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雷帕霉素脂质体滴眼液对大鼠角膜新生血管抑制作用的研究

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中华眼科杂志 2009年第2期45卷 146-152页

作者：赵桂秋张振华梁涛张丽娜刘建伟杜兆东青岛大学医学院附属医院眼科 266021 青岛大学医学院附属第二医院眼科

目的探讨雷帕霉素（RAPA）对大鼠角膜新生血管（CNV）的抑制作用及其机制。方法采刚成组设计法，将102只健康Wistar大鼠按随机数字法分为正常对照组（A组，6只）、碱烧伤空白对照组（B组，24只）、碱烧伤空白脂质体对照组（C组，24只）... 详细信息

目的探讨雷帕霉素（RAPA）对大鼠角膜新生血管（CNV）的抑制作用及其机制。方法采刚成组设计法，将102只健康Wistar大鼠按随机数字法分为正常对照组（A组，6只）、碱烧伤空白对照组（B组，24只）、碱烧伤空白脂质体对照组（C组，24只）、碱烧伤RAPA脂质体治疗组（D组，24只），碱烧伤RAPA豆油治疗组（E组，24只），除正常对照组外，均选用右眼制作碱烧伤模型。利用薄膜分散法制备RAPA脂质体滴眼液，以正交设计法研究制备工艺中影响脂质体制备质量的主要影响因素，筛选出较理想的处方。碱烧伤后每日裂隙灯显微镜观察眼局部情况，并详细记录碱烧伤后大鼠角膜反应情况与新生血管生长情况，采用免疫组织化学方法与半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测角膜组织缺氧诱导因子1α（HIF-1α）与血管内皮生长因子（VEGF）的表达。实验结果采用方差分析与组间q检验进行统计学分析。结果（1）制得的RAPA脂质体为完整的类球形，平均粒径为145．2nm，包封率为90．02％；RAPA脂质体滴眼液中RAPA含量高，粒径合适。（2）B、C、D、E组碱烧伤后14d，CNV面积为（28．289±0．703）、（28．005±0．801）、（20．002±1．005）、（22．300±0．853）mm^2（F=159．62，P〈0．05）；D、E组分别与B、C组相比，CNV生长迟缓、稀疏，退化较早，相应组间CNV面积分别比较差异有统计学意义（q=47．80、46．20、34．60、32．90，均P=0．00）；D组与E组间比较，CNV退化更早，面积更小，差异有统计学意义（q=13．20，P=0．00）。碱烧伤后，HIF-1αmRNA、VEGFmRNA、HIF—1α蛋白、VEGF蛋白表达显著增强；其中，D、E组的HIF-1α、VEGF表达被显著抑制，D组变化更明显。结论脂质体是RAPA良好的药物载体。RAPA能通过HIF-1与VEGF途径显著抑制CNV的生长，有望成为防治CNV的一种有效方法。

关键词：西罗莫司缺氧诱导因子1α亚基血管内皮生长因子A 角膜新牛血管化脂质体

脂质运载蛋白2及其受体与子痫前期发病的关系

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中华妇产科杂志 2012年第6期47卷 418-421页

作者：曹文红陈维萍李静叶元华青岛大学医学院附属医院产科 266003 青岛大学医学院附属医院妇科 266003

目的研究脂质运载蛋白2（LCN-2）及其受体（NGALR）与子痫前期发病的关系。方法选择2010年12月至2011年4月在青岛大学医学院附属医院住院分娩的轻度子痫前期孕妇26例（轻度子痫前期组），重度子痫前期孕妇38例（重度子痫前期组）；以同... 详细信息

