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基于专利计量的天麻药品研发态势分析

中草药 2022年第15期53卷 4915-4924页

作者：上官晨虹全毅恒陈琛陕西理工大学中德天然产物研究所陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心陕西省资源生物重点实验室陕西理工大学生物科学与工程学院陕西汉中723000

天麻Gastrodia elata是我国名贵中药,具有极高的药用和食用价值,拥有巨大的潜在市场,为了解天麻药品专利的特点,掌握其技术研发趋势,以IncoPat数据库和DII数据库为数据源,检索2002年以来国内外公开的天麻药品专利,运用多种专利计量学手... 详细信息

天麻Gastrodia elata是我国名贵中药,具有极高的药用和食用价值,拥有巨大的潜在市场,为了解天麻药品专利的特点,掌握其技术研发趋势,以IncoPat数据库和DII数据库为数据源,检索2002年以来国内外公开的天麻药品专利,运用多种专利计量学手段,对申请总量、申请地域、申请机构、主要发明人、专利代理、前沿热点等方面进行分析。结果表明,20年来天麻药品专利数量持续增加;全球天麻药品专利主要源于中国,韩国和美国在未来可能会成为中国的竞争国;国内外申请机构间的合作较少且呈现出较强的地域性;发明人间缺乏跨地区、跨国界的交流;国内杰出的代理机构主要分布在安徽省、山东省、北京市;天麻药品未来的研究热点在治疗血管性偏头痛、高血压及风湿骨病。该研究能为天麻药品专利未来申请布局、产品创新研发及市场战略的制定提供参考,研究人员应当紧抓未来前沿热点,加强省际、国际合作,不断研发出高质量的天麻药品。

关键词：天麻药品 IncoPat数据库 DII数据库专利计量学

天麻中酚类成分对心脑血管疾病的药理作用研究进展

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中草药 2022年第14期53卷 4582-4592页

作者：全毅恒上官晨虹陈琛陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心陕西理工大学中德天然产物研究所陕西汉中723000 陕西理工大学生物科学与工程学院陕西省资源生物重点实验室陕西汉中723000

天麻Gastrodia elata具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络的功效,含有天麻素、天麻苷元、天麻多糖等主要成分。总结了天麻中的主要酚类成分,阐明了天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷、香草醛等酚类成分对心脑血管疾病如缺血性脑损伤、血管... 详细信息

天麻Gastrodia elata具有息风止痉、平抑肝阳、祛风通络的功效,含有天麻素、天麻苷元、天麻多糖等主要成分。总结了天麻中的主要酚类成分,阐明了天麻素、对羟基苯甲醇、巴利森苷、香草醛等酚类成分对心脑血管疾病如缺血性脑损伤、血管性痴呆、缺血性心肌损伤、高血压、动脉粥样硬化、血凝血栓、炎症等的药理作用,探讨了天麻酚类成分通过抗氧化、调节功能性蛋白表达、抗凋亡、抗炎等机制治疗心脑血管疾病的作用机制,为天麻酚类成分的深入研究提供参考和依据。

关键词：天麻天麻素对羟基苯甲醇巴利森苷心脑血管疾病

天麻惊风散在小动物惊风中的新治疗方法研究与探讨

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中国兽医杂志 2019年第5期55卷 53-54页

作者：郑红星祁珊珊陈琛陕西理工大学生物科学与工程学院陕西汉中723000 陕西理工大学中德天然产物研究所陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心陕西汉中723000

惊风是小动物常见的一种急重病证,以临床出现抽搐、昏迷为主要特征。本病的发生是由于幼龄动物的大脑发育尚未成熟,免疫机能比较低下,加上幼龄期某些特殊疾病,如产伤、脑发育畸形等,即容易出现急性感染及中枢神经系统感染。另外,小动物... 详细信息

