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姜黄素通过抑制乙酰转移酶P300表达促进HeLa细胞凋亡

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中国病理生理杂志 2024年第7期40卷 1197-1204页

作者：赵行宇丁思源何奇张巍吉林医药学院生化教研室吉林吉林132013

目的:探讨姜黄素(Cur)通过下调HeLa细胞腺病毒E1A相关300 kD蛋白(P300)调控HeLa细胞的活力及凋亡。方法:将对数生长期的HeLa细胞分别采用20、40、60和80μmol/L Cur处理,并以未处理组细胞作为对照,用CCK-8法检测细胞活力;选取20和40μmo... 详细信息

目的:探讨姜黄素(Cur)通过下调HeLa细胞腺病毒E1A相关300 kD蛋白(P300)调控HeLa细胞的活力及凋亡。方法:将对数生长期的HeLa细胞分别采用20、40、60和80μmol/L Cur处理,并以未处理组细胞作为对照,用CCK-8法检测细胞活力;选取20和40μmol/L Cur处理细胞,以流式细胞术检测细胞凋亡,RT-qPCR、Western blot法检测E6基因的mRNA和蛋白表达及凋亡相关蛋白、P300和组蛋白的表达;构建沉默质粒shE6和阴性对照质粒shNC转染HeLa细胞,设置shNC,shNC+Cur(40μmol/L),shE6以及shE6+Cur(40μmol/L)四组,以CCK-8、流式细胞术以及Western blot法分别检测细胞活力、凋亡以及凋亡相关蛋白的表达;构建沉默质粒siP300和阴性对照质粒siNC转染HeLa细胞,RT-PCR、Western blot法分别检测P300的mRNA和蛋白表达、E6的蛋白表达。结果:与未处理组相比,用不同浓度Cur处理HeLa细胞后能显著抑制其活力并可使早期凋亡率增高(P<0.05);Cur处理HeLa细胞后,E6的mRNA及蛋白表达均下调,而敲减E6与未敲减E6的Cur处理组相比,敲减组的早期凋亡率以及促凋亡相关蛋白表达均低于未敲减组(P<0.05);敲减P300后,HeLa细胞中E6蛋白表达降低;而单以Cur处理HeLa细胞后,P300及相关组蛋白表达均下调(P<0.01)。结论:Cur抑制HPV18阳性宫颈癌细胞的活力并促进其凋亡,机制可能与其下调P300而抑制E6蛋白乙酰化有关。

关键词：姜黄素乙酰化 HeLa细胞 P300

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穿山龙薯蓣皂苷通过调控自噬治疗胶原诱导性关节炎小鼠模型的机制

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中国药理学通报 2024年第4期40卷 645-651页

作者：江涛由涌夏东帅薄思涵王永为高亚贤宋鸿儒承德医学院基础医学院免疫学教研室河北承德067000 承德医学院基础医学院解剖学教研室河北承德067000 河北北方学院医学检验学院免疫学教研室河北张家口075000

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫... 详细信息

目的探讨穿山龙薯蓣皂苷通过自噬治疗胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)模型小鼠的作用机制。方法通过鸡Ⅱ型胶原乳剂建立CIA模型小鼠,初次免疫DBA1小鼠(0.1 mL),第21天后再次给予相同剂量刺激。加强免疫后将胶原免疫的50只小鼠随机分组为CIA模型组、雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷低、中、高剂量组,另有10只小鼠注射等量生理盐水作为对照组。在对小鼠进行连续14天灌胃治疗并观察各组小鼠足爪的炎症程度,取下各组小鼠脾、腹股沟淋巴结和踝关节、膝关节,对踝关节、膝关节进行HE染色,检测各组淋巴结、脾组织中mRNA和蛋白质水平的相关自噬指标。结果与CIA模型组相比,穿山龙薯蓣皂苷高剂量组关节炎指数(AI)评分降低(P<0.05);雷公藤组及穿山龙薯蓣皂苷组足爪厚度差值减小(P<0.01)。与对照组相比,CIA模型组体质量明显下降(P<0.01);小鼠膝关节滑膜和足爪踝关节HE染色结果显示CIA模型组对比对照组出现免疫细胞浸润、骨质侵蚀、软骨破坏和滑膜增生的症状;雷公藤组与穿山龙薯蓣皂苷中、高剂量组对CIA模型有不同程度的治疗作用,可以减轻和预防症状。与CIA模型组相比,雷公藤组和穿山龙薯蓣皂苷治疗组中LC3、Beclin-1的mRNA水平和蛋白水平的表达升高,p62的mRNA水平和蛋白水平的表达降低。结论穿山龙薯蓣皂苷可能通过抑制自噬对CIA模型小鼠起到治疗作用。

