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hUMSCs外分泌上清联合替莫唑胺在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用

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中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 385-394页

作者：刘雨思王明明张玉富靳小燕贺晶史海燕陈美霓张静延安大学基础医学院陕西延安716000 延安大学附属医院陕西延安716000 西安医学院第二附属医院陕西西安710038 陕西干细胞工程有限公司陕西西安710075

目的:探讨人脐带间充质干细胞外分泌上清(hUMSC-CM)联合替莫唑胺(TMZ)在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用及潜在机制。方法:采用2种血清剥夺法(24和48 h分批次撤血清法)收集hUMSC-CM并制备成冻干粉,设置5种浓度(0、1、3、6和9 g/L)处... 详细信息

目的:探讨人脐带间充质干细胞外分泌上清(hUMSC-CM)联合替莫唑胺(TMZ)在不同胶质瘤细胞系中的协同增敏作用及潜在机制。方法:采用2种血清剥夺法(24和48 h分批次撤血清法)收集hUMSC-CM并制备成冻干粉,设置5种浓度(0、1、3、6和9 g/L)处理大鼠恶性胶质瘤细胞系RG-2、人星形细胞瘤细胞系U251和人胶质母细胞瘤细胞系LN-428。通过CCK-8实验检测hUMSC-CM作用于胶质瘤细胞24、48和72 h后的肿瘤抑制可行性及敏感度。HE染色结合CCK-8法确定6种浓度(0、25、50、100、200和400µmol/L)的TMZ作用于胶质瘤细胞48 h后化疗敏感性的差异。筛选出低、高2种浓度(3和9 g/L)的hUMSC-CM和低、中、高3种浓度(50、100和200µmol/L)的TMZ配伍,作用于胶质瘤细胞后检测细胞活力和病理形态学变化。TUNEL染色检测细胞凋亡;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot检测凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、cleaved caspase-8和cleaved PARP1,以及自噬相关蛋白beclin-1和LC3的表达变化,探讨hUMSC-CM与TMZ体外联合给药协同增敏的作用机制。结果:3种胶质瘤细胞系对hUMSC-CM和TMZ的敏感度为RG-2>U251>LN-428。hUMSC-CM(3和9 g/L)与TMZ(50、100和200µmol/L)配伍给药对胶质瘤细胞生长的抑制作用比单独给药组显著增强(P<0.05),且随着配伍药物剂量的增加而增强。其中,9 g/L hUMSC-CM(C9)与50µmol/L TMZ(T50)配伍可有效抑制胶质瘤细胞生长。与C9或T50组相比,CCK-8实验显示C9+T50组细胞活力显著下降(P<0.05),HE染色和TUNEL检测结果显示C9+T50组细胞形态变化明显,出现典型凋亡形态学特征,流式细胞术结果显示C9+T50可诱导胶质瘤细胞周期发生阻滞,Western blot结果显示C9+T50组细胞中cleaved caspase-3、cleaved caspase-8、cleaved PARP1、beclin-1和LC3-II/LC3-I水平显著升高(P<0.01)。结论:(1)hUMSC-CM与TMZ配伍给药对胶质瘤细胞的抑制作用具有广谱性,且两者之间存在增敏作用,在不同细胞系中呈现不同的增敏效果。(2)hUMSC-CM提高胶质瘤细胞对TMZ敏感度的机制可能与调节caspase-8/caspase-3/PARP1信号通路及自噬通路、诱导胶质瘤细胞发生凋亡和自噬有关。

关键词：脐带间充质干细胞替莫唑胺胶质瘤细胞凋亡自噬 caspase-8/caspase-3/PARP1信号通路

人脐带间充质干细胞运载呼肠孤病毒对人慢性髓系白血病K562细胞溶瘤作用的研究

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中国病理生理杂志 2024年第6期40卷 1043-1051页

作者：刘雨思贺晶杜娟靳小燕张静张玉富延安大学基础医学院陕西延安716000 延安大学附属医院陕西延安716000 西安医学院第二附属医院陕西西安710038 陕西干细胞工程有限公司陕西西安710075

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUMSCs)运载3型呼肠孤病毒(Reo3)对人慢性髓系白血病K562细胞的溶瘤效应。方法:流式细胞术检测hUMSCs和K562细胞表面Reo3易感受体——连接黏附分子A(JAM-A)表达情况,电镜观察Reo3感染hUMSCs 72 h后胞内病... 详细信息

