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单纯紫外线照射法建立黄褐斑小鼠模型研究

中华整形外科杂志 2024年第4期40卷 444-454页

作者：李丽颖孙靖涵华骋陈振雨吕乐乐杜宪青岛大学附属医院美容整形外科青岛266003 青岛市中心医院烧伤整形外科青岛266042 檀国大学医学院韩国贝克曼激光研究所韩国天安31116 青岛新世纪妇儿医院医学美容中心青岛266011 青岛君良烧伤医院烧伤科青岛266073

目的探索单纯紫外线照射法建立黄褐斑小鼠模型的适宜照射能量及频率,为成功建立黄褐斑模型提供动物品系及照射方案参考。方法使用BALB/c雌鼠及C57BL/6JNifdc雌鼠建立黄褐斑动物模型,采用简单随机方法,将BALB/c雌鼠分为A、B、C、G 4组,... 详细信息

目的探索单纯紫外线照射法建立黄褐斑小鼠模型的适宜照射能量及频率,为成功建立黄褐斑模型提供动物品系及照射方案参考。方法使用BALB/c雌鼠及C57BL/6JNifdc雌鼠建立黄褐斑动物模型,采用简单随机方法,将BALB/c雌鼠分为A、B、C、G 4组,每组各5只;将C57BL/6JNifdc雌鼠分为D、E、F、H 4组,每组各5只。所有小鼠均采用8.428 mW/cm^(2)紫外光予以照射,A、D组照射时间为15 s(单次照射能量为0.13 J/cm^(2)),B、E组照射时间为15 min(单次照射能量为7.59 J/cm^(2)),C、F组照射时间为30 min(单次照射能量为15.17 J/cm^(2)),连续5 d照射后停止2 d为1个周期,共照射4个周期;G、H组不予照射。照射结束后,所有小鼠正常饲养,并于1周后取材(每组3只),行HE、Masson-Fontana、Masson、免疫组化染色,分别测定棘细胞层厚度、黑色素颗粒数、胶原百分比、白细胞介素-1(IL-1)水平。其余小鼠继续饲养1周,脱毛并拍照,观察色斑变化。使用SPSS 27.0软件进行数据分析,不符合正态分布的计量资料采用M(Q 1,Q 3)表示,组间比较采用Kruskal-Wallis秩和检验。结果在全程照射过程中,BALB/c雌鼠各组始终未形成肉眼可见的色斑,而在C57BL/6JNifdc雌鼠中,第2周照射后D、E、F组均产生不同大小的色斑,然而第3周照射后,D组色斑逐渐消失,E组色斑则较前更加明显,与此同时,F组也产生了明显的色斑和部分小鼠背部皮肤出现脱屑甚至灼伤破损。第4周照射后,D组无新色斑形成,E组色斑更为明显,F组大部分出现皮肤灼伤破损。照射结束后2周,各组BALB/c雌鼠背部皮肤无明显色斑,而在C57BL/6JNifdc雌鼠中,D组无明显色斑,E组色斑颜色较第4周照射后变浅,F组皮肤灼伤破损处结痂,色斑较前变浅,但E、F组色斑仍明显肉眼可见。HE染色显示,A、B、C、G组棘细胞层厚度差异无统计学意义(H=1.08,P=0.782);而D、E、F、H组棘细胞层厚度差异有统计学意义(H=12.85,P=0.005),随着单次照射时间的延长,棘细胞层厚度逐渐变薄,F组表皮棘细胞排列有不连续现象,而这种情况在D、E组中未被观察到。Masson-Fontana染色显示,在BALB/c雌鼠中均未见明显色素沉着,A、B、C、G组黑色素颗粒计数差异无统计学意义(H=7.77,P=0.051);而在C57BL/6JNifdc雌鼠中,E、F组表皮和真皮内均有较为明显的色素沉着,D、E、F、H组黑色素颗粒计数差异有统计学意义(H=17.61,P<0.001),随着单次照射时间的延长,黑色素沉积逐渐增加。Masson染色显示,A、B、C、G组胶原百分比差异无统计学意义(H=7.26,P=0.064);而E、F组则可观察到明显的纤维排列紊乱且结构松散,D、E、F、H组胶原百分比差异有统计学意义(H=8.65,P=0.034)。免疫组化结果显示,A、B、C、G组IL-1表达水平差异有统计学意义(H=17.86,P<0.001);D、E、F、H组IL-1表达水平差异有统计学意义(H=14.19,P=0.003),提示紫外线照射激发了小鼠皮肤的炎症反应。结论BALB/c雌鼠并不适用于在本实验照射频率及时间范围内的黄褐斑模型建立,C57BL/6JNifdc雌鼠采用单次照射能量为7.59 J/cm^(2)、5 d/周的照射频率持续4周,可以获得稳定且具有一定色素沉着量的黄褐斑动物模型,并至少维持2周。

