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saRNA激活ABCG2表达增强肾和肠细胞排泄尿酸的研究

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中国药学杂志 2024年第8期59卷 713-723页

作者：贾少平葛科立杨柳张志霞张金玉葛银林青岛大学基础医学院生物化学与分子生物学系山东青岛266071 青岛大学基础医学院免疫学系山东青岛266011 山东商业职业技术学院济南250103

目的筛选、研究小激活RNA(small activating RNA,saRNA)增强ABCG2基因表达对肾、肠细胞排泄尿酸(uric acid,UA)的影响,探索促进UA排泄的全新一类治疗机制药物。方法设计靶向小鼠和人ABCG2基因的saRNA,转染小鼠肾小管上皮细胞(TCMK-1)和... 详细信息

目的筛选、研究小激活RNA(small activating RNA,saRNA)增强ABCG2基因表达对肾、肠细胞排泄尿酸(uric acid,UA)的影响,探索促进UA排泄的全新一类治疗机制药物。方法设计靶向小鼠和人ABCG2基因的saRNA,转染小鼠肾小管上皮细胞(TCMK-1)和人肾小管上皮细胞(HK-2)细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western Blot筛选强激活效果的saRNA;检测强激活saRNA增强TCMK-1和HK-2细胞排泄UA的作用。筛选的saRNA通过尾静脉注射高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)模型小鼠,检测血尿酸(serum uric acid,SUA)、尿尿酸(urine uric acid,UUA)、肠道UA、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和血清肌酐(serum creatinine,SCr)含量,以及肝脏黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活性,验证所选saRNA促进UA排泄的作用。苏木精-伊红染色法(H&E)染色观察小鼠肾脏和小肠病理改变。RT-qPCR,Western blot和免疫组化分析肾脏和小肠ABCG2基因表达水平。结果筛选到小鼠和人ABCG2 saRNA各2条,分别命名为saRNA-1/2和hsaRNA-1/2,能够提高TCMK-1和HK-2细胞ABCG2基因的表达(P0.05)。结论所筛选的saRNA能够提高ABCG2基因的表达,并促进细胞内和小鼠体内UA的排泄,降低SUA水平。

关键词：高尿酸血症尿酸小激活RNA ABCG2 基因表达

PDCA循环模型在开放式医学检验实验室管理中的应用

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医学检验与临床 2024年第3期35卷 79-82页

作者：刘雨欣黄滔何霞陆小琴康雪雷娇娇雅安职业技术学院药学与检验学院四川雅安625000 雅安市人民医院检验科四川雅安625000

医学检验实验室因具有标本种类与化学试剂繁多、仪器设备价格昂贵且专业性要求高、生物安全防护要求高的特点,因而对实验室提出了更高的标准和要求。运用PDCA循环理论,通过管理体系的建立(Plan阶段)、管理措施实施(Do阶段)、日常监督检... 详细信息

医学检验实验室因具有标本种类与化学试剂繁多、仪器设备价格昂贵且专业性要求高、生物安全防护要求高的特点,因而对实验室提出了更高的标准和要求。运用PDCA循环理论,通过管理体系的建立(Plan阶段)、管理措施实施(Do阶段)、日常监督检查(Check阶段)、问题整改(Action阶段)4个主要环节,建立以全过程管理为基础的开放式实验室管理体系,培养高职技能型创新人才,确保实验室教学与科研稳定、高效、高质的运行。

关键词：医学检验 PDCA循环模型开放式实验室实验室管理

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香椿老叶化学成分及生物活性研究进展

山东化工 2024年第16期53卷 90-92页

作者：刘玉梅张家俊任楚瑶武星杜运铜仁职业技术学院药学院贵州铜仁554300

香椿老叶资源丰富,且其中含有大量具有生物活性的化学成分。为了对香椿老叶进行合理的资源开发利用,推动香椿产业的发展继而推动乡村振兴。本课题组将近年来各研究组对香椿老叶的化学成分和生物活性的研究进行了系统的梳理,发现香椿老... 详细信息

香椿老叶资源丰富,且其中含有大量具有生物活性的化学成分。为了对香椿老叶进行合理的资源开发利用,推动香椿产业的发展继而推动乡村振兴。本课题组将近年来各研究组对香椿老叶的化学成分和生物活性的研究进行了系统的梳理,发现香椿老叶中含有大量的黄酮类、多酚类、皂苷类、多糖类等化学成分,具有显著的抗菌、抗氧化、提高动物生长性能等生物活性。并对香椿老叶的后续研究进行了展望,以期为香椿老叶的开发利用提供一定的思路。

关键词：香椿化学成分生物活性

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高职院校专业课《生物化学》融入思政元素的实施路径探索——以“蛋白质的结构”为例