惊风是小动物常见的一种急重病证,以临床出现抽搐、昏迷为主要特征。本病的发生是由于幼龄动物的大脑发育尚未成熟,免疫机能比较低下,加上幼龄期某些特殊疾病,如产伤、脑发育畸形等,即容易出现急性感染及中枢神经系统感染。另外,小动物惊风症状经常发生于犬瘟热、产后抽搐、中暑、中毒等疾病。目前西医疗法对惊风的疗效很有限,中医疗法主要有祛风方、安神方及开窍方,常用于马、牛、羊等大动物,通常以汤剂服用[1]。虽然中药方剂对动物惊风具有确切疗效,但是也存在一些问题,如中药汤剂的煎液体积较大、味苦,服用、携带不方便;多系依据兽医师处方临时配制应用,不宜大量制备,也不利于及时抢救危重患病动物;易发霉、发酵、不能久贮。

关键词：患病动物幼龄动物中医疗法中药方剂幼龄期犬瘟热大脑发育医师处方

重组铜绿假单胞菌外膜蛋白D的原核表达与多克隆抗体制备研究

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河北农业大学学报 2019年第1期42卷 99-105页

作者：伍娜娜荣娜康超刘祥陈琛陈春琳马心怡吴三桥陕西理工大学生物科学与工程学院/中德天然产物研究所陕西汉中723001 陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心陕西汉中723001

为获得铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD并研究其分子功能。本研究采用分子克隆构建OprD蛋白重组表达菌株,用正交试验设计方法获得OprD菌株的最优表达条件和培养条件,通过SDS-PAGE切胶的方法纯化OprD蛋白,小鼠免疫制备OprD多克隆抗血清,蛋白质... 详细信息

为获得铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD并研究其分子功能。本研究采用分子克隆构建OprD蛋白重组表达菌株,用正交试验设计方法获得OprD菌株的最优表达条件和培养条件,通过SDS-PAGE切胶的方法纯化OprD蛋白,小鼠免疫制备OprD多克隆抗血清,蛋白质印迹法检测抗血清的特异性。使用DNAMan和MEGA软件对OprD蛋白进行同源性和系统发生分析。结果表明,OprD重组载体双酶切、DNA测序鉴定结果、OprD蛋白表达与纯化条带大小分别与预测相符。正交试验获得OprD菌株的最优培养条件为:葡萄糖浓度为0,转速230r/min,装液量为50mL;最优表达条件为:菌液OD600=0.8时加入终浓度为0.3mmol/L的异丙基β-D-1-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),37℃诱导12h。SDS-PAGE电泳切胶纯化获得纯度较高的OprD蛋白。蛋白质印迹法证实OprD蛋白抗血清具有较好的特异性。OprD蛋白序列系统发生分析发现,同菌属细菌存在较高的同源性,并且亲缘关系较近的细菌中OprD蛋白可能具有相似的分子功能。

关键词：铜绿假单胞菌外膜蛋白OprD 多克隆抗体诱导条件

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基于数据库对杜仲研究现状的文献计量学分析

世界科学技术-中医药现代化 2022年第7期24卷 2609-2618页

作者：范殊琮郑红星陈琛陕西理工大学中德天然产物研究所/陕西理工大学生物科学与工程学院汉中723000

目的通过归纳2000-2020年杜仲研究领域的研究热点,了解国内外杜仲研究现状,为研究学者提供参考。方法通过检索CNKI和PubMed数据库杜仲研究领域的相关文献,对其发文量、作者、研究机构、被引频次以及高频关键词等用文献计量学的方法以可... 详细信息

