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陕西彬州市中药资源普查分析研究

陕西中医药大学学报 2021年第2期44卷 18-24页

作者：王丹阳李璐含李柳柳王祥张岗彭亮高静颜永刚陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

目的通过对彬州市现有中药资源的实地普查,摸清家底,为彬州市中药资源的合理开发利用和保护提供依据。方法以全国中药资源普查技术规范为指导,通过野外样地调查、标本采集与制作、普查数据整理以及民间走访,并对彬州市现有中药资源从重... 详细信息

目的通过对彬州市现有中药资源的实地普查,摸清家底,为彬州市中药资源的合理开发利用和保护提供依据。方法以全国中药资源普查技术规范为指导,通过野外样地调查、标本采集与制作、普查数据整理以及民间走访,并对彬州市现有中药资源从重点品种、入药部位、生活型、采集地不同方面进行统计分析。结果普查共完成了37个样地,185个套方,1110个样方的调查。调查的药用植物种类涉及82个科,共288种,其中普查重点品种71种。结论彬州市中药资源海拔分布差异较小,各乡镇分布种数差异不大。野生草本药用植物占主要位置,全草类、根及根茎类、果实和种子类的药用植物种类繁多。普查结果为彬州市中医药产业发展规划的制订以及中药材合理利用、栽培与开发提供了参考依据。

关键词：彬州市中药资源普查重点品种入药部位采集地

陕西产重楼属种质资源的SCoT遗传多样性分析

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中草药 2019年第16期50卷 3917-3922页

作者：程虎印王艳颜永刚杨冰月杨琳程江雪彭亮张岗陕西中医药大学药学院陕西秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046 陕西省微生物研究所陕西省科学院秦岭天然产物工程中心陕西西安710043

目的对陕西产重楼属6个类群的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法采用SCoT分子标记技术和非加权平均距离法(UPGMA)对陕西产重楼属6个类群48份样品进行遗传多样性和聚类分析。结果从82条SCoT引物中共筛选出12条多态性稳定、清晰的引物,4... 详细信息

目的对陕西产重楼属6个类群的遗传多样性和亲缘关系进行分析。方法采用SCoT分子标记技术和非加权平均距离法(UPGMA)对陕西产重楼属6个类群48份样品进行遗传多样性和聚类分析。结果从82条SCoT引物中共筛选出12条多态性稳定、清晰的引物,48份重楼样品共扩增出152个DNA片段,多态性片段数为135,平均每个引物扩增出12.67个DNA片段,其多态性为88.82%;重楼属植物在物种水平上具有较高的遗传多样性,Nei's基因多样性指数(H)为0.267 4,Shannon指数(I)平均值为0.404 1,居群间遗传分化系数(Gst)为0.517 9,种群间基因流(Nm)为0.465 4;6个类群重楼按遗传多样性水平排序为七叶一枝花>宽叶重楼>具柄重楼>狭叶重楼>宽瓣重楼>北重楼,聚类分析可将北重楼组和其他重楼组区分开来,当遗传距离一定时,重楼属6个类群被完全区分开来。结论SCoT分子标记可获得多态性丰富、清晰的条带扩增图谱,表明该技术可用于陕西产重楼属主要类群物种分子鉴定和亲缘关系研究,为筛选与药典收载种类近缘的可替代资源种类、指导合理利用地方种类自然资源提供了科学依据。

关键词：重楼属种质资源 SCoT分子标记遗传多样性亲缘关系

窝儿七HPLC指纹图谱建立及12种成分含量测定

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中草药 2020年第19期51卷 5041-5047页

作者：崔誉文宋小妹李玉泽梁小飞西安医学院药学院陕西西安710021 陕西中医药大学陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西省中药基础与新药研究重点实验室陕西咸阳712046

目的建立窝儿七HPLC指纹图谱,并同时测定19个批次不同产地窝儿七中苦鬼臼毒素葡萄糖二苷、苦鬼臼毒素葡萄糖苷、4’-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素葡萄糖苷、山柰酚葡萄糖苷、鬼臼毒素、arabeline、鬼臼毒酮、山荷叶素葡萄糖苷、槲皮素、山... 详细信息