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云南民族大学学报（自然科学版） 2024年第5期33卷 661-665页

作者：刘明源刘竺云王中华李岩泰州职业技术学院药学院江苏泰州225300

《生物化学》作为药品生产技术专业群的一门重要的专业基础课,贯穿整个专业学习过程.课程团队在对本门课程进行思政教学改革的过程中,以“蛋白质的结构”这一教学单元为例,从单元在课程中的定位、思政教学目标、思政教学融入点以及思政... 详细信息

《生物化学》作为药品生产技术专业群的一门重要的专业基础课,贯穿整个专业学习过程.课程团队在对本门课程进行思政教学改革的过程中,以“蛋白质的结构”这一教学单元为例,从单元在课程中的定位、思政教学目标、思政教学融入点以及思政教学考核与评价等方面,对思政元素融入的实施路径进行了探索与实践,为后续深入的思政教学改革提供了思路和借鉴.

关键词：生物化学课程思政实施路径蛋白质的结构

基于UPLC-Triple-TOF-MS技术初步分析雅安产道地中药材川牛膝中生物碱成分

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山东化工 2024年第3期53卷 155-157,160页

作者：王悦秋王昌梁林辉梁大伟雅安职业技术学院药学与检验学院四川雅安625100 沈阳药科大学基于靶点的药物设计与研究教育部重点实验室辽宁沈阳110016

采用乙醇提取、成盐、二氯甲烷萃取等方法初步富集川牛膝总生物碱,确定最优提取分离工艺;通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法,采用Waters XSelect CSH-C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,测试... 详细信息

采用乙醇提取、成盐、二氯甲烷萃取等方法初步富集川牛膝总生物碱,确定最优提取分离工艺;通过超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法,采用Waters XSelect CSH-C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm),梯度洗脱,流速为0.3 mL/min,测试波长254 nm,柱温为50℃,进样量为3μL,采用电喷雾离子源正离子模式,扫描范围为m/z 100~1500,并采用全扫描模式对样品数据进行收集,根据高分辨质谱结合二级质谱所得信息对川牛膝中生物碱类化学成分进行快速鉴定,通过对比分子离子峰和碎片离子的质荷比、Scifinder和Reaxy数据库及相关文献,推测出两种生物碱成分。研究建立的生物碱类化学成分提取与分析方法,为提高雅安产道地中药材川牛膝的质量控制水平及后续阐明药效物质基础提供了实验依据。

关键词：川牛膝生物碱提取方法超高液相色谱串联三重四级杆飞行时间质谱法定性分析

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人乳头瘤病毒16E7和CulL2依赖蛋白对APOBEC3A蛋白表达及子宫颈细胞迁徙能力的影响

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病毒学报 2019年第3期35卷 402-407页

作者：程娟卢永丽杨文君雅安职业技术学院医学系外科系统教研室雅安625000 雅安职业技术学院附属医院妇产科雅安625000 雅安职业技术学院药学检验系生物化学教研组雅安625000

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16 E7基因编码多功能磷酸蛋白,其功能和结构均类似腺病毒,HPV 16 E7可与激活的致癌基因结合,促进肿瘤进展。但是HPV 16 E7对子宫颈细胞迁移的影响和机制尚不清楚。因此本研究探究了HPV16 E7和Cu... 详细信息

人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16 E7基因编码多功能磷酸蛋白,其功能和结构均类似腺病毒,HPV 16 E7可与激活的致癌基因结合,促进肿瘤进展。但是HPV 16 E7对子宫颈细胞迁移的影响和机制尚不清楚。因此本研究探究了HPV16 E7和CulL2依赖蛋白对APOBEC3A蛋白表达及子宫颈细胞迁徙能力的影响。随机选择60名年龄在21～55岁间的妇女,分别设置空白对照组(B组)、患有人乳头瘤细胞组(P组)、添加CulL2依赖蛋白组(C组),采用流式荧光杂交法和第二代杂交捕获实验(hc2)检测其子宫颈脱落细胞,进行细胞培养,采用Transwell法检测细胞数,重组质粒DNA分析基因克隆的完整性,代谢标记细胞,进行过氧化氢酶(catalase,CAT)分析。采用实时荧光定量PCR法对CulL2和APOBEC3A基因水平进行评估测定,免疫印迹(Western Blot,WB)检测相关蛋白表达。与B组相比,P组细胞穿透基质胶的细胞数增多,即迁徙能力提高,重组质粒转染后,C组细胞穿透基质胶的细胞数亦明显增多,但增多幅度不如P组,即迁徙能力有所增强(P组比较,P组细胞基因表达增加,C组细胞中CulL2和APOBEC3A基因的mRNA表达水平明显减少(P<0.05)。本研究发现HPV16 E7和CulL2依赖蛋白可影响APOBEC3A蛋白表达,并且促进子宫颈细胞的迁徙能力。