目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUMSCs)运载3型呼肠孤病毒(Reo3)对人慢性髓系白血病K562细胞的溶瘤效应。方法:流式细胞术检测hUMSCs和K562细胞表面Reo3易感受体——连接黏附分子A(JAM-A)表达情况,电镜观察Reo3感染hUMSCs 72 h后胞内病毒包涵体分布。将不同(0、1、2和3)感染复数(MOI)的Reo3感染hUMSCs 24、48、72、96和120 h后利用CCK-8法筛选最适MOI。选择最适滴度的Reo3感染hUMSCs 24、48、72、96和120 h后收集上清液,利用小鼠成纤维细胞系L929结合半数组织培养感染剂量(TCID50)法测定各组上清液中Reo3病毒滴度以确定最适感染时间。将K562细胞分为对照组、hUMSCs组、Reo3组和hUMSCs-Reo3组,hUMSCs组和hUMSCs-Reo3组设置hUMSCs与K562细胞作用的低、中、高比例(5∶1、10∶1和20∶1)。CCK-8法分析hUMSCs-Reo3与K562细胞共培养24、48、72 h后K562细胞活力的变化。流式细胞术评估细胞凋亡。利用L929细胞确定抗Reo3单克隆抗体的半数效应浓度(EC50);验证在体外抗体存在条件下hUMSCs-Reo3对K562细胞溶瘤作用的变化。Western blot检测运载体作用于K562细胞后胞内Bcl-2、Bax、survivin和cleaved caspase-3蛋白水平。构建K562细胞的BALB/c裸鼠皮下荷瘤模型(每组6只),分析hUMSCs-Reo3在体内对K562细胞的抑瘤效果。结果:hUMSCs和K562细胞表面JAM-A分子表达量分别为11.0%和99.0%。电镜显示Reo3感染hUMSCs 72 h后胞内出现大量病毒包涵体。在120 h范围内,与未感染组相比,MOI=1的Reo3对hUMSCs活力无显著影响,故最佳MOI为1;TCID50结果显示,MOI=1的Reo3感染hUMSCs 48 h后细胞裂解液中病毒滴度最高,故最适感染时间为48 h。hUMSCs-Reo3作用24、48和72 h后K562细胞活力呈现剂量与时间依赖性抑制。抗Reo3单克隆抗体的EC50为1∶34;在体外不同浓度(1∶34、1∶300和1∶600)抗体存在条件下,hUMSCs仍能运载Reo3抑制K562细胞活力并诱导凋亡发生。与对照组相比,hUMSCs-Reo3作用48 h后K562细胞中Bcl-2和survivin表达水平显著下调(P<0.05),Bax和cleaved caspase-3表达水平显著上调(P<0.05或P<0.01)。在BALB/c裸鼠荷瘤模型中,荷瘤体积测定、肿瘤组织和主要脏器病理学分析及小动物活体成像仪检测组织蛋白酶B/L活性结果表明,运载体在体内对K562细胞具有溶瘤效应而对正常组织无不良影响。结论:hUMSCs可有效运载Reo3,该运载体系在体内、外实验中能够释放足量Reo3抑制K562细胞恶性增殖并促进细胞凋亡,从而发挥溶瘤效应。

关键词：人脐带间充质干细胞呼肠孤病毒慢性髓系白血病溶瘤作用细胞凋亡荷瘤模型

手术与非手术治疗Ⅲ型肩锁关节脱位的荟萃分析

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中国矫形外科杂志 2024年第4期32卷 339-344页

作者：王磊张杰王凤凤武政延安大学附属医院关节外科陕西延安716000 延安大学附属医院血液免疫科陕西延安716000

[目的]系统评价手术与非手术治疗Rockwood Ⅲ型肩锁关节脱位的临床疗效。[方法]检索建库至2022年6月Cochrane Library、PubMed、Web of science、EMBASE、中国知网数据库、万方数据库及中国生物医学数据库,收集比较手术与非手术治疗Rock... 详细信息

