缘关系较近。在动物回归试验中,分离毒株可引起SPF鸡发病甚至死亡,发病率为100%,死亡率为20%。说明试验成功分离到了一株Ⅰ群禽腺病毒血清8b型毒株。

关键词：禽腺病毒鸡肝癌细胞分离鉴定 hexon基因血清8b型

银黄可溶性粉体外抗血清4型Ⅰ群禽腺病毒的试验研究

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中国家禽 2020年第2期42卷 42-46页

作者：王君娜王艳高亚东张宇名徐守振青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 青岛汇丰动物保健品有限公司山东青岛266111

为探讨银黄可溶性粉体外抗血清4型Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-4)的活性,应用MTT法与CPE法测定银黄可溶性粉对LMH细胞贴壁和单层生长的最大安全浓度,研究其对病毒增殖抑制、感染阻断和直接灭活的作用效果。结果显示,银黄可溶性粉对LMH细胞最大安... 详细信息

为探讨银黄可溶性粉体外抗血清4型Ⅰ群禽腺病毒(FAdV-4)的活性,应用MTT法与CPE法测定银黄可溶性粉对LMH细胞贴壁和单层生长的最大安全浓度,研究其对病毒增殖抑制、感染阻断和直接灭活的作用效果。结果显示,银黄可溶性粉对LMH细胞最大安全浓度为156.25μg/mL,在安全浓度范围内,加药组LMH细胞贴壁和细胞单层形成与细胞对照组无显著差异(P>0.05)。156.25μg/mL银黄可溶性粉体外抗FAdV-4效果最好,病毒增殖抑制、病毒感染阻断和直接灭活试验的细胞存活率分别为96.1%、122.0%、99.7%,病毒抑制率分别为91.5%、143.8%、99.3%,均显著高于病毒对照组(P<0.05)。此外,78.13μg/mL和156.25μg/mL的银黄可溶性粉体在病毒感染阻断试验中具有促进细胞生长作用。本研究为银黄可溶性粉用于因FAdV-4引起的鸡心包积液综合征的临床治疗提供理论依据。

关键词：血清4型禽腺病毒银黄可溶性粉 MTT法

5株H9N2亚型禽流感病毒分离鉴定及HA基因的序列分析

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安徽农业科学 2022年第23期50卷 78-80,119页

作者：侯娟娟王艳高亚东李春秀李山峰孙景昱张越尹建华青岛汇丰动物保健品有限公司山东青岛266109

[目的]对山东省部分地区疑似H9N2亚型禽流感病毒的5份病料样品进行鉴定,并确定其所属系谱。[方法]通过鸡胚接种、血清学试验、RT-PCR检测和基因测序等方法对样品进行分离、鉴定和分析。[结果]5个分离株与A/chicken/Guangxi/55/2005(H9N2... 详细信息

[目的]对山东省部分地区疑似H9N2亚型禽流感病毒的5份病料样品进行鉴定,并确定其所属系谱。[方法]通过鸡胚接种、血清学试验、RT-PCR检测和基因测序等方法对样品进行分离、鉴定和分析。[结果]5个分离株与A/chicken/Guangxi/55/2005(H9N2)的同源性在90%以上,并属同一分支,与参考株A/chicken/Henan/G19/2011(H9N2)的同源性不到90.0%,与其亲缘关系最近的疫苗株A/chicken/Jiangsu/WJ57/2012(H9N2)的同源性在92.1~93.5%。[结论]分离的5个毒株均属于欧亚系Ⅰ群h9.***.2.5分支,且与参考株和疫苗株之间产生一定的遗传距离。

关键词： H9N2亚型禽流感分离鉴定 HA基因

胆汁酸对白羽肉鸡生长性能、屠宰性能和脂类代谢的影响

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动物营养学报 2023年第1期35卷 221-229页

作者：高露王建民陈德肖传丕潘雪宋志刚山东农业大学动物科技学院泰安271018 山东龙昌动物保健品有限公司齐河251100 青岛西海岸农高发展集团有限公司青岛266000

本试验旨在研究饲粮添加胆汁酸对白羽肉鸡生长性能、屠宰性能和脂类代谢的影响。选取体况一致和体重接近的1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡240只,随机分为2个组,每组6个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加300 mg... 详细信息

本试验旨在研究饲粮添加胆汁酸对白羽肉鸡生长性能、屠宰性能和脂类代谢的影响。选取体况一致和体重接近的1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡240只,随机分为2个组,每组6个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加300 mg/kg胆汁酸。试验期42 d。结果表明:1)与对照组相比,试验组白羽肉鸡1~42日龄料重比显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,试验组白羽肉鸡屠宰率显著提高(P<0.05),腹脂率有降低趋势(P=0.071)。3)与对照组相比,试验组白羽肉鸡肝脏脂肪含量有降低趋势(P=0.054),血清谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05),血清甘油三酯含量有降低趋势(P=0.090)。综上所述,在本试验条件下,饲粮添加300 mg/kg胆汁酸可以降低白羽肉鸡料重比,提高屠宰率,对脂类代谢有一定的改善作用。

关键词：胆汁酸白羽肉鸡生长性能屠宰性能脂类代谢

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鸡传染性支气管炎·H9亚型禽流感病毒与鸡毒支原体混合感染的诊治

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安徽农业科学 2023年第4期51卷 73-76页

作者：江晓阳王艳刘俊镛刘旭高亚东孙景煜张越尹建华青岛汇丰动物保健品有限公司山东青岛266109

通过病理学解剖、细菌分离与培养、病毒分离鉴定、动物回归试验和分子生物学检测,对山东省日照市某发病鸡场5只病死鸡进行诊断。病理学剖检显示,病鸡支气管栓塞,气管喉头出血,肺出血水肿、颜色发黑,输尿管有尿酸盐沉积,气囊增厚、有干... 详细信息

通过病理学解剖、细菌分离与培养、病毒分离鉴定、动物回归试验和分子生物学检测,对山东省日照市某发病鸡场5只病死鸡进行诊断。病理学剖检显示,病鸡支气管栓塞,气管喉头出血,肺出血水肿、颜色发黑,输尿管有尿酸盐沉积,气囊增厚、有干酪物渗出;从发病鸡组织中未分离出细菌;分子生物学检测结果发现,鸡传染性支气管炎病毒、鸡毒支原体和H9亚型禽流感病毒检测结果均呈阳性。经初步推断,发病鸡群存在鸡毒支原体隐性感染,又继发感染鸡传染性支气管炎和H9亚型禽流感病毒,多种病原混合感染造成鸡只死亡。建议该鸡场加强鸡传染性支气管炎和H9亚型禽流感防控措施,投喂抗病毒类药物。

关键词：鸡传染性支气管炎 H9亚型禽流感鸡毒支原体