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三磷酸腺苷酶家族蛋白2在不同病变肝组织中的表达意义及临床应用探讨

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中华肝脏病杂志 2017年第5期25卷 339-343页

作者：刘芬周璇季惠惠李宏项锋钢青岛大学基础医学院病理学教研室 266021 青岛大学附属医院病理科 266003

目的探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白2（ATAD2）在不同病变肝组织中的表达情况及其临床应用价值。方法用免疫组织化学法检测ATAD2在60例肝细胞肝癌手术标本（其中49例合并肝硬化）、43例肝细胞肝癌穿刺标本、2例肝脏高级别异型增生结节标本、... 详细信息

目的探讨三磷酸腺苷酶家族蛋白2（ATAD2）在不同病变肝组织中的表达情况及其临床应用价值。方法用免疫组织化学法检测ATAD2在60例肝细胞肝癌手术标本（其中49例合并肝硬化）、43例肝细胞肝癌穿刺标本、2例肝脏高级别异型增生结节标本、3例肝脏低级别异型增生结节标本、50例肝硬化标本及20例相对正常肝组织标本中的表达情况。据资料不同分别采用F检验、q检验、t检验和χ2检验进行统计学分析。结果ATAD2在56例（93．33％）肝细胞肝癌手术标本中有表达，在35例（81．40％）肝细胞肝癌穿刺标本中有表达，在2例（2／2）肝脏高级别异型增生结节组织中有表达；在肝脏低级别异型增生结节、肝硬化及相对正常肝组织中均不表达。ATAD2在肝细胞肝癌中的平均表达量明显高于肝脏高级别异型增生结节、肝脏低级别异型增生结节、肝硬化及相对正常肝组织，差异均具有统计学意义（F=22．96，口值分别为3．138、3．972、12．272、9．101，P值均〈0．01）。ATAD2在肝细胞肝癌手术标本及穿刺标本中的平均表达量及阳性表达率差异均无统计学意义（t=1．40，P〉0．05；χ2=3．47，P〉0．05）。35例表达ATAD2的肝细胞肝癌穿刺组织中有35例（100％）平均表达量≥1％，27例（77．14％）平均表达量≥3％，23例（65．71％）平均表达量≥5％。其中，在病理分级为Ⅰ～Ⅱ级的肝细胞肝癌穿刺组织中有28例（100％）平均表达量≥1％，22例（62．86％）平均表达量≥3％，19例（54．29％）平均表达量≥5％。此外，ATAD2在肝细胞肝癌中的表达水平与患者血清甲胎蛋白（AFP）水平、是否携带乙型肝炎表面抗原，以及是否合并肝硬化具有相关性（t值分别为2．09、2．30、2．18，P值均〈0．05）。结论ATAD2在肝细胞肝癌的发生中可能起重要作用，并参与了细胞的恶性转化，ATAD2的表达对判断临床肝穿刺组织的病变性质具有较高的参考价值。

关键词：癌肝细胞肿瘤发生诊断 ATAD2

外周细胞淋巴瘤中TET2和DNMT3A的表达及意义

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临床与实验病理学杂志 2017年第4期33卷 388-392页

