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花鲈前脂肪细胞系的建立及油酸诱导分化

水生生物学报 2024年第7期48卷 1102-1110页

作者：柯轶雄毛孝江任惠娟张春晓王玲宋凯李学山鲁康乐集美大学水产学院海水养殖生物育种全国重点实验室厦门 361021

花鲈(Lateolabrax maculatus)前脂肪细胞系为探索鱼类脂肪细胞分化和脂肪沉积的调控作用及相关分子机制提供了一种新的体外模型.研究将花鲈腹腔脂肪组织用胶原酶消化后原代培养,再以胰酶消化后传代,总共经过150次传代培养后,得到花鲈前... 详细信息

花鲈(Lateolabrax maculatus)前脂肪细胞系为探索鱼类脂肪细胞分化和脂肪沉积的调控作用及相关分子机制提供了一种新的体外模型.研究将花鲈腹腔脂肪组织用胶原酶消化后原代培养,再以胰酶消化后传代,总共经过150次传代培养后,得到花鲈前脂肪细胞系.进而,染色体核型分析表明该细胞系长期培养仍能保持正常表型,进一步使用线粒体cox1和cytb基因鉴定该细胞系来源于花鲈.用pEGFP-C1质粒转染细胞系,观察到明显的绿色荧光,表明可用于研究外源基因的表达.用不同浓度的油酸培养细胞系,3d后细胞有明显脂滴聚集,7d后脂滴达到最大;油红O染色表明,400 μmol/L油酸诱导7d后细胞即可正常分化成熟.综上所述,实验建立了花鲈前脂肪细胞系,该细胞系形态典型、可正常分化,为后续研究鱼类脂肪细胞分化及脂肪沉积提供了良好的实验材料.

关键词：前脂肪细胞细胞系细胞培养诱导分化花鲈

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花鲈前脂肪细系的建立及油酸诱导分化

水生生物学报 2024年

作者：柯轶雄毛孝江任惠娟张春晓王玲宋凯李学山鲁康乐集美大学水产学院海水养殖生物育种全国重点实验室

花鲈(Lateolabrax maculatus)前脂肪细胞系为探索鱼类脂肪细胞分化和脂肪沉积的调控作用以及相关分子机制提供了一种新的体外模型。本研究将花鲈腹腔脂肪组织用胶原酶消化后原代培养,再以胰酶消化后传代,总共经过150次传代培养后,得到... 详细信息

花鲈(Lateolabrax maculatus)前脂肪细胞系为探索鱼类脂肪细胞分化和脂肪沉积的调控作用以及相关分子机制提供了一种新的体外模型。本研究将花鲈腹腔脂肪组织用胶原酶消化后原代培养,再以胰酶消化后传代,总共经过150次传代培养后,得到花鲈前脂肪细胞系。进而,染色体核型分析表明该细胞系长期培养仍能保持正常表型,进一步使用线粒体cox1和cytb基因鉴定该细胞系来源于花鲈。用pEGFP-C1质粒转染细胞系,观察到明显的绿色荧光,表明可用于研究外源基因的表达。用不同浓度的油酸培养细胞系, 3d后细胞有明显脂滴聚集, 7d后脂滴达到最大;油红O染色表明, 400μmol/L油酸诱导7d后细胞即可正常分化成熟。综上所述,实验建立了花鲈前脂肪细胞系,该细胞系形态典型、可正常分化,为后续研究鱼类脂肪细胞分化及脂肪沉积提供了良好的实验材料。

关键词：前脂肪细胞细胞系细胞培养诱导分化花鲈

急性低氧胁迫对福建牡蛎鳃组织氧化应激和闭壳肌能量代谢的影响

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中国水产科学 2024年第3期31卷 278-285页

作者：何凡陈融斌缪雄平阙华勇集美大学水产学院农业农村部东海海水健康养殖重点实验室福建省水产生物育种与健康养殖工程研究中心集美大学水产学院福建省海洋渔业资源与生态环境重点实验室厦门海洋职业技术学院海洋生物学院海水养殖生物育种全国重点实验室

为探究福建牡蛎(Crassostreaangulata)在急性低氧胁迫下鳃组织的氧化应激反应和闭壳肌的能量代谢,本研究设置6个溶解氧浓度梯度(0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L、3.0 mg/L、4.0 mg/L),对福建牡蛎实施持续96h低氧胁迫处理。采... 详细信息