关键词：人乳头瘤病毒(HPV) CulL2依赖蛋白 APOBEC3A蛋白蛋白降解

HCV核心抗原磁微粒化学发光法检测试剂的研制及初步性能评价

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国际生物制品学杂志 2024年第4期47卷 212-216页

作者：胡道奇周松辉刘如石童鹏吴刚强刘汨邓金凤刘昕龚瑶伍思蓓杨邦白丹李光湖南康润药业股份有限公司研发部岳阳414000 湖南师范大学医学院微生物教研室长沙410013 免疫试剂湖南省工程研究中心岳阳414000 岳阳职业技术学院医学院药学教研室岳阳414000

目的研制丙型肝炎病毒核心抗原(HCV core antigen,HCV-cAg)磁微粒化学发光法(chemiluminescence microparticle immunoassay,CMIA)的检测试剂,并初步评价其性能。方法采用2株抗HCV-cAg单克隆抗体(单抗)预先包被磁微粒,另2株抗HCV-cAg单抗用吖啶酯标记,制备双抗体夹心CMIA检测试剂;与ELISA试剂盒同时检测210例干扰物样本、1158例健康人样本、140例HCV-RNA阳性样本和2套血清转换盘样本,鉴定研制试剂的特异性和灵敏度。结果CMIA检测试剂的特异性为99.74%,ELISA试剂盒的特异性为99.57%,2种方法干扰物样本的阴性率均为100%;CMIA检测试剂的灵敏度为77.86%,ELISA试剂盒的灵敏度为62.14%,且CMIA检测试剂检出血清转换盘样本阳性的时间早于ELISA试剂盒。结论成功制备了HCV-cAg CMIA检测试剂,该试剂的特异性好、灵敏度高,适用于HCV的早期筛查和临床辅助诊断。

关键词：核心抗原丙型肝炎病毒化学发光磁微粒性能评价

酸性神经鞘磷脂酶直接抑制剂的设计、合成及生物活性

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高等学校化学学报 2015年第2期36卷 279-286页

作者：杨侃张阔军胡松源顾勤兰董继斌王进欣中国药科大学药物分子设计与优化江苏省重点实验室南京210009 中国药科大学高等职业技术学院南京211198 复旦大学药学院生物化学教研室上海201203

构建了基于配体的酸性神经鞘磷脂酶抑制剂药效团模型.根据此模型,以α-倒捻子素(α-Mangostin)为先导化合物进行结构优化,完成了11个新型酸性神经鞘磷脂酶直接抑制剂的设计与合成,其结构经过核磁共振波谱和质谱鉴定正确.初步体外酶抑制... 详细信息

构建了基于配体的酸性神经鞘磷脂酶抑制剂药效团模型.根据此模型,以α-倒捻子素(α-Mangostin)为先导化合物进行结构优化,完成了11个新型酸性神经鞘磷脂酶直接抑制剂的设计与合成,其结构经过核磁共振波谱和质谱鉴定正确.初步体外酶抑制活性筛选结果显示,化合物Ⅰb,Ⅰd,Ⅰe和Ⅰf具有较好的酶抑制活性,其中化合物Ⅰf的酶抑制率为88.9%.

关键词：酸性鞘磷脂酶直接抑制剂药效团模型 α-倒捻子素

柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人血白蛋白中辛酸钠含量

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分析化学 2010年第3期38卷 425-428页

作者：蒋翠岚王立娜韩继红蒋晔河北医科大学药学院分析化学教研室河北化工医药职业技术学院制药系

建立了柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人血白蛋白中辛酸钠含量的方法。用正己烷萃取人血白蛋白中的辛酸钠,与ω-溴苯乙酮和18-冠-6醚在50℃反应30min,然后用甲醇-水(75∶25,V/V)于Nova-ParkC18柱(150mm×3.9mm,4μm)上分离,在262nm检... 详细信息

建立了柱前衍生-反相高效液相色谱法测定人血白蛋白中辛酸钠含量的方法。用正己烷萃取人血白蛋白中的辛酸钠,与ω-溴苯乙酮和18-冠-6醚在50℃反应30min,然后用甲醇-水(75∶25,V/V)于Nova-ParkC18柱(150mm×3.9mm,4μm)上分离,在262nm检测衍生物,流速为1.0mL/min,庚酸为内标。辛酸和庚酸的萃取率可分别达到98.2%和97.9%,RSD小于0.9%。方法的线性范围为9.00×10-4～1.44×10-2mol/L(r=0.9995),平均加样回收率为99.7%,RSD≤0.9%。本方法准确、重现性好,可用于人血白蛋白中辛酸钠含量的测定。

关键词：柱前衍生反相高效液相色谱法人血白蛋白辛酸钠