目的建立窝儿七HPLC指纹图谱,并同时测定19个批次不同产地窝儿七中苦鬼臼毒素葡萄糖二苷、苦鬼臼毒素葡萄糖苷、4’-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素葡萄糖苷、山柰酚葡萄糖苷、鬼臼毒素、arabeline、鬼臼毒酮、山荷叶素葡萄糖苷、槲皮素、山柰酚和山荷叶素12种化学成分含量,为窝儿七质量控制提供科学依据。方法采用COSMOSIL-C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B)为流动相;梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃;检测波长300nm,进样量10μL;建立窝儿七药材指纹图谱,测定12个成分含量,对结果进行聚类分析。结果 19批窝儿七HPLC指纹图谱有16个共有峰,各相似度均在0.9以上,12个化学成分在各自范围内线性关系良好(r2≥0.999 0),精密度、重复性RSD<2%,在24h内稳定性较好(RSD<2%),加样回收率均在99.27%~100.30%,RSD均在1.03%~1.98%。19批样品中上述12个成分的含量测定结果及聚类分析结果可知不同产地窝儿七质量有所差异。结论该方法简单、灵敏、准确,为窝儿七的鉴别及质量评价提供了全面的参考依据。

关键词：窝儿七 HPLC 指纹图谱苦鬼臼毒素葡萄糖二苷苦鬼臼毒素葡萄糖苷 4’-去甲基鬼臼毒素鬼臼毒素葡萄糖苷山柰酚葡萄糖苷鬼臼毒素 arabeline 鬼臼毒酮山荷叶素葡萄糖苷槲皮素山柰酚山荷叶素聚类分析

甘草幼苗响应干旱胁迫的光合、抗氧化特性及转录组分析

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草业科学 2021年第11期38卷 2176-2190页

作者：关思静王楠徐蓉蓉葛甜甜高静彭亮张岗陈莹陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046 陕西中医药大学/陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心陕西咸阳712083

为探究乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)对干旱胁迫的生理及分子响应机制,本研究采用聚乙二醇6000(polyethylene glycol 6000,PEG-6000)模拟干旱的方法,测定乌拉尔甘草幼苗光合指标和抗氧化酶活性,并进行转录组测序分析。结果表明:干... 详细信息

为探究乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis)对干旱胁迫的生理及分子响应机制,本研究采用聚乙二醇6000(polyethylene glycol 6000,PEG-6000)模拟干旱的方法,测定乌拉尔甘草幼苗光合指标和抗氧化酶活性,并进行转录组测序分析。结果表明:干旱胁迫至7 d时,甘草的净光合速率(net photosynthetic rate,P_(n))、气孔导度(stomatal conductance,G_(s))、蒸腾速率(transpiration rate,T_(r))到达最低值。相对叶绿素含量(soil and plant analyzer develotrnent,SPAD)表现为先上升后下降。干旱引起甘草的氧化应激,处理1 d时提高了叶片中过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,降低了根中CAT活性。处理7 d时提高了根中过氧化物酶(peroxide,POD)活性,降低了根中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性。转录组分析结果显示,甘草地上部分和地下部分分别有差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)7500和5298个;基因本体(gene ontology,GO)富集结果表明,地上和地下两部分的DEGs在三大类的分布基本一致,均被显著富集到细胞过程、代谢过程、细胞结构、催化活性、转导活性等功能;京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)代谢途径富集分析表明,地上部分和地下部分DEGs均显著富集在转录因子、蛋白激酶、苯丙烷类生物合成和细胞色素P450等代谢途径。转录调控网络分析预测表明,ERF(ethylene responsive factor)、bHLH(basic helix-loop-helix)、NAC(NAM/ATAF/CUC)、MYB(v-myb avian myeloblastosis viral oncogene homolog)和WRKY类转录因子可能与甘草次级代谢产物相关基因存在转录调控关系。综上,本研究揭示了干旱胁迫对甘草生理特性的影响,分析了不同部位基因的表达,可为今后研究甘草抗旱机制提供有价值的信息。