目的通过归纳2000-2020年杜仲研究领域的研究热点,了解国内外杜仲研究现状,为研究学者提供参考。方法通过检索CNKI和PubMed数据库杜仲研究领域的相关文献,对其发文量、作者、研究机构、被引频次以及高频关键词等用文献计量学的方法以可视图的方式展示杜仲研究的发展脉络,进一步分析出该领域的研究热点,并对未来可能的发展方向进行预测。结果共检索出CNKI数据库7784篇以及PubMed数据库465篇文献,以可视图谱的方式展现杜仲领域发展脉络。结论20年来发文量显著增加;学者及机构之间应不断深化交流与合作;近二十年的研究热点主要有以大鼠为疾病动物模型研究杜仲的药理作用,如降血压、降血脂、治疗骨质疏松等,杜仲的活性成分以木脂素类的松脂醇二葡萄糖苷、环烯醚萜类的桃叶珊瑚甙以及杜仲胶为主;随着科学技术不断进步,重点由栽培育种、化学成分向网络药理学、数据挖掘等方向发展。

关键词：杜仲文献计量学数据库可视化研究热点

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天麻多糖的分离纯化与抗氧化活性研究

中国临床药理学杂志 2018年第18期34卷 2203-2206页

作者：陈琛李鑫鑫徐尤美蔺蓓蓓周天华刘祥郑红星吴三桥曹军毅胡红忠陕西理工大学中德天然产物研究所陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心陕西理工大学生物科学与工程学院陕西汉中723000 陕西汉王药业有限公司陕西汉中723000 陕西百圣生物工程有限公司陕西略阳724300

目的从天麻中分离纯化出活性多糖并考查其抗氧化活性。方法用水提醇沉法提取天麻粗多糖,Sevage法脱去其中的蛋白质,依次通过D101大孔吸附树脂、DEAE-52离子交换色谱及Sephadex G-100凝胶色谱纯化,得到2个天麻多糖(GEP):GEP1-G和GEP2-G,... 详细信息

目的从天麻中分离纯化出活性多糖并考查其抗氧化活性。方法用水提醇沉法提取天麻粗多糖,Sevage法脱去其中的蛋白质,依次通过D101大孔吸附树脂、DEAE-52离子交换色谱及Sephadex G-100凝胶色谱纯化,得到2个天麻多糖(GEP):GEP1-G和GEP2-G,测定其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力,以评价其抗氧化作用。结果天麻中粗多糖提取率为5.6%,经D101大孔吸附树脂纯化后,粗多糖中多糖含量为65.7%;DEAE-52纯化后,有6个洗脱组分GEP 1~6;组分GEP1和GEP2再经Sephadex G-100纯化得到纯品多糖GEP1-G和GEP2-G,其多糖含量分别是97.3%和98.1%。在抗氧化活性实验中:当GEP1-G和GEP2-G浓度为1 mg·mL^(-1)时,两者对DPPH的清除率分别为44.50%和25.60%,对超氧阴离子抑制率分别为33.32%和21.55%,对羟自由基抑制率分别为39.50%和22.80%。结论通过大孔吸附树脂、离子交换色谱和凝胶过滤色谱得到了纯品天麻多糖,其具有一定的抗氧化作用。

关键词：天麻多糖提取纯化抗氧化活性

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绿原酸的提纯分析技术及策略

化学试剂 2019年第12期41卷 1260-1270页

作者：徐尤美蔺蓓蓓郑红星陈琛陕西理工大学生物科学与工程学院中德天然产物研究所

绿原酸具有抗菌、抗病毒、抗炎、保肝、降糖降脂、调节免疫、神经保护、降压、抗氧化等多种生物活性,临床上可用于抗菌解毒、消炎利胆。绿原酸具有易氧化、稳定性差,同分异构体较多且性质差异小,提取纯化难度大,导致绿原酸的提取率低,... 详细信息

绿原酸具有抗菌、抗病毒、抗炎、保肝、降糖降脂、调节免疫、神经保护、降压、抗氧化等多种生物活性,临床上可用于抗菌解毒、消炎利胆。绿原酸具有易氧化、稳定性差,同分异构体较多且性质差异小,提取纯化难度大,导致绿原酸的提取率低,成本高,因此绿原酸的高效提制是天然产物研究中一个热点之一。重点概述了绿原酸的提取方法,包括传统提取法、物理提取法、酶解法、超临界流体萃取法。绿原酸的纯化方法,包括膜分离、聚酰胺柱层析、大孔吸附树脂分离、高效液相色谱、高速逆流色谱法,并分析了各种方法的优缺点和应用效果,提出了绿原酸提取纯化的技术方案,为建立高效低廉的高纯度绿原酸提取纯化提供参考。