作者：孙孟琦王丽丽冉雯雯李宏邢晓明青岛大学基础医学院病理学教研室青岛266071 青岛大学附属医院病理科青岛266003

目的探讨TET2和DNMT3A在外周T细胞淋巴瘤(peripheral T-cell lymphoma,PTCL)中的表达及其与PTCL免疫表型的关系。方法应用CD3、CD4、CD10、BCL-6、CXCL-13、CD30、ALK免疫标记将PTCL分为血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤(angioimmu-noblastic Tcelll ymphoma,AITL)、外周T细胞淋巴瘤,非特指(peripheral T-cell lymphoma,not otherwise specified,PTCL-NOS)、ALK阳性的间变性大细胞淋巴瘤(ALK+ anaplastic large cell lymphoma,ALK^+ ALCL)和ALK阴性的间变性大细胞淋巴瘤(ALK-anaplastic large cell lymphoma,ALK^- ALCL)4种类型。应用免疫组化法检测PTCL组织中TET2和DNMT3A的表达。结果 89例PTCL中,AITL 36例,PTCL-NOS 26例,ALK^- ALCL 18例,ALK^+ ALCL 9例。在AITL组织中,TET2胞质表达和DNMT3A胞质及胞核表达的高表达率均高于PTCL-NOS和ALCL,差异有统计学意义(P均<0.05)。TET2胞质表达和DNMT3A胞质及胞核表达在AITL中均呈正相关(P<0.05)。结论 TET2和DNMT3A可以作为诊断AITL的分子标志物,为AITL的明确诊断提供新策略。

关键词：淋巴瘤外周T细胞淋巴瘤 TET2 DNMT3A 免疫组织化学

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肾脏原发性神经内分泌癌的临床病理学特征

中华病理学杂志 2018年第11期47卷 851-856页

作者：王晓辉卢晓何冰蒋艳霞于文娟王晗张伟李玉军青岛大学基础医学院病理学教研室 266003 解放军第四0一医院病理科

目的探讨。肾脏原发性神经内分泌癌（NEC）的临床病理特征、诊断和预后。方法收集2008年1月至2017年12月青岛大学附属医院和解放军第四。一医院确诊的肾脏原发性NEC8例，按照WHO（2016）泌尿系统与男性生殖器官肾肿瘤分类，采用HE及免... 详细信息

目的探讨。肾脏原发性神经内分泌癌（NEC）的临床病理特征、诊断和预后。方法收集2008年1月至2017年12月青岛大学附属医院和解放军第四。一医院确诊的肾脏原发性NEC8例，按照WHO（2016）泌尿系统与男性生殖器官肾肿瘤分类，采用HE及免疫组织化学进行观察，结合文献分析其临床病理学特点。结果患者男3例，女5例，年龄27-66岁。平均年龄45岁。左肾5例，右肾3例。5例因体检发现，3例因腰痛就诊。组织学上，8例NEC包括：高分化神经内分泌肿瘤5例（类癌3例，不典型类癌2例）、小细胞NEC2例，大细胞NEC1例。8例中6例侵犯肾被膜，5例伴有坏死，3例间质脉管内查见癌栓，1例出现腔静脉淋巴结转移。免疫组织化学染色：神经内分泌标志物CD56、嗜铬粒素A（CgA）、突触素的阳性表达比例分别为6／8、4／8和8／8，其中8例NEC同时不同程度表达上皮性标志物广谱细胞角蛋白（CKpan，6／8；3例灶状）、CAM5．2（4／8）。Ki-67阳性指数在类癌中≤3％，2例不典型类癌分别为5％和8％，而小细胞癌和大细胞癌均≥50％。所有病例对上皮细胞膜抗原（EMA）、细胞角蛋白（CK）7、碳酸酐酶Ⅸ（CA9）、CD10、CD117、PAX2、PAX8、可汀1、p63、S-100蛋白和甲状腺转录因子（TTF）1均不表达。8例NEC患者除3例（2例小细胞癌、1例大细胞癌）分别于术后3、4和9个月因广泛转移死亡外，余5例随访1-9年均健在，未见复发、远处转移。结论肾脏原发性NEC为罕见的肾肿瘤，组织学类型以类癌最多见。依靠病理形态学特点并联合应用神经内分泌标志物（CD56、CgA、突触素）、上皮性标志物（CKpan、CAM5.2）以及肾源性标志物（PAX2、PAX8）对该类肿瘤的诊断及鉴别诊断具有重要意义。肾脏类癌属于低度侵袭性肿瘤，容易出现早期转移，但总体预后良好。小细胞癌和大细胞癌为高度恶性的肾肿瘤，预后极差，生存期很短。