关键词：药用植物胁迫生理特性超氧化物歧化酶过氧化物酶富集分析调控网络

基于转录组数据分析药用大黄的密码子使用偏好性

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中草药 2021年第20期52卷 6344-6349页

作者：高梦琦邹建珍霍小位李依民张明英高静张岗刘蒙蒙河北大学中医学院河北保定071002 河北大学药学院河北保定071002 陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西西安712046

目的研究药用大黄Rheum officinale转录组编码序列的密码子使用特点及其影响因素,为蒽醌类化合物异源合成的载体选择及药用大黄分子进化研究提供理论基础。方法利用perl程序及Codon W软件分析4733条药用大黄转录组编码序列的密码子使用... 详细信息

目的研究药用大黄Rheum officinale转录组编码序列的密码子使用特点及其影响因素,为蒽醌类化合物异源合成的载体选择及药用大黄分子进化研究提供理论基础。方法利用perl程序及Codon W软件分析4733条药用大黄转录组编码序列的密码子使用偏好性。结果药用大黄转录组编码序列的GC、GC3平均含量分别为45.6%、44.73%,GC12与GC3存在显著正相关(r=0.215,P中心点,大部分基因分布偏离期望曲线和中心点。通过基因高表达筛选密码子方法确定了29个药用大黄的最优密码子,大多数的最优密码子以U和A结尾。结论突变压力在药用大黄转录组编码序列的密码子使用偏好性形成过程这起到主要作用。

关键词：药用大黄转录组密码子偏好性最优密码子突变压力

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甘草PRR基因家族鉴定及表达分析

中国农业科技导报 2021年第12期23卷 66-75页

作者：关思静王楠徐蓉蓉葛甜甜高静颜永刚张岗陈莹张明英陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心西安712046 陕西中医药大学陕西中药资源产业化省部共建协同创新中心陕西咸阳712083

伪应答调控(PRR)蛋白作为植物生物钟中央振荡器的重要组成部分,参与植物昼夜节律的调节,在植物生长发育、逆境胁迫响应等生命活动中发挥重要作用。利用生物信息学方法鉴定了甘草PRR蛋白编码基因,并结合转录组数据分析其在盐胁迫、干旱... 详细信息

伪应答调控(PRR)蛋白作为植物生物钟中央振荡器的重要组成部分,参与植物昼夜节律的调节,在植物生长发育、逆境胁迫响应等生命活动中发挥重要作用。利用生物信息学方法鉴定了甘草PRR蛋白编码基因,并结合转录组数据分析其在盐胁迫、干旱胁迫和低磷胁迫下的表达模式。结果表明:甘草基因组中共鉴定出7个GuPRR基因;根据系统发育进化分析将甘草PRR蛋白分为3个分支。在GuPRR启动子区还发现了大量的低温、干旱、光、茉莉酸甲酯、脱落酸和水杨酸响应的顺式元件。转录组数据分析结果表明,7个GuPRR基因在不同的组织都存在表达且响应不同的非生物胁迫。这些结果为甘草PRR基因家族的研究提供了理论的基础资料,将有助于深入了解甘草PRR基因家族的功能。

关键词：甘草 PRR基因家族生物信息学分析基因表达

HPLC指纹图谱结合多指标含量测定的八角莲质量评价研究

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天然产物研究与开发 2020年第12期32卷 2051-2060,2121页

作者：崔誉文何昊张丽李玉泽黄文丽张化为宋小妹西安医学院药学院西安710021 陕西中医药大学陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心/陕西省中药基础与新药研究重点实验室咸阳712046

建立八角莲HPLC指纹图谱,并同时测定5种化学成分的含量,为其质量评价提供依据。采用Thermo HyPURITY C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,体积流量1.0 mL/min,检测波长290 nm,进样... 详细信息

建立八角莲HPLC指纹图谱,并同时测定5种化学成分的含量,为其质量评价提供依据。采用Thermo HyPURITY C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,体积流量1.0 mL/min,检测波长290 nm,进样量10μL,建立了八角莲的HPLC指纹图谱。16批样品指纹图谱中有28个共有峰,相似度较好,经与对照品比照确认了8个成分,对(+)-tanegool-7′-methylether、4′-去甲基鬼臼毒素、槲皮素、鬼臼毒素、山柰酚5种化学成分进行了定量分析,5个化学成分在各自范围内线性关系良好(r^2≥0.9990),精密度、重复性、稳定性均符合定量要求;加样回收率在98.7%~99.6%,RSD小于3%。所建立的方法简便、稳定、可靠,HPLC指纹图谱结合多指标成分含量测定可用于八角莲药材质量的评价。

