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miR-515-5p靶向ITLN2对子宫内膜基质细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第1期44卷 44-50页

作者：刘庄孙颖王钦张琳李泽武济宁医学院附属医院生殖医学科济宁272029 济宁医学院附属医院麻醉科济宁272029

目的探讨微小RNA-515-5p(miR-515-5p)是否可靶向内凝集素2(lectin 2,ITLN2)影响子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)的增殖、迁移和侵袭。方法收集2020年12月至2021年12月期间在济宁医学院附属医院生殖医学科就诊治疗的24例EMT患者的在位内膜和异位内膜组织及18例行腹腔镜手术的非EMT患者的正常内膜组织。RT-qPCR检测内膜组织miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting法检测内膜组织中ITLN2蛋白表达量。原代分离、培养EMT患者的ESCs,利用Lipofectamine 2000试剂转染ESCs,并将其分为空白组、miR-515-5p抑制剂组、miR-515-5p抑制剂阴性对照(negative control,NC)组,CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕愈合和Transwell实验分别评估细胞迁移、侵袭能力;双荧光素酶报告基因检测miR-515-5p和ITLN2的靶向关系;RT-qPCR技术检测各组细胞miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting技术检测ITLN2、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白相对表达量。结果EMT患者在位和异位子宫内膜组织miR-515-5p相对表达量显著高于正常子宫内膜组织(均P<0.001),ITLN2 mRNA相对表达量显著低于正常子宫内膜组织,异位子宫内膜组织ITLN2 mRNA相对表达量显著低于在位子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者异位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于EMT在位和正常子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者在位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于正常子宫内膜组织(P<0.001)。miR-515-5p抑制剂组细胞存活率[(54.71±2.78)%]、划痕愈合率[(38.31±3.78)%]及侵袭数[(286.67±25.15)个]、miR-515-5p相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量均显著低于空白组[(100.00±0.00)%,P<0.001;(84.08±5.14)%,P<0.001;(515.67±22.19)个,P<0.001;P<0.001;P=0.012;P=0.010;P<0.001],ITLN2 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于空白组(P<0.001;P<0.001)。经生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测,ITLN2为miR-515-5p的潜在靶基因。结论降低miR-515-5p水平可抑制EMT患者ESCs增殖、迁移和侵袭,这可能与靶向提高ITLN2表达进而降低炎症因子水平有关。

关键词：子宫内膜异位症微小RNA-515-5p 内凝集素2 子宫内膜基质细胞增殖迁移侵袭

m^(6)A甲基化修饰调控肿瘤免疫的研究进展

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上海交通大学学报（医学版） 2024年第1期44卷 137-144页

作者：周海霞张靖上海交通大学医学院附属第六人民医院消化科上海200233

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m^(6)A)是一种调控真核细胞基因表达最常见的修饰方式,影响RNA的剪接、降解、稳定性以及蛋白翻译等过程。研究表明m^(6)A甲基化修饰与肿瘤发生发展密切相关,在肿瘤免疫应答的相关过程中也发挥着重要的... 详细信息

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m^(6)A)是一种调控真核细胞基因表达最常见的修饰方式,影响RNA的剪接、降解、稳定性以及蛋白翻译等过程。研究表明m^(6)A甲基化修饰与肿瘤发生发展密切相关,在肿瘤免疫应答的相关过程中也发挥着重要的调控作用。m^(6)A修饰参与调节免疫细胞的分化、成熟过程以及相关的抗肿瘤免疫反应。在肿瘤微环境中,m^(6)A修饰也可影响免疫细胞的募集、活化和极化等,从而促进或抑制肿瘤细胞的增殖与转移,起到重塑肿瘤免疫微环境的重要作用。近年来肿瘤的免疫治疗逐渐应用于临床,如免疫检查点抑制剂治疗、过继性细胞免疫治疗等,都取得了较好的临床效果。通过靶向m^(6)A修饰来干预机体免疫系统,如通过小分子抑制剂靶向失调的m^(6)A调控因子、诱导免疫细胞重编程等,可提高抗肿瘤免疫反应,加强免疫细胞对肿瘤细胞的识别和杀伤能力。m^(6)A修饰是肿瘤免疫治疗的一个新方向,具有潜在的临床应用价值。该文围绕m^(6)A甲基化修饰对免疫细胞及肿瘤免疫应答的调控作用进行综述,探讨其免疫治疗的新思路。

