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重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质构建转基因组织工程材料

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4851-4858页

作者：宁寅宽刘林志周次腊隆宇斌邵阳市中心医院血管外科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院内分泌科湖南省邵阳市422000 邵阳市中心医院脊柱外科湖南省邵阳市422000

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与... 详细信息

背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路。目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与脱钙骨基质体外构建转基因组织工程材料的生物矿化特性。方法:细胞贴壁及密度离心法获得兔骨髓间充质干细胞,增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒以感染复数为100转染第5代兔骨髓间充质干细胞,体外观察转染细胞与未转染细胞的增殖能力、细胞表型、细胞周期以及成骨诱导后碱性磷酸酶、Runx2、骨钙素表达的差异;增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染骨髓间充质干细胞与脱钙骨基质在体外构建转基因组织工程材料,对其进行扫描电镜观察及元素能谱分析。结果与结论:增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞后,在转染24,48 h细胞增殖较未转染细胞缓慢(P 0.05);增强型绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞在脱钙骨基质支架上有较好的生物相容性,根据荧光表达强度推测目的基因在2周左右发挥最大生物学功能,且出现了钙磷矿化物沉积,体现出优越的生物矿化特性。

关键词：重组慢病毒载体增强绿色荧光蛋白骨髓间充质干细胞基因治疗生物学特性

FTA-环介导等温扩增技术直接提取变异链球菌DNA的效果评价

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中国组织工程研究 2025年第5期29卷 1043-1049页

作者：王玥晖尚进杨晨符冬格曹灿张晓东王敬夫北部战区总医院口腔科辽宁省沈阳市110016 空军军医大学第三附属医院颌面外科陕西省西安市710004

背景:变异链球菌是龋病的重要病原菌,及时检测变异链球菌水平对龋病的早发现、早治疗有重要意义。目的:建立并评价FTA-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术直接提取变异链球菌DNA的应用效果。方法:①制备... 详细信息

背景:变异链球菌是龋病的重要病原菌,及时检测变异链球菌水平对龋病的早发现、早治疗有重要意义。目的:建立并评价FTA-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术直接提取变异链球菌DNA的应用效果。方法:①制备含有ATCC标准菌株变异链球菌的菌悬液,接种于脑心浸出液培养基,充分混匀后按10倍梯度稀释成7种浓度(4.2×10^(7),4.2×10^(6),4.2×10^(5),4.2×10^(4),4.2×10^(3),4.2×10^(2),4.2×10 CFU/mL),每个稀释级做2个平行对照,并增加无菌水作为空白对照;②分别采用FTA卡、常规煮沸法、试剂盒提取及裂解液提取4种方法直接提取菌株DNA,通过LAMP技术进行扩增,并进行特异性试验,比较4种提取方法的差异。结果与结论:①4种方法提取的DNA均满足LAMP扩增的要求;②特异性试验结果显示,只有变异链球菌才可特异扩增出靶基因;③裂解液提取法最低检测限为4.2×10^(3) CFU/mL,FTA卡提取法最低检测限为4.2×10^(4) CFU/mL,试剂盒提取法和常规煮沸法最低检测限分别为4.2×10^(6) CFU/mL和4.2×10^(7) CFU/mL;④4种提取方法其他方面的比较显示,试剂盒提取法的实验成本、步骤数和时间都是最高;其他3种方法步骤数一致,其中FTA卡所需仪器设备最少,常规煮沸法单次成本最低,裂解液提取法所需时间最少;FTA卡和裂解液提取法仅需少量菌即可提取成功,后者在时间方面优于FTA卡,但相较于FTA卡其单次成本高,所需设备多;⑤结果说明,该研究建立的FTA-LAMP技术具有操作简便、特异性强、灵敏度高、结果可视化等优势,有望为高效提取检测变异链球菌提供新途径。

关键词：变异链球菌环介导等温扩增 FTA卡 DNA 可视化

DTI联合3D-TOF及3D-SSFP序列对高血压伴三叉神经痛诊断价值的研究

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临床放射学杂志 2025年第1期44卷 159-164页

作者：徐天天李立韩彦舟蒋新新商飞翔钱伟军开封市中心医院医学影像科、开封市脑功能与神经肌肉重点实验室开封475000 开封市中心医院疼痛科

目的研究扩散张量成像(DTI)技术联合三维时间飞跃(3D-TOF)序列及三维稳态自由进动序列技术(3D SSFP)对原发性高血压伴三叉神经痛(PH-TN)的诊断价值。方法搜集64例PH-TN患者作为实验组及64例原发性三叉神经痛(TN)患者作为对照组,分别行DT... 详细信息

