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4种红藻的体外模拟消化酵解特性及其抗炎作用

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中国食品学报 2024年第4期24卷 118-129页

作者：周怡倩郑明静洪涛朱艳冰倪辉姜泽东集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物学与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物技术研究中心福建厦门361021

目的:通过体外模拟消化酵解和细胞炎症模型探究江蓠、红毛藻、麒麟菜和坛紫菜等4种经济红藻的消化酵解特性及其抗炎潜力,为红藻的高附加值开发提供依据。方法:通过体外模拟口胃肠消化和结肠发酵,测定4种红藻中总糖、还原糖、蛋白质和总... 详细信息

目的:通过体外模拟消化酵解和细胞炎症模型探究江蓠、红毛藻、麒麟菜和坛紫菜等4种经济红藻的消化酵解特性及其抗炎潜力,为红藻的高附加值开发提供依据。方法:通过体外模拟口胃肠消化和结肠发酵,测定4种红藻中总糖、还原糖、蛋白质和总酚的去向。利用16S r RNA基因Illumina MiSeq测序分析红藻对肠道菌群的影响,同时通过高效液相色谱法分析发酵产物中短链脂肪酸的含量,并采用脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症模型评价4种红藻发酵产物的抗炎活性。结果:在口胃肠消化过程中,坛紫菜对碳水化合物、蛋白质及酚类物质具有较好的生物利用度。难以消化的部分到达结肠后充当肠道微生物群的能量来源,其中坛紫菜在发酵过程中产生更多的短链脂肪酸。同时,4种红藻均表现出调节肠道菌群的能力,包括提高拟杆菌门的丰度,降低厚壁菌门/拟杆菌门的比值。此外,红藻发酵液对脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症损伤具有显著抑制作用,红毛藻发酵液具有更好的抑制效果。结论:4种红藻经模拟消化后有较好的生物可及性,能够调节肠道微生物群,同时表现出较好的抗炎潜力,为基于红藻的高值活性产品的开发提供科学依据。

关键词：红藻模拟消化模拟酵解肠道菌群抗炎

基于石墨烯泡沫的电增强固相微萃取-高效液相色谱法测定鱼肉中3种磺胺类的残留

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食品科学 2024年第5期45卷 265-274页

作者：孙瑞雪方禹文陈冬妍陈全胜陈晓梅集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021

为提高鱼肉中磺胺类抗生素(sulfonamides,SAs)残留的富集效果,建立了基于氮掺杂三维石墨烯泡沫功能化整体柱(monolith@nitrogen-doped three-dimensional graphene foam,M@NGF)的电增强固相微萃取(electroenhanced solid phase microextraction,EE-SPME)方法,结合高效液相色谱技术,快速、灵敏地测定鱼肉中SAs残留。本研究采用原位聚合法,以离子液体为功能单体,NGF为导电增强剂,在不锈钢丝表面制备多孔M@NGF,建立EE-SPME方法,从鱼肉中萃取磺胺噻唑(sulfathiazole,ST)、磺胺二甲基嘧啶(sulfamethazine,SM_(2))和磺胺二甲氧嘧啶(sulfadimethoxypyrimidine,SMM)。对吸附时间、搅拌速度、吸附电压、离子强度、样品溶液p H值、解吸时间、解吸电压和解吸液组成进行了优化。结果表明,基于M@NGF的EE-SPME法对ST、SM_(2)和SMM的富集倍数分别为74、58和64,吸附平衡时间缩短至35 min。在5~5000μg/kg线性范围内,本方法对ST、SM_(2)和SMM的检出限分别为1.78、3.16μg/kg和1.84μg/kg,定量限均为5μg/kg,线性回归分析的决定系数(R^(2))均大于0.9990,加标回收率为79.2%~110.1%,相对标准偏差范围为1.4%~9.8%(n=5)。本方法解决了鱼肉中SAs残留萃取效率低、基质干扰严重的问题,实现了鱼肉中SAs残留的快速、灵敏检测。

关键词：石墨烯泡沫电增强固相微萃取高效液相色谱法磺胺类残留鱼肉

二株石斑鱼源芽孢杆菌的生物学特征与益生性研究

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海洋与湖沼 2024年第3期55卷 775-786页

作者：邹文政黄文树李忠琴杨求华张光明集美大学水产学院福建厦门361021 福建省水产研究所福建厦门361013 鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心福建厦门361021