关键词： m^(6)A甲基化肿瘤免疫免疫治疗

内镜黏膜下剥离术治疗环周食管表浅癌的疗效及安全性分析

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中华消化内镜杂志 2024年第2期41卷 117-120页

作者：窦晓坛吴建海周婷郭慧敏陈敏杨天凌亭生张晓琦吕瑛王雷邹晓平南京大学医学院附属鼓楼医院消化科南京210008 厦门大学附属第一医院消化科厦门361000 江苏省中医院消化内镜中心南京210029

目的评价内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)治疗环周食管表浅癌的疗效及安全性。方法2015年1月至2019年12月间,因环周食管表浅鳞癌在南京大学医学院附属鼓楼医院行ESD治疗的74例连续病例纳入回顾性分析,主要观察... 详细信息

目的评价内镜黏膜下剥离术(endoscopic submucosal dissection,ESD)治疗环周食管表浅癌的疗效及安全性。方法2015年1月至2019年12月间,因环周食管表浅鳞癌在南京大学医学院附属鼓楼医院行ESD治疗的74例连续病例纳入回顾性分析,主要观察ESD操作成功率、治愈性切除率、并发症发生情况以及追加治疗情况。结果1例患者中转外科手术,其余73例顺利完成ESD治疗,ESD操作成功率为98.6%。ESD术后病理提示39例达治愈性切除,ESD治愈性切除率为53.4%(39/73)。15例(20.5%)发生术中肌层损伤,1例(1.4%)发生术中穿孔,2例(2.7%)发生迟发性出血,1例(1.4%)发生迟发性穿孔。有11例失访,其余62例获得随访资料,随访时间(36.4±19.0)个月,其中12例追加外科手术,5例追加放化疗。在未行手术且获得随访资料的57例患者中,有49例发生ESD术后食管狭窄,ESD术后食管狭窄发生率为86.0%。结论ESD治疗环周食管表浅癌总体安全,但术中易发生肌层损伤,且治愈性切除率不高,术后食管狭窄发生率高,追加外科手术比例高。

关键词：食管肿瘤食管表浅癌环周病变内镜黏膜下剥离术食管狭窄

前扣带回至伏隔核GABA能神经通路调控小鼠肠易激综合征及潜在机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第5期40卷 815-826页

作者：郭瑞晓高胜利冯旭菲刘华明星孙金秋栾心驰刘震宇刘蔚毅郭菲菲青岛大学基础医学院生理学与病理生理学系山东青岛266071 青岛大学生物医学中心山东青岛266071 青岛大学附属医院消化内科山东青岛266071 青岛大学青岛医学院山东青岛266071

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和... 详细信息

目的:探讨前扣带回(ACC)至伏隔核(NAc)的γ-氨基丁酸(GABA)能神经通路对小鼠肠易激综合征(IBS)的调控作用及潜在机制。方法:(1)慢急性联合应激法(CACS)建立C57BL/6J小鼠IBS模型,分为正常组和IBS组(均n=8),通过行为学测试、肠动力实验和腹部退缩反射评分观察小鼠IBS样症状。(2)采用荧光金(FG)逆行追踪结合荧光免疫组织化学法检测ACC-NAc的GABA能通路和IBS小鼠ACC中GABA神经元兴奋性(均n=8)。(3)在正常和IBS小鼠NAc分别注射1.5μL生理盐水(NS)、GABA_A受体拮抗剂荷包牡丹碱(BIC)或激动剂异四氢烟酸(Isog),并据此将小鼠分为3组(均n=8):NS组、BIC组和Isog组,观察其IBS样症状。(4)采用化学遗传法将腺相关病毒载体AAV2/9-mDlx-iCre-WPRE-pA定向注射于ACC,AAV2/2Retro Plus-hSyn-DIO-hM3D(Gq)-eGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为4组(均n=8):NS(腹腔注射)+NS(NAc注射)组、NS+BIC组、氯氮平N-氧化物(CNO)+NS组和CNO+BIC组;或AAV2/2Retro-hSyn-DIO-hM4D(Gi)-EGFP-WPRE-pA注射于NAc,小鼠分为3组(均n=8):NS+NS组、NS+BIC组和CNO+NS组,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结肠组织中组胺和5-羟色胺(5-HT)的表达,并观察ACC-NAc的GABA能神经通路对小鼠IBS样症状的影响。结果:CACS诱导小鼠出现IBS样症状;FG逆行追踪结合免疫荧光组织化学实验结果显示,ACC的GABA神经元可以投射至NAc。NAc注射BIC后IBS小鼠的焦虑样行为、腹泻样症状和内脏超敏反应显著减轻(P<0.05)。化学遗传法抑制投射至NAc的ACC内GABA能神经元可显著减轻IBS小鼠的症状(P<0.05)。结论:ACC^(GABA)-NAc神经通路可参与小鼠IBS样症状的调控,其机制可能与肠道组胺和5-HT的释放有关。