关键词：肾肿瘤神经内分泌癌免疫组织化学预后

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快速石蜡法在胸腹水细胞蜡块制作中应用

临床与实验病理学杂志 2012年第7期28卷 820-821页

作者：付海洋王成勤赵洁青岛大学医学院附属医院病理科青岛266003 青岛大学医学院病理学教研室青岛266003

胸腹水检查具有简便、快速、易行等优点，但常规胸腹水涂片的阳性率普遍偏低，涂片上肿瘤细胞量少且不适用于后期的饱疫绀化峪别诊断，给肿瘤疾病的鉴别诊断带来了一定，

关键词：胸腹水细胞蜡块快速石蜡制片免疫组化

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乳腺癌免疫组化全自动染色与手工染色的体会

临床与实验病理学杂志 2014年第1期30卷 96-98页

作者：赵洁王成勤赵涵董娴宁青岛大学附属医院病理科 266002 青岛大学医学院病理教研室 266000

随着免疫组织化学（immunohistochemicaltechnique，IHC）技术的不断发展，该技术已成为病理诊断极为重要的诊断方式之一。尤其是乳腺癌的靶向治疗，对IHC的准确性提出了检测技术的规范标准化和实验结果评价的标准化。为使手工操作在染... 详细信息

随着免疫组织化学（immunohistochemicaltechnique，IHC）技术的不断发展，该技术已成为病理诊断极为重要的诊断方式之一。尤其是乳腺癌的靶向治疗，对IHC的准确性提出了检测技术的规范标准化和实验结果评价的标准化。为使手工操作在染色质量及判读上更能接近全自动染色机的水平，以确保免疫组化染色结果的可靠性及重复性。本文选择乳腺浸润性癌标本，通过手工操作和全自动免疫组化染色机对常用的免疫指标进行染色，在染色质量上做以下探讨。

关键词：乳腺肿瘤全自动染色手工染色

泌乳素瘤性ED大鼠阴茎组织nNOS表达及超微结构变化的初步研究

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中华男科学杂志 2015年第10期21卷 871-876页

作者：翁博文侯四川祝海徐珞栾晓綦海燕王伟民刘伟孙立江青岛大学医学院附属青岛市市立医院泌尿外科山东青岛266003 青岛大学医学院病理生理教研室山东青岛266003 青岛大学医学院附属青岛市市立医院神经外科山东青岛266003 青岛大学医学院附属医院泌尿外科山东青岛266003

目的:采用已烯雌酚(DES)诱导建立大鼠垂体泌乳素瘤勃起功能障(P-ED)模型,并研究泌乳素瘤ED大鼠阴茎n NOS表达及超微结构的变化。方法:取雄性Wistar大鼠,分为生理盐水对照组10只、花生油对照组10只及模型组20只。模型组腹腔内注射DES建... 详细信息

目的:采用已烯雌酚(DES)诱导建立大鼠垂体泌乳素瘤勃起功能障(P-ED)模型,并研究泌乳素瘤ED大鼠阴茎n NOS表达及超微结构的变化。方法:取雄性Wistar大鼠,分为生理盐水对照组10只、花生油对照组10只及模型组20只。模型组腹腔内注射DES建立泌乳素瘤模型,8周后进行阿扑吗啡(APO)试验测定阴茎勃起功能筛选出P-ED大鼠模型。取垂体行病理学检查,并测定垂体质量、血清泌乳素(PRL)及睾酮(T)浓度。免疫组化法测定阴茎组织n NOS表达的变化,透射电镜观察阴茎海绵体组织超微结构变化。结果:APO试验共筛选出P-ED大鼠模型15只。与生理盐水及花生油对照组相比,注射DES 8周时大鼠垂体质量显著升高[(46.7±15.5)mg vs(11.7±2.4)、(12.4±2.3)mg,P均<0.05)];血清PRL浓度显著升高[(1 744.9±304.5)ng/ml vs(11.5±2.4)、(10.6±1.9)ng/ml,P均<0.01)];FT浓度降低[(1.54±0.46)ng/ml vs(3.11±1.08)、3.04±1.11)ng/ml,P均<0.05)]。与生理盐水及花生油对照组相比,注射DES 8周时大鼠阴茎勃起次数显著减少(16.7%vs 100%、vs 87.5%,P<0.05)。透射电镜下,8周时阴茎海绵体内皮细胞、平滑肌细胞等均有显著改变。与生理盐水及花生油对照组相比,P-ED组8周时阴茎组织n NOS表达平均光密度值(MOD)显著减少(0.024±0.011 vs 0.066±0.019、0.058±0.021,P均<0.05)。结论:阴茎组织超微结构的变化及n NOS表达减少可能是泌乳素瘤大鼠发生ED的主要机制。