关键词：八角莲 HPLC 指纹图谱聚类分析含量测定

HPLC法同时测定不同采收期珠子参中5种皂苷类成分含量

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中国民族民间医药 2021年第12期30卷 42-46页

作者：李慧邹晨鑫高静颜永刚张岗宋小妹杨新杰陕西中医药大学药学院/陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳7120460

目的:建立不同采收期珠子参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1以及去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 5种化学成分的含量测定方法。方法:采用Thermo C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱;以0.02%的磷酸水溶液和乙腈进行梯度洗脱... 详细信息

目的:建立不同采收期珠子参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Ro、竹节参皂苷Ⅳa、姜状三七苷R1以及去葡萄糖竹节参皂苷Ⅳa 5种化学成分的含量测定方法。方法:采用Thermo C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱;以0.02%的磷酸水溶液和乙腈进行梯度洗脱;柱温30℃;流速1 mL·min^(-1);检测波长203 nm。结果:不同采收期中5种化学成分含量积累在7月份达到最高。结论:7月份可作为珠子参最佳采收期,用于珠子参的质量控制。

关键词：珠子参高效液相色谱法皂苷类成分不同采收期

水杨酸对秦艽愈伤组织总酚·总黄酮含量及抗氧化酶活性的影响

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安徽农业科学 2021年第2期49卷 165-169页

作者：雷瑞祥杨冰月胡本祥高静魏艳妮曹福麟罗露李洁张岗刘清彭亮陕西中医药大学药学院陕西省秦岭中草药应用开发工程技术研究中心陕西咸阳712046

[目的]研究添加不同浓度的水杨酸(SA)对秦艽愈伤组织生长量、总黄酮、总酚含量及抗氧化酶活性的影响。[方法]以秦艽种子为原材料诱导出秦艽愈伤组织,在秦艽愈伤组织的继代培养中加入0、10、50、100、150、200μmol/L的SA,暗培养25 d后,... 详细信息

[目的]研究添加不同浓度的水杨酸(SA)对秦艽愈伤组织生长量、总黄酮、总酚含量及抗氧化酶活性的影响。[方法]以秦艽种子为原材料诱导出秦艽愈伤组织,在秦艽愈伤组织的继代培养中加入0、10、50、100、150、200μmol/L的SA,暗培养25 d后,测定秦艽愈伤组织的生长量、抗氧化酶活性和总黄酮、总酚含量。[结果]与对照组相比,当SA浓度为150μmol/L时秦艽愈伤组织鲜重达到最大值,SA浓度为100μmol/L时秦艽愈伤组织干重达到最大值,分别为2.8635、0.2017 g,显著高于对照组的鲜重和干重(P<0.05)。秦艽愈伤组织SOD活性在SA浓度为150μmol/L时达到最大值,为183.95 U/g,是对照组的2.44倍;CAT活性在SA浓度为200μmol/L时达到最大值,为22.44 U/mg,是对照组的2.56倍;当SA浓度为200μmol/L时,POD活性虽有所上升,但仍然显著低于对照组(P<0.05),为61.16 U/mg,是对照组的0.40倍。SA浓度为100μmol/L时,秦艽愈伤组织总黄酮含量达到最大值,为0.77 mg/g,是对照组的1.35倍;SA浓度为50μmol/L时,总酚含量达到最大值,为0.98 mg/g,是对照组的1.31倍。[结论]一定浓度的SA处理下,有利于秦艽愈伤组织的生长和干物质的积累;适当浓度的SA对秦艽愈伤组织SOD、CAT活性有促进作用,而添加SA会对POD活性有抑制作用;当添加SA浓度为100、50μmol/L时,分别有利于秦艽愈伤组织中总黄酮、总酚含量的积累。

关键词：秦艽愈伤组织水杨酸总酚总黄酮抗氧化酶活性