关键词：前扣带回伏隔核 γ-氨基丁酸焦虑样行为肠易激综合征内脏超敏反应

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产前超声对尿道下裂的诊断及分型价值

中华围产医学杂志 2024年第9期27卷 768-773页

作者：李小花赵伟刘阿庆济宁医学院附属医院超声科济宁272000

目的探讨产前超声对尿道下裂的诊断及分型价值。方法回顾性分析2012年7月至2023年6月于济宁医学院附属医院就诊,产前超声疑似尿道下裂胎儿的临床资料。根据超声图像将尿道下裂分为重型及轻型。获取这些胎儿生后(引产后)确诊情况,分析产... 详细信息

目的探讨产前超声对尿道下裂的诊断及分型价值。方法回顾性分析2012年7月至2023年6月于济宁医学院附属医院就诊,产前超声疑似尿道下裂胎儿的临床资料。根据超声图像将尿道下裂分为重型及轻型。获取这些胎儿生后(引产后)确诊情况,分析产前超声对尿道下裂的诊断价值及分型符合情况。对数据资料采用描述性统计分析。结果(1)最终70例胎儿进入本研究,包括64例(91.4%)单胎,6例(8.6%)双胎之一;胎儿母亲年龄(31.3±5.1)岁,范围为21~50岁;诊断胎龄为(29.7±4.5)周,范围为21周+3~39周。15例(21.4%)母亲具有早孕期保胎史(包括前述6例双胎),9例(12.8%)母亲曾生育尿道下裂胎儿,4例(5.7%)父亲有外生殖器手术史(具体不详)。70例中,生后确诊尿道下裂49例(70.0%),17例(24.3%)引产终止妊娠,引产胎龄为(30.2±5.3)周,范围为26周+4~36周,引产后均行病理解剖证实尿道下裂。17例中的2例为孤立性尿道下裂,15例合并其他异常。(2)70例中的53例(75.7%)产前超声诊断为尿道下裂,其中重型29例,轻型24例;另17例无尿道下裂。生后(引产后)确诊尿道下裂49例,其中重型28例,轻型21例;另21例确诊无尿道下裂。(3)共36例产前超声发现尿道下裂合并其他超声异常。生后(引产后)确诊的28例重型尿道下裂病例中,24例(85.7%)合并其他超声异常;21例轻型尿道下裂病例中,12例(57.1%)合并其他超声异常者。产前超声诊断为尿道下裂的53例胎儿中,生后(引产后)证实46例诊断正确;产前诊断为重型尿道下裂的29例中,27例证实诊断正确;产前诊断为轻型尿道下裂的24例中,19例证实诊断正确;产前超声对尿道下裂、重型尿道下裂及轻型尿道下裂的阳性预测值分别为86.8%(46/53)、93.1%(27/29)和79.2%(19/24)。生后(引产后)确诊的49例中,3例(6.1%)产前超声漏诊,7例(14.3%)超声误诊,可能是未详细观察正中矢状切面胎儿阴茎末端形态所致。结论产前超声对尿道下裂具有一定诊断及分型价值。检查时需要多切面观察阴茎末端形态,并综合分析超声特征,以提高诊断正确率。