关键词：泌乳素瘤勃起功能障碍神经元型一氧化氮合酶超微结构大鼠

胃动素及其前体mRNA在正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织中表达的研究

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中华病理学杂志 2008年第4期37卷 243-249页

作者：徐珞钟凤郭菲菲赵文娟孙向荣魏晓芳青岛大学医学院病理生理教研室 266021 青岛大学医学院附属医院附属医院口腔系 266021 青岛大学医学院附属医院内科 266021

目的探讨胃动素和胃动素前体mRNA基因在正常人甲状腺的表达，比较人甲状腺胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列的异同；观察胃动素活性肽和胃动素前体mRNA在甲状腺肿瘤中的表达，并比较它们在良、恶性甲状腺肿瘤表达... 详细信息

目的探讨胃动素和胃动素前体mRNA基因在正常人甲状腺的表达，比较人甲状腺胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列的异同；观察胃动素活性肽和胃动素前体mRNA在甲状腺肿瘤中的表达，并比较它们在良、恶性甲状腺肿瘤表达的异同及临床意义。方法采用RT-PCR、Southern杂交和分子克隆等技术，克隆并测定人甲状腺和人小肠黏膜内胃动素前体mRNA基因序列；采用荧光免疫组织化学双染技术、Western印迹和即时荧光定量PCR（real-time PCR），观察胃动素和胃动素前体mRNA在正常甲状腺和甲状腺良、恶性肿瘤组织中表达的异同。结果（1）正常人甲状腺组织有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，且胃动素和降钙素共表达于同一细胞，即甲状腺C细胞；（2）人甲状腺组织内胃动素前体mRNA基因序列与基因库报道的人小肠胃动素前体mRNA基因序列（BC112314，NCBI，美国）完全相同；（3）免疫荧光组织化学、Western印迹以及real-time PCR结果均显示，正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织内均有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，其中甲状腺髓样癌和嗜酸性腺瘤胃动素及其前体mRNA的表达高于正常甲状腺组织（均P〈0．05）；但甲状腺乳头状癌和滤泡癌胃动素和胃动素前体mRNA的表达则明显降低（均P〈0．05）；而结节性甲状腺肿与正常甲状腺组织相比胃动素和胃动素前体mRNA的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论人甲状腺组织有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，且胃动素主要表达于甲状腺C细胞；人甲状腺组织胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列完全相同；甲状腺髓样癌和嗜酸性腺瘤内胃动素及其前体mRNA的表达明显增高，而甲状腺乳头状癌和滤泡癌内胃动素及其前体mRNA的表达明显降低。提示胃动素可能通过影响甲状腺滤泡旁细胞的分泌活动参与其生理活动的调节，胃动素可能与临床甲状腺髓样癌和甲状腺嗜酸性腺瘤疾病的发生和发展有关。

关键词：甲状腺疾病促胃动素降钙素

泌乳素瘤性阴茎勃起功能障碍大鼠阴茎各亚型一氧化氮合酶表达的变化

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中华实验外科杂志 2015年第7期32卷 1646-1649页

作者：翁博文祝海侯四川徐珞栾晓綦海燕刘之俊王伟民刘伟孙立江青岛大学医学院附属青岛市立医院泌尿外科 266003 青岛大学医学院病理生理学教研室青岛大学医学院附属青岛市立医院神经外科 266003