[目的]系统评价手术与非手术治疗Rockwood Ⅲ型肩锁关节脱位的临床疗效。[方法]检索建库至2022年6月Cochrane Library、PubMed、Web of science、EMBASE、中国知网数据库、万方数据库及中国生物医学数据库,收集比较手术与非手术治疗Rockwood Ⅲ型肩锁关节脱位的临床研究。采用RevMan 5.2软件进行荟萃分析。[结果]共纳入17篇文献,1006例患者。荟萃分析结果显示:手术组肩锁关节炎发生率(OR=6.01,95%CI 2.16~16.68,P=0.0006)、感染发生率(OR=5.92,95%CI1.35~22.91,P=0.02)、异位骨化发生率(OR=1.98,95%CI 1.18~3.32,P=0.009)均显著高于保守组。保守组结局功能优良率(OR=1.75,95%CI 1.19~2.58,P<0.05)、Constant评分显著优于手术组(WMD=1.79,95%CI 1.14~2.43,P<0.05)。保守组和手术组并发症发生率(OR=1.73,95%CI 0.65~4.63,P=0.27)、肩关节疼痛(OR=1.23,95%CI 0.61~2.47,P=0.57)、锁骨外侧骨溶解发生率(OR=1.31,95%CI 0.39~4.38,P=0.66)的差异均无统计学意义。[结论]在并发症、疼痛、肩锁关节溶骨等方面手术和保守治疗没有差别,但是在感染、肩锁关节炎、异位骨化、结局功能优良率、Constant评分等方面,保守治疗有明显优势。

关键词： RockwoodⅢ型肩锁关节脱位手术治疗非手术治疗荟萃分析

功能性便秘与儿童急性阑尾炎阑尾腔内粪石形成的相关性

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临床儿科杂志 2024年第6期42卷 533-537页

作者：范娜王春晖张安定曾令超李元霞林燕尚磊张鑫慧贺小宝齐可江逊空军军医大学第二附属医院唐都医院儿科陕西西安710000 延安大学医学院陕西延安716000

目的探讨功能性便秘(FC)与儿童急性阑尾炎(AA)阑尾腔内粪石形成的相关性。方法回顾性分析2022年8月至2023年6月收治确诊为AA患儿的临床资料。根据阑尾腔内有无粪石分为合并粪石AA组和无粪石AA组,比较两组间FC相关临床特征,分析影响儿... 详细信息

目的探讨功能性便秘(FC)与儿童急性阑尾炎(AA)阑尾腔内粪石形成的相关性。方法回顾性分析2022年8月至2023年6月收治确诊为AA患儿的临床资料。根据阑尾腔内有无粪石分为合并粪石AA组和无粪石AA组,比较两组间FC相关临床特征,分析影响儿童AA阑尾腔内粪石形成的因素。结果共纳入AA患儿192例,男114例、女78例,中位年龄6.0(4.0~9.0)岁。其中合并粪石AA组72例、无粪石AA组120例。与无粪石AA组相比,合并粪石AA组大便潴留发生率(≥4岁)较高、FC患病率较高、平均便秘时间较长、偏食发生率较高,差异有统计学意义(P<0.05)。二元logistic回归分析结果显示,便秘时间长、偏食是儿童AA阑尾腔内粪石形成的独立危险因素(P<0.05)。结论长期便秘及偏食对儿童AA阑尾腔内粪石的形成有一定相关性。

关键词：急性阑尾炎阑尾粪石功能性便秘儿童

托法替布通过JAK/STAT3通路抑制肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化

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北京大学学报（医学版） 2024年第3期56卷 505-511页