为了解从云龙石斑鱼(Epinephelus moara♀×Epinephelus lanceolatus♂)肠道分离出的地衣芽孢杆菌GM-2(Bacillus subtilis GM-2)、枯草芽孢杆菌GM-39(Bacillus licheniformis GM-39)的生物学特征与益生特性,通过对胃肠液、pH、鱼胆汁的耐受性等试验进行生物学特征分析,并通过抑菌作用、黏附性、产酶活性、体外抗氧化等试验进行益生特性研究。结果显示,二株芽孢杆菌经人工胃肠液、5%鱼胆汁溶液分别处理1~3 h处理后,存活率分别达70%以上、80%以上以及50%;经不同pH生理盐水处理30 min后,二株菌的存活率分别从0逐渐提高到87.83%、88.25%;二株菌对18种抗生素均不产生耐药性,血琼脂平板培养均未出现溶血现象,菌悬液分别对6株指示菌有抑制作用;二株菌的自聚率达到30%以上,疏水率居于30%~50%;GM-39对黏液蛋白的黏附性显著强于GM-2;GM-39的产酶活力均高于GM-2;GM-2的羟基自由基清除能力和还原能力强于GM-39,而GM-39的DPPH自由基、超氧阴离子自由基的清除能力优于GM-2。结果表明:二株芽孢杆菌均具备较好的耐受性、安全性、抑菌性、产酶活力和抗氧化能力,因而二株芽孢杆菌均具有益生菌开发潜能,为其后续作为益生菌制剂的研究提供了科学理论依据。

关键词：云龙石斑鱼枯草芽孢杆菌GM-39 地衣芽孢杆菌GM-2 生物学特征益生特性

日本鳗鲡心脏细胞系的建立及其在鳗鲡免疫应答研究中的应用

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水生生物学报 2024年第11期48卷 1884-1893页

作者：周晓玲李东利黄文树黄贝集美大学水产学院厦门361021

为建立稳定传代的鳗鲡细胞系用于鳗鲡免疫抗病机制的研究,研究利用组织块法建立了日本鳗鲡(Anguilla japonica)心脏细胞系(Anguilla japonica Heart cells,AJH)。AJH细胞在28℃、含20%胎牛血清(FBS)的DMEM/F-12培养基中培养,传代时间间... 详细信息

为建立稳定传代的鳗鲡细胞系用于鳗鲡免疫抗病机制的研究,研究利用组织块法建立了日本鳗鲡(Anguilla japonica)心脏细胞系(Anguilla japonica Heart cells,AJH)。AJH细胞在28℃、含20%胎牛血清(FBS)的DMEM/F-12培养基中培养,传代时间间隔3—4d,在第5代后更换为15%FBS传代培养。核糖体RNA基因分析显示细胞来源于日本鳗鲡。核型分析显示AJH细胞具有38条染色体,其中10条为中部着丝点染色体,10条为近中部着丝点染色体,18条为端着丝点染色体。病毒感染实验结果显示,鳗鲡疱疹病毒(Anguillad herpesvirus,AngHV)可在AJH细胞中增殖。利用多种试剂转染EGFP-AjLC3至AJH细胞,并通过流式细胞仪检测转染效率,结果显示AJH最高转染效率为(37.17±0.12)%。将AjIRF1真核表达质粒和AjIFNa、AjIFNc1启动子共转染至AJH细胞,利用双荧光素酶报告分析了过表达AjIRF1对AjIFN启动子荧光素酶活性的影响。结果显示AjIFNa和AjIFNc1启动子活性被显著上调,表明AJH细胞可用于体外的基因功能研究。经LPS刺激后,AJH细胞中AjTNF-α及AjIL-Iβ的表达水平明显上调;转染Poly I:C后,AJH细胞中AjRIG-Ia和AjRIG-Ib的表达水平明显上调,表明LPS和Poly I:C可诱导AJH细胞产生免疫应答。综上,研究所建立的日本鳗鲡心脏细胞系可为深入研究鳗鲡抗病毒、抗细菌免疫应答机制提供细胞实验模型。

关键词：心脏细胞系荧光定量病毒感染转染日本鳗鲡

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红毛菜与坛紫菜光合作用和品质的比较分析

应用海洋学学报 2024年第2期43卷 276-283页

作者：林密许凯徐燕纪德华王文磊陈昌生谢潮添集美大学水产学院福建厦门361021 福建省水产生物育种与健康养殖工程研究中心福建厦门361021 农业部东海海水健康与养殖重点实验室福建厦门361021