为探究福建牡蛎(Crassostreaangulata)在急性低氧胁迫下鳃组织的氧化应激反应和闭壳肌的能量代谢,本研究设置6个溶解氧浓度梯度(0.5 mg/L、1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0 mg/L、3.0 mg/L、4.0 mg/L),对福建牡蛎实施持续96h低氧胁迫处理。采用酶联免疫分析技术分析低氧胁迫第6、12、24、48、72、96小时福建牡蛎鳃组织的总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量以及闭壳肌组织的碱性磷酸酶(AKP)活性、乳酸脱氢酶(LDH)活性和糖原含量。结果显示:(1) 6～24 h的低氧胁迫下, T-AOC、SOD活性和MDA含量呈现先升高后降低的现象, CAT活性则表现为先降低后升高。胁迫24 h时全部处理组的MDA含量和部分处理组的T-AOC和SOD活性恢复至对照组水平。24～96 h的低氧胁迫下, T-AOC、SOD活性和MDA含量呈现先升高后降低再升高,部分处理组CAT活性持续降低。低氧胁迫96 h,全部处理组的T-AOC活性和部分处理组的MDA含量及CAT活性恢复至对照组水平;除1.0mg/L浓度组与对照组无显著差异(P>0.05),其余处理组SOD活性显著低于对照组(P0.05)。上述结果表明,急性低氧胁迫下,福建牡蛎通过调整体内不同酶活性变化,改善机体氧化应激反应和能量代谢的收支平衡,但极端的低氧环境胁迫仍会对福建牡蛎造成不可修复的损伤。

关键词：福建牡蛎低氧胁迫鳃闭壳肌抗氧化酶代谢酶

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刺激隐核虫感染对大黄鱼生理生化指标及免疫指标的影响

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水产学报 2024年第5期48卷 85-93页

作者：胡水木刘悦李奕晨田国鹏郭心怡林嘉琪白玉麟徐鹏周涛厦门大学海洋与地球学院海水养殖生物育种全国重点实验室厦门大学海洋与地球学院福建省海洋经济生物遗传育种重点实验室

刺激隐核虫感染能够导致海水鱼类感染“白点病”，而大黄鱼是受“白点病”影响最严重的海水养殖鱼类。为了探究刺激隐核虫感染对大黄鱼生理生化指标及免疫指标的影响，本研究利用刺激隐核虫人工感染大黄鱼，分别在感染后0、12、24、48和... 详细信息

刺激隐核虫感染能够导致海水鱼类感染“白点病”，而大黄鱼是受“白点病”影响最严重的海水养殖鱼类。为了探究刺激隐核虫感染对大黄鱼生理生化指标及免疫指标的影响，本研究利用刺激隐核虫人工感染大黄鱼，分别在感染后0、12、24、48和72 h采集血液、肝脏、脾脏、肠道、鳃、头肾和皮肤组织，并检测血清皮质酮、皮质醇以及肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量等指标的变化。同时使用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)实验检测肝脏、脾脏、肠道、鳃、头肾和皮肤组织中TNF-α、IL-8和IL-1β基因的表达量。结果显示，在大黄鱼感染刺激隐核虫后的0～72 h内，实验组大黄鱼表现出刺激隐核虫病的发病症状；血清皮质醇和皮质酮含量显著增加；肝脏GSH-Px活性极显著降低；肝脏SOD活性极显著增加；肝脏MDA含量在0～12h内急剧增加并达到峰值，随后含量缓慢降低；各组织中的TNF-α、IL-8和IL-1β的表达量均有不同程度的上调，在鳃、头肾、肝脏和皮肤中上调最为显著。研究表明，刺激隐核虫感染后有明显变化的皮质类激素含量和氧化应激指标能够反映大黄鱼的感染程度，有助于进一步辅助抗刺激隐核虫表型测量的优化。本研究可为深入理解刺激隐核虫感染后大黄鱼生理生化及免疫指标的动态变化提供基础，为后续的机制解析和品种选育工作提供参考。

关键词：大黄鱼刺激隐核虫生理生化指标免疫指标抗虫性状评价

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十足目甲壳动物性别控制与单性养殖研究进展

中国水产科学 2024年第1期31卷 106-127页

作者：陈仕海靳雅琦张子平王艺磊集美大学水产学院海水养殖生物育种全国重点实验室广东渔泽原生物科技有限公司福建农林大学动物科学学院福建农林大学海洋学院福建省海洋生物技术重点实验室

十足目甲壳动物性别决定与分化途径有多种方式,其中多数表现出雌雄二态性模式。本文综述了十足目甲壳动物性别决定和分化分子调控机制的研究进展,总结了在其中发挥重要作用的眼柄、促雄腺等组织,以及IAG和dmrt等关键基因的功能,探讨通... 详细信息

十足目甲壳动物性别决定与分化途径有多种方式,其中多数表现出雌雄二态性模式。本文综述了十足目甲壳动物性别决定和分化分子调控机制的研究进展,总结了在其中发挥重要作用的眼柄、促雄腺等组织,以及IAG和dmrt等关键基因的功能,探讨通过激素诱导和RNA干扰技术等获得十足目甲壳动物单性群体的性别控制方案,以期为十足目甲壳动物性别控制深入研究和单性苗种养殖提供参考。