关键词：穿山龙薯蓣皂苷自噬类风湿性关节炎胶原诱导性关节炎 p62 LC3 Beclin-1

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柚皮苷对小鼠高脂血症的作用研究

中国临床药理学杂志 2024年第19期40卷 2864-2868页

作者：姜海斌蒋锐杨丽洁常德职业技术学院内科教研室常德职业技术学院诊断教研室

目的探讨柚皮苷对小鼠高脂血症的影响，并阐明其作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组、高血脂组和柚皮苷组。高血脂组和柚皮苷组小鼠饲喂高脂饲料，持续喂养4周，建立小鼠高脂血症模型。对照组小鼠饲喂正常饲料。造模成功后，... 详细信息

目的探讨柚皮苷对小鼠高脂血症的影响，并阐明其作用机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为对照组、高血脂组和柚皮苷组。高血脂组和柚皮苷组小鼠饲喂高脂饲料，持续喂养4周，建立小鼠高脂血症模型。对照组小鼠饲喂正常饲料。造模成功后，柚皮苷组小鼠每日灌胃200 mg·kg-1柚皮苷，对照组和高血脂组小鼠均灌胃等量0.9%NaCl,连续灌胃5周。收集小鼠血液进行血脂检测。收集小鼠肝组织，用生化法检测超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量，用蛋白质印迹法检测目的蛋白的表达水平。结果对照组、高血脂组和柚皮苷组小鼠肝组织中SOD活性分别为（58.43±6.27）、（37.16±4.10）和（51.23±4.81）U·mg prot-1,CAT活性分别为（176.11±13.59）、（112.65±10.02）和（158.46±14.37）U·mg prot-1,MDA含量分别为（3.15±0.74）、（12.62±2.07）和（5.76±1.83）U·mg prot-1,GSH含量分别为（91.52±11.47）、（34.16±4.62）和（71.64±8.79）U·mg prot-1,诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白相对表达水平分别为0.28±0.05、4.26±1.13和0.94±0.19,腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）蛋白相对表达水平分别为1.32±0.18、0.84±0.11和1.49±0.16,胆固醇调节元件结合蛋白（SREBP）蛋白相对表达水平分别为1.76±0.24、5.78±1.21和2.93±0.42,3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMGCR）蛋白相对表达水平分别为1.69±0.18、6.13±1.38和3.26±0.43。对照组和柚皮苷组的上述指标与高血脂组比较，在统计学上差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01,P<0.001）。结论柚皮苷能够有效调节高脂血症小鼠的血脂水平，抑制氧化应激反应和细胞凋亡水平，其作用机制可能与调控AMPK/HMGCR/SREBP信号通路有关。

关键词：柚皮苷腺苷酸活化蛋白激酶/3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶/胆固醇调节元件结合蛋白信号通路高脂血症氧化应激

浙江省中小学教育质量监测的迭代发展:从健康体检走向实践指导

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华东师范大学学报（教育科学版） 2024年第1期42卷 99-113页

作者：陈荣荣张丰浙江省教育厅教研室杭州310012

本文报告了浙江省教育质量监测从“专业支持”到“自主监测”的迭代发展历程,体现出了浙江省教育质量监测从“健康体检”走向“实践指导”的价值导向。文章从构建“学生发展+成长环境”的评价指标框架、基础指标+自主观测点的设计依据... 详细信息

本文报告了浙江省教育质量监测从“专业支持”到“自主监测”的迭代发展历程,体现出了浙江省教育质量监测从“健康体检”走向“实践指导”的价值导向。文章从构建“学生发展+成长环境”的评价指标框架、基础指标+自主观测点的设计依据这两个方面介绍浙江教育质量监测指标体系的系统设计;从组合分析、模型构建、专题深入和国际比较四个方面介绍浙江在专题分析方面的创新思路;从揭示学生成长机制、聚焦学习品质及影响机制、透视学业负担的实质、推动学校教学管理转型、改善家庭“软环境”五个方面阐述浙江教育质量监测的结论、发现及相关实践指导,体现了浙江教育质量监测的实践透视能力、基层发展立场与实践指导取向。

关键词：教育质量监测指标设计数据分析实践指导

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信息技术与教学深度融合:初中科学教学方式的变革

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全球教育展望 2024年第5期53卷 147-160页

作者：沙琦波浙江省教育厅教研室杭州310012

教育数字化转型对信息技术与科学教学的融合提出了新要求。为转变信息技术在初中科学教学中的应用方式,回应时代发展需求,信息技术与初中科学教学深度融合研究历经二十余年,经历三个阶段,以解决问题为导向、系列课题为引领、研训项目为... 详细信息