作者：何珊陈炘程琦朱灵江张培玉童淑婷薛静杜燕浙江大学医学院附属第二医院风湿免疫科杭州310009 浙江大学医学院附属金华医院风湿免疫科浙江金华321000

目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提... 详细信息

目的:研究泛Janus激酶(Janus kinase,JAK)抑制剂托法替布(tofacitinib)对转化生长因子-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用及机制,为临床治疗结缔组织病相关的间质性肺疾病提供理论依据。方法:(1)体外培养人胚胎肺成纤维细胞(human fetal lung fibroblast 1,HFL-1),设立6个组,分别为DMSO空白对照组、TGF-β1诱导组、TGF-β1联合不同浓度托法替布(0.5、1.0、2.0、5.0μmol/L)药物干预实验组。采用CCK-8法检测细胞活力,划痕愈合实验检测细胞迁移能力。(2)采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-PCR)、蛋白免疫印迹实验(Western blotting)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,COL1)基因及蛋白的表达水平。应用RT-PCR和酶联免疫吸附试验检测各组白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的基因和细胞培养上清液中的蛋白水平。(3)在不同组的细胞培养基中加入DMSO载体对照,以1.0μmol/L和5.0μmol/L的托法替布预培养30 min,然后加入TGF-β1处理1 h、6 h和24 h。以Western blotting检测Smad2/3、信号传导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的蛋白磷酸化水平。结果:(1)托法替布抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞活力及迁移能力。(2)与空白对照组相比,TGF-β1诱导组HFL-1的α-SMA、COL1A1和FN1基因表达显著上调(P<0.05)。5.0μmol/L托法替布干预组的α-SMA基因表达与TGF-β1诱导组相比显著下调(P<0.05)。0.5~5.0μmol/L托法替布各干预组与TGF-β1诱导组相比均可抑制FN1基因表达(P<0.05)。各干预组与TGF-β1诱导组相比,COL1A1基因的表达无明显变化。(3)Western blotting结果提示,TGF-β1诱导组细胞α-SMA、FN1蛋白水平较对照组显著增加(P<0.05),COL1A1表达未见明显差异。托法替布不同浓度干预组与TGF-β1诱导组相比,α-SMA蛋白表达均有下降,其中2.0μmol/L和5.0μmol/L干预组与诱导组间的差异有统计学意义(P<0.05)。托法替布不同浓度干预组的FN1蛋白水平均有下降,但与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。各干预组的COL1A1蛋白表达与TGF-β1诱导组相比差异无统计学意义。(4)TGF-β1诱导48 h,HFL-1细胞中IL-6基因及培养上清液中IL-6的表达水平较对照组显著升高,各浓度托法替布干预组与TGF-β1诱导组相比均有所降低。TGF-β1诱导1 h、6 h和24 h,STAT3蛋白磷酸化水平增加,托法替布预刺激抑制了6 h时Smad2/3的磷酸化水平,在1 h、6 h和24 h时均抑制了STAT3的磷酸化水平。结论:托法替布能抑制TGF-β1诱导的HFL-1细胞向肌成纤维细胞方向转化,其机制可能是通过抑制Smad2/3经典通路以及抑制TGF-β1所诱导的STAT3磷酸化,从而对肺纤维化疾病进展发挥保护作用。

关键词：托法替布肺纤维化成纤维细胞肌成纤维细胞 STAT3转录因子

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消化内镜在早期胃癌诊断中的进展分析

临床医学进展 2024年第6期14卷 511-518页

作者：刘欣彤延安大学医学院陕西延安延安大学附属医院陕西延安

随着医学技术的不断进步,消化内镜作为一种高效率、低创伤的诊断工具,在早期胃癌的检测和诊断中扮演了举足轻重的角色。胃癌作为全球常见的消化系统恶性肿瘤之一,其早期诊断对提高患者的生存率至关重要。本研究集中分析消化内镜在早期... 详细信息

随着医学技术的不断进步,消化内镜作为一种高效率、低创伤的诊断工具,在早期胃癌的检测和诊断中扮演了举足轻重的角色。胃癌作为全球常见的消化系统恶性肿瘤之一,其早期诊断对提高患者的生存率至关重要。本研究集中分析消化内镜在早期胃癌诊断领域内的最新进展,涉及高分辨率内镜、显微内镜、内镜下超声(EUS)及窄带成像(NBI)技术等。调查了现阶段150名临床医生对这些新技术的应用认知,并通过对早期胃癌病例的分析,确立了消化内镜诊断的准确性和应用范围。本课题通过对不同技术的比较研究,阐释了各技术在精确诊断早期胃癌中的具体优势及其潜在局限。研究表明,尽管高分辨率内镜提供了更清晰的图像,而NBI技术改善了黏膜病变的视觉识别,显微内镜和内镜下超声则在定量分析肿瘤浸润深度方面具有不可替代的优势。在实证研究中,我们还发现,尽管这些技术显著提高了早期胃癌的诊断率,但在实际临床应用中还面临技术普及、医生培训及成本效益等方面的挑战。提供了关于不同胃癌早期分型和诊断准则的详细对比,挖掘了影响诊断效率和准确性的关键因素。基于研究结果,建议未来在内镜设备的研发上强调操作的便利性以及更高的图像分辨率,同时提出加强医生相关技术培训,以及建立标准化诊断流程。综上所述,该研究不仅扩展了现有的医学知识,也为临床实践中提供了有价值的参考,对早期胃癌的精确诊断及治疗规划贡献了重要的理论和实证支持。