目的研究扩散张量成像(DTI)技术联合三维时间飞跃(3D-TOF)序列及三维稳态自由进动序列技术(3D SSFP)对原发性高血压伴三叉神经痛(PH-TN)的诊断价值。方法搜集64例PH-TN患者作为实验组及64例原发性三叉神经痛(TN)患者作为对照组,分别行DTI联合3D-TOF及3D-SSFP序列扫描,记录责任血管、血管神经受压程度分级及测量两组患侧和健侧的血管神经受压处的各向异性分数(FA)和表观扩散系数(ADC)值。结果PH-TN组和TN组患侧小脑上动脉压迫神经较多,占位分别为67.9%、67.3%;PH-TN组和TN组患侧血管神经压迫较健侧多,且PH-TN组患侧血管神经压迫分级Ⅱ级、Ⅲ级较TN组患侧多,差异有统计学意义(P<0.05);PH-TN组患侧FA值(0.296±0.119)小于健侧FA值(0.346±0.125)、PH-TN组患侧ADC值(2.27±0.43)×10-3大于健侧ADC值(2.03±0.4)×10-3,FA及ADC值差异具有统计学意义(P<0.05);TN组患侧FA值(0.290±0.107)小于健侧FA值(0.393±0.142),TN组患侧ADC值(2.35±0.32)×10-3大于健侧ADC值(1.99±0.41)×10-3,FA及ADC值差异具有统计学意义(P<0.05)。结论通过DTI联合3D-TOF及3D-SSFP扫描,得出PH-TN组患侧II级、III级血管神经压迫者较TN组患侧多,且三者联合扫描可以从直观及微观层面对TN的病因诊断做出有价值的影像学参考。

关键词：三叉神经高血压 DTI 3D-SSFP 3D-TOF

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线粒体移植治疗肌少症的潜力

中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2842-2848页

作者：李伟尹洪涛孙永晨徐卫娟孙金玲金晓东淄博市中心医院老年医学科山东省淄博市255036 淄博市中心医院神经内科山东省淄博市255036

背景:肌少症是衰老引起的骨骼肌质量和力量下降的一种综合性疾病,是老年人面临的主要健康挑战。越来越多的证据表明,线粒体功能障碍在肌少症的发病机制中起着关键作用。目的:总结线粒体质量控制失调导致肌少症的机制,探讨线粒体移植可... 详细信息

背景:肌少症是衰老引起的骨骼肌质量和力量下降的一种综合性疾病,是老年人面临的主要健康挑战。越来越多的证据表明,线粒体功能障碍在肌少症的发病机制中起着关键作用。目的:总结线粒体质量控制失调导致肌少症的机制,探讨线粒体移植可能是治疗肌少症的潜在靶点。方法:以“sarcopenia,mitochondrial dysfunction,mitochondrial quality control,mitochondrial transplantation,limitations”和“肌少症,线粒体功能障碍,线粒体质量控制,线粒体移植,局限性”为关键词,检索PubMed和CNKI数据库2009-2023年间相关文献。结果与结论:线粒体功能障碍在肌少症发病机制中发挥关键作用,线粒体移植可能通过改善线粒体生物能量学和调节线粒体相关信号通路成为治疗肌少症的可能策略。虽然部分临床前和临床研究证实线粒体移植治疗各种疾病的潜力,但关于线粒体转移的具体细节方面仍有一些亟待解决的问题。

关键词：肌少症线粒体功能障碍线粒体质量控制线粒体移植局限性

发育性髋关节发育不良患者固液双相纤维增强软骨的力学性能

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中国组织工程研究 2025年第21期29卷 4439-4444页

作者：高永昌陈鹏飞陈瑱贤魏晶董哲李辉张志峰长安大学工程机械学院公路养护装备国家工程实验室陕西省西安市710064 内蒙古医科大学第二附属医院关节外科内蒙古自治区呼和浩特市010020 西安市红会医院关节外科陕西省西安市710054

背景:发育性髋关节发育不良由于髋臼、股骨头存在结构、大小及方向等方面的畸形,患者长时间活动或站立会引起腹股沟疼痛,如果得不到有效的治疗,患者的正常活动将严重受限。目的:基于FEBio建立具有固液双相纤维增强软骨的球-窝髋关节有... 详细信息