目的研究脂质运载蛋白2（LCN-2）及其受体（NGALR）与子痫前期发病的关系。方法选择2010年12月至2011年4月在青岛大学医学院附属医院住院分娩的轻度子痫前期孕妇26例（轻度子痫前期组），重度子痫前期孕妇38例（重度子痫前期组）；以同期正常晚期妊娠妇女25例为对照组。采用ELISA方法检测各组孕妇血清LCN-2水平，采用逆转录PCR技术检测各组孕妇胎盘组织中LCN-2、NGALRmRNA的表达水平，采用蛋白印迹法检测胎盘组织中LCN-2、NGALR蛋白的表达水平。结果（1）轻度及重度子痫前期组孕妇血清LCN-2水平分别为（58±20）、（90±18）μg／L，均明显高于对照组的（19±6）μg/L，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期组，两组比较，差异有统计学意义（P〈0．01）。（2）轻度及重度子痫前期组孕妇胎盘组织中LCN-2mRNA表达水平分别为0．55±0．14、0．61±0．14，均明显高于对照组（0．28±0．16），分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；轻度及重度子痫前期组孕妇胎盘组织中LCN-2蛋白表达水平分别为2．2±0．4、2．4±0．5，均明显高于对照组的1．4±0．4，分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。（3）轻度及重度子痫前期组孕妇胎盘组织中NGALRmRNA表达水平分别为0．46±0．11、0．46±0．14，对照组为0．45±0．15，分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）；轻度及重度子痫前期组孕妇胎盘组织中NGALR蛋白表达水平分别为2．7±0．8、3．0±0．9，对照组为2．7±0．9，分别比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。（4）轻度及重度子痫前期组孕妇血清LCN-2水平与胎盘组织LCN-2mRNA、蛋白的表达水平及收缩压、舒张压均无明显相关性（P〉0．05），与24h尿蛋白总量及血尿酸水平有相关性（r=0．565、0．476，P〈0．01）。结论血清LCN-2水平与子痫前期病情进展密切相关；胎盘组织LCN-2表达增高可能是对子痫前期的代偿反应。

关键词：先兆子痫脂笼蛋白质类受体,肽胎盘急相蛋白质类原癌基因蛋白质类

室性期前收缩儿童远期心脏贮备能力及整体运动功能的研究

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中国康复医学杂志 2006年第11期21卷 993-995页

作者：曲政海青岛大学医学院附属医院儿科青岛266003

目的:评价心脏结构正常的室性期前收缩儿童的心脏贮备能力和整体运动功能。方法:123例常规心电图证实的室性期前收缩儿童,经物理查体、超声心动图、心肌酶检查除外器质性心脏疾病,随机分为治疗组50例和非治疗组73例。治疗组采用抗心律... 详细信息

目的:评价心脏结构正常的室性期前收缩儿童的心脏贮备能力和整体运动功能。方法:123例常规心电图证实的室性期前收缩儿童,经物理查体、超声心动图、心肌酶检查除外器质性心脏疾病,随机分为治疗组50例和非治疗组73例。治疗组采用抗心律失常治疗。观察室性期前收缩的自然消失情况,并对部分患儿进行踏车运动试验,测定极量运动时的心率、收缩压、舒张压及其贮备和总运动功量。结果:经1—6年随访,心脏结构正常的室性期前收缩儿童期前收缩自然消失率在治疗组44.4%,非治疗组42.5%,组间比较差异无显著性意义;踏车运动试验表明,治疗组与非治疗组间极量运动时的心率、收缩压、舒张压及其贮备和总运动功量均无显著性差异(P>0.05)。结论:心脏结构正常儿童的室性期前收缩的抗心律失常治疗后,不能提高室性期前收缩的自然消失率;对心脏贮备功能无明显影响,对儿童的整体运动功能弊可能大于利;运动试验对评价室性期前收缩儿童的运动风险有重要作用。

关键词：室性期前收缩心脏贮备心率血压运动试验运动功量

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复旦学报（医学版） 2006年第5期33卷 606-609页

作者：董跃福王德春胡有谷齐宗华青岛大学医学院附属医院骨科-山东省创伤骨科研究所青岛266003

目的构建人血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)表达载体包装质粒pSNAV-VEGF165,并体外检测pSNAV-VEGF165表达和生物学活性。方法采用分子克隆技术,从pcDNA3(+)-VEGF165质粒获得VEGF165cDNA,并克隆至AAV包装质粒pSNAV上,构建pSNAV-VEGF165的AAV重组质粒,经酶切及测序鉴定正确,用脂质体介导pSNAV-VEGF165转染HEK293细胞和血管内皮细胞(vascular endothelial cell,VEC),荧光免疫组化方法检测VEGF165蛋白,并用MTT法测定VEGF165对VEC增殖的影响。结果经酶切鉴定及基因测序证实AAV包装质粒pSNAV-VEGF165构建成功,荧光免疫组化显示VEGF165蛋白的表达,对照组未见VEGF165蛋白的表达,MTT法显示VEGF165蛋白对VEC增殖有促进作用。结论构建的AAV包装质粒pSNAV-VEGF165在体外具有生物学活性,可作为AAV-VEGF165表达载体的包装质粒。