关键词：晒斑,晒伤黄褐斑动物模型紫外线照射法

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普萘洛尔治疗浅表性婴幼儿血管瘤的疗效分析

临床医药文献电子杂志 2020年第23期7卷 2-3页

作者：李雪丽黄勇青岛大学附属医院烟台毓璜顶医院烧伤整形外科

目的观察口服普萘洛尔药物治疗浅表性婴幼儿血管瘤的疗效。方法观察2017年9月～2019年9月在青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院接受口服普萘洛尔药物医治的46例浅表性血管瘤患儿治疗的效果及不良反应。结果本次研究中46例浅表性血管瘤患... 详细信息

目的观察口服普萘洛尔药物治疗浅表性婴幼儿血管瘤的疗效。方法观察2017年9月～2019年9月在青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院接受口服普萘洛尔药物医治的46例浅表性血管瘤患儿治疗的效果及不良反应。结果本次研究中46例浅表性血管瘤患儿均遵医嘱完成治疗,经过观察发现口服普萘洛尔药物治疗有效率高达95.7%,优良率为78.3%,且不良反应较少。结论口服普萘洛尔药物对浅表性婴幼儿血管瘤能取得满意疗效。

关键词：婴幼儿血管瘤治疗普萘洛尔

跨膜接头蛋白CBP对皮肤鳞癌细胞A431生长增殖的负调控作用研究

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中国癌症杂志 2017年第7期27卷 527-532页

作者：李美佳张维娜渠开攀王冰青岛大学附属医院烧伤整形外科山东青岛266000 青岛大学医学院免疫教研室山东青岛266000

背景与目的:跨膜接头蛋白(Csk-binding protein,CBP)是新发现的Src家族成员,与多种肿瘤的发生有关。该研究旨在观察CBP基因过表达对皮肤鳞癌细胞系A431增殖及细胞凋亡的影响,探讨其相关的分子机制。方法:构建CBP-增强型绿色荧光蛋白(enh... 详细信息

背景与目的:跨膜接头蛋白(Csk-binding protein,CBP)是新发现的Src家族成员,与多种肿瘤的发生有关。该研究旨在观察CBP基因过表达对皮肤鳞癌细胞系A431增殖及细胞凋亡的影响,探讨其相关的分子机制。方法:构建CBP-增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合蛋白的慢病毒过表达载体,采用反转录病毒转染的方法建立CBP过表达的A431细胞株。实验分为亲本细胞组(未进行基因转染的A431细胞)、对照组(A431细胞转染仅含EGFP阴性对照病毒)和实验组(A431细胞转染CBP-EGFP病毒)。在激光共聚焦显微镜下观察细胞转染率,验证转染成功与否;CCK-8法检测CBP过表达对A431细胞增殖能力的影响,并采用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测对细胞凋亡的影响;实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白[质]印迹法(Western blot)检测Lck、Csk和Fyn三种上游信号转导分子分别在m RNA和蛋白中的表达水平变化。结果:建立了稳定过表达CBP的A431细胞株;CCK-8法结果提示,CBP过表达明显抑制细胞生长,第2~6天的组间差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测显示,实验组细胞凋亡率显著增加,与亲本细胞组及对照组相比差异有统计学意义(P<0.001);RTFQ-PCR结果显示,实验组A431细胞Lck m RNA的相对表达水平显著下调(P<0.001),实验组细胞Csk和Fyn m RNA的表达分别约为亲本细胞组的1.6倍和3.8倍,表达显著上调(P<0.001);Western blot结果表明,实验组Lck蛋白的相对表达水平明显下降(P<0.001),实验组细胞Csk和Fyn蛋白与亲本细胞组和对照组相比表达明显增加(P<0.001)。结论:CBP过表达可抑制皮肤鳞癌细胞增殖,诱导细胞凋亡及坏死。CBP通过调节上游信号转导通路中的蛋白酪氨酸激酶Lck、Csk和Fyn来调控细胞的增殖活性。