背景:发育性髋关节发育不良由于髋臼、股骨头存在结构、大小及方向等方面的畸形,患者长时间活动或站立会引起腹股沟疼痛,如果得不到有效的治疗,患者的正常活动将严重受限。目的:基于FEBio建立具有固液双相纤维增强软骨的球-窝髋关节有限元模型,探究发育性髋关节发育不良患者和正常人髋关节软骨的生物力学特性。方法:对1名发育性髋关节发育不良患者和1名正常志愿者进行髋关节建模,模型包含左盆骨、左股骨及附着其上的软骨。验证正常髋关节固液双相纤维增强软骨模型有效性后,建立髋关节发育不良患者髋关节有限元模型,对比两者在单腿站立时(2 130 N静态载荷)软骨的接触应力、流体压力、固相等效应力和流体支撑率的差异。结果与结论:(1)与正常髋关节相比,载荷加载完成后1 s(承载初期),发育性髋关节发育不良患者髋臼软骨出现明显的边缘接触,且峰值接触应力(3.86 MPa)和峰值流体压力(3.76 MPa)均大于正常髋关节软骨;(2)1 500 s(承载稳定)后,2个模型软骨峰值接触应力和峰值流体压力均减小,但发育性髋关节发育不良患者软骨接触位置由软骨边缘向中心移动,流体支撑率由97.41%下降到91.08%,正常髋关节软骨流体支撑率下降了0.58%,由95.24%下降到94.66%;(3)提示单腿站立生理载荷下,发育性髋关节发育不良患者软骨出现明显的边缘载荷,其峰值接触应力、流体压力和流体支撑率的下降幅度均大于正常软骨,考虑软骨的固液双相纤维增强特性对于评估髋关节发育不良患者髋关节软骨的生物力学性能、理解髋关节发育不良病理生理机制和制定术前计划具有重要的临床意义。

关键词：发育性髋关节发育不良软骨固液双相纤维增强有限元分析生物力学

乙型肝炎患者血清lncRNA XIST表达与HBV-DNA载量、肝纤维化的关系

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中国现代医学杂志 2025年第02期 78-82页

作者：王慧郝泉水肖华彭郭飞张丹平宋伟黄冈市中心医院检验科黄冈市中心医院麻醉科黄冈市中心医院输血科

目的探讨乙型肝炎患者血清长链非编码RNA X染色体失活特异转录本（lncRNA XIST）表达与乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）载量、肝纤维化的关系。方法选取2020年6月—2022年6月黄冈市中心医院收治的87例乙型肝炎患者作为乙肝组，另取... 详细信息

目的探讨乙型肝炎患者血清长链非编码RNA X染色体失活特异转录本（lncRNA XIST）表达与乙肝病毒脱氧核糖核酸（HBV-DNA）载量、肝纤维化的关系。方法选取2020年6月—2022年6月黄冈市中心医院收治的87例乙型肝炎患者作为乙肝组，另取同期该院健康体检者71例作为对照组。所有纳入对象均检测血清lncRNA XIST表达与HBV-DNA载量及肝纤维化指标[透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）、Ⅲ型前胶原（PC-Ⅲ）]。采用Pearson相关分析探讨血清lncRNA XIST与HBV DNA载量、肝纤维化指标的关系，采用受试者工作特征（ROC）曲线分析血清lncRNA XIST对乙型肝炎的诊断价值。结果乙肝组血清TBil、ALT、AST、lncRNA XIST、HA、LN、Ⅳ-C、PC-Ⅲ水平均高于对照组（P <0.05）。高载量组乙型肝炎患者血清lncRNA XIST及HA、LN、Ⅳ-C、PC-Ⅲ水平均高于中、低载量组（P <0.05）；中载量组乙型肝炎患者血清lncRNA XIST及HA、LN、Ⅳ-C、PC-Ⅲ水平均高于低载量组（P <0.05）。Pearson相关分析结果显示，乙型肝炎患者血清lncRNA XIST相对表达量与HBV-DNA载量、HA、LN、Ⅳ-C、PC-Ⅲ均呈正相关（r=0.445、0.420、0.369、0.330和0.419，均P=0.000）。ROC曲线结果显示，血清lncRNA XIST诊断乙型肝炎的敏感性为80.65%(95%CI:0.801,0.811)，特异性为88.74%(95%CI:0.866,0.908)。结论乙型肝炎患者血清lncRNA XIST表达升高，且随着HBV-DNA载量增加而逐渐上升，同时与肝纤维化密切相关，有望作为临床诊断乙型肝炎的有效指标。