关键词：血管内皮生长因子腺相关病毒 HEK293细胞血管内皮细胞

胃动素及其前体mRNA在正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织中表达的研究

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中华病理学杂志 2008年第4期37卷 243-249页

作者：徐珞钟凤郭菲菲赵文娟孙向荣魏晓芳青岛大学医学院病理生理教研室 266021 青岛大学医学院附属医院附属医院口腔系 266021 青岛大学医学院附属医院内科 266021

目的探讨胃动素和胃动素前体mRNA基因在正常人甲状腺的表达，比较人甲状腺胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列的异同；观察胃动素活性肽和胃动素前体mRNA在甲状腺肿瘤中的表达，并比较它们在良、恶性甲状腺肿瘤表达... 详细信息

目的探讨胃动素和胃动素前体mRNA基因在正常人甲状腺的表达，比较人甲状腺胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列的异同；观察胃动素活性肽和胃动素前体mRNA在甲状腺肿瘤中的表达，并比较它们在良、恶性甲状腺肿瘤表达的异同及临床意义。方法采用RT-PCR、Southern杂交和分子克隆等技术，克隆并测定人甲状腺和人小肠黏膜内胃动素前体mRNA基因序列；采用荧光免疫组织化学双染技术、Western印迹和即时荧光定量PCR（real-time PCR），观察胃动素和胃动素前体mRNA在正常甲状腺和甲状腺良、恶性肿瘤组织中表达的异同。结果（1）正常人甲状腺组织有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，且胃动素和降钙素共表达于同一细胞，即甲状腺C细胞；（2）人甲状腺组织内胃动素前体mRNA基因序列与基因库报道的人小肠胃动素前体mRNA基因序列（BC112314，NCBI，美国）完全相同；（3）免疫荧光组织化学、Western印迹以及real-time PCR结果均显示，正常人甲状腺和甲状腺肿瘤组织内均有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，其中甲状腺髓样癌和嗜酸性腺瘤胃动素及其前体mRNA的表达高于正常甲状腺组织（均P〈0．05）；但甲状腺乳头状癌和滤泡癌胃动素和胃动素前体mRNA的表达则明显降低（均P〈0．05）；而结节性甲状腺肿与正常甲状腺组织相比胃动素和胃动素前体mRNA的表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论人甲状腺组织有胃动素和胃动素前体mRNA的表达，且胃动素主要表达于甲状腺C细胞；人甲状腺组织胃动素前体mRNA基因序列与人小肠胃动素前体mRNA基因序列完全相同；甲状腺髓样癌和嗜酸性腺瘤内胃动素及其前体mRNA的表达明显增高，而甲状腺乳头状癌和滤泡癌内胃动素及其前体mRNA的表达明显降低。提示胃动素可能通过影响甲状腺滤泡旁细胞的分泌活动参与其生理活动的调节，胃动素可能与临床甲状腺髓样癌和甲状腺嗜酸性腺瘤疾病的发生和发展有关。

关键词：甲状腺疾病促胃动素降钙素

维生素D治疗全面性发育迟缓患儿的临床疗效研究

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中国全科医学 2025年第3期28卷 346-351页

作者：牛国辉谢加阳朱登纳崔博赵会玲王明梅冯欢欢张萌萌李停停郑州大学第三附属医院康复医学科河南省郑州市450052 河南省儿科疾病临床医学研究中心河南省郑州市450052 河南省小儿脑损伤重点实验室河南省郑州市450052 郑州大学第三附属医院小儿神经科河南省郑州市450052