关键词：尿道下裂产前诊断超声分型胎儿

CircCCND1调节miR-340-5p/TGIF1轴对H446肺癌细胞恶性生物学行为的影响

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中国肺癌杂志 2024年第3期27卷 161-169页

作者：董怡朱翠敏柳新赵继伟李青山承德医学院附属医院肿瘤科承德067000

背景与目的肺癌是常见的肺部恶性肿瘤,探究肺癌发生发展的分子机制是当前研究的热点。环状RNA细胞周期蛋白D1 (circular RNA Cyclin D1,CircCCND1)在肺癌中高表达,可能是治疗肺癌的潜在靶点。本研究旨在探讨CircCCND1调节miR-340-5p/... 详细信息

背景与目的肺癌是常见的肺部恶性肿瘤,探究肺癌发生发展的分子机制是当前研究的热点。环状RNA细胞周期蛋白D1 (circular RNA Cyclin D1,CircCCND1)在肺癌中高表达,可能是治疗肺癌的潜在靶点。本研究旨在探讨CircCCND1调节miR-340-5p/转化生长因子β诱导因子同源框1 (transforming growth factor β-induced factor homeobox 1,TGIF1)轴对肺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法检测人正常肺上皮细胞BEAS-2B及人肺癌H446细胞中CircCCND1、miR-340-5p及TGIF1 mRNA表达。将体外培养的H446细胞分为对照组、CircCCND1 siRNA组、miR-340-5p mimics组、阴性对照组、CircCCND1 siRNA+miR-340-5p inhibitor组,检测细胞增殖、线粒体膜电位、凋亡、迁移和侵袭情况,以及各组细胞CircCCND1、miR-340-5p、TGIF1 mRNA、BCL2相关X蛋白(BCL2-associated X protein,Bax)、剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶3 (cleaved Caspase-3)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、TGIF1蛋白表达,并验证miR-340-5p与CircCCND1、TGIF1的靶向关系。结果与BEAS-2B细胞相比,H446细胞CircCCND1、TGIF1 mRNA升高,miR-340-5p表达降低(P<0.05)。敲低CircCCND1或上调miR-340-5p表达可抑制H446细胞增殖、迁移、侵袭,降低TGIF1 mRNA和TGIF1蛋白表达,促进细胞凋亡;下调miR-340-5p可拮抗敲低CircCCND1对H446肺癌细胞恶性生物学行为的抑制作用。CircCCND1可能靶向下调miR-340-5p,miR-340-5p可能靶向下调TGIF1。结论敲低CircCCND1可抑制肺癌H446细胞恶性行为,其作用可能是通过调控miR-340-5p/TGIF1轴实现的。

关键词： CircCCND1 miR-340-5p/TGIF1 肺肿瘤恶性生物学行为

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胰腺炎后糖尿病的诊断新进展

中华糖尿病杂志 2024年第7期16卷 729-734页

作者：王笑瑗吕颖奇张梦鸾孙科祁靓杜岩鸿杨婷赵芹李玲东南大学附属中大医院内分泌科南京210009 南京大学医学院附属鼓楼医院消化科南京210009

胰腺炎后糖尿病(PPDM)是一种继发于急、慢性胰腺炎的特殊类型糖尿病。其患病率已超越1型糖尿病,成为第二大成人常见糖尿病类型。但目前尚缺乏特异性的诊断标志物及规范有效的诊疗流程,漏诊及误诊率极高。该文围绕PPDM现有诊断方法、新... 详细信息

胰腺炎后糖尿病(PPDM)是一种继发于急、慢性胰腺炎的特殊类型糖尿病。其患病率已超越1型糖尿病,成为第二大成人常见糖尿病类型。但目前尚缺乏特异性的诊断标志物及规范有效的诊疗流程,漏诊及误诊率极高。该文围绕PPDM现有诊断方法、新型诊断标志物及诊断技术的研究进展作一综述,以期为该病的高危人群早期筛查预警和制定规范化诊断策略拓展新思路。