关键词：皮肤鳞癌跨膜接头蛋白细胞增殖细胞凋亡

早期非小细胞肺癌胸膜侵犯术前评估的研究进展

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影像研究与医学应用 2023年第5期7卷 8-10,14页

作者：蔡晓婷王萍李文杰马恒滨州医学院医学影像学院山东烟台264003 青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院影像科山东烟台264000 潍坊市益都中心医院烧伤整形外科山东潍坊262500

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是癌症死亡中的首要原因。随着高分辨率CT在肺癌筛查中的普及,越来越多早期NSCLC被发现。脏层胸膜侵犯(visceral pleural invasion,VPI)是早期NSCLC的不良预后因素之一。本文从临床、病... 详细信息

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)是癌症死亡中的首要原因。随着高分辨率CT在肺癌筛查中的普及,越来越多早期NSCLC被发现。脏层胸膜侵犯(visceral pleural invasion,VPI)是早期NSCLC的不良预后因素之一。本文从临床、病理及CT征象方面探讨早期NSCLC的VPI影响因素,指导临床决策。

关键词：非小细胞肺癌胸膜侵犯影响因素

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淋巴途径在烫伤大鼠肠道细菌移位中的作用

中华烧伤杂志 2011年第1期27卷 49-53页

作者：冯永强王德昌王坤冷向锋肖虎郭丹凤山东大学附属省立医院烧伤整形科济南250021 潍坊市人民医院烧伤整形外科青岛大学医学院附属医院烧伤整形外科济南市中心医院烧伤整形外科

目的了解淋巴途径在烫伤大鼠肠道细菌移位中的作用。方法制备羰花青荧光染料CM—DIL标记的大肠埃希菌菌液（数量级10 9CFU／L）。将60只成年雄性Wistar大鼠按照信封法随机分为烫伤组、假伤组，每组30只。2组大鼠经胃灌注已制备的标记菌... 详细信息

目的了解淋巴途径在烫伤大鼠肠道细菌移位中的作用。方法制备羰花青荧光染料CM—DIL标记的大肠埃希菌菌液（数量级10 9CFU／L）。将60只成年雄性Wistar大鼠按照信封法随机分为烫伤组、假伤组，每组30只。2组大鼠经胃灌注已制备的标记菌液0．5mL后，烫伤组致30％TBSA深Ⅱ度烫伤，伤后立即行液体复苏；假伤组大鼠皮肤经25℃水浴10s模拟烫伤并同法复苏。采集2组大鼠伤后2、24、72h（每时相点10只）的肠系膜淋巴结（MLN）、肝脏、肠系膜淋巴液（MLF）、肝静脉血标本。分别采用荧光示踪法和细菌培养法检测细菌移位情况；用鲎试剂显色基质法定量测定上述4种标本中内毒素含量，并计算MLF和肝静脉血的内毒素携带量。对实验数据行t检验或单因素方差分析。结果（1）荧光示踪法检测显示活菌呈短棒状，液体标本中可见单体或两三个联体的可移动活菌；死菌呈不规则碎片状。假伤组伤后2h有少量标记菌，24h数量达高峰；烫伤组伤后2h标记菌较多，24、72h仍处于较高水平。烫伤组各种标本比较，MLN内标记菌最多，伤后24h达高峰[（5872±1976）×10 3CFU／g]，明显多于假伤组[（216＋-110）×10 3CFU／g，t=30．129，P=0．000]，72h有所减少但仍多于假伤组（t=4．323，P=0．000）；血液内标记菌最少。（2）细菌培养法检测：假伤组120份标本中，29份细菌培养呈阳性占24．2％；烫伤组120份标本中，72份培养阳性占60．0％。2组大鼠除血液标本在各时相点均未检出活菌外，其余3种标本伤后2h或24h可培养出活菌。烫伤组MLN和肝脏较其余2种组织检出更多活菌；伤后24h，该组MLN、肝脏以及MLF标本中细菌数量均明显多于假伤组（t值分别为4．353、4．354、4．965，P值均等于0．000）。（3）内毒素含量：烫伤组大鼠伤后各时相点4种标本的内毒素含量均高于假伤组，其中肝脏、MLF内毒素含量伤后2h即达高峰。此时相点烫伤组4种组织间内毒素含量比较，差异有统计学意义（F=258．47，P=0．000），其中肝脏、MLN、MLF内毒素含量较高，且明显高于假伤组（t值分别为43．378、43．123、22．423，P值均等于0，000）；MLF内毒素含量约为血液中含量的9倍。（4）烫伤组伤后各时相点MLF、血液内毒素携带量均高于假伤组。结论用CM—DIL标记细菌能够较全面反映细菌移位情况，淋巴途径在细菌移位中发挥重要作用。