为研究两种经济红藻红毛菜(Bangia fucscopurpurea)和坛紫菜(Pyropia haitanensis)的光合作用和品质差异,选取一株野生型红毛菜CY和一株野生型坛紫菜NSD35作为实验材料,分别测定二者在相同培养条件下的关键光合参数和营养成分指标。结... 详细信息

为研究两种经济红藻红毛菜(Bangia fucscopurpurea)和坛紫菜(Pyropia haitanensis)的光合作用和品质差异,选取一株野生型红毛菜CY和一株野生型坛紫菜NSD35作为实验材料,分别测定二者在相同培养条件下的关键光合参数和营养成分指标。结果显示:红毛菜的最大电子传递速率、净光合速率、藻红蛋白含量分别比坛紫菜高29.6%、96.8%、60.5%;必需矿质元素钾、钙、镁、铁、锌的含量分别比坛紫菜高59.5%、39.5%、34.1%、86.2%、68.4%;红毛菜的必需氨基酸和风味氨基酸含量都高于坛紫菜。此外,二者的呼吸速率、最大光量子产率、叶绿素a、总糖、总蛋白和碘含量没有显著差异。研究结果表明,与坛紫菜NSD35相比,红毛菜CY的光合速率更快,矿质元素积累能力更强,必需氨基酸和风味氨基酸含量更高。研究结果有助于了解红毛菜和坛紫菜的光合作用和品质特点,为开发红毛菜种质资源提供数据参考。

关键词：海洋生物学红毛菜坛紫菜光合作用营养成分品质

不同采收阶段的坛紫菜营养成分分析及预测模型

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中国食品学报 2024年第8期24卷 371-384页

作者：陈晓晨倪辉姜泽东陈艳红杨远帆杜希萍集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021 厦门海洋职业技术学院福建厦门361021

为获取不同采收阶段坛紫菜的区分方法,以4个采收阶段坛紫菜为原料,测定其色泽、营养物质、氨基酸等营养成分指标。依据坛紫菜采收阶段与营养成分指标的相关性建立模型,预测坛紫菜适宜的采收阶段。结果表明,随着坛紫菜采收阶段的增加,L*... 详细信息

为获取不同采收阶段坛紫菜的区分方法,以4个采收阶段坛紫菜为原料,测定其色泽、营养物质、氨基酸等营养成分指标。依据坛紫菜采收阶段与营养成分指标的相关性建立模型,预测坛紫菜适宜的采收阶段。结果表明,随着坛紫菜采收阶段的增加,L*和b*值显著上升(P研究建立了坛紫菜采收阶段与相关品质指标的关联模型,为不同采收阶段坛紫菜的鉴定筛选及高值利用提供了技术参考。

关键词：坛紫菜采收阶段营养成分相关性分析模型

珍珠蚌肉二肽基肽酶-IV抑制肽的制备与分离

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食品科学 2024年第17期45卷 63-70页

作者：张楚涵陈寅格马婷翁凌张凌晶张根芳曹敏杰集美大学体育学院福建厦门361021 集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 金华职业技术大学农学院浙江金华321000

目的:以珍珠蚌肉为原料制备对二肽基肽酶(dipeptidyl peptidase,DPP)-IV具有抑制作用的生物活性肽。方法:利用两步酶解法并优化珍珠蚌肉酶解条件,筛选体外DPP-IV抑制活性较高组分进行超滤膜浓缩,Superdex^(TM) peptide 10/300 GL凝胶柱... 详细信息

目的:以珍珠蚌肉为原料制备对二肽基肽酶(dipeptidyl peptidase,DPP)-IV具有抑制作用的生物活性肽。方法:利用两步酶解法并优化珍珠蚌肉酶解条件,筛选体外DPP-IV抑制活性较高组分进行超滤膜浓缩,Superdex^(TM) peptide 10/300 GL凝胶柱层析与反相高效液相色谱(reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)技术分离纯化出酶解液中的DPP-IV抑制肽,最终通过液相色谱-串联质谱鉴定其氨基酸序列。结果:中性蛋白酶与碱性蛋白酶对珍珠蚌肉均有良好降解效果,经3 kDa超滤膜浓缩后,酶解产物的DPP-IV抑制率可达67.4%。通过凝胶过滤柱和RP-HPLC进一步分离纯化出6个活性较高的肽段,序列分别为FNAPAM、FIPNY、IYNPPTPF、LAMPYP、FFVVMP和LAGMP。进一步,以分子对接的方式分析6个肽段与DPP-IV的相互作用关系。结论:本研究利用珍珠蚌肉制备DPP-IV抑制肽,可为以水产加工副产物为原料制备功能性食品提供理论参考。