关键词：甲壳动物性别控制单性养殖

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温度对中国鲎幼体蜕壳及成活的影响

中国水产科学 2024年第06期 674-683页

作者：翁朝红陈瑞芳谢仰杰陈志钟赟民臧浩男吴思颖集美大学水产学院海水养殖生物育种全国重点实验室农业农村部东海海水健康养殖重点实验室广西科学院广西海洋生物种质资源利用技术创新中心福建省淡水水产研究所

为了评价温度对中国鲎(Tachypleus tridentatus)幼体培育效果的影响,在实验室条件下利用自行设计的中国鲎幼体培育系统,比较了仔鲎和稚鲎在4种水温(25、28、31和34℃)条件下的蜕壳率、蜕壳时间和死亡率。结果表明,经过120d的培育,仔稚... 详细信息

为了评价温度对中国鲎(Tachypleus tridentatus)幼体培育效果的影响,在实验室条件下利用自行设计的中国鲎幼体培育系统,比较了仔鲎和稚鲎在4种水温(25、28、31和34℃)条件下的蜕壳率、蜕壳时间和死亡率。结果表明,经过120d的培育,仔稚鲎的总存活率在各温度组之间无显著差异(P>0.05),但较高培育温度能显著促进仔稚鲎蜕壳。实验结束时, 34℃组多数幼体为4龄稚鲎,部分已进入5龄; 31℃组多数为4龄稚鲎; 28℃组多数为3龄稚鲎,部分进入4龄;25℃组多数为2龄稚鲎,仅少数个体进入3龄。在实验期间内,1龄仔鲎的死亡率为6.00%～19.33%,其中25℃温度组1龄仔鲎的死亡率显著高于31℃和34℃温度组(P0.05); 2～4龄稚鲎的死亡率在不同温度组之间无显著差异(P>0.05)。1龄仔鲎最早蜕壳时间在不同温度组之间差异显著(P室内大规模培育大规格稚鲎是可行的,鲎卵孵出1龄仔鲎后,应及时采用较高温度进行培育,使其能尽快发育蜕壳进入2龄,避免低温导致仔鲎进入滞育状态。

关键词：中国鲎仔鲎稚鲎温度培育

灭菌和添加益生菌对沉积物菌落数和营养盐通量的影响

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中国水产科学 2024年第1期31卷 82-94页

作者：张爽房景辉曾超吕富杨明树罗坤梁博中国水产科学研究院黄海水产研究所海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室盐城工学院江苏省海洋滩涂生物化学与生物技术重点建设实验室江苏省滩涂池塘养殖生态重点实验室

通过对养殖环境灭菌,可以降低作为对虾亲虾的饵料沙蚕携带病原弧菌的风险。本研究采用实验生态学方法,基于病原弧菌的生物学特征,探究不同温度灭菌处理（65℃处理30 min, 100℃处理30 min和121℃处理20 min）对沉积物的灭菌效果及加入... 详细信息

通过对养殖环境灭菌,可以降低作为对虾亲虾的饵料沙蚕携带病原弧菌的风险。本研究采用实验生态学方法,基于病原弧菌的生物学特征,探究不同温度灭菌处理（65℃处理30 min, 100℃处理30 min和121℃处理20 min）对沉积物的灭菌效果及加入益生菌制剂对沉积物理化指标的影响。结果表明,各温度处理组在灭菌后立即采样,灭菌效果良好:65℃-30 min、100℃-30 min和121℃-20 min处理组对沉积物中总菌落数量的灭菌率分别为57.5%、99.45%、99.99%,表明随着灭菌处理温度的升高,灭菌率逐渐提高,对病原弧菌的灭菌率均达到100%。对于沉积物的理化指标分析表明,随着取样时间增长,灭菌处理方式给沉积物–上覆水界面的氮磷扩散通量带来的影响逐渐减小,益生菌制剂的添加能够降低水体和沉积物中的NO3-浓度和PO43-浓度,同一取样时间添加益生菌制剂处理组与未添加益生菌制剂处理组的NO3-扩散通量和PO43-扩散通量有显著差异（P实验期间未检测到病原弧菌菌落,添加益生菌制剂能够优化沉积物菌落结构,抑制总菌落数量的增长,同时对沉积物-上覆水界面的氮磷扩散通量产生影响。本研究可为沉积物灭菌及益生菌制剂在养殖环境中的应用提供数据参考。