背景除了某些有明确病因的代谢性疾病导致的全面性发育迟缓(GDD),康复治疗是GDD的主要治疗方式;维生素D通过影响神经营养因子在调节神经细胞的发育和分化方面发挥着重要的神经保护作用;但目前关于补充维生素D对GDD患儿临床疗效的研究... 详细信息

背景除了某些有明确病因的代谢性疾病导致的全面性发育迟缓(GDD),康复治疗是GDD的主要治疗方式;维生素D通过影响神经营养因子在调节神经细胞的发育和分化方面发挥着重要的神经保护作用;但目前关于补充维生素D对GDD患儿临床疗效的研究开展较少。目的探讨补充不同剂量的维生素D对GDD患儿康复治疗的临床效果。方法于2020年9月—2022年6月选取在郑州大学第三附属医院康复医学科首次住院就诊的120例GDD患儿为研究对象,采用随机区组化的方法将其分为常规组(38例)、400 U组(37例)和1 200 U组(35例)。常规组仅进行常规康复治疗;400 U组在常规康复治疗的基础上给予口服400 U/d维生素D;1 200 U组在常规康复训练的基础上给予口服1 200 U/d维生素D。收集3组患儿的性别、就诊年龄等基本资料;于入院时(治疗前)及第3个疗程末(治疗后)行血清25羟维生素D[25(OH)D]水平检测和Gesell发育量表评估[评估适应能力、大运动能力、精细运动能力、语言能力和社交能力5个能区的发育商(DQ)];记录发生在患儿住院期间不良事件的次数,并对上述资料进行分析比较。结果 3组患儿性别、居住地、出生季节、分娩方式、就诊年龄、出生体质量、出生胎龄、主要就诊原因比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗前,3组患儿25(OH)D水平、Gesell量表各能区DQ值比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,1 200 U组患儿血25(OH)D水平、Gesell量表大运动能力、精细运动能力、语言能力DQ值高于常规组(P0.05);第3疗程期间,1 200 U组患儿不良事件发生率低于常规组及400 U组(P<0.05)。结论补充1 200 U维生素D对GDD患儿的康复疗效有益,且能减少康复期间不良事件的发生率。

关键词：儿童发育障碍广泛性全面性发育迟缓维生素D Gesell量表不良事件康复治疗神经保护

腰椎间盘后缘高信号区在诊断椎间盘源性腰痛中的意义

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中华医学杂志 2008年第35期88卷 2478-2481页

作者：王子轩胡有谷陈祥民青岛大学医学院附属市立医院介入放射科 266000 青岛大学医学院附属市立医院放射科 266000 青岛大学医学院附属医院骨科山东省创伤骨科研究所

目的观察腰椎间盘后缘高信号区（HIZ）的发生率并探讨HIZ与下腰痛的关系。方法统计1000例无选择腰椎MRI中HIZ发生率和200例有完整临床资料MRI中下腰痛组与无下腰痛组的HIZ发生情况。对11例16个HIZ椎间盘行CT椎间盘造影（CTD），观察CTD ... 详细信息

目的观察腰椎间盘后缘高信号区（HIZ）的发生率并探讨HIZ与下腰痛的关系。方法统计1000例无选择腰椎MRI中HIZ发生率和200例有完整临床资料MRI中下腰痛组与无下腰痛组的HIZ发生情况。对11例16个HIZ椎间盘行CT椎间盘造影（CTD），观察CTD Dallas分级与疼痛诱发试验的关系。结果腰椎间盘后缘HIZ发生率31．7％（317例），378个椎间盘。其中，L4、5和L5S1水平发生率最高（74．8％），HIZ左侧（153个）多于右侧（94个），可发生于上（15．4％）、中（28．8％）、下缘（55．8％），多节段HIZ 54例（17．0％）。200例HIZ中下腰痛者115例（57．5％），无下腰痛者85例（42．5％）。CTD DallasⅢ级者疼痛诱发试验多为阴性（6／7），Ⅳ级者多为阳性（8／9）。结论HIZ有无腰痛与椎间盘纤维环退变程度有关，当CTD检查退变至DallasⅣ级时多可出现腰痛。故HIZ仅提示椎间盘源性腰痛的可能性，确诊仍需辅以椎间盘造影。