关键词：珍珠蚌酶解分离纯化二肽基肽酶-IV 抑制肽

仿刺参(Apostichopus japonicus)肠道源植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HY21的生长及益生特性分析

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微生物学报 2024年第3期64卷 840-853页

作者：李忠琴王泽楠黄文树杨求华邹文政集美大学水产学院福建厦门361021 福建省水产研究所福建厦门361021 鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心福建厦门361021 华中农业大学动物科学技术学院·动物医学院湖北武汉430070

【目的】在仿刺参(Apostichopus japonicus)健康养殖中为了寻找具有良好耐受性、益生性、安全性的益生菌,本研究从仿刺参肠道内容物中分离获得一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HY21,对其益生潜能进行评价。【方法】利用摇瓶发... 详细信息

【目的】在仿刺参(Apostichopus japonicus)健康养殖中为了寻找具有良好耐受性、益生性、安全性的益生菌,本研究从仿刺参肠道内容物中分离获得一株植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)HY21,对其益生潜能进行评价。【方法】利用摇瓶发酵培养、应用环境因子模拟试验、抗生素药敏测试等方法,分析*** HY21的生长特性、产酸性能、发酵液的抗氧化性质和对水产致病菌的抑制作用;检测菌体的疏水性、自聚性和共聚性、黏附力和药物敏感性,以及对应用环境因子的耐受性。【结果】*** HY21摇瓶发酵培养温度30°C、初始pH 8.0,于2–10 h为对数生长期,发酵18 h后pH达到最低3.6;发酵液对溶藻弧菌的抑菌直径达到(13.96±0.30)mm,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-trinitrophenylhydrazine,DPPH)自由基清除率达到95.45%±1.56%;*** HY21的疏水率为60.42%±2.78%、自聚率为22.69%±1.36%,与溶藻弧菌共聚率为27.98%±1.45%;对体表和肠道黏液蛋白的黏附量分别达到(1.66±0.01)×10^(6)CFU/mL和(1.23±0.15)×10^(6)CFU/mL;对13种常见的抗菌药物均表现敏感;菌体在模拟胃肠液(pH 3.0,pH6.8)中孵育3 h存活率均可达99%以上,在10%鱼胆汁溶液中孵育3 h存活率达到68.11%±7.98%,在3%海盐溶液中孵育16h存活率达到97.58%±7.14%。【结论】*** HY21具有良好的定殖作用、抑菌作用、抗氧化作用等益生特性,而且在应用环境中具有高存活率和高安全性,可以作为一株新的水产益生菌,为开发水产益生菌制剂提供科学理论依据。

关键词：植物乳杆菌耐受性黏附性抑菌作用抗氧化作用

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高效氨氧化细菌筛选优化及其应用研究

海洋与湖沼 2024年第5期55卷 1236-1244页

作者：刘勇江兴龙黄秋溶杨若兰集美大学水产学院福建厦门361021 鳗鲡现代产业技术教育部工程研究中心福建厦门361021

为了实现水产养殖水质或尾水中氨氮的高效快速降解,开展了氨氧化细菌的筛选优化及其在养殖尾水处理中的应用研究。从池塘活性淤泥中,主要通过应用格里斯试剂显色反应筛选得到一株具有异养硝化作用的氨氧化细菌NH-1,开展了16S rDNA分子... 详细信息

为了实现水产养殖水质或尾水中氨氮的高效快速降解,开展了氨氧化细菌的筛选优化及其在养殖尾水处理中的应用研究。从池塘活性淤泥中,主要通过应用格里斯试剂显色反应筛选得到一株具有异养硝化作用的氨氧化细菌NH-1,开展了16S rDNA分子生物学菌种鉴定;药敏和溶血性的安全性试验;氨氮降解条件优化及工厂化养殖尾水应用研究。结果表明,菌株NH-1属于假单胞菌(Pseudomonas sp.);仅对亚胺培南表现出耐药性其他抗生素敏感,且为γ型溶血菌株不产生溶血素;以葡萄糖为碳源、水温24.9°C、pH 8.1、C/N 9.1和接种量0.7%的实验室条件下,水力停留时间24 h对养殖尾水的氨氮降解率为96.3%;工厂化鳗鲡养殖尾水处理应用实验中,水力停留时间24 h对氨氮降解率为95.9%。表明菌株NH-1能安全高效降解水产养殖尾水中的氨氮,具备良好的应用前景。

关键词：异养氨氧化细菌氨氮硝化作用养殖尾水