关键词：消化内镜早期胃癌诊断高分辨率内镜显微内镜内镜下超声文献综述

利多卡因在预防全身麻醉拔管呛咳中的应用进展

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临床医学进展 2024年第3期14卷 1249-1254页

作者：郭晓帮张海亮延安大学医学院陕西延安延安大学附属医院陕西延安

在全身麻醉后气管拔管过程中,吸痰拔管的机械刺激不仅会引起咳嗽、支气管痉挛等气道反应,还会引起血流动力学波动,如高血压、心动过速、心律失常等,导致心脑血管事故甚至危及生命的事件。目前,利多卡因为临床常用的表面麻醉剂来预防呛... 详细信息

在全身麻醉后气管拔管过程中,吸痰拔管的机械刺激不仅会引起咳嗽、支气管痉挛等气道反应,还会引起血流动力学波动,如高血压、心动过速、心律失常等,导致心脑血管事故甚至危及生命的事件。目前,利多卡因为临床常用的表面麻醉剂来预防呛咳反应的发生。本文综述了利多卡因在预防全身麻醉拔管呛咳中的不同方式的研究进展。

关键词：利多卡因全身麻醉拔管呛咳反应预防

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椎管内麻醉中常用辅助镇静药物的研究进展

临床医学进展 2024年第4期14卷 1801-1812页

作者：柴欢欢李玲霞延安大学医学院陕西延安延安大学附属医院麻醉科陕西延安

近年来,随着麻醉技术的不断提升和无痛舒适化医疗理念的推广,麻醉工作不仅仅只局限在术中镇痛,我们不仅要考虑患者围术期的生理变化,同时要考虑到患者的心理变化。椎管内麻醉在临床麻醉中是不可缺少的麻醉方法,麻醉后患者意识处于清醒状... 详细信息

近年来,随着麻醉技术的不断提升和无痛舒适化医疗理念的推广,麻醉工作不仅仅只局限在术中镇痛,我们不仅要考虑患者围术期的生理变化,同时要考虑到患者的心理变化。椎管内麻醉在临床麻醉中是不可缺少的麻醉方法,麻醉后患者意识处于清醒状态,手术医师的操作,手术间里的机械声音等会使患者感觉恐惧和不适,为了减少患者焦虑,紧张的状态,麻醉医师常辅助一些镇静药物来使患者达到睡眠状态,从而使患者在手术过程中不愉快的情绪减少。随着医疗技术不断提高,不同种类麻醉药物也在不断更新,选择一种起效快、代谢快、副作用小、安全性高的麻醉药品对麻醉医师来说非常重要。本文就目前几种常用的静脉镇静药物的特点及应用展开综述。

关键词：椎管内麻醉镇静丙泊酚咪达唑仑右美托咪定瑞马唑仑

多囊卵巢综合征雄激素过多对产科并发症的影响

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医学诊断 2024年第1期14卷 106-111页

作者：付春雷张媛媛王亚倩延安大学医学院陕西延安延安大学附属医院陕西延安

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是一种育龄期妇女常见的妇科生殖内分泌疾病。临床上观察到PCOS患者发生妊娠期糖尿病、妊娠期高血压疾病、早产等产科并发症的风险高。雄激素过多是PCOS的重要临床特征、诊断要点及核... 详细信息

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是一种育龄期妇女常见的妇科生殖内分泌疾病。临床上观察到PCOS患者发生妊娠期糖尿病、妊娠期高血压疾病、早产等产科并发症的风险高。雄激素过多是PCOS的重要临床特征、诊断要点及核心病理环节,也是引起其产科并发症的主要因素之一。因此,本文分析了PCOS患者雄激素过多对产科并发症的影响,复习PCOS患者雄激素过多的管理及孕前药物抗雄激素治疗对其产科并发症的影响的文献。

关键词：多囊卵巢综合征雄激素过多产科并发症孕前抗雄激素治疗