教育数字化转型对信息技术与科学教学的融合提出了新要求。为转变信息技术在初中科学教学中的应用方式,回应时代发展需求,信息技术与初中科学教学深度融合研究历经二十余年,经历三个阶段,以解决问题为导向、系列课题为引领、研训项目为支撑,推动深度融合的研究、实践和推广,构建了信息技术与初中科学教学深度融合的实践体系:以深度融合为核心目标,实现信息技术与初中科学深度融合的新理念、新路径、新策略、新样态和新评价。研究结果表明,“技术融学”实现了初中科学信息化教学方式的系统变革,提升了学生的核心素养,促进了科学教师信息素养的发展。信息技术与教学深度融合的科学课堂在浙江已成为常态,形成了初中科学教学方式信息化转变的“浙江经验”,并正逐步向全国推广。

关键词：信息技术初中科学深度融合教学方式

十溴联苯醚暴露通过细胞外囊泡装载miR-221促进三阴性乳腺癌细胞转移

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浙江大学学报(医学版) 2024年

作者：江孟晓王丽珍卢林明童有华李艳宇支慧皖南医学院病理解剖教研室

目的:探讨环境污染物十溴联苯醚（BDE-209）暴露促进三阴性乳腺癌（TNBC）恶性进展的机制。方法:将TBNC细胞分为空白对照组和BDE-209暴露组。超速离心法提取细胞外囊泡，分别应用扫描电子显微镜和蛋白质印迹法对提取的胞外囊泡进行鉴定... 详细信息

目的:探讨环境污染物十溴联苯醚（BDE-209）暴露促进三阴性乳腺癌（TNBC）恶性进展的机制。方法:将TBNC细胞分为空白对照组和BDE-209暴露组。超速离心法提取细胞外囊泡，分别应用扫描电子显微镜和蛋白质印迹法对提取的胞外囊泡进行鉴定，采用纳米颗粒跟踪技术检测细胞外囊泡生成量，细胞划痕实验和Transwell小室实验检测与胞外囊泡共培养后TNBC细胞的迁移能力和扩散能力，qRT-PCR检测囊泡中的miR-221表达水平，蛋白质印迹法检测共培养后TNBC细胞中基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达水平。结果:与空白对照组比较，2.00、20.00和200.00 ng/mL BDE-209暴露可显著增加胞外囊泡的生成（均P<0.05），其中200.00 ng/mL BDE-209暴露诱导释放的胞外囊泡共培养的细胞迁移率较空白对照组提高86%，穿膜细胞数提高至1.32倍，miR-221表达水平提高至2.7倍，MMP9表达水平提高至1.62倍（均P<0.05）。转染抗miR-221抗体能降低BDE-209暴露诱导生成的胞外囊泡内miR-221表达水平，使BDE-209促进MDA-MB-231细胞迁移的能力被显著抑制。结论:BDE-209暴露可通过增加胞外囊泡的生成及装载miR-221增强TNBC细胞的迁移能力，促进TNBC细胞转移。

关键词：十溴联苯醚三阴性乳腺癌胞外囊泡细胞迁移微RNA-221 基质金属蛋白酶9

孕期应激生活事件暴露水平对儿童2~6岁内情绪与行为问题的影响

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中华流行病学杂志 2024年第3期45卷 401-407页

作者：洪佳仪魏倩井光壮叶佩琪石宇阳史慧静复旦大学公共卫生学院妇幼与儿少卫生教研室上海200032

目的研究母亲孕期应激生活事件暴露水平对儿童2~6岁内情绪与行为问题的影响。方法上海亲子队列于2016-2018年招募待产孕妇建卡并随访,本研究纳入来自队列的2524对母子,使用量表于孕早、晚期评估母亲应激生活事件暴露水平,儿童2~6岁内评... 详细信息

目的研究母亲孕期应激生活事件暴露水平对儿童2~6岁内情绪与行为问题的影响。方法上海亲子队列于2016-2018年招募待产孕妇建卡并随访,本研究纳入来自队列的2524对母子,使用量表于孕早、晚期评估母亲应激生活事件暴露水平,儿童2~6岁内评估情绪与行为问题。使用多因素二元logistic回归模型及广义估计方程分析孕期应激生活事件暴露水平对儿童2~6岁内情绪与行为问题发生风险的影响及作用关键期。结果孕期应激生活事件暴露水平持续较低、仅孕早期较高、仅孕晚期较高、持续较高的母亲分别占61.8%、13.2%、13.2%和11.8%。儿童3~6岁的情绪症状、多动问题、同伴交往及困难总分异常检出率在持续较高组中最高。广义估计方程结果显示,与孕期应激生活事件暴露水平持续较低组相比,仅孕早期较高组的儿童2~6岁内品行问题(aOR=1.41,95%CI:1.07~1.87)异常发生风险显著增加,孕期应激生活事件暴露水平持续较高组的儿童情绪症状(aOR=1.41,95%CI:1.09~1.83)、同伴交往(aOR=1.46,95%CI:1.15~1.86)及困难总分(aOR=1.51,95%CI:1.17~1.93)异常发生风险均显著增加。结论母亲孕期应激生活事件暴露增加儿童2~6岁内情绪与行为问题异常发生风险,孕早期可能是暴露关键期。