关键词：绿原酸提取纯化生物活性高纯度

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天麻不同极性成分的体外抗氧化综合评价

食品科技 2018年第7期43卷 66-71页

作者：李鑫鑫徐尤美陈琛李晓东胡红忠陕西理工大学中德天然产物研究所陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心陕西理工大学生物科学与工程学院汉中723000 略阳县中药材技术推广服务中心略阳724300 陕西百圣生物工程有限公司略阳724300

通过体外抗氧化活性评价实验,研究天麻6种不同极性成分的抗氧化作用。分别用水和95%的乙醇回流提取天麻块茎,浓缩的乙醇浸膏依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,各极性成分分别配制成适当浓度的溶液,采用1,1-二苯基-2-... 详细信息

通过体外抗氧化活性评价实验,研究天麻6种不同极性成分的抗氧化作用。分别用水和95%的乙醇回流提取天麻块茎,浓缩的乙醇浸膏依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,各极性成分分别配制成适当浓度的溶液,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法、2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉磺酸-6)二铵盐(ABTS)自由基法、邻苯三酚自氧化法和铁氰化钾还原法测定天麻各极性成分的自由基清除能力和还原能力。从天麻中提取的6种极性成分对DPPH自由基的清除能力效果最好的是乙酸乙酯、二氯甲烷和石油醚萃取物,清除率分别为87.58%、83.33%和68.55%;ABTS自由基的清除率6种成分效果均较好,特别是乙酸乙酯萃取物(99.15%)和二氯甲烷萃取物(98.72%)清除率接近于阳性对照V_E;但超氧阴离子自由基的清除能力6个成分均较弱,清除率明显低于阳性对照V_E;而在还原力测定实验中,在高浓度时,石油醚萃取物表现出比V_E更强的还原能力。在天麻的6种不同极性成分中,石油醚萃取物的综合抗氧化活性最强,其APC指数达到了71.82%。

关键词：天麻提取物 APC指数抗氧化活性

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抗酒石酸酸性磷酸酶染色方法的改良

临床与实验病理学杂志 2019年第7期35卷 864-866页

作者：何佳祁珊珊李鑫鑫陕西理工大学维生素D生理与应用研究所病理室汉中723000 陕西理工大学中德天然产物研究所/陕西省天麻山茱萸工程技术研究中心细胞室汉中723000

破骨细胞是一种执行骨吸收功能的细胞,其清晰辨识对骨组织生理病理学研究及代谢性骨病的研究具有十分重要的意义。当机体内破骨细胞功能活跃时,胞质内产生大量的抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistnt acid phosphatase,TRAP)。因此,鉴... 详细信息

破骨细胞是一种执行骨吸收功能的细胞,其清晰辨识对骨组织生理病理学研究及代谢性骨病的研究具有十分重要的意义。当机体内破骨细胞功能活跃时,胞质内产生大量的抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistnt acid phosphatase,TRAP)。因此,鉴定破骨细胞的TRAP染色技术在病理诊断中不可或缺。TRAP作为破骨细胞的特异性标志酶,是鉴别破骨细胞的重要标志[1],应用TRAP染色法可显示破骨细胞胞质内TRAP的活性,准确辨别破骨细胞。传统的TRAP染色液(pH 5.0~5.2)染色背景常有颗粒沉渣,经蒸馏水水洗易脱片。我们在实际工作中经过反复试验,对TRAP染色技术的细节进行分析和调整,获得较好的染色效果,现介绍如下。

关键词： TRAP 破骨细胞染色技术 pH值