目的探讨泌乳素瘤性勃起功能障碍的发病机制.方法雄性Wistar大鼠腹腔内注射乙烯雌酚（DES）建立泌乳素瘤模型.8周通过阿扑吗啡（APO）实验筛选,建立泌乳素瘤性阴茎勃起功能障碍（P-ED）模型,应用免疫组织化学方法测定大鼠阴茎组织神... 详细信息

目的探讨泌乳素瘤性勃起功能障碍的发病机制.方法雄性Wistar大鼠腹腔内注射乙烯雌酚（DES）建立泌乳素瘤模型.8周通过阿扑吗啡（APO）实验筛选,建立泌乳素瘤性阴茎勃起功能障碍（P-ED）模型,应用免疫组织化学方法测定大鼠阴茎组织神经型一氧化氮合酶（nNOS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达水平的变化.结果 DES注射8周后,垂体泌乳素瘤成模率为100％,P-ED成模率为75％.与对照组比较,注射DES 8周时大鼠垂体质量明显增加;血清泌乳素（PRL）水平升高而游离睾酮（FT）水平降低;阴茎勃起次数显著减少.阴茎组织nNOS、eNOS表达降低而iNOS表达增加.结论 P-ED大鼠模型阴茎组织nNOS、eNOS表达减少而iNOS表达增加.

关键词：勃起功能障碍泌乳素瘤神经型一氧化氮合酶内皮型一氧化氮合酶诱导型一氧化氮合酶

曲格列酮对前列腺癌PC-3细胞转移潜能影响分子机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2014年第14期21卷 1094-1098,1103页

作者：祝海翁博文朱磊一于小玲徐珞孙小庆贾勇侯四川綦海燕青岛大学医学院附属青岛市市立医院泌尿外科山东青岛266011 青岛大学医学院病理生理学教研室山东青岛266011

目的:探讨曲格列酮对人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:PC-3细胞经不同浓度曲格列酮(0、1×10-6、1×10-5和1×10-4 mol/L)处理后,采用MTT法检测各组细胞增殖水平;细胞划痕实验和细胞侵袭试验检测侵袭及迁移能力的改变;... 详细信息

目的:探讨曲格列酮对人前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法:PC-3细胞经不同浓度曲格列酮(0、1×10-6、1×10-5和1×10-4 mol/L)处理后,采用MTT法检测各组细胞增殖水平;细胞划痕实验和细胞侵袭试验检测侵袭及迁移能力的改变;蛋白质印迹法检测细胞Id1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平。结果:MTT检测显示,不同浓度曲格列酮对PC-3细胞抑制作用明显,并呈浓度和时间依赖性,P室的细胞数为88.83±17.02,1×10-5 mol/L组为71.67±9.44,1×10-4 mol/L组为54.50±9.35,明显低于对照组的142.00±17.40,差异有统计学意义,P<0.001,且呈显著剂量依赖关系,F=44.72,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,对照组Id1蛋白相对表达量为12.67±7.23,1×10-6 mol/L组为24.67±6.51,1×10-5 mol/L组为36.67±6.11,1×10-4 mol/L组为49.33±4.93;对照组MMP-2蛋白相对表达量为9.00±4.36,1×10-6 mol/L组为25.33±8.62,1×10-5 mol/L组为42.00±7.55,1×10-4 mol/L组为58.67±12.06;对照组MMP-9蛋白相对表达量为13.00±3.61,1×10-6 mol/L组为25.67±6.43,1×10-5 mol/L组为38.33±8.96,1×10-4 mol/L组为53.67±6.43。曲格列酮显著下调PC-3细胞Id1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平,P值均<0.05。结论:曲格列酮能有效抑制PC-3细胞增殖与侵袭迁移,同时下调Id1、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。

关键词：前列腺肿瘤侵袭细胞增殖细胞分化抑制因子1