关键词：烧伤肠淋巴细菌移位内毒素类

跨膜接头蛋白PAG1过表达对皮肤鳞癌细胞A431运动能力的影响

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肿瘤防治研究 2016年第9期43卷 738-742页

作者：李美佳王冰毛凯平渠开攀张维娜青岛大学附属医院烧伤整形外科青岛266000 青岛大学医学院免疫教研室青岛266000 青岛市市立医院(集团)胸外科青岛266000

目的研究跨膜接头蛋白PAG1过表达对人皮肤鳞状细胞癌A431运动能力的影响。方法构建PAG1-EGFP融合蛋白的慢病毒表达载体,采用反转录病毒转染的方法建立PAG1过表达的A431细胞株,实验分为3组:亲本细胞组(未进行基因转染的A431细胞)、对照组... 详细信息

目的研究跨膜接头蛋白PAG1过表达对人皮肤鳞状细胞癌A431运动能力的影响。方法构建PAG1-EGFP融合蛋白的慢病毒表达载体,采用反转录病毒转染的方法建立PAG1过表达的A431细胞株,实验分为3组:亲本细胞组(未进行基因转染的A431细胞)、对照组(A431细胞转染仅含EGFP阴性对照病毒)、实验组(A431细胞转染PAG1-EGFP病毒)。流式细胞术检测细胞转染率,实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后PAG1 mRNA及其蛋白表达,进一步验证细胞转染成功与否;利用划痕修复实验、Transwell迁移实验、侵袭实验三种不同的方法检测PAG1基因的过表达是否会对皮肤鳞癌细胞的生长、迁移和侵袭能力产生影响。结果实验组和对照组目的基因病毒的转染表达率分别为(94.97±0.15)%、(94.60±0.35)%;实验组细胞中PAG1基因m RNA的表达量约为亲本细胞组的1.6倍(P=0.000),转染后实验组中PAG1蛋白的相对表达水平明显增加(P=0.000),建立了稳定过表达PAG1的A431细胞系;PAG1过表达明显降低A431细胞愈合率(P=0.000);实验组A431细胞迁移、侵袭能力明显降低(P=0.001,P=0.000)。结论 PAG1的过表达能抑制人皮肤鳞癌细胞运动能力,影响肿瘤的浸润及远处转移。

关键词：皮肤鳞癌 PAG1 迁移侵袭

严重烫伤大鼠淋巴循环中三种重要炎症介质的变化

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中华烧伤杂志 2011年第1期27卷 61-62页

作者：冯永强王德昌王坤冷向锋肖虎郭丹凤山东大学附属省立医院烧伤整形外科济南250021 潍坊市人民医院烧伤整形外科青岛大学医学院附属医院烧伤整形外科济南市中心医院烧伤整形外科