关键词：腰痛磁共振成像椎间盘

儿童急性淋巴细胞白血病微量残留病细胞的DNA定量研究

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中华儿科杂志 1999年第6期37卷 356-358页

作者：卢洁谷仁凯佟琳如庞秀英孙立荣李学荣董增义宋如俊青岛大学医学院附属医院儿科

目的探讨定量监测儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微量残留病（ＭＲＤ）细胞ＤＮＡ变化的临床意义。方法采用５′端修饰引物，构建内参照竞争模板，建立竞争性聚合酶链反应（ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒ... 详细信息

目的探讨定量监测儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微量残留病（ＭＲＤ）细胞ＤＮＡ变化的临床意义。方法采用５′端修饰引物，构建内参照竞争模板，建立竞争性聚合酶链反应（ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ，ＣＰＣＲ）ＤＮＡ（ＣＰＣＲＤＮＡ）定量法，对７０例ＡＬＬ患儿进行了Ｔ细胞受体（Ｔｃｅｌｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＴＣＲ）Ｖδ２Ｄδ３基因重排定性检测及完全缓解（ＣＲ）期ＭＲＤ的动态定量研究。结果（１）ＴＣＲＶδ２Ｄδ３基因重排检出率：在７０例ＡＬＬ中占８１％，４８例ＢＡＬＬ中占８３％，４例ＴＡＬＬ中占１／４，后两者比较差异有显著意义（Ｐ＜００５）。（２）ＭＲＤＤＮＡ定量监测显示：①随ＣＲ期延长（除ＣＲ＜３个月者），ＭＲＤ水平呈逐年下降趋势，以ＣＲ４～１２个月ＭＲＤ水平最高，并与骨髓复发呈正相关。②９例复发者于复发前平均７个月即出现ＭＲＤ增高，分子水平的改变先于临床复发。③ＡＬＬ持续完全缓解（ＣＣＲ）３年以上，ＭＲＤ持续转阴或持续≤００５％，可作为终止化疗的可靠指标。结论（１）建立了一种简捷、敏感、准确的ＣＰＣＲＤＮＡ定量法；（２）用该ＣＰＣＲ方法定量监测ＭＲＤ变化，对判断?

关键词：白血病急性残留肿瘤 PCR 序列分析

人CTGF和TIMP1基因重组腺相关病毒双表达质粒的构建及其活性检测

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复旦学报（医学版） 2008年第3期35卷 401-406页

作者：魏见伟王德春胡有谷青岛大学医学院附属医院脊柱外科-山东省创伤骨科研究所青岛266003

目的构建人结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinases1,TI MP1)基因腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)表达质粒,并观察其在HEK293细胞中的表达,检测目的蛋白的生物学活性。方法采用PCR技术,分别设计引物扩增所需序列并进行PCR鉴定。再采用分子克隆的方法,以内部核糖体进入位点(internal ribosome entry sites,IRES)序列连接CTGF和TI MP1并克隆到AAV表达质粒pSNAV2.0构建重组质粒pSNAV2-CTGF-IRES-TI MP1。把重组质粒转染HEK293细胞,用双重免疫荧光和Western blot的方法对重组质粒的表达进行研究,MTT法检测细胞培养上清液中CTGF蛋白的生物学活性,ELISA法检测细胞培养上清液中TI MP1蛋白的含量。结果PCR、酶切、DNA测序等方法均证实成功构建了含有完全正确的CTGF和TI MP1基因序列的AAV表达质粒。双重免疫荧光和Western blot检测到目的蛋白的表达,转染后的细胞上清具有促使成纤维细胞增殖的生物学活性,ELISA法结果证实重组载体能够高表达TI MP1蛋白。结论成功构建了双表达质粒pSNAV2-CTGF-IRES-TI MP1,转染HEK293细胞后能够表达具有生物学活性的目的蛋白,为基因治疗椎间盘退变的研究工作奠定了基础。

关键词：结缔组织生长因子基质金属蛋白酶组织抑制剂1 基因载体腺相关病毒椎间盘