关键词：乙型肝炎长链非编码RNA X染色体失活特异转录本乙肝病毒脱氧核糖核酸载量肝纤维化相关性

不同屈光度青少年近视患者配戴角膜塑形镜的疗效分析

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国际眼科杂志 2025年第1期25卷 162-165页

作者：李小静伍玲玲杨倩倩赵森刘云孟瓅咸阳爱尔眼科医院陕西省咸阳市712000 西安古城爱尔眼科医院陕西省西安市710061

目的:探讨不同屈光度青少年近视患者配戴角膜塑形镜1 a的控制效果。方法:采用前瞻性非随机对照研究。收集2022-11/2023-05在我院视光科验配角膜塑形镜的青少年近视患者120例224眼,平均年龄11.00±2.08岁,根据等效球镜度分为3组:其中-0.5... 详细信息

目的:探讨不同屈光度青少年近视患者配戴角膜塑形镜1 a的控制效果。方法:采用前瞻性非随机对照研究。收集2022-11/2023-05在我院视光科验配角膜塑形镜的青少年近视患者120例224眼,平均年龄11.00±2.08岁,根据等效球镜度分为3组:其中-0.50--2.00 D组86眼,-2.25--4.00 D组99眼,-4.25--6.00 D组39眼。随访1 a,观察三组患者戴镜前及戴镜1 a后裸眼视力、眼轴、角膜曲率、角膜中央厚度及角膜内皮细胞密度的变化情况。结果:共113例212眼完成1 a随访,其中-0.50--2.00 D组82眼,-2.25--4.00 D组95眼,-4.25--6.00 D组35眼。戴镜1 a后,三组患者角膜中央厚度、角膜内皮细胞密度较戴镜前无差异(均P>0.05),裸眼视力较戴镜前均显著提高,角膜水平曲率(平K值)及角膜垂直曲率(陡K值)均明显变平坦(均P<0.01)。戴镜1 a后三组患者眼轴增长量分别为0.21±0.26、0.13±0.21和0.09±0.10 mm(P<0.05),-0.50--2.00 D组与-2.25--4.00 D组、-4.25--6.00 D组比较均有差异(P=0.028、0.010),-2.25--4.00 D组与-4.25--6.00 D组比较无差异(P=0.344)。结论:青少年近视患者配戴角膜塑形镜安全有效,能预防眼轴非良性增长、有效延缓近视发展,尤其对-2.0 D以上近视患者的眼轴控制更好,近视控制效果更佳。

关键词：角膜塑形镜近视眼轴疗效分析

miR-192-5p靶向CKIP-1促进骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2641-2647页

作者：鄂正康辛红伟于清波张允帅开封市中心医院(河南大学附属人民医院)骨六科河南省开封市475000

背景:酪蛋白激酶2结合蛋白1(casein kinase 2-interaction protein-1,CKIP-1)是一种重要的骨形成负调控基因,其敲除鼠骨质显著增强、骨形成和骨密度也显著提高。而miRNA作为较早发现的小分子调控物,对大多数编码基因具有调控作用,在成... 详细信息

背景:酪蛋白激酶2结合蛋白1(casein kinase 2-interaction protein-1,CKIP-1)是一种重要的骨形成负调控基因,其敲除鼠骨质显著增强、骨形成和骨密度也显著提高。而miRNA作为较早发现的小分子调控物,对大多数编码基因具有调控作用,在成骨分化中发挥重要作用。目的:探讨miRNA/CKIP-1对骨质疏松患者骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及其分子机制。方法:采用miRNA-Seq技术检测2022年3-6月在开封市中心医院骨外科就诊32例骨质疏松患者及同期体检中心健康人群骨髓间充质干细胞中miRNA的变化情况;利用Targetscan网站预测靶向调控CKIP-1的miRNA,利用荧光素酶报告基因实验检测miRNA与CKIP-1启动子区DNA的结合;在骨髓间充质干细胞中转染miR-192-5p类似物(miR-192-5p mimics)/阴性对照(NC mimics)或miR-192-5p抑制剂(miR-192-5p inhibitor)/阴性对照(NC inhibitor),成骨诱导后第7,14天,通过实时荧光定量PCR技术及茜素红染色检测成骨标志基因Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素、抗骨桥蛋白、骨唾液蛋白及CKIP-1的表达水平和骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的情况;采用蛋白质免疫印迹实验及茜素红染色检测miR-192-5p/CKIP-1/轴对细胞成骨分化的的调控作用。结果与结论:与健康组相比,骨质疏松组有16个miRNA表达明显升高,53个miRNA表达明显降低(P<0.05);利用Targetscan网站预测,并通过荧光素酶报告基因实验验证,发现miR-192-5p与CKIP-1有互补的核苷酸序列(P<0.05);过表达miR-192-5p,Runx2、骨钙素、骨桥素和骨唾液蛋白的表达水平显著升高(P<0.05),抑制miR-192-5p,Runx2、骨钙素、骨桥素和骨唾液蛋白的表达水平显著降低(P<0.05),而沉默CKIP-1的表达后,Runx2、骨钙素及骨桥素的蛋白水平增加(P<0.05),逆转了敲低miR-192-5p对细胞成骨分化的抑制作用。上述结果证实,miR-192-5p在骨质疏松症中表达降低;miR-192-5p通过靶向抑制CKIP-1的表达,促进骨髓间充质干细胞成骨分化。