严重烧（创）伤后在肠系膜淋巴结、肠淋巴液。甚至股淋巴液内，可检测到细菌或者内毒素，发生移位的微生物和内毒素与效应细胞作用时必然产生大量的细胞因子。这些细胞因子随着淋巴液、血液进入体循环，必将对全身产生作用，

关键词：炎症介质淋巴循环烫伤大鼠肠系膜淋巴结肠淋巴液细胞因子烧(创)伤细胞作用

hTERT反义寡核苷酸对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖及端粒酶活性的影响

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中华临床医师杂志（电子版） 2012年第18期6卷 38-41页

作者：黄勇林立新王鹏王学明王玉婷姜蕾青岛大学医学院附属烟台毓璜顶医院烧伤整形科山东省264000

目的研究hTERT基因反义寡核苷酸(ASODN)对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长增殖及端粒酶活性的抑制作用,探讨其在瘢痕疙瘩治疗中的作用。方法应用ASODN封闭瘢痕疙瘩成纤维细胞hTERT基因的表达,不同浓度不同时间以ASODN作用于体外培养的瘢痕疙瘩... 详细信息

目的研究hTERT基因反义寡核苷酸(ASODN)对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长增殖及端粒酶活性的抑制作用,探讨其在瘢痕疙瘩治疗中的作用。方法应用ASODN封闭瘢痕疙瘩成纤维细胞hTERT基因的表达,不同浓度不同时间以ASODN作用于体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞,细胞计数和MTT法检测成纤维细胞生长增殖情况,端粒酶PCR-ELISA法检测不同处理浓度和时间成纤维细胞端粒酶活性。结果 ASODN作用于瘢痕疙瘩成纤维细胞72h后,成纤维细胞生长受抑,增殖能力减弱,并具有浓度、时间依赖性。端粒酶活性检测显示:ASODN0.5、1.0和1.5μmol/L作用组OD450-690值分别为0.612±0.038、0.535±0.027、0.423±0.023,与空白对照组(0.898±0.058)比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 hTERT基因ASODN能抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞的生长增殖,降低成纤维细胞端粒酶活性是其重要作用机制之一。通过抑制端粒酶活性进行抗瘢痕疙瘩治疗可能是一个新途径。

关键词：瘢痕疙瘩端粒,末端转移酶寡核苷酸类,反义

骨髓间充质干细胞移植对Tourette综合征大鼠纹状体脑源性神经营养因子表达的影响

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中国儿童保健杂志 2016年第9期24卷 928-930,936页

作者：刘秀梅王学明衣明纪烟台毓璜顶医院儿科山东烟台264000 烟台毓璜顶医院烧伤整形美容科山东烟台264000 青岛大学医学院附属医院儿童保健科山东青岛266021

目的考察骨髓间充质干细胞(MSC)移植对Tourette综合征(TS)大鼠纹状体内脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨MSC移植治疗TS的作用机制。方法采用立体定向技术向大鼠纹状体内微量灌注抗基底神经节抗体(ABGA),制备自身免疫TS动物模型... 详细信息

目的考察骨髓间充质干细胞(MSC)移植对Tourette综合征(TS)大鼠纹状体内脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响,探讨MSC移植治疗TS的作用机制。方法采用立体定向技术向大鼠纹状体内微量灌注抗基底神经节抗体(ABGA),制备自身免疫TS动物模型;采用密度梯度离心法在体外分离、培养和扩增大鼠MSC,经流式细胞仪鉴定后将MSC标记并移植到TS大鼠纹状体内。通过ELISA及RT-PCR技术检测大鼠脑内BDNF水平。结果将MSC移植到TS大鼠纹状体内,自移植后7d开始观察到TS大鼠的刻板行为减少。TS大鼠纹状体内BDNF水平升高(P<0.05);MSC移植后TS大鼠纹状体内BDNF含量下降。结论 MSC移植能减少TS大鼠的刻板行为、降低TS大鼠体内的BDNF含量。

关键词：骨髓间充质干细胞移植 Tourette综合征脑源性神经营养因子