关键词：温度处理灭菌益生菌沉积物

三种植物精油对美人鱼发光杆菌美人鱼亚种的抑菌效果及其毒力基因表达的影响

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水产学报 2024年第5期48卷 193-203页

作者：杨新月王春元于永翔王印庚李京泽刘定远张正上海海洋大学水产与生命学院中国水产科学研究院黄海水产研究所海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室

为研究百里香精油、牛至精油和肉桂精油对海水养殖经济鱼类主要致病菌美人鱼发光杆菌美人鱼亚种（PDD）的抑菌作用，实验采用二倍稀释法分别测定3种植物精油对6株不同致病力PDD菌株的最小抑菌质量浓度（MIC）和最小杀菌质量浓度（MBC）... 详细信息

为研究百里香精油、牛至精油和肉桂精油对海水养殖经济鱼类主要致病菌美人鱼发光杆菌美人鱼亚种（PDD）的抑菌作用，实验采用二倍稀释法分别测定3种植物精油对6株不同致病力PDD菌株的最小抑菌质量浓度（MIC）和最小杀菌质量浓度（MBC）。采用分光光度计法检测添加精油后6株PDD生长曲线的变化；以2株高致病性PDD菌株为研究对象，分析不同浓度精油对PDD毒力基因表达量及胞外产物（ECP）活性的影响；分析了3种精油存储不同时间后以及在金属离子影响下的药效稳定性。结果显示，3种精油对6株PDD菌株均具有较好的抑菌和杀菌作用，MIC为32～128μg/mL,MBC为64～192μg/mL;3种精油对2株高致病性PDD菌株的毒力基因表达及ECP的磷脂酶活性和溶血活性均有抑制作用，其中低浓度精油对PDD主要毒力基因的抑制作用最明显。3种精油于室温下避光存储35 d，对实验菌株的杀菌率均大于99%，显示其良好的药物稳定性；水环境中不同浓度Na+、Mg2+、Ca2+、K+等对3种精油的杀菌效果无显著影响。研究表明，3种精油均适宜开发为防治水产动物细菌性疾病的新型渔药或饲料添加剂。本研究可为拓展芳香类植物精油在水产疾病防控上的应用提供借鉴与参考。

关键词：海水养殖美人鱼发光杆菌美人鱼亚种植物精油抑菌作用药效稳定性

不同金属富集能力品系福建牡蛎金属耐受性分析

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渔业研究 2024年

作者：郭安琪柯才焕王恬史博集美大学水产学院海水养殖生物育种全国重点实验室厦门大学海洋与地球学院

【背景】牡蛎具有强大的金属富集能力，被称为铜、锌超富集生物。同时，牡蛎在富集大量铜、锌后能仍正常存活，表现出超强的金属耐受能力。牡蛎对金属的富集能力存在显著的个体差异，是一种数量性状。目前已有采用富集动力学和全基因组... 详细信息

【背景】牡蛎具有强大的金属富集能力，被称为铜、锌超富集生物。同时，牡蛎在富集大量铜、锌后能仍正常存活，表现出超强的金属耐受能力。牡蛎对金属的富集能力存在显著的个体差异，是一种数量性状。目前已有采用富集动力学和全基因组关联分析等方法对牡蛎金属富集能力差异的机制进行解析的研究。但富集能力差异是否影响金属耐受性尚无定论。【目的】探究不同铜、锌富集能力的福建牡蛎在不同发育阶段对铜、锌耐受性的差异。【方法】本研究利用福建牡蛎（Crassostrea angulata）高铜锌富集品系和低铜锌富集品系开展实验，测定不同品系福建牡蛎亲本的金属含量，并对两者D形幼体和6月龄成体进行铜、锌急性毒性实验，计算半致死浓度(LC50)。【结果】两品系间亲本的铜、锌含量均有显著差异；在D形幼体期，低富集品系幼体24 h锌LC50显著低于高富集品系幼体，24 h铜LC50在两个品系中无显著差异，即高富集品系对锌的耐受性显著强于低富集品系，但两个品系对铜的耐受性无明显差异；在成体期，高富集品系成体96 h的铜、锌LC50均高于低富集品系，即高富集品系对铜、锌的耐受性均显著强于低富集品系。【结论】福建牡蛎铜锌富集能力越高，其耐受能力也越强，但受到了金属种类和生长发育阶段的影响，并且推测牡蛎在应对金属胁迫时，金属区域化隔离的解毒效率更高，也更适应环境的压力。【意义】本研究为探讨牡蛎金属富集能力与其耐受性间的联系奠定基础，并进一步为解析牡蛎金属富集和解毒机制提供参考。另外，研究牡蛎金属富集及耐受现象对保障食品安全以及利用牡蛎作为环境检测指示生物都具有重要意义。

关键词：福建牡蛎金属富集金属耐受性解毒机制半致死浓度