关键词：糖尿病胰腺炎后糖尿病诊断胰腺外分泌糖尿病

超声内镜经胃输入襻吻合旁路辅助内镜逆行胰胆管造影术治疗Roux‑en‑Y胆肠吻合术后胆道疾病3例(含视频)

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中华消化内镜杂志 2024年第8期41卷 663-666页

作者：张斌王凤兰吴瑞沈珊珊王雷南京大学医学院附属鼓楼医院消化科南京210008 南京大学医学院南京210008

Roux‑en‑Y胆肠吻合术后患者常出现胆肠吻合口狭窄、胆管结石等多种胆道疾病,需要接受内镜逆行胰胆管造影术(endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)治疗。由于肠管迂曲、成角且易粘连、狭窄等因素,使得此类患者的ERCP手... 详细信息

Roux‑en‑Y胆肠吻合术后患者常出现胆肠吻合口狭窄、胆管结石等多种胆道疾病,需要接受内镜逆行胰胆管造影术(endoscopic retrograde cholangiopancreatography,ERCP)治疗。由于肠管迂曲、成角且易粘连、狭窄等因素,使得此类患者的ERCP手术难度较大。本文介绍了3例超声内镜引导下经胃输入襻吻合旁路辅助ERCP治疗Roux‑en‑Y胆肠吻合术后胆道相关疾病的经验分享,以期为该类疾病的治疗方法提供新思路。

关键词：胰胆管造影术,内窥镜逆行胆肠吻合术超声内镜胃肠吻合术

沉默Ras同源物家族成员C对唾液腺腺样囊性癌增殖、侵袭和迁移的影响

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华西口腔医学杂志 2024年

作者：于汶源赵鹏邵禹徐勇徐进谢磊于承浩何秋萍陈正岗山东第二医科大学口腔医学院康复大学青岛医院(青岛市市立医院)口腔科滨州医学院口腔医学院青岛大学青岛医学院滨州医学院附属烟台口腔医院

目的探讨沉默Ras同源物家族成员C (RhoC)对唾液腺腺样囊性癌（SACC）增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮-间充质转化（EMT）的影响及其分子机制。方法选择2019年1月1日—2024年3月1日于青岛市市立医院手术切除的SACC病灶和正常唾液腺组织... 详细信息

目的探讨沉默Ras同源物家族成员C (RhoC)对唾液腺腺样囊性癌（SACC）增殖、凋亡、侵袭、迁移和上皮-间充质转化（EMT）的影响及其分子机制。方法选择2019年1月1日—2024年3月1日于青岛市市立医院手术切除的SACC病灶和正常唾液腺组织各27例，通过蛋白免疫印迹（Western blot）和免疫组织化学法检测RhoC的表达水平。针对RhoC基因序列设计3条小干扰RNA (siRNA)，转染至SACC-LM和SACC-83细胞系中并评估转染效率。通过Western blot比较RhoC、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1 (ROCK1)、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）、磷酸化p38MAPK (p-p38MAPK)、扭曲家族bHLH转录因子1 (TWIST1)、E-钙黏蛋白（Ecadherin）、 N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的蛋白表达水平。CCK-8实验、流式细胞术、Transwell侵袭实验、伤口愈合实验分别检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力的差异。生物信息学方法预测RhoC可能的上游微小RNA (miRNA)及其在SACC中的表达情况，双荧光素酶报告基因实验验证二者的结合位点。结果 RhoC在SACC中的表达显著上升（P0.05）；细胞增殖、侵袭和迁移能力显著下降，凋亡率显著上升（P<0.05）。miR-138-5p在SACC中低表达，miR-138-5p micmic可以显著下调转染RhoC野生型质粒后293T细胞的荧光素酶活性（P<0.05）。结论RhoC在SACC中高表达，沉默RhoC可能靶向下游ROCK1/p38MAPK/TWIST1信号通路从而抑制SACC的增殖、侵袭、迁移和EMT，同时促进其凋亡。miR-138-5p在SACC中低表达，是RhoC潜在的上游基因，二者可能存在结合位点。

关键词：唾液腺腺样囊性癌 Ras同源物家族成员C Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶1 上皮-间充质转化 miR-138-5p