关键词：骨质疏松微小RNA miR-192-5p 酪蛋白激酶2结合蛋白1 骨髓间充质干细胞成骨分化 Runt相关转录因子2 骨唾液蛋白

邮票异体皮植皮在特重度烧伤Meek皮片移植失败后的应用

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中国组织工程研究 2025年第12期29卷 2507-2512页

作者：田晨阳陶克计鹏王耘川胡大海高晓文郑朝空军军医大学第一附属医院烧伤与皮肤外科陕西省西安市710000 温州医科大学附属第一医院创面修复中心与再生医学中心创面修复科浙江省温州市325000

背景:部分特重度烧伤患者采用Meek皮片移植的术后效果并不能令人满意,出现了延迟愈合或皮片移植失败的问题。对于皮源不足的Meek皮片移植失败患者的治疗研究较少,此次研究探索了一种治疗的新方法。目的:观察邮票异体皮植皮技术在特重度... 详细信息

背景:部分特重度烧伤患者采用Meek皮片移植的术后效果并不能令人满意,出现了延迟愈合或皮片移植失败的问题。对于皮源不足的Meek皮片移植失败患者的治疗研究较少,此次研究探索了一种治疗的新方法。目的:观察邮票异体皮植皮技术在特重度烧伤Meek皮片移植失败后的疗效。方法:纳入空军军医大学第一附属医院烧伤科2013年8月至2023年8月收治Meek皮片移植术后愈合不良的23例特重度烧伤患者,根据治疗方式不同分为2组,其中异体皮治疗组10例,换药组13例。对比两组患者二次Meek植皮术前血红蛋白、血小板计数、白蛋白计数、白细胞计数、中性粒细胞,降钙素原及微生物培养阳性率;二次Meek植皮术前、术后皮片成活率;手术次数及脓毒血症发生率;以及术后3,6个月创面瘢痕情况。结果与结论:①异体皮治疗组的二次Meek植皮术前血红蛋白、血小板计数、白蛋白计数均明显高于换药组(Z=-3.172,P=0.002;Z=-3.010,P=0.003;Z=-2.761,P=0.006);②两组二次Meek植皮术前白细胞计数、中性粒细胞相比差异无显著性意义(Z=1.148,P=0.251;Z=0.373,P=0.709);但异体皮治疗组二次术前降钙素原计数明显低于换药组(Z=2.955,P=0.002);③换药组烧伤患者二次术前微生物培养阳性率高于异体皮治疗组(χ^(2)=6.303,P=0.029);④异体皮治疗组的二次Meek植皮术前植皮成活率(74.8±13.3)%明显高于换药组(58.4±14.2)%(t=2.85,P=0.01),术后植皮成活率(84.0±11.5)%明显高于换药组(67.6±20.7)%(t=2.24,P=0.03);⑤异体皮治疗组后期手术次数少于换药组(Z=2.27,P=0.02);⑥换药组烧伤患者脓毒血症发生率明显高于异体皮治疗组(χ^(2)=5.490,P=0.03);⑦两组手术后3,6个月瘢痕温哥华瘢痕量表评分相比差异无显著性意义(t=0.960,1.138,P>0.05);⑧提示邮票状异体皮在治疗Meek微型移植术后皮片愈合不良创面时具有较好的疗效,患者后期皮片利用率明显增高,减少了创面感染的概率,解决了皮源不足的问题。

关键词：特重度烧伤大面积烧伤邮票异体皮植皮术 Meek皮片移植延迟愈合