关键词：孕期应激生活事件学龄前儿童情绪与行为问题队列研究

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基于素养发展模型构建的语文试题研究

语文建设 2024年第1期 70-74页

作者：章新其郑慧浙江省教育厅教研室浙江省衢州市教育局教研室

语文课程学业质量标准以核心素养为主要维度,意味着语文学业评价的测量对象从知识与技能变为核心素养,这将给考试命题带来一系列的变化。为指导并规范素养测量中的命题实践与技术创新,有必要比较素养测量与传统测量的区别,研究素养发展... 详细信息

语文课程学业质量标准以核心素养为主要维度,意味着语文学业评价的测量对象从知识与技能变为核心素养,这将给考试命题带来一系列的变化。为指导并规范素养测量中的命题实践与技术创新,有必要比较素养测量与传统测量的区别,研究素养发展的心理机制,认识素养试题的特点。基于《中国学生发展核心素养》,结合学习科学的最新研究成果,运用信息加工理论,可以绘制出“素养发展模型”,以此解释“心智知”融合发展的心理机制。语文素养命题的实质是结合课程内容设计呈现“心智知”融合发展水平的情境任务。运用该模型,不仅可以描绘素养试题的外在特点,还能揭示其“生成性”的内在属性。

关键词：素养测量模型情境任务 “心智知”融合语文命题

灵芝酸A对非小细胞肺癌PC9细胞糖酵解及其关键限速酶的影响

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吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 682-688页

作者：任爱华董彦伯苗润芝吕俞娇刘岩峰北华大学基础医学院解剖教研室吉林吉林132013 北华大学临床医学院外科教研室吉林吉林132013

目的:探讨不同剂量灵芝酸A(GAA)对非小细胞肺癌(NSCLC) PC9细胞的生物活性、糖酵解及其限速酶表达的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养NSCLC PC9细胞,将PC9细胞分为空白对照组、低剂量(25μmol·L^(-1)) GAA组、中剂量(50μmol·L^(... 详细信息

目的:探讨不同剂量灵芝酸A(GAA)对非小细胞肺癌(NSCLC) PC9细胞的生物活性、糖酵解及其限速酶表达的影响,并阐明其作用机制。方法:体外培养NSCLC PC9细胞,将PC9细胞分为空白对照组、低剂量(25μmol·L^(-1)) GAA组、中剂量(50μmol·L^(-1)) GAA组和高剂量(100μmol·L^(-1)) GAA组。采用噻唑蓝(MTT)法检测各组PC9细胞存活率,Transwell小室实验检测各组PC9细胞迁移细胞数,葡萄糖检测试剂盒检测各组PC9细胞葡萄糖摄取量,三磷酸腺苷(ATP)检测试剂盒检测各组PC9细胞中ATP水平,乳酸检测试剂盒检测各组PC9细胞中乳酸水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组PC9细胞中己糖激酶2(HK2)和M2型丙酮酸激酶(PKM2) mRNA表达水平,Westernblotting法检测各组PC9细胞中HK2和PKM2蛋白表达水平。结果:MTT法,培养24、48和72 h时,与空白对照组比较,中和高剂量GAA组PC9细胞存活率明显降低(P室实验,与空白对照组比较,中和高剂量GAA组细胞迁移数明显减少(P<0.05);与低剂量GAA组比较,高剂量GAA组细胞迁移数明显减少(P<0.05)。与空白对照组比较,中和高剂量GAA组PC9细胞中葡萄糖摄取量和乳酸水平均明显降低(P<0.05),高剂量GAA组PC9细胞中ATP水平明显降低(P<0.05)。RT-qPCR法,与空白对照组比较,中和高剂量GAA组PC9细胞中HK2和PKM2 mRNA表达水平均明显降低(P<0.05)。Western blotting法,与空白对照组比较,中和高剂量GAA组PC9细胞中HK2和PKM2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:中和高剂量GAA可抑制PC9细胞增殖及迁移的生物活性,降低糖酵解作用,其作用机制可能与抑制关键限速酶HK2和PKM2的表达有关。

关键词：灵芝酸A 癌,非小细胞肺己糖激酶2 M2型丙酮酸激酶糖酵解